细胞迁移侵袭实验操作步骤
细胞迁移侵袭实验操作步骤
实验介绍细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。
实验步骤：1材料准备：可拍照显微镜，Transwell小室，孔径8μm，没包被胶的(Coster和Corning公司的也较常用)，Transwell迁移实验的细胞培养板24孔板。
细胞培养板应当与购买的Transwell小室相配套，BD公司的Matrigel，无血清DMEM，(1%胎牛血清)DMEM和1640培养基，DMEM完全培养基，1640完全培养基（也可加到20%血清），无菌PBS，棉签，胰酶，4%多聚甲醛固定液或者甲醇，结晶紫染液（%（g/ml）PBS结晶紫）2步骤和流程基质胶铺板：用BD公司的Matrigel 1：8（根据细胞产生mmp的量来决定）稀释，包被Transwell小室底部膜的上室面，置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。
使用前进行基底膜水化。
制备细胞悬液①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12－24h，进一步去除血清的影响。
但这一步并不是必须的。
②消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，（用PBS洗1－2遍），用含BSA的无血清培养基重悬。
调整细胞密度至5×105/ml。
接种细胞①取细胞悬液100µl加入Transwell小室。
②24孔板下室一般加入600µl含20%FBS的培养基，特别注意的是，下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，在种板的时候要特别留心，一旦出现气泡，要将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板。
③培养细胞：常规培养12－48h（主要依癌细胞侵袭能力而定）。
24h较常见，时间点的选择除了要考虑到细胞细胞侵袭力外，处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。
细胞迁移侵袭实验操作步骤(Transwell)
细胞迁移侵袭实验操作步骤(Transwell)实验介绍：细胞迁移和侵袭实验是通过将Transwell小室放入培养板中，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，研究细胞在不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜下的共培养、细胞趋化、细胞迁移和侵袭等多种方面的实验。
实验步骤：1.材料准备：可拍照显微镜、Transwell小室（孔径8μm，没包被胶的），24孔板、BD公司的Matrigel、无血清DMEM、(1%胎牛血清)DMEM和1640培养基、DMEM完全培养基、1640完全培养基（也可加到20%血清）、无菌PBS、棉签、胰酶、4%多聚甲醛固定液或者甲醇、结晶紫染液（0.1%（g/ml）PBS结晶紫）。
2.实验步骤：2.1 基质胶铺板：用XXX的Matrigel稀释1：8，包被Transwell小室底部膜的上室面，置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。
使用前进行基底膜水化。
2.2 制备细胞悬液：细胞撤血清饥饿12-24小时后，消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，用含BSA的无血清培养基重悬。
调整细胞密度至5×105/ml。
2.3 接种细胞：取细胞悬液100µl加入Transwell小室，24孔板下室加入600µl含20%FBS的培养基。
注意避免气泡的产生。
2.4 培养细胞：常规培养12-48小时。
24小时较常见，时间点的选择除了要考虑到细胞侵袭力外，处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。
2.5 结果统计：通过给细胞染色，在镜下计数细胞。
胞悬液；将细胞悬液加入上室中央，保持液面水平；将下腔室中加入含有20% FBS的条件培养基；37℃培养箱中孵育20-24小时；取出transwell，用PBS洗涤2次，用4℃的5%戊二醛固定，加入结晶紫或Giemsa染色；用棉球擦去上表面细胞，显微镜下观察。
注意事项包括确保transwell在24孔板中浸泡1小时，消化细胞时用无血清培养基洗涤2次并计数，将细胞悬液加入上室中央保持液面水平，下腔室中加入含有20% FBS的条件培养基，37℃培养箱中孵育20-24小时，用PBS洗涤2次，用4℃的5%戊二醛固定，加入结晶紫或Giemsa染色，用棉球擦去上表面细胞，并小心避免混淆实验组和对照组。
细胞侵袭转移实验报告
细胞侵袭转移实验报告细胞侵袭转移是癌症进展和转移的重要特征之一。
了解细胞的侵袭转移机制对于癌症预防和治疗具有重要意义。
本实验旨在研究细胞的侵袭转移能力，并探究其相关机制。
实验过程如下：1. 细胞培养与处理：选取一种具有侵袭能力的癌细胞株，如乳腺癌细胞MCF-7。
将细胞培养在含有适当营养和生长因子的培养基中，经过传代培养至适当细胞数目。
2. Transwell侵袭实验：将含有细胞的培养基加入到上游腔室中，下游腔室中加入含有化膜毛细孔的过滤膜，如Matrigel。
使细胞逐渐通过过滤膜向下游腔室侵袭。
培养一定时间后，取出过滤膜并使用染色剂染色，以观察和计数通过膜孔的细胞数量。
3. Western blot分析：用Western blot方法检测有关侵袭转移的分子标志物，如转录因子Snail和转录因子Slug、E-cadherin和N-cadherin等。
提取细胞总蛋白，经SDS-PAGE电泳分离，转移至聚乙烯二醇膜上，用特异性抗体与目标蛋白结合。
通过免疫反应，使用化学发光显色剂检测目标蛋白的表达水平。
4. Real-time PCR分析：通过Real-time PCR技术检测相关基因的mRNA水平，包括Snail、Slug、E-cadherin和N-cadherin等。
提取总RNA，逆转录为cDNA 后，用特异性引物进行PCR扩增。
通过观察PCR曲线和计算Ct值，比较各样本基因表达水平的差异。
实验结果如下：1. Transwell侵袭实验表明MCF-7细胞具有较强的侵袭能力。
染色显示通过过滤膜的细胞数量较多。
2. Western blot结果显示Snail、Slug和N-cadherin的蛋白表达水平较高，而E-cadherin的蛋白表达水平较低。
这表明细胞侵袭转移相关的转录因子和黏附分子表达异常。
3. Real-time PCR结果进一步证实了上述结果，Snail、Slug和N-cadherin的mRNA水平较高，而E-cadherin的mRNA水平较低。
细胞迁移和侵袭实验
细胞迁移和侵袭实验细胞迁移和侵袭实验实验准备：细胞，24孔板，transwell小室（8μm，24孔板专用），ECM Gel，10%FBS+培养基，无血清培养基，10 μ、200 μL、1000 μL移液器及配套枪头，1.5 mL EP 管，冰盒实验设计：实验分组一般分为阴性组（上下层均没有趋化因素），实验组（按照实验需要，上层或者下层加入趋化因素），对照组（趋化因素与实验组中的相反）。
如果有特别需要，可以再加上阳性组（上下层都有趋化因素）。
实验操作（请细读注意事项）：一、细胞侵袭实验1.ECM Gel原液提前1 h放在4 ℃冰箱中解冻，实验前转移到冰盒中。
2.将1.5 mL EP、枪头盒、transwell放在24孔板里面后，置于冰上预冷。
3.根据自己的使用量，按照ECM Gel : 无血清培养基=1 : 7.5在冰上稀释成使用液。
4.把枪头剪去一小段（约3 μm）后在冰上吸取40 μL/孔ECM Gel 使用液轻轻加入transwell上室中，加入时慢慢移动枪头，保证液体平铺在底部。
5.放在37 ℃孵箱15 min，让胶凝固。
6.消化、离心、计数细胞后，按照2.5x104 / mL用无血清培养基稀释细胞，制成细胞悬液（如果细胞很多，这一步可以提前，在4、5之前做）。
7.按照每孔200 μL，将细胞悬液加入transwell上室，同时在transwell下室加入10%FBS+培养基500 μL，放入37 ℃孵箱培养。
8.若干小时后取出，吸去transwell上室多余液体，用PBS清洗两次，用棉棒在上室中轻轻转动，吸干水分并擦去膜内侧的细胞。
9.在上室中加入结晶紫染液，染色5 min，回收染液，用流水缓缓冲去染液，再次用棉棒在上室中轻轻转动，吸干水分。
10.在正置显微镜上放置一块载玻片，将transwell小孔倒置放在上面，拍照。
11.在100倍视野下，对膜的上下左右及中间计数，做平均数。
12.清洗transwell，可以反复使用。
细胞侵袭迁移检测
细胞迁移的实验。
其中划痕法以其材料廉价，操作简单而多年来一直深受大家的欢迎。
我这里介绍一下我自己的操作过程和结果图。希望能给新来的战友们以帮助。
材料：
6 孔板（其他的也可以，但感觉6孔比较好，大小适中）
marker笔
直尺
20微升枪头（灭菌）
无血清培养基
PBS
准备：
所有能灭菌的器械都要灭菌，直尺和marker笔在操作前紫外照射30min（超净台内）
流程：
1。先用marker笔在6孔板背后，用直尺比着，均匀得划横线，大约每隔.5~1cm一道，横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2。在空中加入约5X105个细胞，具体数量因细胞不同而不同，掌握为过夜能铺满。
3。第二天用枪头比着直尺，尽量垂至于背后的横线划痕，枪头要垂直，不能倾斜。
4。用PBS洗细胞3次，去处划下的细胞，加入无血清培养基。
.2 软琼脂集落形成实验 大肠癌HCT116细胞在体外半固体培养体系中可以自发地形成集落. 而经PRL-3 siRNA转染的细胞集落生长呈剂量依赖性减少(P<0.05, 图2).
图2?PRL-3 siRNA转染对大肠癌细胞锚着不依赖性增殖的影响.
2.3 PRL-3 siRNA对肠癌细胞侵袭的影响 本研究采用Boyden小室模型方法采用PRL-3 siRNA转染对大肠癌细胞侵袭能力的影响, 结果发现: 与对照组比较, siRNA组穿过滤膜的癌细胞数明显下降, 且与浓度相关(P<0.05, 图3).
5。放入37度5%co2培养箱，培养。按0，6，12，24小时取样，拍照。
如果你连续监测24小时，你需要考虑到划痕缩小是细胞迁移和细胞繁殖共同作用的结果，而不是单纯的细胞迁移。如果你要单纯的考虑细胞迁移，你可以先用丝裂霉素处理一小时，抑制细胞的分裂，这样你的结果就是细胞迁移的作用了。
培育技术中的细胞迁移和侵袭研究方法简介
培育技术中的细胞迁移和侵袭研究方法简介培育技术中的细胞迁移和侵袭是现代生物医学领域中重要的研究方向之一。
细胞迁移和侵袭能力是癌症发展和转移的关键步骤，因此了解和掌握这些研究方法对于深入研究癌症等疾病的发生和发展机制至关重要。
本文将对几种常见的培育技术中的细胞迁移和侵袭研究方法进行简介。
首先，细胞迁移和侵袭实验中最常用的方法是Transwell实验。
Transwell实验通过在一个具有孔洞的膜上涂覆细胞并将其置于培养皿中进行培养，通过孔洞上、下的培养液来观察细胞迁移和侵袭的情况。
该方法简单易行，可以模拟细胞穿过基底膜进入邻近组织的过程。
此外，也可将上下孔洞的培养液分别加入不同的试剂，以研究其对细胞迁移和侵袭能力的影响。
其次，划痕实验也是常用的细胞迁移实验方法之一。
该方法通过在细胞培养皿中划出一条明显的划痕，然后观察一定时间后细胞填充划痕的程度，来评估细胞的迁移能力。
划痕实验可以直观地观察到细胞的迁移情况，并且操作简单快捷。
然而，由于该方法不模拟细胞穿越基底膜的过程，所以不能全面评估细胞的侵袭能力。
除了以上两种方法，还有其他一些更加先进和精确的技术用于研究细胞迁移和侵袭。
例如，全息成像技术可以实时观察细胞的三维迁移和侵袭过程，提供更为全面的视角。
单细胞迁移技术可以追踪和记录单个细胞的迁移轨迹，揭示细胞迁移的空间和时间特征。
这些方法需要更加复杂的设备和技术条件，但可以提供更为准确和详细的研究结果。
在细胞迁移和侵袭研究中，细胞系的选择也是至关重要的。
常用的细胞系包括癌细胞和原代细胞。
癌细胞系具有较强的迁移和侵袭能力，是研究肿瘤转移的理想模型。
原代细胞系则来自于患者的组织，具有更高的生物学真实性。
不同细胞系的选择需要根据具体研究目的和实验要求进行。
细胞迁移和侵袭研究方法的发展为探索癌症转移的分子机制提供了重要工具和平台。
通过合理选择合适的实验方法和细胞系，研究者们可以逐步揭示细胞迁移和侵袭的调控机制，为深入理解癌症等疾病的发生和发展提供重要线索。
细胞迁移or侵袭实验分析——LumaScope活细胞成像系统
细胞迁移/侵袭实验分析——LumaScope活细胞成像系统细胞迁移实验是普遍应用于评价损伤修复、贴壁肿瘤细胞转移或血管再生等的典型实验。
传统方法是应用无菌枪头（Tip）在细胞培养容器上划痕来实现。
但是此种方法无法实现在不同孔中划出同样大小的划痕。
Oris TM迁移/侵袭试剂盒能够提供更加精确的方法，在培养容器中生成一个圆形区域。
这种方法同样适用于观察不同方向的细胞迁移。
LumaScope活细胞成像系统具备传统显微镜的功能，可应用于细胞或组织培养实验室的日常细胞观察。
如细胞状态实时检测、远程传送和监控、细胞计数、形态观察、染色观察等。
LumaScope可放置于培养箱中实现细胞的长时间的连续成像和定点监测。
这种应用大大提高了实验过程检测的便捷性和结果的准确性。
本文将描述如何结合LumaScope与Oris TM迁移/侵袭试剂盒来实现细胞迁移/侵袭实验。
实验结果可通过Image J软件来进行分析，最终得到细胞迁移的数量和速度数据。
细胞迁移分析：Day 1：am 9:00插入Stoppers，接种细胞；pm 4:00（根据细胞贴附状况），拔除stoppers，PBS洗一遍后加入新鲜培养液。
Day 2：根据要观察的时间点设置LumaScope成像参数进行成像，并进行量化分析。
细胞侵袭分析：Day 1：am 9:00包被薄层BME（用无血清培养液制备），插入stoppers，接种细胞；pm 4:00 （根据细胞状况），拔除stoppers，包被厚层BME（含血清生长因子），再在第二层gel上面加上一层无血清培养液Day 2：根据要观察的时间点设置LumaScope成像参数进行成像，并进行量化。
一、材料●Oris TM迁移/侵袭试剂盒●细胞、培养容器和培养液●CO2培养箱●LumaScope活细胞成像系统●Image J软件（含Mtracking插件）二、操作方法1、根据上述Oris TM迁移/侵袭试剂盒使用说明培养细胞；2、75%乙醇消毒LumaScope系统及相关部件；3、将LumaScope系统放入CO2培养箱中，并连接到控制电脑（建议使用10倍或20倍物镜）4、将培养容器置于LumaScope载物台上，聚焦并找到目标视野；5、设置Time Lapse程序（包括光源、成像参数和保存路径等），建议成像间隔时间为20-30min；6、启动程序，系统将自动运行，直至结束；7、实验结果可通过Image J软件进行分析。
细胞迁移侵袭实验操作步骤(Transwell)(汇编)
迁移实验（cell migration assay）实验介绍细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。
实验步骤：1材料准备：可拍照显微镜，Transwell小室，孔径8μm，没包被胶的(Coster和Corning公司的也较常用)，Transwell迁移实验的细胞培养板24孔板。
细胞培养板应当与购买的Transwell小室相配套，BD公司的Matrigel，无血清DMEM，(1%胎牛血清)DMEM和1640培养基，DMEM 完全培养基，1640完全培养基（也可加到20%血清），无菌PBS，棉签，胰酶，4%多聚甲醛固定液或者甲醇，结晶紫染液（0.1%（g/ml）PBS结晶紫）2步骤和流程2.1基质胶铺板：用BD公司的Matrigel 1：8（根据细胞产生mmp的量来决定）稀释，包被Transwell小室底部膜的上室面，置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。
使用前进行基底膜水化。
2.2制备细胞悬液①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12－24h，进一步去除血清的影响。
但这一步并不是必须的。
②消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，（用PBS洗1－2遍），用含BSA的无血清培养基重悬。
调整细胞密度至5×105/ml。
2.3接种细胞①取细胞悬液100µl加入Transwell小室。
②24孔板下室一般加入600µl含20%FBS的培养基，特别注意的是，下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，在种板的时候要特别留心，一旦出现气泡，要将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板。
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实验介绍
细胞迁移与侵袭实验将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔，将研究的细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。
实验步骤：
1材料准备：
可拍照显微镜，Transwell小室，孔径8μm，没包被胶的(Coster和Corning公司的也较常用)，Transwell迁移实验的细胞培养板24孔板。
细胞培养板应当与购买的Transwell小室相配套，BD公司的Matrigel，无血清DMEM，(1%胎牛血清)DMEM和1640培养基，DMEM完全培养基，1640完全培养基（也可加到20%血清），无菌PBS，棉签，胰酶，4%多聚甲醛固定液或者甲醇，结晶紫染液（%（g/ml）PBS结晶紫）
2步骤和流程
基质胶铺板：
用BD公司的Matrigel 1：8（根据细胞产生mmp的量来决定）稀释，包被Transwell小室底部膜的上室面，置37℃30min使Matrigel聚合成凝胶。
使用前进行基底膜水化。
制备细胞悬液
①制备细胞悬液前可先让细胞撤血清饥饿12－24h，进一步去除血清的影响。
但这一步并不是必须的。
②消化细胞，终止消化后离心弃去培养液，（用PBS洗1－2遍），用含BSA的无血清培养基重悬。
调整细胞密度至5×105/ml。
接种细胞
①取细胞悬液100μl加入Transwell小室。
②24孔板下室一般加入600μl含20?S的培养基，特别注意的是，下层培养液和小室间常会有气泡产生，一旦产生气泡，下层培养液的趋化作用就减弱甚至消失了，在种板的时候要特别留心，一旦出现气泡，要将小室提起，去除气泡，再将小室放进培养板。
③培养细胞：常规培养12－48h（主要依癌细胞侵袭能力而定）。
24h较常见，时间点的选择除了要考虑到细胞细胞侵袭力外，处理因素对细胞数目的影响也不可忽视。
结果统计
可以附着在膜的这里所谓的“贴壁”是指细胞穿过膜后，“贴壁”细胞计数，直接计数法，
下室侧而不会掉到下室里面去，通过给细胞染色，可在镜下计数细胞。
取出Transwell小室，弃去孔中培养液，用无钙的PBS洗2遍，甲醇固定30分钟，将小室适当风干。
%结晶紫染色20 min，用棉签轻轻擦掉上层未迁移细胞，用PBS洗3遍。
400倍显微镜下随即五个视野观察细胞，记数。
实验材料
（1）Transwell chamber: 24-well, μm pore membranes (Corning) （2）细胞培养相关试剂：无血清培养基，10％血清培养基，PBS，％EDTA （3）固定液：甲醇
（4）染色液：Giemsa染液
（5）封片剂：中性树胶
（6）其他：小镊子，棉棒，载玻片，盖玻片
操作步骤
（1）所有细胞培养试剂和Transwell chamber 放在37℃温育；
（2）待测细胞培养至对数生长期，消化细胞，用PBS和无血清培养基先后洗涤5 /ml；10 一次，用无血清培养基悬浮细胞，计数，调整浓度为2×（3）在下室（即24孔板底部）加入600－800μl 含10％血清的培养基，上室加入100－150μl细胞悬液，继续在孵箱培养24小时；
（4）用镊子小心取出chamber，吸干上室液体，移到预先加入约800μl甲醇的孔中，室温固定30分钟；
（5）取出chamber，吸干上室固定液，移到预先加入约800μl Giemsa染液的孔中，室温染色15－30分钟；
（6）轻轻用清水冲洗浸泡数次，取出chamber，吸去上室液体，用湿棉棒小心擦去上室底部膜表面上的细胞；
）用小镊子小心揭下膜，底面朝上晾干，移至载玻片上用中性树胶封片；7（．（8）显微镜下取9个随机视野计数，统计结果。
注意事项
（1）根据待测细胞体积大小选择合适孔径的chamber。
常用的为μm孔径（如AGS细胞），如果细胞体积较大可以考虑用10-μm孔径；
（2）根据待测细胞的迁移能力强弱调整细胞数和迁移时间。
常规24-well
4/well，迁移时间12≈36小时；接种细胞数约为2≈5×10 chamber（3）由于Corning公司的24-Transwell内含12个独立的chamber，为了避免操作污染，每次实验可预先另准备一块24孔普通培养板（Corning）；
（4）如果细胞迁移能力较弱，下室液体可用3T3细胞无血清培养24小时获得的上清加50μg/ml FN（Fibronectin），具体可查阅相关文献；
（5）细胞悬液加入膜中央，尽量保证液面水平；
（6）固定染色擦洗时动作小心，避免擦去膜底面的细胞。
但一定要充分擦净膜表面上未迁移的细胞，以免影响读数。
尤其是膜周边上可用细牙签或小镊子缠上湿棉花擦洗，但要小心避免将膜戳破；
（7）Chamber和膜上都无法标记，操作时应小心避免混淆实验组和对照组；（8）充分晾干，避免残留水分导致镜下聚焦不一致。
细胞侵袭实验（cell invasion assay）
实验材料
（1）Matrigel (BD 5mg/ml)，-20℃保存
（2）其余材料同迁移实验
操作步骤
（1）Matrigel在4℃过夜融化；
，冰上操作；1mg/ml至终浓度Matrigel℃预冷的无血清培养基稀释4）用2（．437℃温育上室底部中央垂直加入100μl稀释后的Matrigel，3（）在chamber 5小时使其干成胶状；－。
（4）后续步骤同迁移实验（1-8）注意事项在过高或
过低的温度均易凝固，因此操作所需枪头和离心管应提（1）Matrigel 4℃预冷；前在 2）铺胶时保证液面水平，胶的厚度均匀一致，切勿产生气泡；（）其他注意事项同迁移试验。
（3
其他做肿瘤侵袭实验的具体步骤Transwell，变成液态；度过夜（24h）度冰箱的(1) 基质胶准备：将冻存于－80BD matrigel 4℃操 4，混匀，（每室）（2）取300ul无血清培养基，加入60ul（或50ug/Matrigel
；>5h）放入最好在冰浴上）作，，加入上室各100ul（3个室）；37℃培养箱中，孵育4-5h（此间经常观察，当出现“白色层”时，说明已经变为固态。
1-2h。
5注释：无血清培养基和基质
胶按1：稀释，每孔加50ul，在37℃培养箱中 3次，计数，配成细胞悬液；（3）消化细胞，无血清培养基洗细胞悬液；100ul（4）用无血清培养基洗 Matrigel洗1次；每孔加入条件培养基；含有（5）下腔室中加入500ul20％FBS ；6（）37℃培养箱中，孵育20-24h 遍，洗2 5%戊二醛固定，4℃；用（7）取出transwellPBS遍，用棉球擦洗PBS210minGiemsa8（）加入结晶紫（%）染色或染色（5－），室温，去上表面细胞，显微镜下观察。
迁移实验细配成计数，次， 2 洗无血清培养基消化细胞，小时；1孔板中浸泡24在transwell 细胞悬液；加药刺激；下腔室中加入条件培养基或其他刺激因100ul胞悬液，每孔加入℃；5% 戊二醛固定， 4用子；37℃培养箱中，孵育 20-24h；取出 transwell PBS洗2遍，遍，用棉球擦去上表面细胞，显洗 2 PBS PBS洗2遍，加入结晶紫（%）染色，室温，照相，记录。
微镜下
观察计数 10
侵袭实验操℃，取 300ul 无血清培养基，加入 30ul （或 50ug/ 每室） Matrigel 混匀，（ 4
4-5h 孵育；最好在冰浴上），加入上室各 100ul （ 3 个室）放入 37 ℃培养箱中，作，；用无血清培养 3 （ >5h ）；消化细胞，无血清培养基洗次，计数，配成细胞悬液
条 1 次；每孔加入 100ul 细胞悬液；下腔室中加入 600ul 无血清 Matrigel 基洗洗戊 5% 2 PBS 洗遍， transwell 件培养基；37 ℃培养箱中，孵育 20-24h；取出用遍， 2 2 ℃；PBS 洗遍，加入结晶紫（ % ）染色，室温， PBS 洗 4 二醛固定，用棉球擦去上表面细胞，显微镜下观察
小室是否可以重复利用，该怎样消毒transwell3×5min，蒸，清水用棉签轻轻擦去胶和反面细胞，清水冲洗，超声清洗，低挡，30min10min×2，，微波，低火6h3h馏水3×5min，室温凉干，用前紫外线小室正面，反面效果很好。