微生物细菌分离培养实验报告

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细菌的分离培养与纯培养实验报告

细菌的分离培养与纯培养实验报告

细菌的分离培养与纯培养实验报告一、实验目的本实验旨在掌握细菌的分离培养方法,了解纯培养的原理及方法,以及熟悉细菌培养基的制备和使用。

二、实验原理1. 细菌分离培养方法细菌分离培养是指将混合菌落中的单一细菌分离出来,使其在无竞争的环境中独立生长。

常用的方法有均匀涂布法、斜坡涂布法和点式涂布法。

2. 纯培养原理及方法纯培养是指将混合菌落中同一种细菌分离出来并进行单独培养。

常用的方法有挑选法和稀释法。

3. 细菌培养基制备与使用细菌培养基是供给微生物生长发育所需营养物质和条件的一种人工环境。

根据不同需求可制备不同类型的细菌培养基,如寒偏好性、厭氧性、选择性、差异性等。

常用的细菌培养基有普通营养琼脂平板、LB 平板等。

三、实验步骤1. 细菌分离培养(1)取一支无菌的铂丝,将其消毒并冷却。

(2)取一份混合菌落,将铂丝在其表面轻轻刮几下,使细菌附着在铂丝上。

(3)将铂丝均匀涂布于琼脂平板上。

(4)重复以上步骤,涂布多个琼脂平板。

(5)将琼脂平板放置于恒温箱中,在适宜的温度下培养。

2. 纯培养(1)取一份混合菌落,在显微镜下观察并挑选出同一种细菌。

(2)取一支无菌的铂丝,在混合菌落表面轻轻刮几下,使细菌附着在铂丝上。

(3)将铂丝均匀涂布于琼脂平板上,并进行单独培养。

3. 细菌培养基制备与使用(1)按照需要制备不同类型的细菌培养基,并进行消毒灭菌处理。

(2)将需要进行分离或纯化的混合菌落均匀涂布于培养基上,进行培养。

四、实验结果1. 细菌分离培养经过适当时间的培养后,可看到琼脂平板上出现单一的细菌菌落。

2. 纯培养经过适当时间的培养后,可看到琼脂平板上只有挑选出的同一种细菌菌落。

3. 细菌培养基制备与使用制备好的细菌培养基可用于分离、纯化和大量繁殖特定细菌。

五、实验注意事项1. 实验器材需消毒并严格无菌操作。

2. 均匀涂布法需注意铂丝在琼脂平板上均匀涂布。

3. 液体培养基需注意摇晃均匀以使细菌均匀分布。

4. 实验结束后要彻底清洗和消毒实验器材和工作台面。

细菌的分离培养实验报告

细菌的分离培养实验报告

细菌的分离培养实验报告细菌的分离培养实验报告细菌是微生物中的一类重要生物体,它们广泛存在于自然界的各个环境中,包括土壤、水体、空气以及人体等。

研究细菌的分离培养对于了解其生态特征、代谢能力以及与人类健康相关的病原性等方面具有重要意义。

本次实验旨在通过分离培养的方法,获取和鉴定不同细菌菌株,从而深入了解细菌的多样性和功能。

实验材料和方法:1. 实验材料:含有营养成分的琼脂平板、离心管、移液器、无菌培养皿等。

2. 实验方法:将待分离的样品(如土壤、水样等)加入到含有营养成分的琼脂平板中,用无菌棉签均匀涂抹在平板表面,然后在恒温培养箱中进行培养。

实验结果与讨论:经过一段时间的培养后,我们观察到了琼脂平板上的细菌生长。

细菌形态的多样性令人惊叹,有的细菌呈圆形,有的呈椭圆形,还有的呈链状、菌丝状等。

这种多样性反映了细菌在适应各种环境中的进化和适应能力。

为了更好地了解这些细菌的特性,我们进行了进一步的分离培养。

首先,我们选择了一些形态和颜色不同的菌落进行分离。

通过无菌棉签的转接,我们将这些菌落分别接种到新的琼脂平板上。

经过培养,我们得到了一系列纯培养的细菌菌落。

接下来,我们对这些纯培养的细菌进行了形态观察和生理生化试验。

形态观察包括细菌的大小、形状、颜色等特征,而生理生化试验则包括对细菌的代谢能力、酶活性等方面的测试。

通过这些试验,我们可以初步了解细菌的分类和功能。

在形态观察中,我们发现了一些细菌呈现出独特的特征。

比如,某些细菌呈现出亮黄色的菌落,这可能与其代谢产物有关。

而另一些细菌则呈现出粘稠的菌落,这可能与其产生胶原蛋白等粘附物质有关。

这些特征为我们进一步研究细菌的功能和应用提供了线索。

在生理生化试验中,我们使用了一系列常见的试剂和培养基,如甲基红试剂、氧化酶试剂、柠檬酸盐培养基等。

通过对细菌的反应观察,我们可以初步判断其代谢能力和酶活性。

例如,某些细菌在柠檬酸盐培养基上呈现出黄色,这可能是由于其产生了柠檬酸酶。

细菌分离纯化实验报告

细菌分离纯化实验报告

细菌分离纯化实验报告本次实验的目的是通过细菌分离纯化的方法,从混合菌液中分离出目标菌株,并进行纯化,以获得纯净的目标菌株用于后续实验。

实验设备和试剂:1. 细菌培养平板:含有选择性抑制其他细菌生长的培养基。

2. 培养基:适用于目标菌株的培养基,如营养琼脂培养基。

3. 微量离心管:用于样品的处理和离心。

4. 恒温恒湿箱:调节实验环境的湿度和温度。

5. 显微镜:观察细菌形态和数量。

6. 干燥箱:用于处理培养平板和培养皿。

7. 试剂:如无菌生理盐水、酒精,用于消毒和处理细菌样品。

实验步骤:1. 预处理培养基和培养皿:将培养基热解,倒入无菌培养皿中,待凝固。

2. 提取目标菌株:取一定量的混合菌液,加入微量离心管中,并在1000rpm条件下离心10分钟。

3. 厌氧处理(如需要):若目标菌株是厌氧菌,则在无氧条件下进行操作。

4. 稀释样品:取离心后的上清液,逐渐进行稀释,直至可以观察到单个菌落形成的板。

5. 涂布培养:取少量稀释液,利用无菌培养棒均匀涂布在固体培养基上,避免菌落交叉生长。

6. 培养和筛选:将涂布好的培养皿面朝下放入恒温恒湿箱中,以适当的温度和时间进行培养。

根据菌落形态进行初步筛选,挑选出目标菌落。

7. 细菌分离:用无菌培养棒或酒精灯消过菌的鉴别针,在富含目标菌株的培养基上从相应菌落上轻轻刮取少量菌液,涂布于无菌培养基上。

8. 纯化:再次进行培养,重复步骤7直至获得明显的单菌落。

根据菌落形态和生理特性进行进一步鉴定,如果需要较纯净的目标菌株,可进行多次次传代。

9. 存储:将纯化的目标菌株进行保存,可在干燥箱中以适当的温度和湿度保存,或使用冰冻保存。

实验结果与讨论:通过上述实验步骤,我们成功地从混合菌液中分离出了目标菌株,并对其进行了纯化。

在筛选过程中,我们根据菌落形态和生理特性来初步判断目标菌株。

而通过细菌分离和纯化,我们能够获得更纯净的目标菌株。

然而,在实验中可能会遇到一些困难和问题。

例如,在筛选过程中,可能会出现非目标菌落过多的情况,导致目标菌株的分离速度较慢。

细菌培养实验报告模板(3篇)

细菌培养实验报告模板(3篇)

第1篇一、实验目的1. 熟悉细菌培养的基本原理和方法。

2. 学习观察细菌的生长特征。

3. 掌握无菌技术操作,提高实验技能。

二、实验原理细菌是单细胞微生物,具有繁殖速度快、形态多样等特点。

在适宜的培养基和条件下,细菌可以生长繁殖,形成肉眼可见的菌落。

通过细菌培养,可以观察其生长特征,为后续研究提供基础。

三、实验材料1. 培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基等。

2. 细菌:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。

3. 实验仪器:恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、移液器、无菌操作台等。

4. 实验试剂:无菌水、无菌棉签、无菌生理盐水等。

四、实验方法1. 培养基制备:按照说明书配制牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基,高压蒸汽灭菌后备用。

2. 细菌接种:将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中。

3. 恒温培养:将接种后的培养基放入恒温培养箱中,分别于37℃和30℃下培养24小时。

4. 观察记录:观察细菌在培养基上的生长情况,记录菌落形态、大小、颜色等特征。

5. 无菌技术操作:在无菌操作台中,进行接种、移液等操作,防止污染。

五、实验结果1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好,形成圆形、金黄色、表面光滑的菌落。

2. 大肠杆菌在营养肉汤培养基上生长良好,形成乳白色、浑浊的菌液。

六、实验分析1. 通过本次实验,掌握了细菌培养的基本原理和方法。

2. 观察到金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在不同培养基和温度下的生长特征,为后续研究提供了基础。

3. 在实验过程中,注意无菌技术操作,防止污染。

七、实验讨论1. 细菌在不同培养基和温度下的生长情况有何差异?2. 如何提高细菌培养的效率?3. 在实验过程中,如何避免污染?八、实验总结通过本次细菌培养实验,我们了解了细菌的基本特征和生长规律,掌握了无菌技术操作,为后续研究奠定了基础。

在实验过程中,我们要注重细节,严格按照操作规程进行,确保实验结果的准确性。

细菌的分离培养与移植实验报告

细菌的分离培养与移植实验报告

实验五细菌的分离培养与移植[实验目的]1、掌握细菌分离培养及移植的基本要领和方法。

[实验原理]在细菌学诊断中,分离培养是不可缺少的一环。

分离培养的目的主要是在含多种细菌的病料或培养物中挑选出某种细菌。

在分离培养时应注意:选择适合于所分离细菌生长的培养基、培养温度、气体条件等。

同时应严格按无菌操作程序进行实验,并做好标记。

[实验材料]菌种:大肠杆菌斜面、大肠杆菌与金黄色葡萄球菌等。

器械:剪刀、记号笔(以上小组共用)。

培养基:普通肉汤和普通琼脂斜面、普通琼脂平板、酒精灯、接种环。

[实验内容]1、细菌的分离平板划线接种法通过在平板上划线,将混杂的细菌在琼脂平板表面充分的分散开,使单个细菌能固定在一点上生长繁殖,形成单个菌落,以达到分离纯种的目的。

若需从平板上获取纯种,则挑取一个单个菌落作纯培养。

可用做分离纯种细菌。

操作方法(三区划线法):a、右手拿接种环,烧灼冷却后,勾取菌种。

b、左手抓握琼脂平板(让皿盖留于桌上),在酒精灯火焰左前上方,使平板面向火焰,以免空中杂菌落入,右手将已沾菌的接种环在琼脂表面密集而不重叠的来回划线,面积约占整个平板的1/5-1/6,此为第一区。

划线时接种环与琼脂呈30-40度角轻轻接触,利用腕力滑动,切忌划破琼脂。

c、接种环上多余的细菌可烧灼(每划完一个区域是否需要烧灼灭菌视标本中含菌量多少而定),待冷后,在划线末端重复2-3根线后,再划下一区域(约占1/4面积),此为第二区。

d、第二区划完后可不烧灼接种环,用同样方法划第三区,划满整个平皿。

e、划线完毕,将平板扣入皿盖并作好标记,置37℃温箱孵育18-24小时观察琼脂表面菌落分布情况,注意是否分离出单个菌落,并记录菌落特征(如大小、形状、透明度、色素等)。

平板分区划线法培养后菌落分布情况平板划线培养的方法甚多,可按各人的习惯选择应用,其目的都是达到使被检材料适当的稀释,以求获得独立单在的菌落,防止发育成菌苔,以致不易鉴别其菌落性状。

分离细菌的实验报告

分离细菌的实验报告

一、实验目的1. 学习细菌分离和纯化的基本方法。

2. 掌握平板划线法和稀释涂布平板法分离纯化细菌。

3. 了解细菌纯化过程中的注意事项。

二、实验原理细菌分离和纯化是微生物学实验中的重要技术,通过将混合菌液中的细菌分离出来,得到单个菌落,从而研究细菌的生物学特性。

本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法进行细菌分离。

1. 平板划线法:将菌液滴在琼脂平板上,用无菌接种针划线,使菌液在平板上逐渐稀释,最终形成单个菌落。

2. 稀释涂布平板法:将菌液进行一系列稀释,将适量稀释液涂布在琼脂平板上,使菌液在平板上稀释至形成单个菌落。

三、实验材料1. 实验试剂:牛肉膏蛋白胨培养基、无菌水、生理盐水、无菌棉签、无菌接种针、酒精灯、无菌培养皿、移液器、显微镜等。

2. 实验菌种:待分离的细菌菌液。

四、实验步骤1. 制备牛肉膏蛋白胨培养基:按照实验要求,将牛肉膏蛋白胨培养基溶解于蒸馏水中,调整pH至7.0-7.2,分装于无菌培养皿中,高压灭菌。

2. 菌液制备:将待分离的细菌菌液用无菌生理盐水进行适当稀释。

3. 平板划线法分离:(1)将牛肉膏蛋白胨培养基冷却至50℃左右,倒入无菌培养皿中,待凝固。

(2)用无菌棉签蘸取适量菌液,在平板上划线。

(3)将平板倒置,放入37℃恒温培养箱中培养24小时。

4. 稀释涂布平板法分离:(1)将牛肉膏蛋白胨培养基冷却至50℃左右,倒入无菌培养皿中,待凝固。

(2)将菌液进行一系列稀释,取适量稀释液涂布在平板上。

(3)将平板倒置,放入37℃恒温培养箱中培养24小时。

5. 观察结果:观察平板上的菌落生长情况,记录菌落特征。

五、实验结果与分析1. 平板划线法:在平板上观察到多个菌落,其中有些菌落可能为单个菌落,但有些菌落可能为多个细菌聚集而成。

2. 稀释涂布平板法:在平板上观察到单个菌落,说明菌液已成功分离。

六、实验讨论1. 平板划线法分离细菌时,划线次数和划线速度对分离效果有较大影响。

划线次数过多或过少、划线速度过快或过慢,均可能导致分离效果不佳。

细菌分离培养实训报告

细菌分离培养实训报告

一、实验目的1. 掌握细菌分离培养的基本原理和操作方法。

2. 了解不同细菌的生长特性和菌落形态。

3. 培养实际操作能力,为后续的微生物学学习和研究打下基础。

二、实验原理细菌分离培养是微生物学实验中的一项基本操作,通过将混合菌液中的细菌进行分离、纯化,得到单一菌种。

常用的分离方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

本实验采用平板划线法进行细菌分离培养。

三、实验材料与仪器1. 实验材料:大肠杆菌菌种、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、接种环、酒精灯、无菌水、试管、试管架、培养皿等。

2. 仪器:恒温培养箱、电子天平、生物安全柜、无菌操作台等。

四、实验步骤1. 培养基制备:称取牛肉膏蛋白胨琼脂干粉,加入适量无菌水,混匀后煮沸溶解,待冷却至50℃左右,倒入培养皿中,待凝固。

2. 接种:将大肠杆菌菌种接种于牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上,用接种环在平板表面进行划线。

3. 恒温培养:将划线平板倒置放入恒温培养箱中,培养24小时。

4. 观察菌落:观察菌落形态,记录菌落特征,如大小、形状、颜色、边缘等。

5. 纯化菌种:根据菌落特征,挑选单个菌落进行纯化。

将纯化后的菌落接种于新的牛肉膏蛋白胨琼脂平板培养基上,培养24小时,再次观察菌落形态,确认纯化成功。

五、实验结果与分析1. 菌落形态:大肠杆菌菌落呈圆形、光滑、湿润、边缘整齐,直径约为2-3mm,白色。

2. 纯化菌种:通过观察菌落特征,挑选出单个菌落进行纯化,成功得到纯化的大肠杆菌。

六、实验总结本次细菌分离培养实训,使我掌握了细菌分离培养的基本原理和操作方法。

通过实验,我了解到不同细菌的生长特性和菌落形态,提高了实际操作能力。

在实验过程中,我学会了无菌操作、接种、观察和记录等技能,为后续的微生物学学习和研究打下了基础。

七、注意事项1. 操作过程中要严格遵循无菌操作原则,避免污染。

2. 接种环要灼烧灭菌,待冷却后再进行划线操作。

3. 观察菌落时,要仔细观察菌落形态,准确记录。

4. 培养过程中,要注意培养箱温度和湿度,保证菌落正常生长。

细菌培养实验报告分析

细菌培养实验报告分析

一、实验背景细菌培养是微生物学实验中一项基本且重要的技术,通过对细菌进行培养,可以观察其生长特性、分离纯化、鉴定以及进行各种生化实验等。

本实验旨在通过平板划线法分离培养细菌,并对所分离的菌落进行形态观察、生化实验和药敏试验,以分析细菌的种类和特性。

二、实验材料与方法1. 实验材料(1)菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。

(2)培养基:牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基、琼脂平板等。

(3)试剂:酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、靛基质、甲基红、V-P试剂、革兰氏染色液等。

2. 实验方法(1)平板划线法分离细菌:将待分离的细菌接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上,用无菌接种环进行划线操作,重复划线直至菌落分离。

(2)观察菌落特征:观察分离的菌落形态、大小、颜色、边缘、表面等特征。

(3)进行生化实验:对分离的菌落进行葡萄糖发酵、乳糖发酵、靛基质试验、甲基红试验、V-P试验等生化实验。

(4)药敏试验:采用纸片扩散法进行药敏试验,观察细菌对多种抗生素的敏感性。

三、实验结果与分析1. 菌落特征通过平板划线法分离,我们得到了形态各异的菌落。

大肠杆菌菌落呈白色、光滑、圆形、边缘整齐;金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色、光滑、圆形、边缘整齐;枯草芽孢杆菌菌落呈白色、粗糙、圆形、边缘不整齐。

2. 生化实验结果(1)葡萄糖发酵:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖,产生红色沉淀;枯草芽孢杆菌不发酵葡萄糖。

(2)乳糖发酵:金黄色葡萄球菌能发酵乳糖,产生红色沉淀;大肠杆菌、枯草芽孢杆菌不发酵乳糖。

(3)靛基质试验:金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均产生靛基质,使培养基呈蓝绿色;大肠杆菌不产生靛基质。

(4)甲基红试验:金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应;大肠杆菌呈阳性反应。

(5)V-P试验:金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌均呈阴性反应;大肠杆菌呈阳性反应。

3. 药敏试验结果大肠杆菌对氨苄西林、头孢噻肟、头孢曲松等抗生素敏感;金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺等抗生素敏感;枯草芽孢杆菌对青霉素、氨苄西林、头孢噻肟等抗生素耐药。

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微生物细菌分离培养实验报告土壤微生物的分离培养技术实验报告重庆大学研究生专业实验教学实验报告书实验课程名称:实验指导教师:学院: 专业及类别: 学号: 姓名: 实验日期: 成绩:重庆大学研究生院制一、实验目的1、了解分离与纯化微生物的基本原理及方法;2、了解倒平板配制土豆培养基的方法与平板划线分离的基本操作技术;;3、学习平板菌落计数的基本原理和方法,并掌握其基本技能;4、初步观察来自土壤中的几类微生物的菌落形态特征,并能判断菌的类型。

二、实验原理1、培养基的种类培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴别、保存各种微生物或积累代谢产物。

一般的培养基应包含适合微生物生长的6大营养素即水分、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子。

培养基的种类很多,根据培养成分的不同可分为天然培养基、合成培养基与半合成培养基;根据物理状态的不同又可分为液体培养基和固体培养基。

微生物的分离、纯化、记数等方面的研究常常使用的就是固体培养基。

本实验就是使用的固体培养基。

已配制好的培养基必须立即灭菌,如来不及灭菌,应暂存冰箱,以防止其中微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养基酸碱度所带来不利影响。

培养基的原材料来源十分广泛,本实验采用的原材料为土豆。

2、接种方法与无菌接种将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。

接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。

接种的关键是要严格的进行无菌操作。

微生物的接种方法很多,划线接种、三点接种、穿刺接种、混浇接种与涂布接种是几种常用的接种方法。

划线接种是最常用的接种方法,即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可以达到接种的目的。

常用的接种工具为接种环、针等。

在斜面接种和平板划线中就常用此法。

三点接种是把少量的微生物接种在平板表面,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察研究它们的形态。

研究霉菌形态时就常用此法。

穿刺接种是用针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺。

该法常用于厌氧菌种的保藏或微生物的动力研究。

混浇接种是先将待接的微生物放入培养皿中再倒入冷却至45?左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就被稀释了。

待平板凝固后,置于适宜温度下培养,就可以长出单个菌落的微生物。

涂布接种是将菌液倒入平板上,再用涂布棒在表面迅速的作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可以长出单个菌落的微生物。

本实验采用的是划线接种。

为了防止接种时引入其它微生物,整个操作过程均需在无菌操作台上进行,还需对操作员的双手进行酒精消毒,每次划线前都需灼烧接种环,接种时才打开培养皿且不能全部打开,接种完马上关上。

三、实验器材1、仪器培养皿、量筒、滴管、吸水纸、烧杯、三角瓶、酒精灯、玻璃棒、接种环、15ml离心管、试管架、镊子、电磁炉、锅、恒温培养箱、高温灭菌锅、无菌操作台、酒精灯、天平、滤纸等。

2、材料土豆、琼脂、蒸馏水、酒精、土壤样品四、实验步骤1、土壤稀释液的配制? 在菜地用九点取样法取适量土壤样品,具体操作为:在菜地选取九个取样点,在每个取样点取相同量的表层土壤(10cm左右),然后将其混合均匀;? 称取1g土壤样品与99ml蒸馏水,将其配制成100ml的土壤溶液;? 用移液管取9ml蒸馏水于15ml离心管中,再用移液枪取1ml前一步已配制的土壤溶液于离心管中,摇匀,即为10-3的土壤溶液;? 重复前一步,将土壤溶液稀释为10-4、10-5、10-6、10-7、10-8一系列稀释液。

2、土豆培养基的制备? 用天平称取200g土豆,清洗干净后去皮切丁;? 用量筒量取1000ml蒸馏水与电磁炉锅中,再加入已准备好的土豆,将其煮烂;? 从锅中取出已煮烂的土豆,用纱布过滤,滤液待用;? 称取20g琼脂与滤液中,再用蒸馏水定容至1000ml;? 在制备好的滤液中加入0.1ml菌液,然后放入高温灭菌锅中,在121?下灭菌20min;? 取出已灭菌的土豆培养基,待其熔化后冷却至60?,倒入每付平板约15-20ml,待其凝固后便可使用。

3、微生物的接种与分离? 将接种需要的所有器材均放置于无菌操作台上;? 用浸泡在酒精里棉花给双手灭菌,点燃酒精灯,右手拿接种环,左手拿培养基;? 将接种环放在火焰上烧灼,待其冷却后在10-6土壤稀释液中蘸取少量液体,打开培养基的一部分,采用划线接种,使之形成单菌落,一共划线3-4次,每划线一次就需在火焰上烧灼一次;? 重复上步,接种10-7、10-8的土壤稀释液的微生物;? 接种完的培养基放在恒温培养箱中倒置培养48h,取出观察。

五、结果与思考1、实验结果图1实验结果如图1所示。

由图1可知,采用划线接种土壤微生物的培养皿里有单菌落出现,这说明划线接种能达到分离培养的目的。

学习过微生物这门课程的同学都知道,真菌的菌落较大且疏松,菌丝细长,呈绒毛状、蜘蛛网状、棉絮状,无固定大小,多有光泽,不易挑,孢子会呈现红色、褐色、绿色、黑色、黄色等不同的颜色;细菌的菌落较小,形状表面或光滑黏稠,或粗糙干燥,易挑起,多为白色。

由此可知土壤里既含有真菌又含有细菌。

2、思考题?在平板划线法中,为什么每次都需要将接种环上的剩余物烧掉,答:这么做的主要目的是杀死上次划线后接种环上残留的菌种,以使下次划线的菌种直接来自于上次划线的末端,使每次划线菌种数目减少,从而达到分离菌株的目的。

?为什么要把培养皿倒置培养,答:?操作时培养皿盖上可能粘有水珠或者细菌,倒着培养可以避免培养皿盖上的水珠或者微生物落在培养皿上;?培养过程中,细菌在代谢繁殖过程中会产生一些有害于细菌生长繁殖的代谢物,释放热量及有水排出,如果不倒着培养会有水珠滴落到培养基中,影响菌落的生长;?如果培养目标是收集细菌代谢物,而且代谢物易溶于水,倒着培养可能会方便收集。

六、实验总结篇二:南医微生物实验报告脓汁和粪便标本中病原菌的检测[摘要]脓汁和粪便标本中有不同的病原菌。

为了探究两种标本中病原菌的种类、特性和生化反应等,本实验将对脓汁和粪便中的病原菌进行分离培养、革兰染色、生化反应、血清学反应、细菌药物敏感性试验等操作。

在实践中学习培养基的制备、消毒和灭菌,细菌的分离与培养,细菌群体和个体形态特征的观察,细菌生化反应鉴定等操作方法。

从而达到掌握各种微生物实验的操作方法,培养对微生物实验的兴趣,反思微生物实验中所遇到的问题并总结探讨如何解决优化的目的。

[引言]常见的化脓性病原菌有金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、脑膜炎球菌、肺炎链球菌、结核杆菌、淋病奈瑟菌、铜绿假单胞菌等。

临床上,脓汁标本在做细菌分离培养的同时,须直接涂片检查,观察是否有典型形态的菌体,芽孢有无,为临床提供最初的诊治依据;粪便和经离心的尿沉淀物等则直接接种与指定的培养基中。

粪便标本中常见的病原菌有志贺氏菌属、大肠埃希菌属、弧菌属、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌等。

粪便标本中常含有很多杂菌,应根据检验目的菌的不同而选择培养基(如SS琼脂、伊红-美蓝平板等),选择培养基时应根据需要尽可能地抑制杂菌,以利于病原菌的检出。

本实验通过常规的病原菌检测方法从脓汁标本中分离出黄白两种细菌,均为革兰氏阳性球菌,其中黄色是致病菌—金黄色葡萄球菌,白色是白色葡萄球菌;从粪便标本中分离到紫黑色和粉红色的细菌,均为革兰氏阴性杆菌,其中紫黑色的是大肠埃希菌,粉红色的是痢疾志贺菌。

1.实验材料1.1器材酒精灯、接种环、接种针、打火机、试管、棉塞、油性笔、污物盘、普通冰柜、奥林巴斯 CX21型生物显微镜、拭镜纸、称量纸、药勺、牛皮纸、电炉、橡皮筋、锥形瓶、刻度尺、镊子、玻片、吸水纸、培养皿、高压蒸汽灭菌器、隔水式电热恒温培养箱等。

1.2 试剂药品脓汁标本、粪便标本、营养琼脂、营养肉汤、半固体琼脂、普通营养琼脂培养基、伊红-美蓝培养基、斜面琼脂、结晶紫、卢戈碘液、95%乙醇、稀释品红、香柏油、拭镜油、葡萄糖微量发酵管(2支)、乳糖微量发酵管(2支)、青霉素抗菌素纸片、先锋霉素?抗菌素纸片、庆大霉素抗菌素纸片、蒸馏水、生理盐水、兔血浆、福氏志贺菌诊断血清等。

2.实验方法与步骤实验的总流程:培养基的制备?细菌的分离培养?细菌的纯培养?细菌的形态学检查?细菌的生化试验等?细菌的血清学试验、结果分析2.1培养基制备(1)营养琼脂培养基营养琼脂干粉与蒸馏水按适当比例充分混合均匀?加热溶化?高压蒸汽灭菌?倒平板分装?琼脂完全凝固后,平板倒放?4?冰箱保存备用(2)斜面培养基营养琼脂干粉与蒸馏水按适当比例充分混合均匀?加热溶化?高压蒸汽灭菌?倒试管分装?培养基趁热斜放?琼脂凝固以后,4?冰箱保存备用2.2空气与人体体表细菌学检查2.2.1空气的细菌学检查2.2.1.1实验方法自然沉降法:根据空气中细菌气溶胶粒子,在地心引力的作用下,以垂直的自然方式沉降到培养基表面,培养以后,计数菌落形成单位( Colony-Forming Units,CFU),可了解空气的污染情况。

2.2.1.2实验步骤每组1个营养琼脂平板,选择采样地点(实验室、卫生间、走廊等)?将平板盖打开,盖朝下放置在平板旁边?平板暴露于空气中15分钟?平板倒扣盖上?作标记?37?温箱培养24小时?观察结果2.2.2人体体表的细菌学检查2.2.2.1实验步骤甲常规洗手,乙标准洗手,甲和乙共用1个平板。

按下图在普通平板上接种手指上的细菌。

第1格为洗手前,第2格为洗手后,第3格为消毒后,第4格空白对照。

2.3 细菌的分离培养2.3.1实验方法平板划线法:借助于划线,将混杂的多种细菌,在平板表面分散成单个细菌,并固定在某一点上。

培养以后细菌各自分裂繁殖,形成肉眼可见的细菌集团(单菌落)。

2.3.2实验步骤接种环烧灼灭菌?分别取脓汁标本与粪便标本点在普通平板和伊红美蓝平板上,各做两份?烧掉接种环上多余的脓汁或粪便标本?冷却后,使用分区划线分离法,将脓汁标本接种于营养琼脂平板(2份),粪便标本接种于伊红美蓝平板(2 份)?接种环烧灼灭菌?将平板倒置37?培养18,24h?观察结果2.4细菌的群体生长特性观察和纯化培养2.4.1实验方法斜面接种法:是一种从已经生长好的菌种中挑取少量菌种移植到另一个斜面培养基的饭方法。

该法主要用于单个菌落的纯培养、保存菌种或观察细菌的某些特性。

用灭菌的接种环取单个菌落或少许细菌,从培养基斜面底部向上划一条直线,然后从底部向上作连续曲线划线,一直划到斜面顶端。

2.4.2实验步骤接种环烧灼灭菌?挑选平板上典型的四种单菌落(白色、金黄色、紫黑色、粉红色)进行斜面接种纯培养?做好标记?接种环烧灼灭菌?斜面培养基置于37?培养过夜?保存备用2.5细菌的个体形态特征的观察2.5.1实验方法:革兰氏染色法和肉汤接种法2.5.2实验原理革兰氏染色法:G,菌的细胞壁厚,肽聚糖网状分子形成一种透性障,当乙醇脱色时,肽聚糖脱水而孔障缩小,故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上,呈紫色。

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