最新植物器官培养
3. 培养条件
暗光和温度25-27℃。
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一、离体根的培养
4、根的间接增殖 第一步在脱分化培养基上诱导形成愈伤组织，如胡杨
的根段培养，可诱导形成白色愈伤组织。 第二步在再分化培养基上诱导形成芽的分化，如胡杨
从绿色愈伤组织分化出小植株。
胡 萝 卜 根 培 养
5、培养方式
离体根的培养方式有三种类型。 第一种固体培养法，即将根尖接种在固体培养基
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2、材料处理及消毒
将采集到的茎尖切成0.5-1.0cm长→→去叶（休眠 芽预先剥除鳞片） →→流水冲洗2-4h →→ 75％的酒 精中处理30s →→稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min(取 自老枝条上的可适当延长时间）→→用无菌水冲洗数次， 准备接种。
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3、接种
接种前再剥掉一些叶片，使茎尖0.5cm →→接种 要求：随切随接，动作迅速。 亦可将切下茎尖材 料在1－5% VC液中浸一下。
——茎尖脱毒的基本原理
（三）茎尖培养方法及步骤
及材
取
消料
材
毒处
理
接
培
驯
化
种
养
移 栽
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1、 取材
①直接取材：在生长旺盛、枝 条健壮、无病的母株上选生 长不久、杂菌污染少的顶梢 （1－2cm）（取前可喷杀菌 药，可顶芽或侧芽）。
②从试管苗获取。
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取1-2㎝顶梢
2、氮源 氮源有铵态氮、硝态氮和可溶性有机 氮如氨基酸或酰胺等，其中以硝态氮的效果最好。 加入含各种氨基酸的水解酪蛋白，能促进离体根 的生长。
3、碳源 以蔗糖的效果最佳，几乎为葡萄糖的10 倍。蔗糖的浓度为2—3%。
4、维生素 维生素以B1和B6最为重要，缺少它根 的生长受到阻碍，而加入它可使根的生长成倍的加 快。B1的使用浓度为0.1-1.0mg/L为宜。
茎尖培养的意义： 普通茎尖培养技术简单，操作方便，易成活，成苗 时间短，加快繁殖。 微茎尖培养可获得脱毒苗；
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(二)病毒在植物体内的分布
❖ 病毒侵染植株的叶片后，经过一段时间，即向附近的 细胞增殖转移。转移速度很慢，每小时只有几微米。 当叶片内病毒浓度增大到一定量时，就转移到韧皮部， 随后通过维管束转移到其它部分。由于病毒转移速度 慢，加上茎尖分生组织无维管束，病毒只能通过胞间 连丝传递，赶不上细胞分裂和生长的速度，所以生长 点的病毒数量极少，几乎检测不出。茎尖培养时，切 取的茎尖越小，带病毒的可能性就越小。
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(一)茎尖培养概念及类型
茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行 无菌培养。
茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： ①微茎尖培养: 带有1-2个叶原基的生长点, 其长度不超 过 0.5mm。
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②普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧 芽。 这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便， 茎尖容易成活，成苗所需时间短 。
White培养基；2/3或1/2 MS 和 B5培养基 注：离体根生长要求提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效 果好，加入VB1、VB6最重要，生长素对离体根影响不一致。 培养温度25－27℃，暗光培养。
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离体根生长的营养要求
1、无机成分 要求培养基中有全部必要元素， 因为它是离体生长所需要的，一般的为MS、B5培 养基。
上，根依靠培养基中的养分和生长物质而不断生长。 第二种是液体培养法，把根尖接种在无琼脂的液
体培养基中，经常振荡使根获得充足的氧气。 第三种是固体-液体培养法，就是把根基部插入固
体琼脂培养基中，根尖浸在液体培养基中，根尖生长 而根不断的伸长和分枝。
二、茎尖的培养*
（一）茎尖培养概念及类型 （二）病毒在植物体内的分布 （三）茎尖培养方法及步骤
5、生长物质 对离体根的生长而言，生长素的效 应最为明显，在一般情况，加入适量的生长素能促 进根的生长，其反应和需要量因植物种而异：
6、温度和光照 黑暗有利于根的形成，温度一般 在16-25℃
7、PH 根发生和生长所需的PH范围一般为5.0-6.0
2. 无性繁殖系的建立
种子消毒 →→ 接种→→待根伸长后从根尖一端切取长 1.2cm的根尖→→接种于培养基→→发育出侧根→→待侧 根生长约1周后切取侧根的根尖进行扩大培养→→又迅速 生长并长出侧根→→切下进行培养，如此反复→→得到 从单个根尖衍生而来的离体根的无性系。
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4、培养的方法和程序
（1）培养基 ① 基本培养基 MS、White、 B5、 Heller培养基。 ② 蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。 ③ 激素（ 2，4-D，IAA， NAA ）和有机添加物有明显影 响。但激素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。
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叶鞘、叶片、子叶）
繁殖器 官培养
花培养 （包括花托、花瓣、花丝、 花柄、子房、花药）
种子培养（包括成熟与未成熟） 胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、 胚珠、
子房、胚乳培养 ）
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外植体形态发生形成完整植株的途径
（一）外植体-愈伤组织-完整植株。 具体又可分为三种：
1、愈伤组织-同时长芽和根-植株。 2、愈伤组织-茎-根-植株。 3、愈伤组织-根-芽-植株。 4、愈伤组织-体细胞胚-植株
植物器官培养
第一节 概述
植物器官培养（Organ Culture）是指对植物某一器官 的全部、部分或器官原基进行离体培养的技术。分为 营养器官（根、茎、叶）和繁殖器官（胚胎、种子、 花器官）培养。
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植物 器官 培养
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营养器 官培养
根培养 茎培养（ 包括茎尖、茎段） 叶培养（包括叶原基叶柄、
第二节 营养器官培养
一、离体根的培养 二、茎尖的培养* 三、茎段的培养 四、离体叶的培养*
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一、离体根的培养
（一） 意义： ①生理代谢研究的优良实验体系 ②研究器官分化形态建成的良好体系 ③建立快速生长的根无性系 ④进行诱变育种
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（二） 培养方法
1. 培养基选择
茎尖生长状态
生长太慢：茎尖不增大→→变绿→→细胞逐渐老化→→休眠 原因: 生长素浓度太低；温度过低或过高；
植物器官培养实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 理解植物组织培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握无菌操作技术，包括消毒、接种等。
3. 学习植物器官培养的过程，包括愈伤组织的诱导、分化以及再生植株的形成。
4. 观察并分析植物器官培养过程中的各种现象，加深对植物生长发育机制的理解。
二、实验原理植物组织培养是利用植物细胞的全能性，通过无菌操作将植物器官、组织或细胞在人工控制的培养条件下进行培养，使其生长发育成完整的植株。
实验过程中，植物激素的添加和培养条件的调控对愈伤组织的形成和器官分化起着关键作用。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：小麦种子、香蕉叶片、胡萝卜块根。
2. 试剂：70%乙醇、氯化汞、MS培养基、2,4-D、6-BA、蔗糖、琼脂等。
四、实验方法与步骤1. 无菌操作：将实验材料用70%乙醇和氯化汞消毒后，用无菌水冲洗干净，放置在超净工作台上进行接种。
2. 愈伤组织诱导：a. 将小麦种子接种于MS培养基中，添加2,4-D和6-BA，置于培养箱中培养。
b. 将香蕉叶片切成小块，接种于MS培养基中，添加2,4-D和6-BA，置于培养箱中培养。
c. 将胡萝卜块根切成小块，接种于MS培养基中，添加2,4-D和6-BA，置于培养箱中培养。
3. 愈伤组织分化：a. 当愈伤组织形成后，调整培养基中激素比例，诱导愈伤组织分化成根和芽。
b. 将分化出的芽和根接种于新的培养基中，继续培养。
4. 再生植株形成：a. 当芽和根生长到一定程度后，将其移植到土壤中，培养成完整的植株。
五、实验结果与分析1. 愈伤组织诱导：实验结果表明，在不同植物材料中，愈伤组织的诱导效果不同。
小麦种子和香蕉叶片的愈伤组织诱导效果较好，而胡萝卜块根的愈伤组织诱导效果较差。
2. 愈伤组织分化：在调整培养基中激素比例后，愈伤组织分化成根和芽。
小麦种子愈伤组织分化出较多的根和芽，香蕉叶片愈伤组织分化出较多的芽，而胡萝卜块根愈伤组织分化出的根和芽较少。
3. 再生植株形成：将分化出的芽和根移植到土壤中，大部分植株成功生长。
植物组织培养技术第三章第四章植物器官的培养
营养器官的培养——茎尖的培养 营养器官的培养——茎尖的培养
1、 取材 、
取1-2㎝顶梢 ①直接取材：在生长旺盛、枝 直接取材：在生长旺盛、 条健壮、 条健壮、无病的母株上选生 长不久、杂菌污染少的顶梢 长不久、 （1－2cm）（取前可喷杀菌 cm）（取前可喷杀菌 ）（ 药，可顶芽或侧芽）。 可顶芽或侧芽）。 ②从试管苗获取。 从试管苗获取。
第一节 一、离体根的培养 意义： （一） 意义： ①生理代谢研究的优良实验体系 ②研究器官分化形态建成的良好体系 ③建立快速生长的根无性系 ④进行诱变育种 营养器官的培养
营养器官的培养——根的培养 营养器官的培养——根的培养
（二） 培养方法 1. 培养基选择 White培养基；2/3或1/2 MS 和 B5培养基 培养基； 或 培养基 培养基 注：离体根生长要求 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好， 提供全部必需元素，蔗糖、硝态氮效果好，加入 B1、B6最重要 生长素对离体根影响不一致。 最重要， B1、B6最重要，生长素对离体根影响不一致。培养 温度25 27℃，暗光培养。 25－ 温度25－27℃，暗光培养。
离 体 根
脱分化培养基
愈 伤 组 织
再分化培养基
分 化 芽
再 生 植 株
植物器官的培养
二、茎尖的培养
•1.茎尖培养概念及类型 1.茎尖培养概念及类型 1. •2.茎尖培养方法及步骤 2.茎尖培养方法及步骤 2.
营养器官的培养——茎尖的培养 营养器官的培养——茎尖的培养
（一）茎尖培养概念及类型
茎尖培养： 茎尖培养：切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分，进行 无菌培养。 茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： 茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为： 微茎尖培养: 微茎尖培养 带有1-2个叶原基的生长锥, 其长度不超过0.5mm 普通茎尖培养： 普通茎尖培养：较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽 这里主要讲普通茎尖培养。这种培养技术简单，操作方便， 茎尖容易成活，成苗所需时间短
第四章植物器官的培养
第四章植物器官的培养1、器官培养包括离体的根、茎、叶、花器和果实的培养。
以器官作为外植体进行离体培养。
器官培养的意义:研究器官生长、营养代谢、生理生化、组织分化和形态建成在生产实践上具有重要的应用价值,可在短期内提高繁殖速率,进行名贵品种的快速繁殖;利用茎尖培养可得到脱毒试管苗,解决品种的退化问题,提高产量和质量;将植物器官作诱变处理,用器官培养可得到突变株,进行细胞突变育种等。
第一节营养器官的培养一、茎尖的培养茎尖培养是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分,进行无菌培养。
这是组织培养中用得最多的一个取材部位。
茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为微茎尖培养和普通茎尖培养。
微茎尖指带有1-2个叶原基的生长锥,其长度不超过0.5mm。
普通茎尖指较大的茎尖(如几mm到几十mm)、芽尖及侧芽。
普通茎尖培养(1)取材: 挑选杂菌污染少,生长不久的茎尖。
(2)消毒接种: 将茎尖切成0.5-1.Ocm长将茎尖置于流水冲洗2-4h在75%的酒精中处理30s在稀释20倍的次氯酸钠中浸5-8min无菌水冲洗数次接种(3)接种: 为了减少污染,可在接种前再剥掉一些叶片,使茎尖为0.5cm左右大小。
(4)培养的方法和程序①培养基多数茎尖培养采用MS作为基本培养基,常用的其他培养基有White,Heller.培养基中生长素:2,4-D,IAA,NAA,浓度一般用0.1mg/L左右,高于此浓度,往往产生畸变芽或形成愈伤组织。
茎尖在培养过程中会出现生长太慢、生长太快和生长正常等三种类型。
生长太慢:接种后茎尖不增大,只是茎尖逐渐变绿,出现绿色小点,细胞逐渐老化而进人休眠状态,或者逐渐变褐死亡。
引起的原因:生长素浓度太低,或是温度过低或过高;生长太快型是接种后茎尖迅速增大,在茎尖基部产生愈伤组织,并迅速增殖,而茎尖不伸长,久之茎尖也形成愈伤组织,从而丧失发育成苗的能力。
引起的原因:一是生长素浓度过高,引起细胞疯狂分裂而导致愈伤组织的形成。
植物组织培养第三章 植物器官和组织培养
（二）规范操作
操作技术熟练、工作经验、操作者、进入超净工作台 的物品表面。
（三）条件合适
培养基种类、激素种类和浓度、其他添加物、外植 体来源、生长发育状态、培养条件。
形态发生和植株再生 建立的无菌培养物在适宜的离体环境 中，生长发育（形态发生）形成完整的 小植株。 离体材料的形态发生的途径： 器官发生 体细胞胚胎发生
（5）生根培养 刚形成的芽苗往往比较弱小，多数无根，此时可降
低或不加细胞分裂素浓度，提高生长素浓度，促进芽苗
生根，提高其健壮度。 （6）炼苗移栽
选择生长健壮，有3～5条根的生根苗进行炼苗，移
栽到疏松透气的基质中，注意保温、保湿、遮荫。当苗 完全成活后，再移向大田。
拟定培养方案
外植体预处理
外植体无菌接 种
形态发生和植株再生
器官发生：芽或芽原基起源于培养组织中比较表 层的细胞，即外起源。根原基发生在组织较深处，即 内起源。两者之间一般没有什么联系，呈现单向极性。 胚状体发生：极大多数体细胞胚起源于单细胞， 形成的胚状体具有双极性，在其发育的早期阶段，在 方向相反的两端分化出茎端和根端，其维管组织与母 体植物或外植体的维管组织通常没有联系。胚状体维 管组织呈独立的Y形。
2、无菌苗的增殖
优缺点： 第一、二种途径的好处是增殖速度快，但会产生变 异， 第三种途径的好处是不会产生变异，能保持品种优 良特性，且方法简便，可在各种植物上使用，但增殖速 度不如前二者。 若用于育种，以第一、第二种途径有利，而用于良 种快速增殖，以第三种途径有利，主要是要保证良种的 优良品性，不产生变异。目前已广泛采用，每年每个芽 可增殖10万株乃至上百万株。
⑵腋芽增殖的原理
高等植物的每个叶腋中都有腋芽存在，通常由于 顶芽的存在，顶端优势阻止腋芽的生长，但在一定的 条件下可以使它生长，如除去顶芽或使用生长激素， 可以解除顶端优势，腋芽便不断分化和生长，逐渐形 成芽丛。 若反复切割这些腋芽和移植到新的培养基中继代 培养，就可在短期内得到大量的芽。
7第七章 植物的器官培养
接后1周
侧根
无菌种子
1.2cm
根 无 性 反复转接 繁 殖 系
3.根无性繁殖性的建立
4.植株再生培养
离 体 根 愈 伤 组 织 分 化 芽 再 生 植 株
脱分化培养基
再分化培养基
人参根消毒、接种操作程序图
二、茎尖培养
• 1.茎尖培养概念、意义及类型 • 2.普通茎尖培养方法 • 3.影响茎尖培养的因素
3.接种
•外植体大小： 5×5mm薄片
• 上表皮朝上接种培 养基。最好带叶脉， 注意极性
4.培养
培养基：
MS、B5、White 、N6；蔗糖3%；2.4－D利于 愈伤组织形成，NAA抑制芽形成，利于根发 生，KT、6BA利于芽形成。 愈伤组织诱导：BA 1-3mg/L,NAA 0.25 mg/L； 分化培养：CTK 2 mg/L； 生根培养：NAA 0.5－1.0 mg/L
1.茎尖培养概念及类型
概念：切取茎的先端或茎尖分生组织 进行无菌培养.
意义：微茎尖培养可获得脱毒苗；茎尖培 养技术简单，操作方便，易成活，成苗时 间短，加快繁殖。
1.茎尖培养概念及类型
类型：根据培养目的和取材大小分为： 微茎尖培养;普通茎尖培养
普通茎尖指几毫米到 几十毫米的芽尖及侧 芽。
微茎尖为0.3-0.5mm
2.4 培养
一、培养基
①基本培养基：MS、White、B5、Heller、 Gautheret。 ②蔗糖作碳源效果好，浓度2－3%。 ③激素和有机添加物有明显影响。但激 素浓度以0.1mg/L为宜，不要太高。
2.4
培养
二、初代培养 ①光强：1000－3000lx；光照时间： 16h。光的作用？
②温度：2 5℃左右 ③ 昼夜温差有或无，以植物或培养过 程来定 ④ 干燥季节注意保湿。如何做？
植物器官培养资料
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离体根生长的营养要求
1、无机成分 要求培养基中有全部必要元素， 因为它是离体生长所需要的，一般的为MS、B5培 养基。
2、氮源 氮源有铵态氮、硝态氮和可溶性有机 氮如氨基酸或酰胺等，其中以硝态氮的效果最好。 加入含各种氨基酸的水解酪蛋白，能促进离体根 的生长。
3、碳源 以蔗糖的效果最佳，几乎为葡萄糖的10 倍。蔗糖的浓度为2—3%。
3. 培养条件
暗光和温度25-27℃。
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一、离体根的培养
4、根的间接增殖 第一步在脱分化培养基上诱导形成愈伤组织，如胡杨
的根段培养，可诱导形成白色愈伤组织。 第二步在再分化培养基上诱导形成芽的分化，如胡杨
从绿色愈伤组织分化出小植株。
胡 萝 卜 根 培 养
5、培养方式
离体根的培养方式有三种类型。 第一种固体培养法，即将根尖接种在固体培养基
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植物 器官 培养
营养器 官培养
根培养 茎培养（ 包括茎尖、茎段） 叶培养（包括叶原基、叶柄、
叶鞘、叶片、子叶）
繁殖器 官培养
花培养 （包括花托、花瓣、花丝、 花柄、子房、花药）
种子培养（包括成熟与未成熟） 胚胎培养（包括幼胚、成熟胚、 胚珠、
子房、胚乳培养 ）
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外植体形态发生形成完整植株的途径
4、维生素 维生素以B1和B6最为重要，缺少它根 的生长受到阻碍，而加入它可使根的生长成倍的加 快。B1的使用浓度为0.1-1.0mg/L为宜。
5、生长物质 对离体根的生长而言，生长素的效 应最为明显，在一般情况，加入适量的生长素能促 进根的生长，其反应和需要量因植物种而异：
6、温度和光照 黑暗有利于根的形成，温度一般 在16-25℃
植物组织培养植物器官以及组织培养
植物器官和组织培养的基本程序 植物营养器官培养 植物繁殖器官培养 植物组织培养
植物组织培养植物器官以及组织培 养
组织培养步骤图
植物组织培养植物器官以及组织培 养
（1）准备阶段 查阅相关文献，根据已成功培养的相近植物资料，结合
实际制定出切实可行的培养方案。 根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段
植物组织培养植物器官以及组织培 养
⑵腋芽增殖的原理
高等植物的每个叶腋中都有腋芽存在，通常由于 顶芽的存在，顶端优势阻止腋芽的生长，但在一定的 条件下可以使它生长，如除去顶芽或使用生长激素， 可以解除顶端优势，腋芽便不断分化和生长，逐渐形 成芽丛。
若反复切割这些腋芽和移植到新的培养基中继代 培养，就可在短期内得到大量的芽。
植物组织培养植物器官以及组织培 养
一、离体根的培养
2、根的间接增殖 第一步在脱分化培养基上诱导形成愈伤组织，如胡杨
的根段培养，可诱导形成白色愈伤组织。 第二步在再分化培养基上诱导形成芽的分化，如胡杨
从绿色愈伤组织分化出小植株。
植物组织培养植物器官以及组织培 养
胡 萝 卜 根 培 养
植物组织培养植物器官以及组织培 养
C、GA GA对芽的伸长有促进作用，故常加入少量的GA，使
用浓度为0.5mg/L。 D、光照 光照条件也十分重要，这一阶段必须保持适当的光
一、离体根的培养
3、碳源 以蔗糖的效果最佳，几乎为葡萄糖的10 倍。蔗糖的浓度为2—3%。
4、维生素 维生素以B1和B6最为重要，缺少它根 的生长受到阻碍，而加入它可使根的生长成倍的加 快。B1的使用浓度为0.1-1.0mg/L为宜。
5、生长物质 对离体根的生长而言，生长素的效 应最为明显，在一般情况，加入适量的生长素能促 进根的生长，其反应和需要量因植物种而异：
植物器官的培养-花器官的培养(花蕾)1(精)
一、植物器官的培养-花器官的培养（花蕾）1. 定义：花器官培养指整个花器及其组成部分如花托、花瓣、花丝、花柄、子房、花药等的无菌培养。
2、意义：通过离体花芽培养可了解整体植物和内源激素在花芽性别决定中所起的作用；可以了解花器各部分对果实和种子发育的作用；内、外源激素在果实种子发育过程中的调控作用；生产上也可用于珍贵品种的扩大繁殖。
3. 培养方法(1) 取材、消毒：从健壮植株上取未开放的花蕾→75％酒精浸润约30s →饱和漂白粉浸泡10-15min（或0.1％升汞中浸3-5min ）→无菌水冲洗数次→接种。
(2)接种：花蕾培养：花梗插入培养基中。
部分花器培养：切片接入培养基中。
(3)培养培养基：MS、B5。
附加生长素（NAA0.1 mg/L ）和细胞分裂素（6-BA 2mg/L ），诱导形成愈伤组织或胚状体，再分化培养成植株。
培养条件：温度：25±2℃；光照时间：10-12h/d，光照强度：1500-3000 Lx。
培养约1周，形成少量愈伤组织。
再经1个月就分化出绿色芽点，再切割转接，可形成大量无根苗，经长根成植株，用于繁殖。
二、种子的培养1定义：种子培养是指受精后发育完全的成熟种子和发育不完全的未成熟种子的无菌培养。
2.意义：可以打破种子休眠，促进萌发；解决远缘杂种败育性，产生后代；快速繁殖苗木。
优点：植株分化容易，无菌操作方便。
3.培养技术(1) 种子灭菌：种皮厚或不饱满的种子，宜用0.1％升汞消毒10-20min。
幼嫩的或发育不全的种子，宜用饱和漂白粉消毒15-30min。
若种子上有绒毛或蜡质，应先用95％酒精或吐温80处理，提高消毒效果。
对壳厚难萌发的种子，可去壳培养。
(2)培养基：A.促种子萌发用MS培养基，加或不加激素，诱导愈伤组织则可加入6-BA或2,4-D。
B.无胚乳种子（棉花、大豆、花生、向日葵、番薯、马铃薯、苹果、烟草、薄荷）应适当加生长素。
C.一般糖浓度为1-3%。
第三章第一节 植物器官培养
C、 培养基其他因素： 如活性炭（Activated Charcoal）、酚类物质 （Phenolic compounds）、pH值、继代培养次数 （subculture）、渗透压等。
（二）无菌苗的增殖
1、增殖培养过程：
增殖培养过程是促 进无菌苗数量增加的 过程。主要通过芽增 殖芽的过程进行。
蝴蝶兰的增殖培养
3、离体茎尖的发育方向：
A 腋芽萌发进行增殖； B 脱分化形成不定器官； C 脱分化形成形成胚状体； D 脱分化形成愈伤组织。
4、影响茎尖外植体起始培养的因素：
（1） 外植体的遗传基础及生理
（2） 培养基组成成分
（3） 培养条件
（1）外植体
外植体种类及基因型
外植体供体植株和外植体的生理状态
外植体大小 外植体的极性
a. 单子叶植物不易诱导器官发生。 b. 木本植物较难诱导。 c. 存在基因型差异（如番茄29%~63%） d. 开始生长季节取材容易诱导。
外植体大小： 外植体越小成苗能力越弱，较大的外植体 增殖较快。
外植体极性： 当外植体以形态学的基部接种于培养基上 时，从远离基部的表面诱导出芽、苗数目较 多。
赤霉素类： 赤霉素与促进细胞伸长和开花反应，组织培 养条件下只在少数植物上对芽的诱导有促进作 用。 如马铃薯、甜菜、樱桃等。
其他有机化合物： 腺嘌呤衍生物具有促进器官分化作用。 椰子汁等物质也具有促进分化的功能。
（3） 培养条件及其他因素 A 光照
通常1000~5000 Lx 16 小时光照。
（3）增殖阶段要给予外植体适宜的温度和光照条件，才 能保证其旺盛的增殖过程。 （4）增殖培养阶段要注意及时转接，否则生长变弱。
3、增殖培养中的常见问题： （1）小型化和无效苗： 激素浓度过高导致无效苗增加。可以通过降低细 胞分裂素浓度克服。 （2）玻璃化现象： 琼脂用量低，相对湿度大，激素浓度高，温度高 等导致玻璃化。
植物繁殖器官培养
植物繁殖器官培养植物繁殖器官的离体培养研究不仅可以进行植物的离体快速繁殖，而且可以改变植株的染色体倍性、挽救远缘杂种的胚、诱导三倍体植株等，所以植株繁殖器官的离体培养在植物育种和繁殖等方面起着重要作用。
一、植物花器官培养植物花器官培养是指对植物的整朵花或花的组成部分（包括花托、花柄、花瓣、花丝、子房、花药、胚珠等）进行离体培养的技术。
植物花器官培养的特殊用途是进行花性别决定、果实和种子发育、花形态发生等方面的研究。
将未开放的花蕾或花柄、花瓣、花托等组织经过灭菌处理和适当切割后，在适宜条件下进行培养，培养结果可能有：①成熟果实；②不定芽或丛生芽；③愈伤组织。
如授粉或未授粉的花蕾在适宜条件下培养，可形成成熟果实，并已在人参、番茄和葡萄等植物中成功获得了与天然果实相似的果实状结构，并在离体条件下将它们培养成熟。
花椰菜的花托可直接再生不定芽；蝴蝶兰的花梗腋芽可直接萌发形成丛生芽；菊花的花托、花瓣和诸葛菜的花托和花序轴可先形成愈伤组织，再形成不定芽。
1959年，Galum最早研究了激素对植物花性别决定的影响。
他将发育早期（0.5～0.7mm）的花芽接种在添加不同激素的较复杂培养基（基本培养基中添加B族维生素、色氨酸、水解酪蛋白和15%椰子汁）中培养，发现添加IAA或幼蕾提早切离，可促进潜在雄蕊转化为子房，但这种促进作用可被赤霉素颉颃。
学者们还利用生长抑制剂等对花性别决定进行了研究，如用矮壮素（chlorocholine chloroid，CCC）（抗赤霉素试剂）处理潜在花芽培养物，可抑制雄花分化，三碘苯甲酸（2，3，5-triiodobenzoic acid，TIBA）和马来酰肼（maleic hydrazide）（抗生长素试剂）则抑制雌花分化。
二、植物幼果的培养植物幼果培养是指对植物不同发育时期的幼小果实进行离体培养的技术。
幼果培养的特殊用途是进行果实发育、种子形成和发育等方面的研究。
不同发育时期的幼果经过适当灭菌处理后，在适宜培养条件下可能获得：①成熟果实；②愈伤组织。