强心苷

内酯环的水解:在强心苷的水溶液中加入氢氧化钠、氢氧
化钾可使内酯环水解开裂，加酸后又环合成内酯环。甲型 强心苷在醇性氢氧化钾溶液中，Δαßｒ-内酯可以发生双键 转位，生成活性亚甲基，并可与某些试剂缩合显色，用于 甲型强心苷元的检识。而乙型强心苷不能发生双键转位的 反应，不能生成活性亚甲基
（三）酶水解
第四节 提取与分离方法
一、提取方法


由于强心苷易受酸、碱、酶的作用，发生 水解、脱水及异构化等反应。在提取分离 时要注意这些因素的影响和应用。在研究 或生产中，若以提取分离原生苷为目的时， 原料 中含脂类杂质较多时，须用石油醚或汽油 脱脂后再提取。


Salkowski反应 将试样溶于氯仿，沿试管壁 加入浓硫酸，静置，氯仿层呈血红色或青 色，硫酸层有绿色荧光。 Kahlenberg反应 将强心苷的醇溶液点在滤 纸或薄层上，喷以20%三氯化锑氯仿溶液 （不含乙醇和水），于100℃加热数分钟， 在可见光或紫外光下可观察到不同颜色的 斑点。

三氯醋酸-氯胺T(chloramines T反应) 将试样 醇溶液点在滤纸（或薄板）上，喷以三氯 醋酸-氯胺T试剂（25%三氯醋酸乙醇溶液4 ml加3%氯胺T水溶液1ml混匀），待纸片干 后，100℃加热数分钟，于紫外光下观察。 洋地黄毒苷元衍生的苷类显黄色荧光；羟 基洋地黄毒苷元衍生的苷类显亮蓝色荧光； 异羟基洋地黄毒苷元衍生的苷类显灰蓝色 荧光。该反应可初步区别洋地黄类的苷元。


Liebermann-Burchard反应 取试样溶于冰醋酸，加 浓硫酸-醋酐（1∶20）混合液数滴，反应液呈黄 →红→蓝→紫→绿等变化，最后褪色。本反应液 的呈色变化过程随分子中双键数目与位置不同而 有所差异。 Tschugaeff反应 取试样溶于冰醋酸，加无水氯化 锌及乙酰氯后煮沸，或取试样溶于氯仿或二氯甲 烷，加冰醋酸、乙酰氯和氯化锌煮沸，反应液呈 紫→红→蓝→绿等变化，B环有不饱和双键的作用 更快。

亚硝酰铁氰化钠试剂反应（Legal反应）取 试样1mg～2mg，溶于2～3滴吡啶中，加3% 亚硝酰铁氰化钠试剂和2mol/L氢氧化钠各1 滴，反应液呈深红色并渐渐消失。
+
[Fe(CN)5NO]2-
H2C
+
2OH-
[ Fe(CN)5N
C ] 4-
+
2H2O
（二）作用于α-去氧糖的反应

Keller-Kiliani (K-K)反应（三氯化铁-冰醋酸 反应）取试样1mg溶于5ml冰醋酸中，加1滴 20%三氯化铁溶液，沿试管壁缓缓加入5 ml 浓硫酸，观察界面和醋酸层的颜色变化。 如有α-去氧糖存在，醋酸层渐呈蓝或蓝绿色。

间二硝基苯试剂反应（Raymond反应）
O N O
22 20 21
OH
O N
O-
O O 0HEtOH - HC
NO2 22
O
NO2
O N O
O
NO2 O
[O] NO2
O
NO2 O
OH
OH OH OH

3,5二硝基苯甲酸试剂反应（Kedde反应） : 取试样的甲醇或乙醇溶液于试管中，加入 3,5二硝基苯甲酸试剂（A液：2%的3,5-二硝 基苯甲酸甲醇或乙醇溶液；B液：2mol/L氢 氧化钾溶液，用前等量混合）3～4滴，产生 红色或紫红色。原理与间二硝基苯试剂反 应类似，本试剂可作为强心苷纸色谱和薄 层色谱的显色试剂，喷雾后显紫红色，几 分钟后褪色。
二、构效关系

构效关系即化学结构与生物活性之间的关 系。强心苷的生物活性与结构有密切关系， 当强心苷中某些结构发生改变时，强心作 用也随之改变。强心作用与甾体母核的立 体结构、不饱和内酯环和取代基的种类、 构型有关。糖部分本身不具有强心作用， 但可以改变强心苷的水/油分配系数，影响 强心苷对心肌细胞膜上类脂质的亲和力， 进而影响强心作用的强度。
（二）薄层色谱


吸附薄层色谱 由于强心苷分子中含有较多的极性 基团，尤其是多糖苷，在氧化铝上吸附作用较强， 分离效果较差，因此常采用硅胶作吸附剂，以氯 仿-甲醇-冰醋酸（85∶13∶2）、二氯甲烷-甲醇-甲 酰胺（80∶19∶1）、醋酸乙酯-甲醇-水（8∶5∶5） 等溶剂系统作为移动相。这些展开剂中含少量甲 酰胺或水可以减少拖尾现象。 分配色谱 一般选用硅藻土、纤维素为支持剂，甲 酰胺、二甲基甲酰胺或乙二醇作固定相。氯仿-丙 酮（4∶1）、氯仿-正丁醇（19∶1）等溶剂系统作 移动相。分配色谱分离检识强心苷类的效果要比 吸附薄层色谱好，所得斑点集中，承载分离试样 的量较大。


取代基:当C10位的角甲基被醛基或羟基取代时， 强心作用增强。当C10位的角甲基被羧基取代或无 角甲基时，强心作用明显减弱。如果在甾体母核 上引入5β、11α、12β-羟基时，强心作用增强。引 入1β、6β、16β-羟基时，活性降低；引入双键Δ4 （5），活性增强；引入双键Δ16，则活性降低或 消失。 不饱和内酯环: C17侧连上的不饱和内酯环为β-构 型时，具有活性。为α构型时，活性减弱；若内酯 环的不饱和键被饱和，活性大大减弱，毒性亦减 弱；若不饱和内酯环水解开环，活性降低或消失。
（一）甾体母核与强心作用的关系

环的稠合方式:A/B环为顺式稠合的甲型强心苷元， C3羟基为β-构型有强心活性，否则无活性；A/B 环为反式稠合的甲型强心苷元，无论C3羟基是β还是α-构型对强心活性无明显影响。C/D环为顺 式稠合，即C14羟基或氢为β-构型时有强心活性； C/D环为反式稠和，即C14羟基或氢为α构型，或 C14羟基与邻位氢原子脱水形成脱水苷元，强心作 用消失。

碱性苦味酸试剂反应（Baljet反应）取试样 的甲醇或乙醇溶液于试管中，加入碱性苦 味酸试剂（A液：1%苦味酸乙醇溶液；B液： 5%氢氧化钠水溶液，用前等量混合）数滴， 呈现橙色或橙红色，反应有时需要15分钟以 后才能显色，原理也是活性亚甲基与苦味 酸缩合显色。此缩合产物在485nm波长处有 吸收峰，《药典》以此法测定强心苷类药 物含量。

呫吨氢醇反应（xanthydrol反应）取试样1～ 10μg加入呫吨氢醇试剂（呫吨氢醇10mg溶 解于100ml冰醋酸中，加入1ml浓盐酸）1ml， 置沸水浴中数分钟后呈红色。本反应非常 灵敏，只要分子中有α-去氧糖都能呈色。可 用于含α-去氧糖化合物的定性、定量分析。
（三）作用于甾体母核的反应
二、色谱检识

强心苷的常用色谱检识方法有纸色谱、薄 层色谱等。
（一）纸色谱

纸色谱常用于强心苷的检识。根据强心苷 及其苷元的极性不同可选用不同的固定相。 如强心苷的亲水性较强，宜选用水为固定 相，移动相多选用水饱和的丁酮、乙醇-甲 苯-水（4∶6∶1）、氯仿-甲醇-水 （10∶2∶5）；如强心苷的亲水性较弱或检 识苷元时，可选用甲酰胺为固定相，以甲 酰胺饱和的甲苯或苯为移动相。
3
7

A/B顺式 C/D顺式
A/B反式 C/D顺式
（二）糖的部分
α-羟基糖: C2连接有氧原子的糖，此类糖包含 非去氧糖（如葡萄糖）、6-去氧糖和6-去氧 糖-3-甲醚。 α-去氧糖: C2不含有氧原子的糖类，主要是 2,6-二去氧糖和2,6-二去氧糖-3-甲醚。
（三）糖与苷元的连接方式



Ⅰ型强心苷：苷元C3-O-（2,6-二去氧糖）x（D-葡萄糖）y，如紫花洋地黄苷 A(purpurea glycoside A)和毒毛花苷 (strophanthink)。 Ⅱ型强心苷：苷元C3-O-（6-去氧糖）x（D-葡萄糖）y，如黄花夹竹桃苷A(thevetin A)和乌本苷(ouabain)。 Ⅲ型强心苷：苷元C3-O-（D-葡萄糖）x， 如绿海葱苷(scilliglaucoside)。
（二）糖部分与强心活性的关系

糖本身不具强心作用，但糖的种类、数目 可影响强心苷在水/油中的分配系数，影响 对心肌细胞上类脂质的亲和力，从而影响 强心活性和毒性 。
一般乙型强心苷元的毒性大于甲型强心苷 元，乙型强心苷的毒性规律为：苷元>单糖 苷>双糖苷。

第二节 理化性质
一、性状

强心苷类化合物多为无色晶体或无定形粉 末，具有旋光性，对粘膜有刺激性。C17侧 连为β-构型者味苦，为α-构型无苦味。

过碘酸-对硝基苯胺反应过碘酸将α-去氧糖 氧化成丙二醛，丙二醛与硝基苯胺试剂反 应呈深黄色。
CHO CH2 CHO CHO CH
+
CH NH2 NO2.HC I CH CH
N
NO2
. 2HCI
O NH N O-
CHOH

对二甲氨基苯甲醛反应将试样的醇溶液点 在滤纸上，喷以对二甲氨基苯甲醛试剂 （1%对二甲氨基苯甲醛的醇溶液4ml加浓盐 酸1ml），并于90℃加热，分子中含有α-去 氧糖的强心苷可显灰红色斑点。
（三）纸色谱和薄层色谱常用的显 色剂


适用于甲型强心苷的显色剂 1%苦味酸水溶液与 10%氢氧化钠水溶液（95∶5）混合，喷后于100℃ 烘数分钟，显呈橙红色；2%3,5-二硝基苯甲酸乙 醇溶液与2mol/L氢氧化钾溶液等体积混合，喷后 显红色，数分钟后渐褪色。 适用于各类强心苷的显色剂 2%三氯化锑的氯仿 溶液，喷后于100℃烘数分钟，各种强心苷及苷元 显不同颜色；25%三氯醋酸乙醇溶液与3%氯胺 T(4∶1)混合，喷后于100℃加热数分钟，在紫外灯 下显蓝（紫）、黄（褐）色荧光。
（一）酸水解

温和酸水解法用稀酸0.02mol/L～0.05 mol/L的盐酸或
硫酸在含水乙醇中经短时间（半小时至数小时）加热回流， 可使苷元与α-去氧糖之间的苷键、α-去氧糖与α-去氧糖之 间的糖苷键水解断裂，而α-去氧糖与α-羟基糖、α-羟基糖 与α-羟基糖之间的糖苷键不易被水解。

剧烈酸水解法用3%～5%的盐酸或硫酸在含水乙醇中