2018_2019学年高中生物专题2微生物的培养与应用课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修1

要点一
选择培养基的选择原理与方法
1．分离土壤中分解尿素细菌的培养基为何能起到选 择作用？
2．如果让你去分离某种微生物，你会怎么做？
归纳提升 1．原理：根据不同微生物的特殊营养要求或其对某 化学、物理因素的抗性不同而制备培养基。 2．方法 (1)在培养基中加入某种化学物质。例如，加入青霉 素可以分离出酵母菌和霉菌；加入高浓度的食盐可以得 到金黄色葡萄球菌。
2．途径。 用选择培养基筛选。 在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同 时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择 培养基。用其培养的目的是从众多微生物中分离所需要 的微生物。
二、统计菌落数目的方法和注意事项 1．常用方法：稀释涂布平板法。 (1)统计依据。 ①当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一 个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 ②通过统计平板上的菌落数来推测样品中大约含有 的活菌数。
【例1】
下面是本课题将用到的培养基配方，请根
据下表回答下面的问题：
编号 ① ② ③ 成分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4· 7H2O 含量 1.4 g 2.1 g 0.2 g
10.0 g ④ 葡萄糖 1.0 g ⑤ 尿素 15.0 g ⑥ 琼脂 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL
(2)改变培养基中的营养成分。例如，缺乏氮源时可 以分离固氮微生物；石油作为唯一碳源时，可以分离出 能消除石油污染的微生物。 (3)改变微生物的培养条件。例如，将培养基放在高 温环境中培养可以得到耐高温的微生物。
通过选择培养的微生物不一定都是符合要求的 微生物，原则上只有目的微生物才能在培养基上生长。 但 实际上，微生物培养是一个非常复杂的问题，有些微生物 可以利用其他微生物的代谢产物生长繁殖， 因此能够在选 择培养基上生长的微生物不一定是所需要的微生物， 还需 要进一步验证。
3．细菌的培养与观察。 将培养基平板倒置于 30～37 ℃温室中培养 1～2 d， 每隔 24 h 统计一次菌落数目，最后选取数目稳定时的记 录作为结果。 4．细菌的计数。 当菌落数目稳定时， 选取菌落数在 30～300 的平板进 行计数。 在同一稀释度下， 至少对 3 个平板进行重复计数， 然后求出平均值， 并根据平板所对应的稀释度计算出样品
解析：用加入酚红指示剂的鉴别培养基可以鉴别分 解尿素结果分析
1．微生物的计数方法有哪些？
2．如何分析实验结果？
专题2 微生物的培养与应用
课题2 土壤中分解尿素的细 菌的分离与计数
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1.掌握利用选择培养基分离细菌的原理
和方法。 2.学会运用活菌计数法测定土壤中分解尿素的细 菌的数量。
一、筛选菌株 1．原理。 人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温 度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
中的细菌数目。
判断正误： (1)土壤中的细菌能分解尿素，是因为能合成脲酶。 (√ ) (2)常用平板划线法统计活菌数目。(×) (3)统计的菌落数目往往比活菌的实际数高。(×) (4)在一定的培养条件下，同种微生物表现出稳定的 菌落特征。(√)
(5)在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁 操作。(√) (6)细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨。(√)
解析：筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可， 不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的是对要分 离的菌种作进一步的鉴定。 答案：B
2．从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，下列实验操 作不正确的是( 释液 B．将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上 C．用加入刚果红指示剂的选择培养基筛选分解尿素 的细菌 D．从周围出现红色环带的菌落中挑取能够分泌脲酶 的菌株 ) A．将土壤用无菌水稀释，制备 103～106 倍的土壤稀
(2)计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷ V)×M。 C：代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数。 V：代表涂布平板时所用的稀释液的体积。 M：代表稀释倍数。 (3)注意事项。 ①一般选择菌落数在 30～300 的平板进行计数。 ②统计菌落数往往比活菌的实际数目低。 ③统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。
解析： 碳源是提供碳元素的物质， 氮源是提供氮元素 的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。绝大多数微生 物都能利用葡萄糖， 但是， 只有能合成脲酶的微生物才能 分解尿素， 所以这种培养基对微生物有选择作用。 选择的 原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。
答案： (1)葡萄糖
尿素
(2)葡萄糖
尿素
(1) 在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的是 ________，提供氮源的是________。 (2)绝大多数微生物都能利用________，但是，只有 能合成脲酶的微生物才能分解________。 (3)分析该培养基的配方，该培养基对微生物是否具 有选择作用？如果具有， 又是如何进行选择的？________ _____________________________________________
④设置对照：目的是排除实验组中非测试因素对实 验结果的影响，提高实验结果的可信度。 2．计数方法。 利用显微镜直接计数。
三、实验设计 1．土壤取样。 从富含有机质、酸碱度接近中性的潮湿土壤中取样。 取样时， 一般要铲去表层土， 在距地表的 3～8 cm 的土壤 层取样。
2．样品的稀释。 样品的稀释度直接影响平板上生长的菌落数目， 选用 一定稀释范围的样品液进行培养， 保证菌落数在 30～300 之间，便于计数。
(3)具有。
以尿素为唯一氮源的培养基可以分离到产生脲酶的微生 物(即分解尿素的微生物)。
选择培养基筛选微生物的原理 人为提供有利于目的菌株生长的条件 (包括营养、温 度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。
即时演练 1．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 的目的是( )
A．筛选出能分解尿素的细菌 B．对分离的菌种作进一步鉴定 C．作细菌的营养成分 D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素