树脂层析柱
层析柱说明书
锐意进取、和谐创新550层析柱说明书浙江中能轻工机械有限公司一产品介绍:层析过程是采用特殊的吸附剂，从植物提取液中选择性地吸附其中的有效部分，去除无效成分的一种分离纯化新工艺。
可以解决植提生产中所面临的剂量大、产品吸潮和重金属残留等实际问题。
经层析技术处理后所得到的精制物，可使有效成分高度富集，杂质少，提取得率仅为原生物的2～5%，而一般水煮法为30%左右，醇沉法为15%左右；可有效地去除吸潮成分，并增强产品的稳定性；可有效地去除重金属。
层析分离工艺所得提取物体积小，不吸潮，容易制成外型美观的各种剂型，尤其适用于颗粒剂、胶囊剂、片剂等的生产。
该技术将是对中药提取工艺影响最大、带动面最广的技术进步之一。
用于生物工程、制药工业、精细化工领域的分离纯化设计制造的工业制备，具有分辨高、选择性好、流动连续、效率高、处理稳定、样品可多可少、易于操作的特点，适用于含量少的复杂高分子物质的分离纯化，是中草药、化学合成药及生物活性物质有效成分分离提纯的核心设备。
二产品特点:①合理的高径比，精密的进出口流体分布装置，保证层析柱装填效果和填料再生效果，为高效分离提供了保障。
②产品采用不锈钢材料，并进行内外抛光，耐腐蚀、使用寿命长、硬度高、运输安全，质量有保障。
③本设备确保无污染、效率高、操作方便等。
三技术参数四操作说明层析操作流程一般为：预处理，逆流洗柱，水洗，吸附，解吸、再生等工艺。
1、预处理：在吸附树脂的生产过程中，一般均采用工业级原料，产品没有经过进一步纯化处理，因此树脂内部往往残留少量单体，致孔剂和其他有机杂质，所以在使用之前必须进行预处理。
吸附树脂预处理方法如下：（1）将准备装柱使用的新树脂，用2倍左右体积的甲醇或其他水溶性溶剂（如乙醇、丙酮）浸泡2小时，并不时搅动，使树脂充分溶胀。
（2）、将已充分溶胀的吸附树脂装柱，以每小时3至4倍床体积的流速，将5至8倍的甲醇或其他水溶性的溶剂（如乙醇、丙酮）通过树脂层，至流出液加水稀释不变混。
柱层析分离操作规程
柱层析分离操作规程柱层析分离（Column Chromatographic Separation）是一种基于差异吸附和分配的分离技术，广泛应用于化学、生物、制药等领域。
柱层析分离操作规程的编制旨在确保操作过程的安全性、有效性和可重复性。
下面是柱层析分离操作规程的一般步骤：1. 实验准备：a. 确保实验室环境整洁、无杂物干扰。
检查仪器设备的运行状态，并进行必要的校准。
b. 准备所需试剂和溶剂，确保其纯度和质量符合要求。
准备充分的样品，并根据需要进行前处理。
c. 清洗柱子和配件，确保无残留样品。
2. 柱层析容器的装填：a. 选择合适的柱子和填料（如硅胶、活性炭、树脂等）。
b. 按照操作流程和填料的特性进行填料，确保填料均匀、紧密。
c. 配置层析缓冲液或溶剂，用于样品的吸附和洗脱。
3. 样品预处理：a. 根据需要，对样品进行预处理，如调整pH值、去除杂质等。
b. 将样品溶解于合适的溶剂中，确保样品溶解度适宜，并滤除悬浮物。
4. 柱层析操作：a. 将样品溶液小心地加入柱子顶部，避免溅出和溶剂浪费。
b. 控制流速和压力，使样品缓慢通过填料。
c. 观察样品的洗脱情况，根据需要适时收集洗脱液。
d. 若需要收集多个洗脱液组分，请采取适当的洗脱步骤和收集方法。
e. 监测洗脱液的浓度变化，根据需要调整洗脱缓冲液的浓度和pH值。
5. 柱层析后处理：a. 对收集的洗脱液进行检测分析，确定目标物质的纯度和得率。
b. 对柱层析装置进行清洗和维护，确保下次操作的质量和效果。
6. 结果分析和记录：a. 将实验结果记录在实验记录本中，包括所用试剂、溶剂、操作步骤、观察等数据。
b. 对实验结果进行分析，包括目标物质的纯度、得率、柱效等。
7. 安全注意事项：a. 柱层析操作涉及到有机溶剂和化学试剂，应穿戴个人防护用品，如手套、安全镜等。
b. 严格遵守实验室安全操作规范，确保实验过程安全无事故发生。
以上是柱层析分离操作规程的一般步骤，实际操作中，根据实验需求和柱层析装置的具体要求，可能会有所不同。
9种大孔树脂对萝卜硫素柱层析分离研究
收稿日期： 2014 － 07 － 21
修回日期： 2015 － 03 － 13
网络出版时间： 2016 － 01 － 15 15： 05
* 基金项目： 贵阳市乌当区科学技术计划项目 （ 2012051） 。
作者简介： 谢述琼 （ 1988—） ，女，四川德阳人，硕士，讲师，主要从事天然产物研究与新药开发研究。
将按照 1. 2. 1 节制得的萝卜硫素提取液的样 品分成 3 份，每份 89 mL，分 别 用 AB-8，SP825 和 SP850 大孔树脂柱层析，50% 乙醇 400 mL 洗脱 大孔树脂层析柱上的萝卜硫素，收集洗脱液，为 萝卜 硫 素 粗 品， 分 别 记 录 其 体 积， 并 采 用 用 HPLC 检测其中萝卜硫素的含量，计算其回收率。 将余下的萝卜硫素粗品在 35 ℃ 条件下真空浓缩至 浸膏，称取浸膏 5 mg 左右，并溶于 10 mL 甲醇， 用 HPLC 检测其中萝卜硫素的含量，按以下公式 进行计算：
预处理 AB-8 树脂装柱，将 100 g 西兰花种子 按照 1. 2. 1 节方法制得的萝卜硫素提取液上柱， 预吸附 1 h 后，依次用水 （ 3BV） ，10% ，30% ， 50% ，70% ，95% 乙醇溶液 （ 各 3BV） ，以 3 mL / min 流速洗脱，分别测不同乙醇浓度洗脱液中萝 卜硫素的含量。试验重复 5 次并计算其平均值。 1. 2. 4. 3 溶剂洗脱量的考察
D-101
南开大学化工厂
DM-130
安徽三星树脂科技有限公司
HPD417
河北沧州宝恩化工有限公司
HPD5000
西安蓝深公司
SP825
北京慧德易科技有限责任公司
SP850
北京慧德易科技有限责任公司
柱 层 析 简 介
常用的装柱方法有干装法和湿装法两种
（1）干装法 在柱内装入2/3 溶剂，在管口上放一漏斗，打开活塞让溶剂慢慢地 滴入锥形瓶中，接着把干吸附剂经漏斗以细流状倾泻到管柱内，同时 用套在玻璃棒（或铅笔等）上的橡皮塞轻轻敲击管柱，使吸附剂均匀 地向下沉降到底部。填充完毕后，用滴管吸取少量溶剂把粘附在管壁 上的吸附剂颗粒冲入柱内，继续敲击管子直到柱体不再下沉为止。柱 面上再加盖一薄层洁净细砂，把柱面上液层高度降0.1~1cm，再把收 集的溶剂反复循环通过柱体几次，便可得到沉降得较紧密的柱体。
固定相：固定相是层析的一个基质。它可以是固体物质（如 吸附剂，凝胶，离子交换剂等），也可以是液体物质（如固 定在硅胶或纤维素上的溶液），这些基质能与待分离的化合 物进行可逆的吸附，溶解，交换等作用。 流动相：在层析过程中，推动固定相上待分离的物质朝着一 个方向移动的液体、气体等，都称为流动相。柱层析中一般 称为洗脱剂，薄层层析时称为展层剂。 系数K： 是物质在两相中的浓度比。K值大，则在固定相中 吸附牢，K值小吸附差。各物质间的K值差别大，则易被分 离。不同类型层析的K值含义不同，可视为吸附平衡常数， 分配常数或离子交换常数等。
层析的基本原理层析的基本原理层析的基本概念层析的分类柱层析的基本操作原理几个基本概念基本操作步骤硅胶柱大孔吸附树脂柱聚酰胺柱柱层析常见问题与对策吸附剂的选择洗脱剂的选择操作方式层析的基本原理层析法chromatography又称色谱法是利用混合物中各组分物理化学性质的差异如吸附力分子形状及大小分子亲和力分配系数等使各组分在两相一相为固定的称为固定相
（2）湿装法
基本方法与干装法类似，所不同的是，装柱前吸附剂需要预先用 溶剂调成淤浆状，在倒入淤浆时，应尽可能连续均匀地一次完成。如 果柱子较大，应事先将吸附剂泡在一定量的溶剂中，并充分搅拌后过 夜（排除气泡），然后再装。其优点是一般柱子装的比较结实，没有 气泡。 无论是干装法，还是湿装法，装好的色谱柱应是充填均匀，松紧 适宜一致，没有气泡和裂缝，否则会造成洗脱剂流动不规则而形成 “沟流”，引起色谱带变形，影响分离效果。
大孔树脂 层析
大孔树脂使用方法发布者：郭玉亮发布时间：2011-1-4 12:05:24一大孔吸附树脂的预处理：大孔树脂在试验中使用时间较长，必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理过，但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂、引发剂、分散剂等用前必须除掉。
预处理的流程简述如下：（1）以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h （1BV为1个树脂床体积）（2）用2BV 的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱，并浸泡4-5 h（3）再用水以同样流速洗净（4）用乙醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止。
（5）用2BV的5%HCL 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性（6）用2BV 的2%NaOH 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h 而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
也可采用下列程序：在洁净的分离柱内，放入已去除外来杂质，体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇（或甲醇）浸泡24 h ，然后用树脂体积的2-3倍的乙醇（或甲醇）与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次，至最终以水洗脱后，保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
二大孔树脂的使用大孔树脂是大孔径的高分子分离材料，中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。
大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同，可以分成非极性和极性两大类。
非极性吸附树脂适合从极性溶液中（如水溶液）中吸附非极性物质。
中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质，还能从非极性溶液中吸附极性物质。
大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。
大孔树脂比表面积越大，单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大，单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。
而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。
树脂孔径过小有效成分分子不能进入树脂内部，只能在树脂外表面吸附，相应的比表面积就比较小。
浅谈天然产物分离之柱层析
浅谈天然产物分离之柱层析胡利红彭宣嘉植物有效成分分离主要手段是柱色谱，其中包括：吸附性柱色谱；分配性柱色谱；离子交换柱色谱；凝胶过滤柱色谱；聚酰胺柱色谱以及大孔吸附树脂。
一、吸附性柱色谱我们常用的以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱，即是吸附性柱色谱。
本文重点介绍这种色谱方法。
一般而言，氧化铝用于分离脂溶性成分，在天然产物中包括生物碱，甾体和挥发油等。
而硅胶既可分离脂溶性成分，也可分离水溶性成分，根据需要可选用不同类型的硅胶，即正相硅胶或反相硅胶。
1、硅胶可以分为：正相色谱硅胶和键合相硅胶正相色谱硅胶是我们在实验室经常接触的，它的使用范围非常广泛，一般极性和非极性的化合物都可以用于分离。
硅胶的吸附能力取决于其结构中硅醇基的数目及含水量。
一般硅胶中的含水量若超出12%，则其吸附力极若，只可作为分配色谱的载体。
色谱硅胶应该是中性无色颗粒，由于在制备过程中接触强酸，常带有酸性，可用水洗至中性或用10%NaOH将其调至碱性，再在1100C下活化24小时用于来分离在酸性条件不稳定的化合物。
有时也可向其中掺入某种试剂，改良吸附性能，提高分离效率。
通常用硝酸银处理过的硅胶对不饱和烃类有很好的分离效果。
在键合相硅胶中，以C-18反相硅胶应用最为广泛，实验室中基本用的就是这种类型的反相材料，一般用于分离极性较大的化合物，可减少分离这类化合物时用正相硅胶吸附太大的缺点。
在利用键合相硅胶进行反相色谱时，常用甲醇-水，乙醇-水或乙腈-水为洗脱剂。
2、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。
所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。
减压柱能够减少硅胶的使用量，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气。
加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。
离子交换树脂层析分离混合氨基酸
实验二离子交换树脂层析分离混合氨基酸【实验目的】1. 了解离子交换树脂层析的工作原理及操作技术。
2. 学会用离子交换树脂层析法分离混合氨基酸。
【实验原理】离子交换树脂是一种合成的高聚物,不溶于水,能吸水膨胀。
高聚物分子由能电离的性基团及非极性的树脂组成。
极性基团上的离子能与溶液中的离子起交换作用,而非极性的树脂本身物性不变。
通常离子交换树脂按所带的基团分为强酸(=R=S03H)、弱(=COOH)、强碱(=N+=R:)和弱碱(=NH2=NHR=NR2)。
离子交换树脂分离小分子物质如氨基酸、腺苷、腺苷酸等是比较理想的。
但对生物大于物质如蛋白质是不适当的,因为它们不能扩散到树脂的链状结构中。
故如分离生物大子、可选用以多糖聚合物如纤维素、葡聚糖为载体的离子交换剂。
本实验用磺酸阳离子交换树脂分离酸性氨基酸(天冬氨酸)、中性氨基酸(丙氨酸)碱性氨基酸(赖氨酸)的混合液。
在特定的pH条件下,它们解离程度不同,通过改变脱液的pH 或离子强度可分别洗脱分离。
【实验材料】1.实验器材层析柱(1.6X20cm);恒流泵;梯度混合器;试管及试管架;紫外分光光度计、磺酸阳离子交换树脂(Dowex 50)2.实验试剂(1)2mol/L HCl(2)2mol/L NaOH(3)0.1mOl/L HCl(4)0.1mol/L NaOH(5)pH4.2的柠檬酸缓冲液:0.lmol/L柠檬酸54m1加0.1mol/L柠檬酸钠46ml(6)pH5的醋酸缓冲液:0.2mol/L NaAc 70ml加0.2mol/L HAc 30ml(7)0.2%中性茚三酮溶液:0.2g茚三酮加100ml丙酮(8)氨基酸混合液:丙氨酸、天冬氨酸、赖氨酸各10m1加0.1mol/L HCl 3m【实验方法】1. 树脂的处理100ml烧杯中置约10g树脂,加25ml 12mo1/L HCl搅拌2h,倾弃酸液,用蒸馏水充洗涤树脂至中性。
加25ml 12mol/L NaOH至上述树脂中搅拌2h,倾弃碱液,用蒸馏水洗涤至中性。
离子交换柱层析法分离氨基酸实验报告手写
离子交换柱层析法分离氨基酸实验报告手写1、树脂的处理干树脂经蒸馏水膨胀，倾去细小颗粒，然后用4倍体积的2mol/L HCI及2mol/LNaOH依次浸洗，每次浸2h，并分别用蒸馏水洗至中性。
再用1mol/LNaOH浸半小时（转型），用蒸馏水洗至中性。
2、装柱前的准备选择直径1cm长度15~20cm的层析柱，观察柱底端滤膜是否完好，分别用流水和蒸馏水冲洗干净。
将层析柱垂直装在铁架台上，柱进水口和出水口装上橡皮管，关闭柱底端出口，在柱内注入少许（约1cm高）的洗脱液，打开出水口，排净管内空气后关闭出水口。
3、装柱向盛有已处理好的树脂的烧杯中加适量洗脱液，用玻棒轻轻将树脂搅成悬浮状，然后沿柱内壁小心地加至适当高度。
倒入速度不要太快，以免产生泡沫和气泡。
待树脂在柱底部有明显沉积（约1cm高）后，缓慢打开出口（或用滴管吸出柱内上层过多的洗脱液），继续加入树脂直至树脂沉积达5cm 高。
装柱要求连续，均匀，无文格、无气泡，表面平整，液面不得低于树脂表面，否则要重新装柱。
4、平衡层析柱装好后，接上已调好流速的恒流泵，用洗脱液以0.4mL/min 的流速进行平衡，直到流出液的pH与洗脱液pH相同（约需2~3倍柱床体积）。
5、加样关闭恒流泵，关闭层析柱底端出口，移去层析柱上端出口塞，缓慢打开层析柱底端出口，小心使层析柱内液体流至层析柱床体表面时，立即关闭出口。
用移液枪吸取0.5mL样品液沿柱内壁缓慢加入柱中，以免冲坏树脂表面。
加样完毕后，慢慢打开层析柱底端出口，使液面降至与树脂表面相平处关闭。
吸取少量缓冲液冲洗柱内壁数次，加缓冲液至液层3~4cm左右，接上恒流泵。
加样时应注意避免冲破树脂表面，避免将样品全部加在某一局限部位。
6、洗脱以柠檬酸缓冲液洗脱，洗脱流速24mL/h，每管4mL10min一管（试管收集前提前编号）。
7、测定分别取各管洗脱液1mL各加入苗三酮显色剂1mL混合后沸水浴5min，冷却，各加0.1%CuSO4液3mL混匀，测定代存]。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
树脂层析柱
一、概述
树脂层析柱是一种用于分离、富集和纯化混合物中目标物质的技术。
它是在柱状介质中利用目标分子与树脂之间的相互作用力进行分离的。
树脂层析柱在生物制药、食品工业、环境监测等领域具有广泛的应用。
二、树脂层析柱的类型
树脂层析柱根据其工作原理和应用领域的不同，可以分为吸附层析柱、离子交换层析柱、凝胶层析柱和亲和层析柱等多种类型。
1. 吸附层析柱
吸附层析柱利用目标物质与固定在树脂表面的配体之间的亲和力进行分离。
常用的吸附层析柱介质包括蛋白A、蛋白G和蛋白L等。
这些介质分别具有对IgG、IgG 全亚型和非免疫球蛋白类分子的特异性结合作用。
2. 离子交换层析柱
离子交换层析柱将目标物质与树脂表面固定的离子交换基团之间的电荷作用力进行分离。
离子交换层析柱一般可分为阴离子交换柱和阳离子交换柱。
阴离子交换柱主要用于富集和纯化带负电的目标物质，如DNA和RNA等。
阳离子交换柱则主要应用于带正电目标物质的分离。
3. 凝胶层析柱
凝胶层析柱利用凝胶介质的孔隙大小和分布来分离分子。
凝胶层析柱常用于富集和纯化蛋白质和核酸等大分子物质。
根据凝胶介质的性质不同，凝胶层析柱可以进一步分为分子筛层析柱、凝胶过滤层析柱和凝胶透析柱等。
4. 亲和层析柱
亲和层析柱利用目标物质与树脂表面固定的特定亲和剂之间的高亲和性相互作用进行分离。
常用的亲和层析柱介质包括金属离子亲和树脂、亲和脂质和药物亲和树脂等。
亲和层析柱广泛应用于蛋白质、抗体和药物的富集和纯化。
三、树脂层析柱的工作原理
树脂层析柱的分离原理是基于目标物质与树脂表面固定配体之间的相互作用力。
根据目标物质与配体之间的特异性相互作用，可以实现目标物质的富集和纯化。
树脂层析柱的工作过程一般包括样品加载、洗脱和再生等步骤。
首先，样品通过加载步骤进入柱管，与树脂表面固定的配体发生相互作用。
随后，洗脱步骤中引入洗脱缓冲液，将非目标物质洗脱出柱管。
最后，再生步骤中使用适当的再生缓冲液将柱管中的树脂再生，以便于下一次使用。
四、树脂层析柱的优势和局限性
树脂层析柱具有以下优势：
1.高选择性：树脂层析柱能够利用目标物质与配体的特异性相互作用，实现高
选择性的分离。
2.高效性：树脂层析柱能够在短时间内高效地完成样品的富集和纯化，提高实
验效率。
3.可重复使用：树脂层析柱的柱管可以进行再生，多次使用，降低实验成本。
然而，树脂层析柱也存在一些局限性：
1.样品容量限制：树脂层析柱对样品容量有一定的限制，大容量样品需使用大
型设备。
2.耗时操作：树脂层析柱的操作流程较复杂，需要较多的时间和操作技巧。
3.高成本：某些特定类型的树脂层析柱较为昂贵，增加了实验成本。
五、树脂层析柱的应用领域
树脂层析柱广泛应用于以下领域：
1.生物制药：树脂层析柱在生物药物的富集和纯化中扮演重要角色，如抗体、
重组蛋白质的纯化等。
2.食品工业：树脂层析柱被用于食品中有害物质的富集和分离，如农药残留和
食品添加剂等。
3.环境监测：树脂层析柱可用于环境样品的净化和富集，如水体中的有机、无
机物质的检测等。
六、树脂层析柱的发展趋势
随着生物技术的不断发展，树脂层析柱也在不断创新和改进。
未来的发展趋势主要包括以下几个方向：
1.自动化：树脂层析柱的操作将更多地向自动化方向发展，提高操作效率和稳
定性。
2.高通量：树脂层析柱将逐渐发展为能够同时处理多个样品的高通量技术，提
高分离效率。
3.多功能化：树脂层析柱将不仅仅用于单一类型的分离，而是能够实现多种模
式的组合，提供更加全面的分离解决方案。
七、总结
树脂层析柱是一种重要的分离和富集技术，在生物制药、食品工业、环境监测等领域具有广泛应用。
不同类型的树脂层析柱利用特异的相互作用力实现目标物质的纯化。
树脂层析柱具有高选择性、高效性和可重复使用等优势，但也存在样品容量限制和操作耗时的局限性。
随着技术的不断发展，树脂层析柱将朝着自动化、高通量和多功能化的方向发展。