土壤脱氢酶(S-DHA)活性检测试剂盒说明书 可见分光光度法
土壤亮氨酸氨基肽酶(S-LAP)活性检测试剂盒说明书 微量法
土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC4025规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存；临用前加入3mL丙酮溶解。
产品说明：S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。
S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。
自备实验用品及仪器：天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛（或更小）。
操作步骤：一、样本处理土样自然风干，过30-50目筛。
二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。
2、加样表：测定管对照管土样（g）0.030.03甲苯（μL）1515震荡混匀，室温静置15min。
试剂一（μL）255255试剂二（μL）30-30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。
流水冷却至室温。
试剂二（μL）-3014000g常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照顾管。
三、酶活计算公式（1）按微量比色皿计算：酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。
S-LAP活性（U/g）=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。
ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10-4L；W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
土壤脱氢酶活性测定
土壤脱氢酶活性测定
测定步骤
1 称取4克鲜土于50ml三角瓶中，加入4ml（0.5%TTC+0.5%葡萄糖）-Tris缓冲溶液（pH7.6）,(2ml 1%TTC-Tris缓冲溶液，2ml 1%葡萄糖)，置37℃暗室培养24hr。
2 取出后用少量甲醇提取后过滤，再用50ml容量瓶或比色管定容。
3 滤液马上用485nm波长下分光光度计测定。
pH7.6 Tris缓冲液的配制：
A：0.2M三-（羟甲基）-氨基甲烷溶液（1000 ml含24.23克）
B：0.2M HCl
100 ml A+76.8ml B,加水稀释至400 ml，准确调节pH为7.6。
TBF标准曲线的制备：准确称取10mg TPF溶于250 ml甲醇中，得到40 mg/L 的母液。
从中吸取0，1，2，3，4，5 ml于50ml容量瓶中，用甲醇定容，得到0，40，80，120，160，200ug TPF的标准曲线。
参考文献
Casida LC Jr, Klein DA, Santoro T(1964) Soil dehydrogenase activity. Soil Science 98, 371-376.
H.Y.Chu, J.G.Zhu, Z.B.Xie, H.Y.Zhang, Z.H.Cao and Z.G.Li(2003) Effects of lanthanum on dehydrogenase activity and carbon dioxide evolution in a Haplic Acrisol. Australian Journal of Soil Research 41, 731-739.
H.Y.Chu,。
土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase,S-SC)试剂盒使用说明
土壤蔗糖酶(Solid-Sucrase,S-SC）试剂盒使用说明分光光度法50管/24样货号：BC0240产品简介：S-SC能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收，其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量，微生物数量及土壤呼吸强度密切关，是评价土壤肥力的重要指标。
S-SC催化蔗糖降解产生还原糖，进一步与3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在540nm有特征光吸收，在一定范围内540nm光吸收增加速率与S-SC活性成正比。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
产品内容：试剂一：甲苯5mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前每瓶加入40mL蒸馏水充分溶解备用；试剂四：液体45mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1ml 蒸馏水溶解备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。
标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至0.5、0.4、0.3、0.2、0.1mg/ml。
操作步骤：试剂名称测定管对照管标准管风干土样（g）0.10.1-试剂一（μL）1515-振荡混匀，使土样全部湿润，37℃放置15min-试剂二（μL）250250-试剂三（μL）750--蒸馏水（μL）-750-混匀，放入37℃水浴培养24小时，10000g，4℃，离心5min，取上清液，同时准备标准品上清液或标准品（μL）200200200试剂四（μL）500500500充分混匀，放入沸水浴中煮沸5min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀。
标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值A。
以浓度（y）为纵坐标，吸光度A（x）为横坐标建立标准曲线。
辅酶ⅠNAD（H）含量检测测定试剂盒说明书可见分光光度法
辅酶ⅠNAD（H）含量检测测定试剂盒说明书可见分光光度法辅酶ⅠNAD(H)含量检测测定试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC0310规格:50T/24S产品内容：酸性提取液：15mL×1瓶，4℃保存；碱性提取液：15mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：液体6mL×1瓶，4℃保存试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存，用时加入6.1mL双蒸水，混匀，4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存，用时加入6.6mL双蒸水，混匀，4℃保存一周；试剂五：液体3mL×1瓶，4℃保存；试剂六：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂七：自备，将72mL乙醇和3mL蒸馏水充分混合备用。
NAD+标准品：粉剂×1支，-20℃保存。
临用前加入1.5mL蒸馏水，即2μmol/mL，将其稀释为1.25nmol/mL 的NAD标准溶液备用。
NADH标准品：粉剂×1支，-20℃保存。
临用前加入1.4mL蒸馏水，即2μmol/mL，将其稀释为1.25nmol/mL 的NAD标准溶液备用。
产品说明：辅酶I包括还原型和氧化型两种形式，在生物氧化中起传递氢的作用。
氧化型辅酶I又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）是脱氢酶的辅酶，它在糖酵解，糖异生，三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。
中间产物会将脱下的氢递给NAD，使之成为NADH（还原型辅酶I）。
而NADH则会作为氢的载体，在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式，合成ATP。
NAD(H)在机体内有重要的生理意义，与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。
体内辅酶I含量降低会导致细胞损伤或衰亡。
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH，NADH通过PMS的递氢作用，还原氧化型噻唑蓝（MTT）为甲瓒，在570nm 下检测吸光值，NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用MTT还原法检测。
植物脱氢酶(PDHA)活性检测试剂盒说明书 微量法
植物脱氢酶(PDHA)活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号:BC3125规格:100T/48S产品内容：试剂一：粉剂×2瓶。
使用前加少量水溶解，定容至50mL，避光、4℃保存（尽量现配现用）。
试剂二：液体100mL×2瓶，4℃保存。
试剂三：乙酸乙酯，自备。
产品说明：生物体的脱氢酶(Plant dehydrogenase,PDHA)的活性在很大程度上反映了生物体的活性状态，能直接表示生物细胞对其基质降解能力的强弱。
受氢体2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride，即TTC）在细胞呼吸过程中接受氢以后，其还原产物三苯基甲替（TriphenylFormazone，即TFF）呈现红色，在波长485nm处有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm测定其吸光值，即得植物脱氢酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板（非聚苯乙烯/聚丙烯材质）、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水、乙酸乙酯（不允许快递，请用户自备）。
操作步骤：一、样品处理：称取0.1g的植物组织，用双蒸水清洗3-4次，用滤纸吸干水分，备用。
二、测定步骤：1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至485nm，乙酸乙酯调零。
2、操作表：取5mLEP管依次加入对照管测定管样品（g）0.10.1试剂一（mL）1试剂二（mL）21充分混匀，37℃，暗培养3h，取出后立即冰浴5min，去滤液，尽量用滤纸吸干样品，置于研钵/匀浆器中。
试剂三（mL）11充分研磨（建议在通风橱操作）后全部移至于离心管中，用少量试剂三冲洗研钵，一起加入离心管，用试剂三定容至2mL，10000rpm/min，4℃，离心5min，取200μL上清至微量玻璃比色皿或96孔板中，测定485nm下的吸光值。
一株铁还原菌的分离及其碳源利用特性研究
一株铁还原菌的分离及其碳源利用特性研究童磊;李湘凌;吴纪南;袁峰;周涛发【摘要】文章探究从污水处理厂污泥中筛选的一株铁还原菌的生长特性,研究不同碳源对Fe(Ⅲ)还原的影响.结果表明:此株铁还原菌株适宜的生长条件为p H=7、温度为35℃ 、黑暗条件;碳源类型和浓度显著影响菌株的铁还原能力,其最适碳源浓度为1.5 mol/L,以蔗糖、葡萄糖、丙酮酸钠、乙酸钠、乳酸钠为碳源时,其Fe(Ⅲ)还原率依次降低,以蔗糖和葡萄糖为碳源时Fe(Ⅲ)还原率分别为81.0%和57.2%;Fe(Ⅲ)还原过程中脱氢酶活性与Fe(Ⅲ)还原率显著正相关,脱氢酶活性能在一定程度上反映Fe(Ⅲ)还原程度.%An iron-reducing bacteria strain was isolated from municipal sewage sludge .The characteristics of the bacteria strain and the influence of carbon sources on the Fe(Ⅲ) reduction were studied .The results showed that the strain grew best when pH value was 7 and the temperature was 35 ℃ under the darkness condition .The iron reduction ability of the bacteria strain was significantly influenced by the type and the con-centration of carbon source .The optimum concentration of the carbon source was 1.5 mol/L .When sucrose , glucose ,sodium pyruvate ,sodium acetate ,sodium lactate were serviced as carbon sources respectively ,Fe (Ⅲ) reduction rate of the strain reduced in turn .When sucrose and glucose were used as carbon sources ,Fe (Ⅲ) reduction rate of the strain was 81.0% and 57.2% respectively .There was a significant positive correla-tion between the dehydrogenase activity of the strain and Fe(Ⅲ) reduction rate .Dehydrogenase activity could reflect the Fe(Ⅲ) reduction degree .【期刊名称】《合肥工业大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(039)004【总页数】7页(P536-542)【关键词】铁还原菌;碳源;脱氢酶活性【作者】童磊;李湘凌;吴纪南;袁峰;周涛发【作者单位】合肥工业大学资源与环境工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学资源与环境工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学资源与环境工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学资源与环境工程学院,安徽合肥 230009;合肥工业大学资源与环境工程学院,安徽合肥 230009【正文语种】中文【中图分类】X172异化铁还原是铁还原菌介导进行的Fe(Ⅲ)还原,该过程广泛地存在于自然界的厌氧环境[1]。
土壤过氧化氢酶测定试剂盒使用说明
土壤过氧化氢酶测定试剂盒使用说明分光光度法50管/24样货号:BC0100产品简介：S-CAT 是土壤微生物代谢的重要酶类，在H 2O 2清除系统中具有重要作用。
H 2O 2在240nm 下有特征吸收峰，通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化，即可反应S-CAT 活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容：试剂一：液体×5瓶，4℃保存；临用前每瓶加入9.9mL 蒸馏水充分溶解后待用。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入2mL 蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存。
试剂三：液体×1瓶，4℃保存。
操作步骤：试剂名称测定管无基质管无土管风干土样（g ）0.10.1试剂一（μL ）10001000双蒸水（μL ）1000振荡培养20min试剂二（μL ）252525混匀8000g ，常温离心5min ，取全部上清试剂三（μL ）120120120混匀，用蒸馏水调零，240nm 处记录各管A 值。
注意：每个测定管要设一个无基质管，无土管只要做一管。
S-CAT 活力的计算：单位的定义：每天每g 风干土样催化1μmol H 2O 2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式：S-CAT（U/g）＝[(A 无土管-A 测定管+A 无基质管)×V 反总÷（ε×d）×106]÷W÷T=18.9×（A 无土管-A 测定管+A 无基质管）V 反总：反应体系总体积，1.145×10-3L；ε：过氧化氢摩尔消光系数，4.36×104L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；T：反应时间，20min=1/72d；W：样本质量，0.1g。
土壤酸性磷酸酶(soil acid phosphatase)活性测定试剂盒(分光光度法)使用说明
土壤酸性磷酸酶（soil acid phosphatase）活性测定试剂盒（分光光度法）使用说明货号:BC0140规格:50T/48S产品简介：土壤磷酸酶是一类催化土壤有机磷矿化的酶，其活性的高低直接影响着土壤中有机磷的分解转化及其生物有效性，是评价土壤磷素生物转化方向与强度的指标。
土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH显著影响，根据最适pH范围，通常分为酸性、中性和碱性三种类型。
酸性环境中，S-ACP催化磷酸苯二钠水解生成苯酚和磷酸氢二钠，通过测定酚的生成量即可计算出S-ACP活性。
产品内容：试剂一：液体×1瓶，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。
用前加50mL蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1支，4℃避光保存。
临用前加1152μL无水乙醇（自备），48μL蒸馏水充分溶解。
（变褐色后不能再使用）标准品：液体×1支，0.5μmol/mL苯酚标准液，4℃保存。
操作步骤：一、粗酶液提取：称取风干混匀土壤约0.1g，加入0.05mL甲苯（自备），轻摇15min；加0.4mL试剂一并且摇匀后，置于37℃恒温培养箱，开始计时，催化反应24h；到时后迅速加入1mL试剂二充分混匀，以终止酶催化的反应。
8000rpm，25℃离心10min，取上清液置于冰上待测。
二、测定步骤：1.分光光度计预热30min以上，调节波长到660nm，蒸馏水调零。
2.空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL蒸馏水，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A空白管。
3.标准管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL标准液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A标准管。
4.测定管：取1mL玻璃比色皿，加入50μL上清液，100μL试剂三，20μL试剂四，充分混匀，显色后再加蒸馏水830μL，混匀后室温静置30min，于660nm 测定吸光度，记为A测定管。
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土壤脱氢酶（S-DHA）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
货号：BC0390
规格：50T/24S
产品简介：
土壤脱氢酶(Soil dehydrogenase,sDHA)的活性可以反映土壤体系内活性微生物量以及其对有机物的降解活性，可以作为土壤微生物的降解性能指标。
氢受体2,3,5-氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride,TTC）在细胞呼吸过程中接受氢以后，被还原为三苯基甲臜（Triphenyl Formazone,TF），TF呈现红色，在波长485nm处有最大吸收峰，采用分光光度法于485nm测定其吸光值，即得土壤脱氢酶活性。
试验中所需的仪器和试剂：
筛子、天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、玻璃比色皿，冰、蒸馏水、丙酮（不允许快递，请用户自备）。
产品内容：
试剂一：粉剂×1瓶，使用前加30ml水溶解，4℃避光保存（尽量现配现用）。
试剂二：液体50ml×1瓶，4℃保存。
试剂三：丙酮，自备。
操作步骤：
一、样本前处理：
1.土壤样品：准确称取过40目筛的新鲜土壤样品约0.1g（以保证TTC与土壤颗粒充分接触）。
2.污泥样品：污泥用蒸馏水洗涤，12000rpm，25℃，离心10min，弃上清，反复3-4次。
二、测定操作：
对照管测定管
样品（g）0.10.1
试剂一（ml）
0.5试剂二（ml）10.5
充分混匀，37℃，暗培养6h，取出后立即冰浴5min
试剂三（ml）0.50.5
反复震荡数次，37℃保温10min，12000rpm，4℃，离心5min，取上清1ml 于1ml 玻璃比色皿，
分光光度计提前30分钟预热，蒸馏水调零，测定对照管和测定管，计算△A。
脱氢酶活力的计算：
酶活单位定义：在37℃时，每克样品每小时使每ml 反应体系OD 值每增加0.01为一个酶活单位。
计算公式：sDHA 活性（U/g）=01.0△A ÷培养时间（6h）÷样品质量（0.1g）×V 反总（1.5ml）
=250×A 485
注意事项：
1.
配制好的试剂一避光保存于4℃，最好在一周内使用，若出现红色，则不能使用。
2.
试剂三易挥发，有毒，为了您的健康，请穿实验服，戴口罩，戴乳胶手套操作。
3.
反应完成后立即冰浴以终止反应。
4.
如果测定出来的吸光值较大，减少样品用量再进行测定，若吸光值过小则延长培养时间。
5.试剂盒2-8℃保存。