植物组织快繁的技术
植物无糖培养快繁技术及其优点
传基因相同、生理一致、生长发育正常、无病无毒的 群体植株。 2. 要求植株有高的光合能力或光独立生长能力（能利用 空气中的CO2作主要的碳源）。
二、植物无糖培养快繁技术的优点
（一）缩短培养周期 通过人工控制，动态调整优化植物生长环境，为种苗繁殖
改一变、了 植碳物源无的糖供培给养途快径繁小，技即术植改变株培养表基成现分，为培养生基中长不再速含有度糖；慢、徒长、发育差、生理形态
以大豆、海棠、核桃、生姜、甘薯、香蕉等20多种植物为材料的植物无糖培养试验表明，无糖组培苗的移栽成活率可提高10%以上，培
异常、个体差异大、变异性增加、成活率降低。 养周期缩短了25%以上，生产成本降低了35%以上。
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因而可使植株长势良好，生物量较有糖培养的显著增加，污染率明显降低。 一是植物体靠光合作用进行自然生长（自养） 无糖组培工艺的简单化，流程缩短，技术和设备的集成度提高，降低了操作技术难度和劳动作业强度，更易于在工厂化生产上推广应 用。 植物无糖培养快繁技术，又称为光自养微繁殖技术，是指在植物组织培养中以CO2代替糖作为植物体的碳源，通过控制影响组培苗生长 发育的环境因子，促进植株光合作用，以更接近植物自然生长状态、成本相对较低的方式生产优质种苗的一种植物组织培养技术。 海棠无糖培养与常规培养的试验对照 二、植物无糖培养快繁技术的优点
主要内容
一 植物无糖培养快繁技术 二 植物无糖培养快繁技术的优点
一、植物无糖培养快繁技术
（一）提出
植物无糖培养快繁技 术是由 设施园艺与环 境控制专家古在丰树 教授在20世纪80年代 末提出的，是一种全 新的植物组织培养技 术。
植物快繁新技术
04
植物快繁新技术的优势与挑战
Chapter
植物快繁新技术的优势
繁殖速度快
繁殖材料丰富
繁殖品质优良
节省空间和时间成本
植物快繁新技术采用离体培养 、组织培养等高效繁殖方式， 比传统繁殖方式速度更快，可 大量快速繁殖优质植物。
植物快繁新技术可以使用各种 植物组织、器官、细胞、原生 质体等作为繁殖材料，不受季 节、地域限制，极大丰富了繁 殖材料来源。
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案例三
抗逆性增强
01
通过基因工程技术，将抗逆相关基因导入作物中，从而提高作
物对逆境（如干旱、盐碱、低温等）的耐受能力。
产量提升
02
抗逆性作物的生长发育受到逆境影响较小，能够保持较高的产
量和品质。
生态效益
03
抗逆性作物的推广种植，有助于减少化肥和农药的使用量，降
低农业生产对环境的负面影响，实现生态可持续发展。
植物快繁新技术可以通过无性 繁殖方式，保留母株的优良性 状，保证繁殖品质的一致性， 且可以避免有性繁殖带来的基 因变异。
植物快繁新技术可以在实验室 等室内环境中进行，节省了大 量耕地和时间成本，同时也避 免了自然环境下繁殖过程中的 病虫害等问题。
植物快繁新技术的挑战
技术难度大
植物快繁新技术需要专业的技术人员进行操作， 技术难度较大，需要掌握植物生理学、生物化学 、遗传学等多学科知识。
繁殖材料选择和处理难
不同的植物组织和器官对于离体培养和组织培养 等快繁技术的适应性不同，如何选择和处理繁殖 材料是技术成功的关键，也是一大挑战。
设备成本高
植物快繁新技术需要使用各种高精密度的仪器设 备和实验室设施，设备成本较高，也增加了技术 难度和成本。
植物组织培养中的快繁与脱毒技术及其应用
植物组织培养是一种重要的生物技术，它能够实现植物的快速繁殖、脱毒和基因转化。
在植物学研究和植物育种领域，植物组织培养技术的应用非常广泛。
本文将深入探讨植物组织培养中的快繁与脱毒技术及其应用，以帮助读者更深入地理解这一重要领域。
1. 快繁技术在植物组织培养中，快繁技术是指利用植物体的一小部分组织或细胞，通过体外条件培养，实现植物的快速繁殖。
这种技术可以大大提高繁殖速度，缩短繁殖周期，是进行新种质创制、遗传改良和疫病防治的重要手段。
快繁技术的主要方法包括离体培养、愈伤组织培养和微繁殖等。
1.1 离体培养离体培养是将植物体表层（如幼叶、幼茎）或内部组织（如胚乳、子叶）分离出来，移入含有适当营养盐和植物生长调节物的培养基中培养。
通过控制培养条件和添加合适的植物生长激素，可以诱导组织分化和再生形成新植株。
1.2 愈伤组织培养愈伤组织是植物在受到外界刺激或损伤后，经过细胞分裂和组织再生形成的一种未分化的组织。
愈伤组织培养是利用这种特殊组织进行快速繁殖的一种方法，通过控制培养条件和添加植物生长调节物，可以诱导愈伤组织再生形成新植株。
1.3 微繁殖微繁殖是利用植物的微小芽或胚珠进行快速繁殖的方法。
通过培养条件的控制和植物激素的添加，可以诱导微小芽或胚珠快速生长并形成新植株。
2. 脱毒技术在植物组织培养中，由于植物体内可能携带病毒、细菌等病原体，因此会影响到组织培养的效果。
脱毒技术是为了解决这一问题而出现的一种重要技术。
脱毒技术能够有效地清除植物体内的病原体，提高组织培养的成功率和繁殖效率。
2.1 生物脱毒生物脱毒是利用生物制剂对植物体内的病原体进行清除的方法。
通过培养环境中添加含有特定菌株或真菌的生物剂，可以促进植物体内病原体的清除和组织的健康再生。
2.2 生理脱毒生理脱毒是利用植物自身的生理代谢特性进行脱毒的方法。
通过调节培养条件和添加特定的营养物质，可以激活植物的生理代谢活性，加速病原体的清除和组织的再生。
第四节 植物组织培养快速繁殖技术
植物组织培养快速繁殖技术
（七）试管苗驯化与移栽
1.试管苗生存环境与自然环境的差异 2.试管苗的特点 3.试管苗的驯化 4.试管苗的移栽 5.苗期管理
讲课教师：郭广领
植物组织培养快速繁殖技术
1.试管苗生存环境与自然环境的差异
（1）高温且恒温：温度控制在25±2℃ 。 （2）高湿：瓶内相对湿度接近于100% 。 （3）弱光：组织培养中的光强与太阳光相比 一般很弱，故幼苗生长也较弱，2000～3000 Lx
讲课教师：郭广领
植物组织培养快速繁殖技术
课后热身
1、怎样选择和处理外植体？ 2、怎样进行外植体的表面灭菌与接种？
3、外植体发育的方式有哪些？ 4、试管苗的主要特点有哪些？怎样进行试管苗 的移栽？怎么对驯化的试管苗进行管理？
讲课教师：郭广领
讲课教师：郭广领
思考一下： 提高生根率的措施有哪些？
植物组织培养快速繁殖技术
（1）培养基内矿物元素浓度高时有利于发生茎叶，而 较低时有利于生根。(培养基采用1/2MS或1/2大量元 素培养基) （２）培养基中去掉细胞分裂素，加入适量的生长素。 （CTK/IAA比值低时有利于生根）
（３）生根培养基的蔗糖用量可适当减少，用1.5%～ 2%的浓度，以减少试管苗对异养条件的依赖。 (4）提高光照强度，促进光合作用。
讲课教师：郭广领
植物组织培养快速繁殖技术
（四）外植体的接种
1. 打开已准备好的培养基瓶盖或封口膜，将三 角瓶倾斜拿在手中，使瓶口靠近酒精灯火焰，并 将瓶口在火焰上方转动灼烧数秒钟。 2. 用镊子夹取一块切好的外植体送入瓶内，轻 轻插在培养基上。 3. 将叶片背面接触培养基，茎尖、茎段要按其 生长极性的上下端，正放在培养基上。外植体接 种以每瓶放一枚组块为宜。 4. 接完种后，将瓶口在火焰上再灼烧数秒钟， 盖上瓶盖或封口膜。然后再接下一瓶，直到全部 接种完毕。 5. 做好记录，注明处理材料的物种名称、处理 方法、接种日期等。
植物快繁是什么技术？能具体说说吗？
植物快繁是什么技术？能具体说说吗？植物快繁技术简介：所谓植物非试管高效快繁技术也就是植物克隆技术，也有人称之为植物非试管快繁技术、植物快繁技术、植物全光照喷雾育苗技术、全光雾插技术、微材料或微组织扦插育苗技术，喷雾育苗技术、喷雾扦插育苗技术、傻瓜克隆。
无论叫做植物快繁还是植物克隆其原理和方法是一样的。
植物克隆技术（植物快繁技术）的关键是喷雾，十几年前就有权威单位推广全光照喷雾育苗技术，实际上也就是后来有人称之为植物非试管高效快繁技术，而现今更多被称为植物克隆、傻瓜克隆等时髦词汇。
过去开发的喷雾全套设备是机械式，成本高达数万元，且容易锈蚀和损坏，一段时间后就没人再使用，而自从引进以色列微喷（头）技术后，微喷雾问题顺利以低成本形式解决，于是植物克隆技术（植物快繁技术）得以在全国迅速推广普及。
植物快繁技术（植物克隆技术）的推广的另一障碍就是自动控制仪的问题，进口的温湿控制设备好用但价格高，所谓的农业智能化计算机系统除了价格更高之外还总是不能成熟，使用起来问题百出，经常造成育苗的失败，笔者使用两年后才不得已开发了国产育苗仪，其低廉的价格和丰富实用的功能很快被全国同行赏识。
植物克隆技术（植物非试管高效快繁技术）现在的投入只需2000余元，大力推广植物克隆技术、植物快繁技术利国利民。
植物傻瓜克隆技术与植物组培试管快繁和传统育苗技术相比，具有以下先进性：１、用一叶一芽植物外植体为繁殖单位材料，直接接种在大田沙床或营养袋中，一次成苗直至供应生产，不需任何移动，成活率高。
２、无论南方北方.不同纬度不同土壤.不同气候,一年四季都可用此法连续快繁，从第二代起多数品种均可达６―１２代。
一年中365天任何时间都可用此快繁技术启动生产，拓展了技术应用的时间和空间。
３、技术操作容易推广。
经过一段时间培训合格的普通劳动力每天（８小时）可接种3000--５０００个单位材料。
长期推广实践证明：一是对生产技术人员素质要求不高，技术培训期短、适应性极广，易于推广；二是个人操作速度比组织培养快繁和常规育苗均快，如组织管理得当，在其他条件满足的情况下，每天每个基地可快速接种20万--100万个单位繁殖材料，技术易于大面积推广，这是试管快繁技术所不可比拟的。
植物无糖组培快繁技术
探索无糖组培快繁技术在更多植物种类和应用领域中的潜 力，如濒危植物保护、种质资源保存、药用植物繁育等， 促进其在实践中的广泛应用。
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快速扩繁
无糖组培技术可以在短时 间内扩繁出大量的优质果 树和林木苗木，提高造林 和栽培的效率。
农作物脱毒苗的繁育与应用
脱毒苗生产
利用无糖组培技术，可以生产出 无病毒、无病原菌的农作物脱毒 苗，提高农作物的产量和品质。
病虫害防治
农作物脱毒苗具有较强的抗病抗 虫能力，可以有效减少农药的使 用量和频率，降低对环境的负面
技术原理与基本流程
基本流程 1. 选择适宜的外植体（如种子、幼苗、叶片等），进行消毒处理。
2. 将外植体接种到无糖培养基上，添加适量的激素和营养物质。
技术原理与基本流程
3. 在恒温、光照充足的培养室 内进行培养，定期观察并记录生
长情况。
4. 当植株生长至一定大小时， 进行炼苗处理，提高其适应外部
不受范围
技术优点与应用范围
农业生产
用于繁殖优良作物品种，提高农业生产效率 。
医药产业
用于繁殖药用植物，提取药物成分。
园林绿化
繁殖花卉、树木等观赏植物，丰富城市绿化 。
科研实验
用于植物生理、生化、遗传等方面的研究。
技术原理与基本流程
• 技术原理：植物无糖组培快繁技术基于植物细胞的全能性，即 植物细胞具有发育成完整植株的潜能。通过提供适宜的培养条 件和激素配比，可以诱导植物细胞或组织进行分裂、生长和分 化，最终形成完整的植株。
保持品种特性
无糖组培技术可以确保观赏植物幼 苗保持原品种的优良特性，提高观 赏价值。
果树与林木的优质苗木繁育
植物快繁新技术
2023-11-11•植物快繁技术概述•植物快繁新技术研究•植物快繁新技术的实践•植物快繁新技术的挑战与未来发展•案例分享：某种植物的快繁新技术应用目•参考文献录01植物快繁技术概述植物快繁技术是指通过人工干预，利用植物的茎尖、腋芽、叶片等具有再生能力的组织，在实验室或生产现场快速繁殖出大量植物后代的技术。
该技术主要涉及植物组织培养、基因工程等学科，利用植物细胞的全能性，实现植物的快速繁殖。
植物快繁技术的定义开始尝试利用该技术进行植物的快速繁殖。
得到了进一步的完善和发展。
物繁殖的效率和品质。
植物快繁技术广泛应用于农作物、林业、花卉等领域，对于快速繁殖优良品种、解决种子问题、提高产量和品质等方面具有重要作用。
在林业中，利用植物快繁技术可以快速繁殖出大量的优质林木后代，提高森林质量和产量。
在农业生产中，利用植物快繁技术可以快速繁殖出大量的优质作物后代，提高产量和品质。
在花卉产业中，利用植物快繁技术可以快速繁殖出大量的优质花卉后代，提高花卉品质和产量。
02植物快繁新技术研究植物组织培养技术是一种通过将植物组织或细胞放在人工环境中培养的方法，以实现植物快速繁殖和基因改良的目的。
植物组织培养技术定义该技术主要包括分离、培养、诱导分化、增殖和生根等多个步骤。
技术流程广泛应用于植物快速繁殖、新品种培育、植物病理研究等领域。
应用范围技术流程该技术主要包括分离、培养、诱导分化、增殖等多个步骤。
定义植物细胞培养技术是一种通过将植物细胞在体外进行培养的方法，以实现植物快速繁殖和基因改良的目的。
应用范围广泛应用于植物快速繁殖、新品种培育、农药和激素生产等领域。
植物细胞培养技术RNAi干扰技术技术流程该技术主要包括设计、合成和导入siRNA，然后观察其对特定基因表达的影响。
应用范围广泛应用于植物基因功能研究、植物病理研究和植物基因治疗等领域。
定义RNAi干扰技术是一种利用小干扰RNA（siRNA）抑制特定基因表达的技术，以研究基因功能和基因治疗为目的。
7.3植物组培快繁和脱毒技术
鉴定方法
1、直观测定法 2、指示植物法
利用病毒在其他植物上 出现症状的特征，作为 鉴别病毒种类的标准， 这种专门用以生产症状 的寄主植物即为指示植 物，又称鉴别寄主。
3、抗血清鉴定法
4、酶联免疫吸附法（ELISA） 5、电子显微镜检查法
6、免疫吸附电镜法
• 另一种是起源于苗基部切口处愈伤组织的上部，直接起源于中柱 鞘细胞，由于发生与茎的中柱相连，故利于移栽成活。
胚状体形成
• 概念： 离体培养下起源 于非合子细胞，经历 了胚胎发生和胚胎发 育过程所形成的类胚 结构。
原球茎形成
3、试管苗的增殖与继代培养
• 1）、试管繁殖速率及计算
• 理论计算：
接种一个芽或一块增殖的培养物，经一段时间的培养后看能 得到多少个芽或苗，从而推算理论上一年能繁殖出多少苗。
第一节 植物的离体快繁
植物离体快繁（Micropropagation） 又叫微型繁殖或试管繁殖，它是把植物 材料放在试管内，给予人工培养基和合 适培养条件，达到高速增殖，属离体无 性繁殖。
其特点是快速，每年能以千百万倍
一 .离体快繁的应用
良种快繁 脱毒良种苗快繁和无病毒苗大量快繁； 特殊育种材料快繁； 制种材料快速繁殖； 自然和人工诱变有用突变体的快繁； 基因工程植株的快繁；
四、离体快繁中的有关问题
• 培养物的增殖方式 • 外源生长调节物质对品种典 型性的影响 • 继代次数与变异
第二节 术
• 怎样脱毒？
植物的组培脱毒技
• 为什么要脱毒？
• 怎样鉴定无病毒植株？
病毒不仅使人患病，同样也侵害植物，使植物出现皱叶、黄 叶、落叶，以致品质变劣、花色变淡、花数减少、产量降低。 多数农作物，特别是无性繁殖作物，都易受到一种或多种病原 菌的周身浸染。病原菌的浸染不一定都会造成植物的死亡，很多病 毒甚至可能不表现任何可见症状。但在植物中病毒的存在会减少作 物的产量和降低作物的品质。
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接种在新配置的培养基
长成完整植株
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2、植物离体快繁的概念
• 离体快速繁殖：是指在无菌条件下，利用植物
体的一部分在人工控制的营养和环境下进行的植 物繁殖的一种方法，由于其繁殖速率快，称之为 “快（速）繁（殖）”， 实际是一种特殊的营养繁殖方法，是植物扦插繁 殖方法的扩展和延伸。所不同的是扦插繁殖系数 低，而离体快繁只要建立起组织培养快速体系， 将按几何级数增殖，一般1年有6个繁殖周期。
4）体细胞胚状体的发生途径 体细胞胚状体：是指在植物组织中起源于 一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发 育过程形成的具有双极性的培状结构。 大量的资料证明无论是裸子植物还是被子 植物，在离体培养的条件下，他们的体细 胞都能表现胚胎发生的潜力
3、壮苗与生根
材料增殖到一定数量后，应及时将培养 物移到生根培养基上，否则小苗就会老化 无效苗增多。 生根壮苗培养基多采用1/2或1/4的MS培 养基添家适量的生长素
3、植物离体快繁的发展
1960年，Morel提 出兰花无性快繁， 此方法有巨大的使 用价值，很快就被 生产经营者所采纳。 现在组织培养已经 成为兰花无性繁殖 最常用的方法。
• 再快繁兰花技术的高效益的刺激下，观赏植物、 果树和其他园艺植物森林植物、药用植物及工业 原料植物的快繁的研究和应用取得了很大的进展
4、试管苗移栽与保护
三、植物离体快繁技术的应用
1、用于稀缺或急需良种植物的繁殖 2、用于茎尖脱毒及无毒苗木试管快繁 3、用于自然界无法用种子繁殖或难以保持 后代一致的三倍体、单倍体及基因工程 植株的快繁 4、用于濒危植物的拯救 5、用于种质的试管保存及交换
T hank you
二、植物离体快繁技术原理
1、无菌培养系的建立 2、茎芽增殖 3、壮苗与生根 4、试管苗移栽与保护
植物离体快繁技术原理
茎尖
离体培养
原球茎 形成新原球茎 接种在新配置的培养基 切成3~6块
停止 切块
长成完整植株
1、无菌培养系的建立 2、茎芽增殖 3、壮苗与生根 4、试管苗移栽与保护
1、无菌培养系的建立
植物组织快繁技术 与应用
植物离体快繁与应用
一．植物离体快繁的概念与发展 二．植物离体快繁技术原理 三．植物离体快繁技术的应用
一、植物离体快繁的概念与发展
1、兰花的繁殖 2、植物离体快繁的概念 3、植物离体快繁的发展
1、兰花的繁殖
• 兰花的一般繁殖方法（常规方法）： 分株法、种子繁殖法 分株繁殖法的繁殖极慢，每年只能使植株 增加一倍；种子繁殖法具有异质性，在后 代中可能出现高度变异，造成很大经济损 失。
1）外植体
• 外植体：所谓外植体，就是第一次接种用的离体植物材料 • 任何无菌体系的建立都必须选用适宜的外植体 • 一般外植体的选择因培养体系的目的和接种的植物种类不 同而有所不同。
• 为了增加腋芽生枝的数目就应当使用带有营养芽的外植体； 为了生产脱毒植株，就必须使用不足1mm长的茎尖；母株 不需要脱毒，选择带节的插条
2 ）消毒 • 目的：保证培养物的无菌性
• 方法：将新鲜的外植体在流水中冲洗1~2小 时，然后在超净工作台上用0.5%的升汞或 其他消毒剂消毒
2、茎芽增殖
• • • • 1）不定芽途径 2）原球茎途径 3）腋芽路径 4）体细胞胚状体的发生途径
2、茎芽增殖
1）不定芽途径 不定芽的发生大多数有一个从外植体上产 生愈上组织的阶段,这一阶段的长短和愈伤 组织生长的程度,在不同植物种类和培养条 件而有极大的差异。
• 兰花离体快繁： Morel提出了兰花离体无性繁殖方法。把兰 花离体茎尖进行培养时可形成一个扁球状 体（后称：原球茎），基部生假根。把每 个原球茎切成4~6块，重新接种在培养基上， 每一块又形成若干新的原球茎。如果停止 切块，每个原球茎可形成一个完整植株
茎尖
离体培养
原球茎
停止切块
形成新原球茎
愈伤组织的发生，可能导致长期的培养过 程中不正常分裂而产生变异植株。
2）原球茎途径 原球茎最初是兰花的种子发芽过程中的一 种形态学构造，种子萌发初期并不出现胚 根，只是胚渐渐膨大，以后种皮的一端破 裂，胀大的胚正小圆锥状，成原球茎。 原球茎本身可以增殖。
3）腋芽路径 腋芽在离体培养中都可以被诱导而发育
• 现在国内外都在开展快繁研究，并进行了产业化 生产 • 我国目前从事植物组织培养的人员和实验室面积 居世界第一，试管繁殖有一定的成绩，但是经济 效益不高。
• 我国的观赏植物试管快速繁殖的研究起步 较晚，但取得了另人瞩目的成绩。主要花 卉的离体扩增技术以在我国较为成熟。并 建立无性系应用于生产。