药敏试验简介(1)
药敏试验简介
药敏试验方法学
• 纸片扩散法 • 稀释法（MIC法）
– 肉汤稀释法
• 常量稀释法 • 微量稀释法
– 琼脂稀释法
• E-test法
药敏试验方法学指南
– 使用CLSI 方法记录 – 采用其他方法时使用CLSI做参照方
法进行比对
CLSI M100 “表格” 内容
更新信息
M100
词汇表 I & II & III
M2 表格 扩散法
•抗生素的测试与报告 •S I R 折点 •质控
M7 表格 MIC法
•抗生素的测试与报告 •S I R 折点 •质控
附录
CLSI M100-S22 更新信息
– 普通细菌放CO2时由于 碳酸的影响，药物活性
– 抗生素拮抗剂含量（用29212
受到影响，形成假敏感
监控）
或假耐药
– 钙镁离子含量、锌离子含量
– 苛养菌放普通环境生长
（用27853氨基糖苷类和亚胺
不良，导致假敏感
配能结果监控）
• 菌悬液
• 培养时间
– 粘液性铜绿需48小时
– 浓度高抑菌环缩小
• 测量方法
• 按CLSI规定，由FDA根据抗生素在临床实 践中表现出来的安全性、有效性、和医学 经济学原则将抗生素分为A,B,C三组。报告 时按照A→B→C的次序进行报告。
关于抗生素分组
▪ A组药物是首选药物，属于最经济有效，最安 全的抗生素类别
▪ B组是在A组药物无效时，或者感染不单纯需 要扩展微生物覆盖范围时选用的药物，耐药性 一般较A组CFU/ml）：
35药敏试验(1)
35药敏试验：K-B法（1）1，M-H琼脂平板厚度：正常应为4mm，当它太厚时，会引起假性耐药，抑菌圈变小。
当它太薄时，出现假性敏感，圈变大。
直径90 mm平板可注入25—30 ml的M—H肉汤，制造好后于4度可保存一周。
2，M-H琼脂平板的PH值：正常应为7.2—7.4,当PH升高时，使青霉素、四环素类的抑菌圈变小，大环内脂类的抑菌圈变大。
当PH降低时，使青霉素、四环素类的抑菌圈变大，氨基糖苷类和大环内脂类的抑菌圈变小。
3，M-H琼脂平板中有胸腺密啶或核苷类物质，当它们的含量增多时，抑菌圈变大。
4，M-H琼脂平板中有钙、镁离子，当它们的含量过高时，引起抑菌圈变小。
当它们的含量过低时，引起抑菌圈变大。
5，纸片含药量：饱和法应为20微克，半饱和法应为10微克。
含药量大则抑菌圈小。
纸片的含药量与纸片的重量、吸水性、直径有关。
纸片的含药量应是每一张都相同。
纸片的PH值应为中性。
纸片的厚度应为1厘米，过厚则抑菌圈变小，过薄则抑菌圈变大。
纸片的直径应为6—6.35 mm，过大引起药物浓度变小,故则抑菌圈变小。
过小，则抑菌圈变大。
纸片于零下20度保存，使用时应室温平衡10分钟以上再打开，注意防潮。
纸片保存不当，引直药量损失，可引起能生长的菌增多，故出现抑菌圈变大。
6，标准菌液的浓度：应为0.5个麦氏浊管，相当于1.5＊108CFU/ml，当过浓时，引起抑菌圈变小。
过稀时，抑菌圈变大。
7，加菌液后，应在15分钟内加药片，不能超过15分钟，否则引起抑菌圈变小。
因细菌已过多的渗透入琼脂中。
8，贴纸片时：纸片间的间距应不小于24 mm，距平板边缘应不小于15 mm。
90mm的平板，要加5片：可防不同药物的相互干扰，防抑菌圈边缘交叉，保持纸片周围浓度相对恒定。
加了一个纸片后，应高温灼烧镊子，再冷却后取下一个纸片。
药敏试验kb值27
药敏试验kb值27
（原创实用版）
目录
1.药敏试验简介
2.KB 值的含义
3.KB 值 27 的含义及应用
正文
1.药敏试验简介
药敏试验是一种用于检测微生物对特定药物的敏感性的实验方法。
通过药敏试验，医生可以了解病原体的药物敏感性，从而为患者选择最适合的抗生素进行治疗。
药敏试验的结果通常以 KB 值表示。
2.KB 值的含义
KB 值（Kirby-Bauer Value）是一种药敏试验的结果表示方法，用于衡量微生物对特定抗生素的敏感性。
KB 值越小，表示微生物对药物越敏感；KB 值越大，表示微生物对药物越不敏感。
药敏试验的结果通常分为以下几个等级：敏感（S）、中介（I）、耐药（R）和未测定（NT）。
3.KB 值 27 的含义及应用
KB 值 27 表示微生物对某种抗生素具有较高的敏感性。
根据药敏试验的结果，医生可以选择相应抗生素进行治疗，以提高治疗效果和减少药物不良反应。
然而，KB 值并不能完全预测药物治疗的效果，还需结合患者的具体病情、药物剂量和治疗方案等因素综合判断。
总之，药敏试验 KB 值 27 表示微生物对特定抗生素的高度敏感性，有助于指导临床抗生素治疗。
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药敏试验方法简介
02
耐药性监测
药敏试验可用于监测细菌的耐药性，帮助医生和研究人员了解和预防耐药性的发展。
02
药敏试验方法种类
利用抗菌药物在琼脂平板上扩散，从而测定细菌对药物的敏感程度。
纸片扩散法
原理
将细菌接种在平板上，贴上含不同浓度抗菌药物的纸片，静置一定时间后测量抑菌圈大小。
方法
广泛应用于临床细菌药敏试验，简单易行。
03
药敏试验操作流程
细菌培养
将临床标本接种到固体培养基上，培养出单一菌落，纯化后再进行鉴定。
接种方法
使用无菌棉签或针头将细菌接种到培养基表面，确保细菌均匀分布。
细菌培养与接种
药敏纸片放置
将含有不同抗菌药物的纸片贴在培养基上，纸片之间需留有间隔。
结果观察
将培养皿放入35°C恒温箱中培养24-48小时，观察每个药敏纸片抑菌圈的大小。
标准化阶段
随着生物技术的进步，自动化药敏试验和高通量药敏试验逐渐成为主流，可快速、准确地检测细菌对多种药物的敏感性。
自动化与高通量阶段
03
药物研发
在药物研发过程中，药敏试验可用于评估新药的抗菌效果和比较不同药物之间的效果。
药敏试验的应用场景
01
感染性疾病治疗
对于细菌感染的疾病，如肺炎、尿路感染等，药敏试验可以帮助医生选择合适的抗菌药物进行治疗。
应用
通过稀释抗菌药物，在不同浓度下观察细菌生长情况，以判断药物的抑菌或杀菌效果。
原理
将细菌接种在液体培养基中，加入不同浓度的抗菌药物，观察细菌生长情况。
方法
该方法更适用于定量测定抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）。
应用
稀释法
E-test法
原理
结合纸片扩散法和稀释法，利用琼脂平板上的梯度浓度来检测细菌对药物的敏感性。
细菌药敏试验的原理及其应用
细菌药敏试验的原理及其应用细菌药敏试验（Antibiotic sensitivity test），是指用不同的药物或药物组合对感染性病原体进行敏感性试验，以选择最有效的药物或药物组合进行治疗。
这项检测技术在临床医疗和科学研究领域都有很广泛的应用，为治疗感染性疾病提供了重要的依据。
本文将介绍细菌药敏试验的原理及其应用。
一、细菌药敏试验原理常用的细菌药敏试验包括扩散法（disc diffusion method）和测MIC方法（minimum inhibitory concentration method）。
下面将分别介绍这两种药敏试验的原理。
1.扩散法扩散法是最常用的敏感性试验方法，也称为Kirby-Bauer试验。
其原理是将细菌涂于一层琼脂平板上，然后将不同药物浓度的药物纸片放置于琼脂平板表面，在恰当的条件下，药物会扩散到周围的琼脂平板中，形成特定的药物浓度梯度。
当细菌生长到纸片周围时，能被药物抑制生长的菌落就会停止扩散和形成，药物敏感性可根据抑菌区域大小来判定。
扩散法可快速、可靠地预测某些药物或药物组合对一个特定的细菌是否敏感。
2.测MIC法测MIC（Minimum Inhibitory Concentration）法是指测定从一个特定细菌菌株分离出的标准菌株对各种药物的最低有效浓度。
其原理是将精确浓度的药物加入以特定细菌为基底的墨菌平板，在药物的影响下，细菌生长可能会被完全抑制或减缓，通过测定最小抑菌浓度，即MIC值，来判断细菌对该药物或药物组合的敏感性。
二、细菌药敏试验的应用细菌药敏试验在病原体的鉴定、合理用药及流行病学调查等方面具有重要意义。
下面将从以下三个方面介绍药敏试验的应用。
1. 细菌鉴定细菌药敏试验是细菌鉴定的有力工具，经常在临床医学和科研中使用。
鉴定病原体种类和药敏试验是治疗感染病的基础，细菌药敏试验可以帮助医生选择最合适的治疗方法。
对于一些发病症状不明显的感染病以及病原体不明的疾病，药敏试验尤其重要。
药敏试验方法简介ppt
2
3
包括试剂、器材的准备，样品的收集、处理等。
确保试验前准备工作充分
试验过程中应严格按照规定的方法和步骤进行，避免误差和偏差。
严格遵守操作规程
试验中的细节问题不容忽视，如试剂的保存和配制、样品的处理等。
注重细节
03
数据处理问题
数据处理需谨慎，避免误差和异常数据的干扰，同时要注意数据的可重复性和可再现性。
目的
定义与目的
1906年，美国医学家首次提出药敏试验方法，以解决抗菌药物治疗中的问题。
1940年代，药敏试验逐渐普及并成为抗菌药物治疗中的重要辅助手段。
1950年代，美国FDA开始对药敏试验标准进行规范和推广。
1980年代，自动化药敏试验设备开始广泛应用于临床。
目前，药敏试验已经成为临床抗菌药物治疗中不可或缺的环节。
归档要求
药敏试验结果报告应当及时归档保存，以便后续分析和应用。
结果报告与归档
通过对药敏试验结果的分析，可以了解细菌对不同药物的敏感性，为临床治疗提供参考。
分析目的
药敏试验结果可以应用于临床治疗、流行病学调查、药物疗效评估等多个领域。
应用范围
结果分析与应用
05
药敏试验注意事项及改进建议
1
注意事项
新药研发
综合治疗策略的研究是另一研究热点，通过研究不同药物之间的协同作用，可以制定更加科学合理的治疗方案。
综合治疗策略研究
03
加强基础研究
加强基础研究，深入研究药敏试验方法的原理和机制，推动药敏试验方法的创新和进步。
对未来研究的建议
01
加强国际合作
加强国际间的合作与交流，共同应对耐药性的挑战。
02
03
稀释注意事项：选择合适溶剂、准确计算浓度、保证无菌操作等。
药敏试验PPT资料PPT课件
采集部位
选择病原体含量较高的部 位进行采集，如痰液宜选 自肺部。
样本处理
样本保存
样本量
采集后的样本应尽快送至实验室进行 检测，如不能及时送检，应妥善保存。
保证足够的样本量，以满足后续实验 需求。
样本处理方法
对采集的样本进行适当的处理，如离 心、过滤等，以去除杂质和无关细胞。
结果判断
根据病原体的生长情况，判断其对不同药物的敏 感程度。
报告发布
将实验结果及时报告给临床医生，为治疗提供参 考依据。
04
药敏试验的应用
抗生素选择
抗生素选择
药敏试验能够确定病原体对各种 抗生素的敏感程度，帮助医生选 择最有效的抗生素进行治疗，提 高治愈率并减少耐药性的产生。
耐药性检测
通过药敏试验可以检测病原体对 抗生素的耐药性，了解耐药机制 和传播情况，为制定防控策略提 供科学依据。
在琼脂平板上接种细菌，然后滴 加抗生素溶液，观察抑菌圈的大 小，判断细菌对药物的敏感性。
稀释法
将不同浓度的抗生素与细菌混合培 养，观察细菌的生长情况，确定药 物的最小抑菌浓度（MIC）。
纸片扩散法
将含有一定量抗生素的纸片贴在琼 脂平板上，观察纸片周围抑菌圈的 大小，判断细菌对药物的敏感性。
02
药敏试验的种类
详细描述
E试验法是一种新型的药敏试验方法，通过在药敏试纸上施加连续变化的压力，使药物浓度与细菌生 长曲线呈线性关系，从而快速准确地判断细菌对药物的敏感程度。该方法操作简便，结果准确可靠。
03
药敏试验的步骤
样本采集
采集方法
根据感染部位和病原体类 型，选择合适的采集方法， 如咽拭子、痰液、尿液等。
药敏试验方法简介
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46
革兰氏阴性板
位置
代码
位置
代码
位置
A1
BETA-阿洛糖
B1
多粘菌素E
C1
A2 BETA-龙胆二糖 B2
D-甘露醇
C2
A3
DEDXTROSE
B3
柠檬酸盐
C3
A4
D-半乳糖
B4
多粘菌素B
C4
A5
D-果糖
B5
L-色氨酸-AMC
C5
A6
D-葡糖酸
B6
L-焦谷氨酸-AMC
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7
肠杆菌科抗菌药物敏感试验推荐分组
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8
假单胞菌属的抗菌药物药物敏感推荐分组
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9
不动杆菌属的抗菌药物药敏试验推荐分组
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10
肠球菌属抗菌药物药敏试验推荐分组
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11
肺炎链球菌抗菌药物药敏试验推荐分组
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12
药敏试验的折点亦遵照每年最新公布的 CLSI标准进行，分为敏感（S）、耐药（R） 和中介（I）。
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3. 用无菌棉拭子蘸取菌液，在试管内壁旋转挤去多余 菌液，然后在MH琼脂表面均匀涂布接种3次，每次 旋转平板60度，最后沿平板内缘涂抹1周；
4. 平板在室温下干燥3～5min，用无菌镊子或商品化 的纸片分配器将含药纸片紧贴于琼脂表面；
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21
5. 35℃孵育16～24小时，量 取抑菌圈直径；
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13
敏感：分离菌株能被测试药物使用推荐剂 量时在感染部位通常可达到的抗菌药物浓 度所抑制
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药敏试验简介(1)
药敏试验简介
药敏试验是一种用于检测感染病原体对抗生素的敏感性和抗性的实验方法，用于指导临床医生选择最佳的治疗方案。
以下是有关药敏试验简介的几个方面：
1. 药敏试验的原理
药敏试验的基本原理是，将已知浓度和种类的抗生素加入含有目标病菌的培养基中，观察在一定条件下细胞生长和杀菌效果的变化。
根据药物与细菌之间抑制、杀灭等反应的不同情况，可以确定细菌对各种抗生素的敏感性。
简单地说，药敏试验就是将不同的抗生素添加进培养基中，观察细菌的生长状况，从而确定细菌对各类抗生素的反应情况。
2. 药敏试验的步骤
药敏试验包含多个步骤。
首先，需要从患者样本中分离出单个的病原菌株，并将其保持在适当的培养基中。
接着，将不同浓度的抗生素加入进相应的培养基中，混合均匀，培养一段时间后观察菌落的生长情况，记录生长的数量和质量。
后面，需要根据生长情况，计算并且解释作用的抗生素的最小抑菌浓度(MIC)，以及抗菌的抑制环直径等等。
最后，根据各种抗生素的药敏试验结果，医生可以选择最佳的治疗方案。
3. 药敏试验的意义
药敏试验的意义非常重大。
抗生素的应用不当会导致抗生素的耐药性扩散，病原菌能够抵御原来有效的抗生素，导致其治疗效果降低或失效。
药敏试验可以为医生指导合理使用抗生素，从而减少抗生素的滥用和耐药性扩散。
4. 药敏试验的分类
药敏试验主要分为传统的筛选法和自动化的酶发联试验法两种。
前者需要繁琐的历程，其对微生物的散布、环境、培养条件等都会提出种种宽泛的要求；后者则大大减少耗时，更为方便。
现在在医学领域，自动化的酶发联试验法形象化了检测的过程、提高了药敏试验的原准确度和精准性。
药敏试验在临床医学的治疗中有着重要的地位，因此药敏试验也被医学从业人员广泛运用。
开展药敏试验，能突破医学的局限性和瓶颈，得以精准测试、指导合理用药和提高病人康复率。