国内外同类研究概况(综述)

国内外同类研究概况（综述）1. 银杏及其外种皮的基本概述银杏(Ginkgo biloba.)被称为“活化石”，是地球现存最古老的孑遗植物之一。

我国银杏资源相当丰富，是世界银杏的分布中心，银杏产量占世界总产量的70%以上[1]。

目前，银杏种植已普及到中国27个省(市、自治区)，其中江苏的“三泰”(泰兴、泰州、泰县)，广西的灵川、兴安，湖北的孝感、随州，山东的郯城分布最广泛。

银杏树高大挺拔，叶似扇形。

冠大荫状，具有降温作用。

叶形古雅，寿命绵长。

无病虫害，不污染环境，树干光洁，是著名的无公害树种、有利于银杏的繁殖和增添风景。

适应性强，银杏对气候土壤要求都很宽范。

抗烟尘、抗火灾、抗有毒气体。

银杏树体高大，树干通直，姿态优美，春夏翠绿，深秋金黄，是理想的园林绿化、行道树种。

可用于园林绿化、行道、公路、田间林网、防风林带的理想栽培树种，被列为中国四大长寿观赏树种（松、柏、槐、银杏）。

银杏的种核俗称白果，品味甘美，略带苦涩，营养丰富，医、食俱佳，为上等干果，也作药膳或入药。

银杏的叶子、种皮和树根均含有多种化学成分可入中药。

其药用作用早在李时珍的《本草纲目》中己有较为详细的记载，认为银杏“生食引疗解酒，熟食益人”。

“熟食温肺益气、定喘嗽、缩小便、止白浊。

生食降痰，俏毒杀虫”。

“嚼浆涂鼻面手足，去能疤脐期破皱，及疥癣疮匿阴虱”等。

清代张璐璐的《本经逢源》中记载银杏有降痰、清毒、杀虫之功能，可治疗“疮疥疽瘤、乳痈溃烂、牙齿虫龋、小儿腹泻、赤白带下、慢性淋浊、遗精遗尿”等症。

近些年，国内外医药领域、化学领域等诸多领域的科学家、学者对银杏叶做了大量深入的研究。

研究表明，银杏叶提取物（EGB）的主要成分是黄酮类物质和内酯类物质。

具有抗氧化、抗血小板激活因子（PAF）作用和拮抗PAF特异性受体作用。

药理分析及临床试验表明，银杏叶提取物对冠心病、高血压、心绞痛、动脉硬化、脑功能减退、老年性痴呆、老年性记忆减退、衰老等与心脑血管循环有关的疾病都有显著的预防和治疗效果。

银杏叶的开发利用已日趋完善，由于提取工艺受到酚酸类物质残留的制约，产品开发成本比较高，因此还不能为广大消费者所接受。

由于银杏树及其产品得到了很好的开发利用，银杏的经济效益逐步扩大，被广大农民、企业、商人所认可。

银杏种植面积和加工生产模式迅速扩大，果叶产量显著提高，但同时产生了大量的废弃物——银杏外种皮。

初步估计，全国结实的银杏树大约有100多万株；近年来，每年还以2000—2500万株小苗的发展速度递增，年产银杏果1.2万吨。

银杏外种皮是银杏果仁的皮层，即种子硬壳外面部分，新鲜外种皮与种核的比例大致3:1，据此估计，每年全国至少有3万吨以上的新鲜银杏外种皮，除去60%的水分，干燥银杏外种皮约1.2万吨[2-3]。

目前，国内外对银杏外种皮的研究也在逐步增多，研究表明：银杏酚酸具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗过敏、抑菌、防治病虫害等作用，在化妆品、生物农药和医药方面有很好的应用价值。

银杏酚酸存在于银杏叶、果和外种皮中，在外种皮中含量最高。

由于种种原因，银杏酚酸类物质的开发利用还是比较欠缺，产品更是稀少，致使银杏外种皮等资源得不到很好的利用。

在产区，种植者往往将大量剥离下来的银杏外种皮扔之山沟或河里，不仅毒死鱼虾，而且气味难闻，造成严重的环境污染。

为此，如何开展银杏外种皮资源的合理利用，治理污染，改善环境，是促进银杏进一步产业化工作中的一项迫切任务。

2.银杏外种皮的研究进展2.1银杏外种皮的化学成分及其作用的研究银杏外种皮的主要成分与银杏果、叶所含的成分相似。

经分离鉴定的成分主要有银杏酚(bilobol)、银杏酸(ginkgoicacid)、银杏黄酮(ginkgetin)、银杏内酯(ginkgolide)、白果酚(ginkgol)等五大类几十种有机化合物。

银杏酚酸：银杏外种皮中含有多种银杏酚酸。

银杏酸是一类水杨酸的衍生物，其6位上的侧链碳原子数为13-17，侧链双键数为0-3个，是一同系混合物。

Jaggy H等[4]报道，银杏外种皮中含有4种银杏酸：C13:0、C15:1、C17:2和C17:1，并测出含量分别为0.19%、3.10%、0.03%和0.22%，总银杏酸含量为3.54%。

仰榴青等[5]用RP-HPLC法测得银杏外种皮中银杏酸含量为5.46%，用LC-ESI-MS鉴定出5种银杏酸成分（C13:0、C15:0、C15:1、C17:1和C17:2）。

银杏酚酸类成分按化学结构的不同，可分为白果酸(gink-goicacid)、氢化白果酸(hydroginkgoicacid)、氢化白果亚酸(hydroginkgolinicacid)、银杏酚(bilobol)、白果酚(ginkgol)等10余种。

银杏酚酸类物质是银杏外种皮中主要的化学成分，占提取物的65%左右[6]。

楼凤昌等[7]从银杏外种皮的乙酸乙酯、丙酮和正丁醇提取物中，分得8个结晶，经波谱解析，与对照品及标准图谱对照，分别鉴定为：胡萝卜甙、银杏内酯A和银杏内酯B混合物、银杏内酯C、儿茶酚、金松双黄酮、银杏黄素、异银杏黄素、原儿茶酸。

新鲜银杏外种皮用70%乙醇减压回流提取浓缩得浸膏，依次用正丁醇、氯仿、乙醚抽提得甲、乙、丙三组分。

甲用葡聚糖凝胶LH-20柱层析经甲醇洗脱主带是黄色结晶混合物，主要成分是银杏黄素和异银杏黄素。

组分乙浓缩后放置有固体析出，滤集，甲醇重结晶得白色结晶，鉴定为氢化白果酸（即6-十五烷基水杨酸）；组分丙浓缩后析出固体，乙醇重结晶得白色粉末，鉴定为白果醇（即二十九烷-10-醇）；油状棕色母液经真空蒸馏得无色液体白果酚[8]。

从银杏外种皮中分离提取白果酸类和黄酮类物质，并对其抑制真菌生长效应进行实验研究表明对25种致病真菌有明显抑制生长作用，这种作用不仅对浅部的真菌，而且对深部的真菌也有明显抑制作用[6]。

其抑制真菌生长效果相当0.5g的克霉唑。

白果酸、白果酚在试管中能抑制结核杆菌的生长。

接有不同烃类侧链的漆树酸为银杏外种皮中的主要抗菌成分，对各种革兰氏阴性及阳性菌均有抑制作用[9]。

银杏外种皮经75%乙醇浸提，对玉米大斑菌抑制作用强烈，效果很好，抑制率在80%以上；对小麦赤霉菌、苹果炭疽菌的抑制作用较强烈，抑制率在60%以上，具有进一步在活体条件下进行深入开发和研究的必要。

成分鉴定，抑菌物质主要为银杏酚酸类物[10]。

银杏新鲜种皮的提取液对果树常见的病原菌梨黑星病、桃褐腐病、桃霉斑性穿孔病有一定的抑制作用，对梨黑星病、桃褐腐病、桃霉斑性穿孔病病菌抱子的抑制萌发浓度分别是20%、50%、40%，扬州大学农学院陈鹏、韦军等也发现银杏外种皮提取液可抑制多种果树病害和农作物虫害，20倍液对棉木金星尺度、朱砂叶蜻、桃赤蚜等害虫进行喷雾或饲喂，死亡率达26.3%~100%。

徐立春等[11]报道银杏外种皮石油醚提取物和乙醇提取物对大部分实验真菌(如铁锈色小孢子菌、迭瓦癣菌和羊毛状小孢子菌等)有抑制生长作用。

文献报道从银杏外种皮中分离出的氢化白果酸在1000倍稀释浓度时对苹果炭疽病菌和葡萄炭疽病菌的抑制率分别为98.8%和91.8%[12]。

倪学文等[13]报道了银杏酸对玉米大斑病、大麦条纹病和稻纹枯病的抑制作用，抑制率都在70%以上。

赵肃清等[55]报道了银杏外种皮乙醇提取液对水稻纹枯病、黄瓜炭疽病菌和番茄青枯病菌的抑制效果发现浓度为2.0g·L-1的银杏外种皮提取液就显示明显的抑制作用，浓度为2.0g·L-1的银杏外种皮提取液能明显减少盆栽番茄因青枯病而导致的死亡率。

邓业成等[6]以9种植物病原真菌为供试菌，采用菌丝生长速率法和带药培养基涂布法，测定了银杏外种皮中酚酸类物质的抑菌活性。

结果表明，酚酸类物质对9种植物病原真菌均有抑制活性，对柿角斑病菌、稻瘟病菌、梨锈病菌、玉米炭疽病菌、柑橘疮痂病菌、甘蔗凤梨病菌、西瓜枯萎病菌、梨褐斑病菌和香蕉炭疽病菌的EC50在0.6657-19.5580g/L，对香蕉炭疽病菌活性最高，对稻瘟病菌活性最低。

Koch E等试验了银杏酸的免疫毒素作用，发现银杏酸引起小鼠淋巴组织增生反应。

黄酮、内酯类：银杏外种皮中的银杏黄酮，主要是双黄酮类，包括银杏黄素、异银杏黄素、金松双黄酮、1-5`-甲氧基白果素及白果素。

龚跃新等用分光光度法对银杏外种皮中的黄酮含量进行了测定，结果表明银杏外种皮中黄酮含量为1.3%。

楼凤昌等[7]首次从银杏外种皮中分离得到银杏内酯A和银杏内酯B的混合物以及银杏内酯C。

吴红菱[59]测得银杏外种皮提取物中总内酯平均含量为 5.6%。

表明银杏外种皮中内酯成分与银杏叶相似。

黄酮类物质对小麦赤霉病菌、辣椒疫霉病菌、番茄灰霉病菌、苹果炭疽病菌和玉米大斑病菌等菌的抑制率均超过70%，氢化白果酸对小麦白封面菌治疗和保护作用可分别大于80%。

药理实验研究认为，银杏外种皮有止咳平喘祛痰、扩张冠状血管、降低胆固醇的作用，主要是银杏外种皮中含有黄酮类化合物。

矿质元素：实验表明银杏种子含25种元素，所以银杏外种皮也含25种元素。

其中Ca、Mg、K、P属于常量，其余均属于微量，对人体无毒害。

银杏外种皮中Ca、Mg、K、Sr的高含量和Na的低含量与对冠心病、心绞痛等心血管疾病防治有关。

微含量元素Mn能改善动脉粥样硬化的脂质代谢，有去脂作用，是防治动脉硬化症的原因之一。

银杏外种皮含有相当量的P、Fe、Zn和Cu，这些元素都是人体需要的。

多糖和氨基酸：宋根萍等对银杏外种皮中的多糖进行了成分分析，粗多糖得率为6.58%，总糖含量为89.7%，其中还原糖为5.1%，多糖为84.6%。

粗多糖水解物中含葡萄糖、果糖、半乳糖及鼠李糖。

吴向阳等[5]用氧化还原法测定了银杏外种皮中总糖和还原糖的含量，其值分别为85.12%和7.74%。

银杏外种皮含有较多的氨基酸，余碧钰等测定出银杏外种皮中17种氨基酸的含量为7.15%。

银杏外种皮中含有引起皮炎的银杏毒。

白果酚和银杏毒均有溶血作用。

银杏毒对蛙的中枢神经系统有麻痹作用。

兔静脉注射银杏毒0.2g/kg，先有短暂的血压上升，而后下降，呼吸困难，动物惊厥而死。

2.2银杏外种皮内活性物质的分离提取方法研究目前，在分离纯化领域常用的提取分离技术主要有以下几种类型：①据分子极性大小及溶解度不同的方法。

各种生化物质的极性大小和溶解度性质相差甚远，并受pH值、离子强度、溶剂极性与温度等因素的影响，因此适当改变这些条件可实现分离提取的目的。

常用方法有溶剂提取法、超临界萃取法、等电点沉淀法和盐析法等。

②根据分子形态和大小不同的方法。

根据分子形态和大小不同，可将有用的生物大分子与小分子杂质分离，也可将分子量大小不同的有机物质逐一分离，常用的方法有差速离心与超离心法、膜分离法和凝胶过滤法等。

③根据分子电离(带电性)差异的方法。