血液循环

实验十一在

体蛙心收缩描

记与起搏点观

察

[目的] 了解心肌的某些特性，掌握蛙心收缩的记录方法；并用结扎法观察蛙心正常起搏点和潜在起搏点的自动节律性高低。

[原理] 心肌的绝对不应期长，几乎占据整个收缩期和舒张早期，在此期间给予任何强大的刺激均不能产生动作电位。在心肌的相对不应期给予单个阈上刺激，可引起一次额外收缩，称为期前收缩。期前收缩也有不应期，下一次动作电位传来时通常落在期前收缩的不应期中，心脏便会产生一个较长的代偿间歇。另外，心肌还具有“全或无”的特征，在其他因素恒定的条件下，心肌对不同强度的阈上刺激均发生同样大小的收缩反应。

心脏的正常起搏点为窦房结(蛙类为静脉窦)，此外房室结、房室束、浦肯野氏纤维等组织具有潜在起搏点的功能，且它们发生自动节律性兴奋的频率是依次递减的。当人为阻断它们之间的传导时(如结扎、低温或麻醉等)，则心脏各部分会表现出不同的兴奋节律。

[实验对象] 蛙或蟾蜍

[实验材料] 微机生理实验系统或二道生理记录仪与刺激器、张力换能器

（10~50g）、刺激电极、铁支架、双凹夹、蛙心夹、蛙板、蛙针、手术器械、丝线、小烧杯、滴管、纱布，任氏液。

[实验方法与步骤]

㈠实验准备

用蛙针破坏蟾蜍的脑与脊髓，将其仰卧固定于蛙板上。从上腹部向前方左右剪开胸腔，暴露心脏，用眼科剪剪开心包膜。将连有丝线的蛙心夹在心室舒张时夹住心尖，丝线另一端连张力换能器，松紧适度。换能器接微机生理实验系统或二道仪直流插件插口，调节记录仪。刺激电极可直接与心室肌接触或由刺激器输出端引出二根导线、一根和蛙心夹连接，另一根与心脏周围组织接触。实验装置见图7-11-1。

㈡在体蛙心收缩描记

1．描记正常心搏活动曲线：观察曲线升降及疏密所代表的心室收缩、舒张的关系及频率。

2．在心室收缩期给予中等强度的单个刺激，观察能否引起心脏活动的改变？3．期前收缩和代偿间歇：在心室舒张期，给予中等强度的单个刺激，观察心脏期前收缩和伴随其后的代偿间歇。

4．心肌“全或无”反应：用丝线在静脉窦与心房之间作一结扎，心脏停止跳动。然后给予阈下及不同强度的阈上刺激，观察蛙心收缩强度的变化。两次刺激间隔时间不少于15s。

5．按图7-11-2，在蛙心脏右上方有一血管神经束，在颈静脉和皮动脉之间的是

迷走交感神经干。用玻璃分

针沿血管走向分离神经，并

埋线。电刺激迷走交感神经

干，对心搏曲线有何影响？

6．给予心脏以连续刺激，能否观察到心脏发生强直收

缩？

㈢蛙心起搏点观察

1．认识蛙心各部分，观察蛙心收缩的顺序，并记录心率。

2．用缝合线在静脉窦和心房之间进行斯氏第一结扎(图7-11-3)，观察结扎前后静脉窦、心房和心室的收缩情况和频率。

3．心脏各部分跳动平稳后，再在心房和心室之间进行斯氏第二结扎，观察结扎前后心房和心室的收缩情况和频率。并分析发生变化的可能机理。

[注意事项]

1．实验中经常给蛙心滴加任氏液，以防心肌组织干燥。

2．引起期前收缩后，须间隔一段时间待心搏恢复正常后，再给予心脏第二次刺激。

3．结扎的部位要准确，结扎时用力逐渐增加，直至心房、心室搏动暂时停止。[思考题]

1．心肌的绝对不应期长和不发生强直收缩有何生理意义？

2．有时心脏发生期前收缩后，并无代偿间歇，而是出现所谓“三连跳”，如何解释？

3．正常起搏点和潜在起搏点是怎样的关系？

实验十二离体蛙心灌流

[目的] 掌握离体蛙心的解剖技术和离体蛙心的灌流法。观察内环境理化因素相对稳定对维持心脏正常节律性活动的重要作用，了解肾上腺素、乙酰胆碱等激素、神经递质对心脏活动的调节意义。

[原理] 心脏具有自动节律性收缩的特性，可用人工灌流的方法，研究心脏活动的规律和特点。蛙类心脏标本存活期长，所需条件简单，故常被选用。

[实验对象] 蛙或蟾蜍

[实验材料] 斯氏（Straub）蛙心套管（或八木氏双管蛙心套管，见图7-12-1）、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、微机生理实验系统或二道仪、机械-电换能器（10~50g）、任氏液、长滴管、铁支架等（试剂见实验项目）。

[实验方法与步骤]

㈠离体蛙心标本制备

对蛙行双刺毁，仰卧固定于蛙板上，用铁剪刀剪去胸壁，再用眼科剪小心地剪开心包膜，暴露心脏。识别心脏动脉球、静脉窦（背面）等结构（图7-12-2）。

于主动脉分支下预埋两条棉线，一根向后拉，在静脉窦外试探性地结扎静脉，阻断血液回心；另一根在主动脉分支下做一虚结备用。用第三根线把蛙的主动脉左支上端结扎。在近动脉球处剪一向心斜切口(大小约为血管口径的1/3)，剪口位置视套管尖端长度与心脏大小而定，注意要剪破血管内膜，每次心缩时有血自切口涌出，但不要把血管剪断。左手用眼科镊提起切口缘，右手将注有任氏液的斯氏套管插入动脉干内，然后左手持左侧血管分支上的结扎线向外拉，右手将蛙心套管送入动脉球；用蛙心夹夹住蛙心尖部，拉动蛙心夹上的连线提起心尖，使心室与动脉球约呈100°~120°的钝角，然后当心室缩紧时把套管平直往心室方向推进。当感觉套管进入心室后再把心尖放平，随即将套管稍向心室推进，调整合适位置使套管斜口朝向心室腔，可见套管内液面随心跳而升降。助手立即将已作虚结之丝线把血管和套管固定起来，余线则扎于套管的玻璃小钩上，以免心脏滑脱。提起套管，剪断与心脏相连的血管和组织（注意勿损伤静脉窦及两心房），摘出心脏。最好再将结扎静脉的线头系在套管玻璃钩上，使心脏保持正常位置，射血通畅。用任氏液洗去心脏内外的余血后，注入新鲜任氏液备用。可在套管的下1/3处结一线作为标志，每次换任氏液时使液面与此线相平。

接好微机生理实验系统或二道生理仪和机械-电换能器（图7-12-3），选用相应实验项目或选择适当参数，开始记录。

㈡实验项目

1．描记正常心跳曲线并分析理解其疏密、规律性、幅度、顶点及基线的含义。