高效液相色谱法测定黄芩中黄芩苷含量
黄芩含量实验报告

一、实验目的1. 学习掌握黄芩中黄芩苷的提取和测定方法。
2. 掌握高效液相色谱(HPLC)技术的基本操作。
3. 通过实验,了解黄芩苷在黄芩中的含量,为黄芩的质量控制和药效评价提供依据。
二、实验原理黄芩苷(Baicalin)是黄芩的主要有效成分,具有抗菌、抗炎、抗氧化等多种生物活性。
本实验采用高效液相色谱法(HPLC)测定黄芩中黄芩苷的含量。
HPLC法是一种高效、灵敏、准确的分离分析方法,适用于中药有效成分的含量测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:黄芩药材(市售)、甲醇、乙腈、水(均符合色谱分析要求)、黄芩苷标准品。
2. 仪器:高效液相色谱仪、紫外检测器、色谱柱、超声波清洗器、电子天平、移液器、样品处理装置等。
四、实验方法1. 样品制备(1)称取黄芩药材粉末约1.0g,置于100ml具塞锥形瓶中。
(2)加入甲醇50ml,超声提取30分钟。
(3)过滤,滤液于60℃水浴中浓缩至近干。
(4)加入水5ml,溶解残渣,转移至10ml容量瓶中,定容至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
2. 标准曲线制备(1)精密称取黄芩苷标准品10.0mg,置于100ml容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,得100μg/ml的标准溶液。
(2)分别取标准溶液0.5ml、1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml,置于10ml容量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,得浓度分别为5μg/ml、10μg/ml、15μg/ml、20μg/ml、25μg/ml的标准溶液。
(3)分别取上述标准溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,测定峰面积,以浓度C 为横坐标,峰面积A为纵坐标,绘制标准曲线。
3. 供试品溶液测定(1)分别取供试品溶液和标准溶液各10μl,注入高效液相色谱仪,测定峰面积。
(2)根据标准曲线,计算供试品溶液中黄芩苷的含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线线性关系良好,线性范围为5μg/ml~25μg/ml,相关系数R²=0.999。
黄芩苷含量测定实验报告

黄芩苷含量测定实验报告
黄芩苷(baicalin)是一种天然的药用成分,属于黄芩属植物中的一种黄酮苷类化合物。
黄芩苷具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种药理活性,被广泛应用于中药和保健品领域。
因此,对黄芩苷含量的测定具有重要的意义。
黄芩苷的含量测定通常采用高效液相色谱法(HPLC)进行。
在本实验中,我们使用HPLC法对黄芩苷含量进行了测定。
首先,我们准备了黄芩苷的标准溶液,然后通过HPLC仪器进行色谱分析。
在色谱图上,黄芩苷会表现出特定的峰形,通过峰面积与浓度的关系,可以计算出样品中黄芩苷的含量。
实验结果显示,我们所测定的样品中黄芩苷的含量为XX%,符合预期范围。
这表明我们所使用的方法准确可靠,可以用于对黄芩苷含量进行快速测定。
在进行黄芩苷含量测定时,有几点需要注意。
首先,样品的制备要尽量避免污染和损失,以确保测定结果的准确性。
其次,色谱条件的选择对测定结果也有重要影响,需要根据实际情况进行合理调整。
最后,在进行测定时要注意仪器的操作规范,确保实验过程的准确性和可重复性。
总的来说,通过本次实验,我们成功地测定了黄芩苷的含量,为进一步研究和应用黄芩苷提供了可靠的数据支持。
希望在未来的研究
中,可以进一步完善测定方法,提高测定精度,为黄芩苷的应用提供更多有益信息。
高效液相色谱法在黄芩中黄芩苷含量测定的应用研究

好。
种黄酮类化合物 , 其 中含 量 较 高 并 具 有 明 显 药 理 作 用 的 是
黄芩苷 、 黄芩 素 、 汉 黄 芩 素 和 汉 黄芩 苷 l 2 ] 。 目前 对 黄 芩 的 药 理 研 究 已经 很 广 泛 , 本文采用了高效液相色谱 ( HP L C) 法 分 析 了黄 芩 中黄 芩 苷 的 含 量 , 为 有 效 控 制 该 药 材 质 量 以 及 合 理 利 用 该 药 用植 物 资 源 提 供 参 考 。
1 仪 器 与 试 药
2 . 3 . 4 稳定性试 验 : 取黄芩药材 ( 批号 2 0 1 2 0 7 2 2 ) 按 照 供 试 品 溶 液 制 备 方 法 制 备 样 品液 , 分别于 0 , 4 , 8 , 1 2 , 1 6 ,2 4 h测 定峰面积 , R S D为 0 . 0 0 5 , 表 明测 定 溶 液 在 2 4 h内稳 定 。 2 . 3 . 5 回 收 率试 验 : 精 密 称 取 已知 含 量 的 黄 芩 药 材 ( 批 号 2 0 1 2 0 7 2 2 ) 0 . 2 g , 加入黄芩 苷对照 品适量 , 依 2 . 2项 下 供 试 品溶 液 制 备 方 法 制 备 , 按上述色谱条 件进样分 析 , 计 算 回收 率, 结果见表 1 。
・
4 62 ・
山西医药杂志 2 0 1 3年 4月 第 4 2卷 第 4期 上 半 月 S h a n x i Me d J , Ap r i l 2 0 1 3 , Vo 1 .4 2 , No . 4 t h e F i r s t
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药物研究 ・
高效液 相色谱法在黄芩中黄芩苷含量测定的应用研究
高效液相色谱法测定固经丸中黄芩苷含量

Dee m i ai n o iai n GUJ NGW I b LC
Zh n e,Z a g a pn z a g f h n Y n ig,Wa g Hu n,Lu C a g e,T n S e gin i n a i h n y a h n i a
a js d t p = . y p op o c ai 1 m n o d a 2 6 n i o a f 1 0m / i. eut T e n m e fte r i lpa s dut o H 2 6 b h s h r cd . o i r t 7 m w t a f w rt o . L m n R sl h u b ro h oe c l e e i te h l e s ta t
K y w r s H L ; u n is b i l e o d : P C G j g Pl ; ac i i l an
固经 丸 由黄 柏 、 芩 、 芍 、 附 等 6昧 药 材 细 粉 用 水 泛 丸制 黄 白 香 成 , 有滋阴清热 、 经止带功能 , 于治疗阴虚血热 , 经先期 , 具 固 用 月
rn e fo 2 . 0—2 2 0 p / . h aea e eo ey a 1 0 4 % ,R D:2 0 % ( a g rm 0 2 0 . , mL T e vrg rc vr w s 0 . 6 g S .5 n:6 . n lso T e ) Co cu in h mehd i rv d t b to s po e o e sniv ,a i n cu ae w ih c n b sflt h u ly cnrlo j g n e s ie rpd a d a crt , hc a e u eu o te q ai o t fGui Wa . t t o n
黄芩有效成分的含量测定技术

黄芩有效成分的含量测定技术黄芩素是黄芩的主要活性成分,通常作为评价黄芩质量的指标之一。
目前,对于黄芩素的含量测定方法主要有光谱法、色谱法、生物学法等,下面将就几种常用的测定技术进行简要介绍。
一、紫外-可见分光光度法紫外-可见分光光度法是一种常用的测定黄芩素含量的方法。
此方法利用黄芩素在特定波长下的吸收特性进行测定,一般选择的检测波长为260nm。
该方法简便易行,对样品预处理要求不高,但是在实际应用中往往受到样品基质的干扰,因此在测定时通常需要进行样品前处理和基质干扰的消除。
二、高效液相色谱法高效液相色谱法(HPLC)是目前应用最为广泛、准确性最高的测定黄芩素含量的方法之一。
该方法通常采用反相色谱柱进行分离,以乙腈-水混合溶剂为流动相,并通过梯度洗脱或等温洗脱的方法进行测定。
在检测方面,一般采用紫外检测器进行检测,选取的检测波长为254nm。
HPLC法测定结果准确可靠,适用范围广,但相对来说对设备和实验者的操作要求较高,在测定过程中需要严格控制各种因素的影响,确保测定结果的准确性和可靠性。
三、质谱法质谱法是一种基于物质的分子结构和质荷比特性的测定方法,目前在测定黄芩素含量方面也得到了广泛应用。
该方法通常采用质谱联用技术,如LC-MS/MS、GC-MS等进行测定。
通过质谱法可以直接检测黄芩素的分子信息,对于复杂样品的分析能力强,不受基质干扰,测定结果准确可靠。
质谱法设备和操作要求较高,成本也较高,一般在一般实验室中并不常用。
在进行黄芩素含量测定时,需要结合实际情况选择合适的测定方法,并在测定过程中严格按照要求操作,确保测定结果的准确性和可靠性。
除了黄芩素的含量测定外,黄芩苷作为黄芩的另一重要有效成分的测定也是十分重要的。
目前,对于黄芩苷的测定主要采用色谱法,如HPLC法等进行测定。
在实际应用中,对于黄芩有效成分含量的测定,一般需要结合多种方法进行综合分析,确保测定结果的准确性和可靠性。
黄芩素和黄芩苷的含量测定是保证黄芩质量的重要保证,目前有多种技朋可以选择,但在选择测定方法时需要考虑实际情况,并在测定过程中严格操作,以确保测定结果的准确性和可靠性。
高效液相色谱法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷的含量

高效液相色谱法测定黄芩颗粒剂中黄芩苷的含量
陈晓城;韩安榜;陈凌云;林崇良
【期刊名称】《江西中医学院学报》
【年(卷),期】2004(016)004
【摘要】目的:应用高效液相色谱法测定黄芩颗粒饮片中黄芩苷的含量.方法:色谱柱为Alltech色谱柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-水-磷酸
(50∶50∶0.2),检测波长为274 nm,流速为1.0 ml/min,柱温:30 ℃.结果:黄芩苷在0.094~0.564 μg范围内进样量与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 6);平均加样回收率为97.63%,RSD=0.45%(n=5).结论:本方法测定结果准确、灵敏、重现性好.【总页数】2页(P48,65)
【作者】陈晓城;韩安榜;陈凌云;林崇良
【作者单位】浙江省温州医学院附属第一医院,温州,325000;浙江中医学院,杭州,310053;浙江省温州市药检所,温州,325000;浙江省温州医学院附属第一医院,温州,325000
【正文语种】中文
【中图分类】TQ461
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高效液相色谱法测定溶岩胶囊中黄芩苷的含量

1 6
天津药学
Taj P am c 2 0 i i h r ay 0 8年 nn
第2 O卷第 5期
液 (0 1 4 .2
(7 3 .) 4 :5 :02 为流动相 ; 检测 波长 为 2 0n 柱温 :O℃; 8 m, 4 流速 : . lm n 进样 量 :0 l 10 m/ i; 1 。结果 : 黄芩 苷在 0 103 .2 6— 0 8 24 .0 g范 围内线性 良好 ( = .9 8 , r 0 999 ) 平均 回收率为 117 % , S 0 .9 R D为 1 1 。结论 : .% 本法操作 简便 , 重现性好 , 可有
功能 。为 了更好 地控 制其 内在 质量 , 本实 验采 用 H L 2 12 供 试 品 溶 液 PC ..
S MA Z C 一2 1A T,ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱC sltn工 作 站 ; HI D U L 00 H L o i uo
Lb lne分析之 星工作站。色谱柱 : i os C8 aAl c , a Da ni 1 m l (5 I × . m, m)赛 多利 斯 B 2 l B 10 201T 4 6m 5 TI I ; P 1D、 P9 S 电子 天平 ; 津 U 25 岛 V 40型 紫 外 一可 见 分 光 光 度 计 。 溶岩胶 囊 ( 津 市北 辰 区 中医 医 院 , 号 000 、 天 批 765 0 0 1 、7 7 9 规 格 : . / ) 763 00 1 , 0 3 g 粒 。黄 芩 苷 对 照 品 ( 中 国药 品 生 物 制 品检 定 所 , 号 l0 1 批 17 5—20 1 ) 0 22 。磷 酸、 无水 乙醇 均为 分析 纯 ; 甲醇色谱 级 ; 为纯化 水 。 水
1 仪器 与试 剂
黄芩提取物黄芩苷高效液相法

黄芩提取物黄芩苷高效液相法概述黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)是一种传统的中药材,广泛用于治疗炎症、感染和肿瘤等疾病。
黄芩提取物中的黄芩苷(baicalin)是其主要活性成分之一,具有抗氧化、抗菌、抗炎和抗肿瘤等多种药理作用。
因此,开发一种高效的液相色谱法用于测定黄芩提取物中的黄芩苷含量具有重要意义。
实验方法仪器设备•高效液相色谱仪(HPLC)•色谱柱:C18色谱柱•注射器:10μL固定体积注射器•色谱检测器:紫外检测器(UV)•称量仪:电子天平色谱条件•流动相:甲醇 - 水(含0.1%三氟乙酸)•流速:1.0 mL/min•柱温:30°C•紫外检测波长:280 nm样品制备将黄芩提取物粉末取约1 g,加入20 mL甲醇中,用超声波溶解10分钟,然后离心10分钟,取上清液并过滤。
取适量上清液进一步稀释。
校准曲线制备准备一系列浓度不同的黄芩苷标准溶液,分别为0.1 mg/mL、0.5 mg/mL、1 mg/mL、2.5 mg/mL、5 mg/mL。
以10 μL为一次注射量进行色谱分析。
色谱分析将样品和标准溶液以10 μL固定体积注射器注入HPLC系统中进行色谱分析。
记录峰面积,并根据标准曲线计算黄芩苷的含量。
结果与讨论校准曲线根据不同浓度的黄芩苷标准溶液进行HPLC分析,并绘制出峰面积与浓度的关系曲线。
通过回归分析得到拟合方程,并计算相关系数(R^2)来评估拟合效果。
方法验证对黄芩提取物样品进行重复性实验和稳定性实验,评估该方法的重复性和稳定性。
另外,还可以比较该方法与传统方法的结果,评估其准确性和精确度。
样品分析将不同来源的黄芩提取物样品进行HPLC分析,测定其中黄芩苷的含量。
对不同样品的结果进行比较和统计分析,评估不同来源黄芩提取物中黄芩苷的差异性。
结论通过该高效液相色谱法,可以准确、快速地测定黄芩提取物中的黄芩苷含量。
该方法具有较好的重复性、稳定性和准确度,适用于黄芩提取物质量控制和药理研究中的应用。
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34 加 样 回收 率 试 验 : 供 试 品 溶 液 过 直 径 为 0 4 m 的 . 取 . 5r i 微 孔 滤 膜 , 别 进 样 1 L, 据 批 号 分 别 测 定 , 平 均 值 。 分 O 根 取 结 果 表 明 , 芩 中 含 有 黄 芩 苷 O 2 2mg g 黄 芩 苷 含 量 为 黄 . 4 / , 5 5 。具 体 分 别 为 : 号 2 10 8 、 0 1 50 2 1 0 1 .2 批 0 1 5 0 2 1 0 3 、0 15 2
甲醇 稀 释 至刻 度 , 3 0n 测 吸 光 度 。以 吸 收 度 值 y对 浓 于 7 m 度 X 进 行 线 性 回 归 , 算 回 归 方 程 y一0 O 02 . 6 X, 计 . 0 +0 2 4 r 一0 9 96 线性 范 围 5 2 g mL . 9 , ~ 5t / 。  ̄
2 3 供 试 品 溶 液 的 制 备 : 芩 药 材 约 0 5g 精 密 称 定 ; . 黄 . , 置
于 5 0mL三 角 烧 瓶 中 , 2 加 5mL 甲醇 回 流 3 n 冷 却 ; 0mi, 转
移 至 5 OmL量 瓶 中 , 甲醇 至 刻 度 , 匀 , 过 ; 续 滤 液 5 加 摇 滤 取
3 1 精 密 度 试 验 : 对 照 品 溶 液 2 . 取 0mL, 行 连 续 进 样 6 进 次 , 得 黄 芩 面 积 的相 对 标 准 偏 差 ( S ) 别 为 0 5 % , 测 RD分 . 9 显 示 其 精 密 度 良 好 。然 后 精 密 称 取 已 知 含 量 的 3份 黄 芩 药 材 , 样 品 准 备 与 处 理 方 法 制 备 计 算 回 收 率 , 果 分 别 为 按 结
12 4 6 8h测 定 ,以各 色 谱 峰 峰 面 积 的 积 分 值 计 算 , S , , , , RD
W aes 效 液 相 色 谱 仪 ( 括 W aes1 tr 高 包 tr6 6泵 , tr Waes
分 别 为 2 O ,. , . , . , . , 明 其 重 复 性 . % 2 1 1 9 20 2 0 表
24 对 照 品溶 液 制备 : 对 照 品 黄 芩 适 量 , 密 称 定 , 别 . 取 精 分
置 于 1 OmL量 瓶 中 , 甲 醇 溶 解 并 稀 释 至 刻 度 , 匀 , 得 加 摇 即 单 一 成 分 对 照 品溶 液 。
3 结 果
[ ] 许 勇 , 晓琛 , 波 . 外 分 光 光 度 法 测 定 复 方 银 杏 叶 胶 囊 总 3 黄 陆 紫
的 黄芩 中 黄 芩 苷 含 量 分 别 为 5 5 ,.4
所有 黄 芩 药 材 均 由我 院药 剂 科 中 药 师 鉴 定 。 对 照 品 黄 芩 为 我 院 天 然 药 物 化 学 实 验 室 提 供 , 度 均 > 9 。 纯 8
好。
28 4 7检测器 )AG1 5电子天平 ( ; 3 梅特勒公 司) 。Agl t i n 。 e C
色 谱 柱 ( . X5 m)( aes 司 ) E o r色 谱 工 作 4 6 0r a W tr 公 ; mp we 站 ( aes 司 ) 甲 醇 为 色 谱 纯 ( 号 2 0 1 1 , 京 化 W tr 公 。 批 0825 北 学 试 剂 有 限 公 司) 磷 酸 为 分 析纯 ( 号 2 0 0 1 , 京 化 学 ; 批 0411北
忻 州 市 人 民 医 院 ( 3 0 0 白翠 先 040 )
黄酮 类 化 合 物 是 一 类 重 要 的 植 物 化 学 成 分 , 我 国传 是
统 中 医药 和植 物 化 学 物 质 中重 要 的 活 性 物 质 。从 常 见 药 物
9 . 、4 5 和 9 . % , 示 其 回收 率 高 。 5 9 9 . 50 显 3 2 重 复 性 试 验 : 密 吸 取 对 照 品 溶 液 1 . 精 0mL, 复 进 样 5 重 次 , 定 黄 芩 峰 面 积 , 果 其 R D 为 0 3 , 明仪 器 重 复 测 结 S .4 表
黄 酮 含 量 . 国医 药 研 究 ,0 8 2 8 :36 . 中 2 0 ,( ) 6—4
E] 王欣杨 , 4 于治 国 , 晓 霞 , . 效 液 相 色 谱 法 同 时测 定 斛 寄 生 高 等 高 中 四种 黄 酮 . 中草 药 ,O O 4 ( ) 1 51 7 2 l ,1 1 :3—3 . ( 稿 日期 :O1一 6 2 ) 收 2 1O — 8
2 方 法
黄 芩 药 材化 学 组 成 复 杂 , 了 黄 芩 外 , 有 一 些 杂 质 , 除 还 且 不 容 易 鉴 别 _ 。 同 时 国 内对 于 黄 芩 药 材 的提 取 工 艺 研 究 1 ] 报 道 不 多 , 外 则 未 见 报 道 。杨 向 东 等 嘲 以 紫 外 光 为 检 测 国 手 段 , 用 正 交设 计 法 观 察 了 回馏 提 取 黄 芩 药 材 总 黄 芩 的 采 影 响 因 素 。还 有 研 究 考 察 了超 声 提 取 黄 芩 药 材 总 黄 芩 的 影 响 因素 。 同时 黄 酮 类 化 合 物 作 为 植 物 次 生 代 谢 产 物 , 含 其 量 受 到 自身 遗 传 因素 、 理 生 化 因 素 的影 响 , 时也 受 到 植 生 同 物 生 长 发 育 进 程 及 其 所 处 的生 长 环 境 条 件 的影 响 。 在 药 材 生 长 过 程 中 , 细 胞 内 的 黄 酮 不 断 发 生 合 成 、 化 或 降 解 等 其 转 生 理 生 化 反 应 , 以不 同采 收期 黄酮 含 量 出现 差 异 所 。我 们建立的分析条件测定黄芩药材 的化合物黄芩苷 , 密 度、 精 回收率等均符合要求 , 定性佳 , 现性好 , 分析速度 快 , 稳 重 且 操 作 简 单 , 据 可 靠 , 用 于 黄 芩 药 材 中 黄 酮 成 分 的含 量 测 数 可
定。
参 考 文 献
Ei 张国峰, l 吴瑕 , 白雪 , . L 等 HP C法 同 时 测 定 野 葛 花 中 4种 异 黄
酮 成 分 的含 量 . 阳药 科 大 学 学 报 ,0 9 2 ( )4 —4 沈 2 0 ,6 1 :04 .
2 1 色 谱 条 件 的 选 择 : i n 1柱 (0mm ×4 6mm, . Agl tC8 5 e . 5 m) 以 乙 腈 超 纯 水 为 流 动 相 , 用 梯 度 洗 脱 , 样 量 为 1 , 采 进 0 L, 紫 外 扫 描 图谱 可 知 , 芩 在 3 0n 为 特 征 吸 收 , 此 由 黄 7 m 为 选 择 30n 为 检 测 波 长 。 同 时 考 察 色 谱 柱 温 在 3 、5 4 7 m O 3 、O
mL, 于 2 置 5mL量 瓶 中 , 甲醇 稀 释 至 刻 度 , 得 供 试 品 溶 用 即
液。
E ] 杨 向东 , 博 , 四艳 , . 交 试 验 法 优 选 葛 花 总 异 黄 酮 提 取 2 刘 陈 等 正
工 艺 的研 究 . 北 中 医杂 志 ,0 9 3 ( ) 6— 1 湖 2 0 ,0 8 :06 .
试 剂 六 厂 )盐 酸 为 分 析 纯 ( 号 2 0 0 0 , 京 化 工 厂 ) 乙 ; 批 0778北 ; 醇为分析纯 ( 号 000 , 京 化工厂 ) 批 888北 。其 中建 立 含 量 测 定 方法用黄芩 药 材为 2 1 0 1年 6月 购 买 于 当 地 药 材 公 司 。
性 良好 。
中分 离 纯 化 黄 酮类 化 合 物 具 有 重 要 意 义 。本 研 究 测 定 黄 芩
中黄芩苷 的高效液相 色谱测 定方 法 , 为黄 芩质 量控 制及 资
源选择提供 了科学依据 。
1 材 料 与 仪 器
3 3 稳 定 性 试 验 : 制 备 好 的样 品 溶 液 , 别 在 制 备 后 0 . 取 分 ,
作 者 简介 : 翠 先 , ,9 5年 l 白 女 16 O月生 , 管 药 师 , 州市 人 主 忻
民 医院 ,30 0 0 4 0
及4 5℃ 对 分 离 的 影 响 , 终 选 择 了 3 ℃ 的 柱 温 。 体 积 流 最 O
量 为 1 O mL mi。 . / n
2 2 标 准 曲 线 的 制 备 : 密 吸 取 黄 芩 苷 标 准 溶 液 ( 度 为 . 精 浓 5 g mL ,. ,. ,. ,. ,. 0t / ) 1 0 20 30 40 50mL置 1  ̄ 0mL容 量 瓶 , 加
山西医药杂志 2 l O 2年 1月 第 4 卷 第 1期 上 半 月 S a x Me ,a u r 0 2 V 1 1 No 1teFrt l h n i dJJ n ay2 1 。 o.4 , . h i s
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药 物研 究 ・
高效液 相色谱法测定黄芩中黄芩 苷含量