香蕉dna的粗提取实验

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生物趣味实验——DNA的粗提取

生物趣味实验——DNA的粗提取

(二)从唾液中提取自己的DNA 1、取自己的唾液,置于烧杯中,加入几滴洗洁精; 2、倒入一些橙汁,同时往烧杯里撒入一些盐,摇晃 均匀; 3、向滤液中缓缓加入预冷的酒精,并观察现象。
实验步骤
(一)从水果中提取DNA 1、往烧杯中加入20ML清水和3ML洗洁精,少许食盐 (3g左右),将混合液搅拌均匀备用; 2、将香蕉剥皮,放置于封口塑料袋中,倒入配制的混合 液,用手轻轻挤压破坏细胞,使DNA释放出来; 3、倒出香蕉并过滤,取出滤液; 4、向滤液中缓缓加入预冷的酒精,并观察现象。
DNA的粗提取
实验原理
1、水果的细胞里含有DNA,香蕉更易碾碎、不必 削皮,使实验更加简化; 2、食盐里的钠离子和氯离子可以中和DNA上的电 荷,使DNA变形聚集,更易沉淀出来; 3、洗洁精里有表面活性剂,可以破坏细胞膜和核 膜,使DNA释放出来; 4、橙汁里含有蛋白酶,可把和DNA紧密结合的蛋 白质分解,使得到的DNA更纯; 5、DNA可以溶于水但不溶于酒精,在高浓度酒精 下相互吸附形成沉淀。

DNA的粗提取和鉴定分析

DNA的粗提取和鉴定分析
蓝紫色
加热 加热
4、植物:新鲜菜花、蒜黄、菠菜等。
植物细胞需要先用洗涤剂(洗发香波、沐浴液、洗洁 精等)溶解细胞膜。
•洗涤剂可以瓦解细胞膜的原因是: 洗涤液中含有十二烷基硫酸钠和碱, 它们可使细胞膜破裂,蛋白质变性, 使蛋白质与DNA分离开来。利于DNA 的释放。
• 动物细胞膜是不用试剂(洗涤剂) 破坏的,因为动物细胞膜外面没 有细胞壁的保护,放在清水中自 然的就会吸水而胀破,释放出其 中的DNA等物质。
3、方法与过程
1).制鸡血细胞液
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中,玻棒搅拌,
活鸡鲜血180mL
离心或静置沉淀。
血浆
血细胞 离心或静置后去掉上清液
2)实验方法步骤:
提取细胞核物质:利用细胞吸水破裂,细胞核内物质释放出来,后用纱布过滤取其滤液。 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和核膜的破裂,据此可得出含核DNA的溶液。
(3)生活在牧区的人们,采集羊、牛和马血比较方便,若他们按 实验要求完成实验步骤后,结果是 在实验中很难提取到DNA, 这是因为 哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核,反靠,白细胞
和淋巴细胞中的少量DNA,在实验中很难提取到
但若改用动物肝脏做实验材料,实验可以顺利进行,这是因 为肝细胞中含有细胞核,并且肝组织容易。被破坏,有利于DNA的提取 (4)若选用动物肝脏做实验材料,在提取之前,最好增加 若使肝组织易分离,将肝细胞剪碎、研磨是一种简便易行的方法。程 序,使组织细胞更易分离。
关于DNA粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验结果的比较, 最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请回答下列问题:
(新1陈)代鸡谢血旺中盛红,细因胞而含血有液完中整红的、细成胞形数的目细较胞多核,,可家以鸡提属供于丰鸟富类的,

有趣的科学实验:提取DNA

有趣的科学实验:提取DNA

DNA许愿瓶一、教学目标1.了解DNA的概念和性质2.学会利用简易方法粗体香蕉的DNA3.对提取的DNA进行染色,使用显微镜观察DNA二、教学重难点教学重点:对DNA的介绍教学难点:提取DNA,制作简易标本三、教学准备四、教学过程(一)回顾:回顾上次课所学知识,5分钟(1-2个学生回答),教师总结(二)引入大家喜欢吃香蕉嘛?大家平时有观察过香蕉与香蕉之间是不同的,味道也是不一样的。

那大家知道香蕉的样子和味道主要是由什么决定的嘛?对DNA,不管是植物还是动物,呈现给我们的样子都是由它的DNA决定的,今天我们就来看看香蕉的DNA是什么样子的。

(三)实验过程1.制取香蕉研磨液1)加50ml温水和2g食盐研磨一段约2cm长的去皮香蕉,研磨至呈糊状。

2)用纱布过滤研磨液,存入烧杯中。

2.粗提取DNA1)向烧杯内加入少许洗洁精,按一个方向轻摇1分钟。

(洗洁精中含有的SDS(十二烷基磺酸钠)具有使蛋白质变性,与DNA分离的作用,有利于提取DNA)。

2)加入与研磨液体积比为1:1的酒精。

3.DNA标本制作和观察1)用竹签小心地从烧杯中提取一点DNA样本,并将它放置在一片干净的显微镜载玻片上。

2)保持载玻片的水平,盖上盖玻片,用染色剂(1%甲苯胺盐、亚甲基蓝)给样本染色。

3)在显微镜下观察这些析出物,你不要指望能够看到著名的双螺旋结构。

即使用电子显微镜,也是看不到的。

你能看到的,只是一团团的DNA,就像纠缠在一起的线团。

后面会有专门的课程来介绍DNA的结构。

五、教学总结学生回顾老师总结。

DNA的粗提取与鉴定

DNA的粗提取与鉴定

二、实验原理 2.DNA的分离和提纯
DNA溶于2mol /L的NaCl溶液,但 不溶于冷酒精,细胞中的其它杂 质溶于冷酒精。
二、实验原理 3.DNA的鉴定
DNA与二苯胺作用生成蓝色沉 淀用来鉴定 DNA(沸水浴)
实验步骤
一、取材:香蕉去皮、洗洁精、食盐溶液、95%酒精等
二、DNA的释放、溶解、获取
实验材料
研磨提取粗提取、提纯恒 温 水 浴 加 热实验现象一
实验现象二及比较
作业: 1.如果选用实验材料是鸡的血细 胞,请写出实验操作步骤; 2.你做的实验现象是怎样的?请 分析或推测原因,并拟定证明你 的推测的进一步实验方案。
1.往研钵香蕉加入10mlNaCl溶液和少量的洗洁进行研磨; 2.用漏斗一层纱布过滤,取滤液; 3.往滤液中加入等量的95%的酒精,静置2--3分钟; 4.用玻棒卷起白色絮状物,用吸水红吸去水分后放入试 管,加入4ml 2mol /L的NaCl溶液充分溶解。
三、DNA的鉴定:找实验老师加4ml二苯胺溶液,在 恒温水浴锅加热2--3分钟,观察现象并分析实验结果。
一、实验目标 1.用15分钟左右的时间尝试对
香蕉组织中的DNA进行粗提取; 2.学会用二苯胺对粗提取的DNA
进行鉴定; 3.能对实验结果进行分析评价。
二、实验原理 1.DNA的释放 洗涤剂等去污剂可以溶解香
蕉细胞的细胞壁,破坏细胞膜, 同时也能使蛋白质变性。 (教材P55)洗涤剂能够瓦解细胞 膜,但对DNA没有影响。

不同植物材料粗提取DNA的比较研究

不同植物材料粗提取DNA的比较研究

析出黏稠 少
物的量
较多
很多
鉴定结果 10% 有 显 色 反 30%有显色反 50%有显色反



4 实验反思与改进 (1) 为什么香蕉效果最好? 通过以上三种植物材料的实验结果比较发现,最
合适的实验材料是香蕉。香蕉价格明显便宜,且方便 学生操作,提取出的黏稠物也最多,最后鉴定的效果 也是最好。原因之一是前面制备提取液和析出 DNA 所花的时间少,所以一节课大约还可以剩 15 min 来 鉴定 DNA,加入二苯胺试剂沸水浴加热 5~10 min 以 后,再冷却更容易看到实验结果。原因之二是菜花的 染色体数是 2n=18,洋葱染色体数是 2n=16,香蕉染色 体数是 3n=33,所以香蕉细胞含的 DNA 分子多,提取 的量也多。
信箱。 与作者的电话联系均通过电话 025-85891910,不会采用手机或其他号码的电话。 另本编辑部未以任何形
式向任何论文评选会推荐论文。
《中学生物学》杂志编辑部
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表 1 三种植物提取 DNA 的实验结果
项目
菜花
洋葱
香蕉
实验成本 6 元/斤,而且只 能取花的部分
4~5 元/斤
1.7 元/斤
搅 拌 机 搅 拌 , 研 磨 方 便 ,操
研磨困难,提取
骤 液少,泡沫多,需
液量多,所用时 提 取 液 量 多 ,所
要离心
间较短
用时间短
第 27 卷第 1 期 2011 年
中学生物学 Middle School Biology
文件编号: 1003 - 7586(2011)01 - 0043 - 02
Vol.27 No.1 2011
不同植物材料粗提取 DNA 的比较研究

DNA粗提取与鉴定

DNA粗提取与鉴定

DNA粗提取与鉴定“dna的粗提取与鉴定”实验研究综述文摘:在“DNA粗提取与鉴定”实验中,实验原理较为抽象复杂,实验步骤较多,实验效果不理想。

因此,目前我国在实验材料的选择、实验试剂和工具的处理、实验方法的优化、实验教学设计的创新等方面进行了大量的研究。

本文综述了粗DNA提取与鉴定的实验研究进展和教学。

关键词:DNA的粗提取与鉴定实验改进教学设计中文图纸分类号:G633-91“dna的粗提取与鉴定”实验是人教版高中生物选修1《生物技术实践》专题五课题1的实验内容,教材中详细介绍了动植物细胞dna提取、分离、提纯所涉及到的一般原理、方法和实验材料的选取,但并没有以哪一种材料为例具体介绍其操作过程。

且在dna分离、提纯过程中理想的方法应该是通过离心来不断分离、提纯,而一般中学的实验室又不具有离心设备,这就对本实验的可行性带来了一定的影响。

为了使实验变得简单、可行,许多学者对该实验进行了研究与改进。

1.实验原理真核生物dna核蛋白的溶解度随nacl浓度的变化而改变。

在0.14mol/l时,溶解度最小,而在纯水或1~2mol/l的盐溶液中,溶解度则较大。

利用这一原理,可以将dna溶于nacl溶液中,而与其他物质分开。

在dna的提取物中常常含有蛋白质及其他一些杂质,而使dna提取物呈黄色。

为了去除这些杂质(主要是蛋白质),利用十二烷基磺酸钠(sds)使蛋白质变性的原理,使蛋白质与dna分开。

dna不溶于酒精,而细胞中有些物质则可溶于酒精。

在中等浓度单价阳离子(2mol/l1nacl)存在下,酒精易使DNA沉淀,这就是为什么教科书实验使用2mol/lnacl溶液溶解DNA而不是蒸馏水。

2.实验材料的选择2.1原材料改进的原因根据教材的介绍,该实验的材料可以选择动物材料(如鸡血),也可以选择植物材料(如菜花、洋葱等)。

但是,选用dna含量相对较高的生物组织,实验成功的可能性更大。

课本推荐使用的实验材料是鸡血,优点是细胞易破裂,dna含量大,现象明显;缺点一是费用太高,对普通学校来说,买活鸡显然不现实,与市场上的小商贩联系购买新鲜鸡血,很难定时、定量地保证供应;二是实验步骤烦琐,操作要求高,学生一堂课很难完成实验。

DNA的粗提取和鉴定(香蕉)

DNA的粗提取和鉴定(香蕉)
在液体培养基中培养的大肠杆菌?细胞容易分散容易破碎或容易研碎细胞细胞容易分散容易破碎或容易研碎细胞核中的dnadna容易释放
一、实验原理
(1)洗涤液中含有十二烷基硫酸钠和碱,它 们可使细胞膜破裂,蛋白质变性,使蛋白质 与DNA分离开来。
(2)DNA不溶于酒精,加入酒精玻璃棒沿一 个方向可以从溶液中析出DNA。
(3)利用DNA遇二苯胺变蓝的特性对DNA进行 鉴定。
二、实验材料的选取
问题:下列哪种材料的DNA含量较高? 菜花、香蕉、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜; 鱼卵、猪肝、鸡血、哺乳动物的红细胞; 在液体培养基中培养的大肠杆菌
选材的原则:
•DNA含量相对较高; •细胞容易分散、容易破碎或容易研碎,细胞 核中的DNA容易释放。
DNA的释放 和溶解
研磨果肉2~5分钟,向研钵中 加入8毫升温食盐,研磨成半流 体状,再加4药匙洗涤剂,轻轻 搅拌8~10分钟。
获取含DNA 用两层纱布过滤到白色瓶内
的滤液 如何进一步去除滤液
DNA的析出
冷酒精,静置,用玻璃棒沿一 个方向搅拌,卷起絮状的DNA。
• 核DNA数目:猪38条,鸡78条,哺乳动物红细 胞0条,猕猴桃58条,洋葱16条,豌豆14条, 菠菜12条,香蕉三倍体,大肠杆菌1条。
• 哺乳动物的红细胞:无细胞核 • 液体培养基中的大肠杆菌:DNA量少 • 鱼卵:减数分裂的产物,细胞质多,DNA
相对含量少。
三、方法步骤
取材
取2CM香蕉块去皮放入研钵

实验:高中生物DNA的粗提取与鉴定

实验:高中生物DNA的粗提取与鉴定

(三)去除滤液中的杂质
讨论:为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?
用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用
低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通 过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质.
利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开;
(二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 1.动物细胞 动物细胞的破碎较易,在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水(渗透 作用吸水涨破),同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可
2.植物细胞
①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解细胞膜. 洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放; 食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解 ②实例:提取洋葱DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂 和食盐,进行从分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液 研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量 变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定 不显示蓝色等.
②鸡血细胞极易吸水胀破
1.准备鸡血细胞液 ①过程: 取柠檬酸纳溶液(抗凝剂)100ml,注入新鲜的鸡血 (约180ml),同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分
混合,以免凝血。
②柠檬酸钠作用:防止血液凝固
讨论:提取鸡血中的DNA时,为什么除去血液中的上清液? 获取血液中的血细胞,以及除去血浆中的蛋白质杂质
一.DNA的提取原理 1.DNA的溶解性
DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同
当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大, 浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理, 可以使DNA在盐溶液中溶解或析出
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香蕉dna的粗提取实验
香蕉是一种常见的水果,在细胞学和基因组学研究中常常作为材料使用。

下面介绍一种简单的香蕉DNA粗提取实验。

材料:
- 香蕉1个
- 酒精(95%)100毫升
- 活性炭1块
- 盐1/2勺
- 水100毫升
- 鸡蛋清2个
步骤:
1. 将香蕉去皮,切成小块,放在搅拌机中打碎成泥状。

2. 将100毫升酒精倒入一个干净的玻璃瓶中。

3. 将香蕉泥倒入瓶中,盖上盖子,轻轻摇动瓶子,让酒精和香蕉充分混合。

4. 将瓶子放在冰箱里,冷藏4小时,使得DNA得以沉淀。

5. 将玻璃瓶放在架子上倾斜45度,倒去大部分酒精,但是留下一些酒精,以保证沉淀不会被扰动。

6. 加入10毫升盐水,用手轻轻摇晃,让DNA从沉淀中脱离。

7. 用滤纸将溶液过滤,去除残渣,使得溶液更加清澈。

8. 将溶液倒入另一个干净的玻璃瓶中,加入2个鸡蛋清,慢慢摇晃瓶子,直到DNA凝聚成白色不透明的物质。

9. 用吸管或者挖勺将DNA提取出来,放在一个小瓶子里,保存在冰箱里。

解释:
酒精可以被用来分离DNA和其他的蛋白质、碳水化合物等生物大分子,因为DNA在酒精中不溶解。

加入盐可以增加DNA对水的亲和力,从而被水溶解,这样就可以轻易地从酒精中提取DNA了。

加入鸡蛋清可以帮助DNA聚集成大块,容易观察。

注意事项:
- 操作要注意瓶子的卫生和干净。

- 在分离和提取DNA的过程中要尽量避免搅动和摇晃溶液,以免扰动沉淀和聚集的DNA。

- 实验中使用的器材和吸管要消毒,避免其他物质的污染。

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