转基因检测试剂盒(植物)介绍
转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书
转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书转基因植物35S基因核酸检测试剂盒说明书试剂盒简介货为了适应新加坡石斑鱼虹彩病毒染料法荧光定量PCR试剂盒快速检测和疫病研究的需要，本公司参照 OIE国际标准中规定的引物序列，经多次实验及系统优化，开发生产了本试剂盒。
应用本试剂盒进行检测具有快速、灵敏、特异、准确、安全操作简单、应用广泛和高通量检测等特点及优点。
试剂盒组成及试剂配制：酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶4.生物su标记抗体稀释液（Biotinantibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRPavidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物su标记抗体（Biotinantibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRPavidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10.终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
样本处理及要求：1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于20℃或80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于20℃或80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。
碧云天植物原生质体分离试剂盒产品说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology订货热线: 400-1683301或800-8283301订货e-mail:******************技术咨询: *****************网址: 碧云天网站 微信公众号植物原生质体分离试剂盒产品编号产品名称包装C0362S 植物原生质体分离试剂盒5ml×20次产品简介：碧云天生产的植物原生质体分离试剂盒(Plant Protoplasts Isolation Kit)，是一种能够简单、快捷地通过酶学方法消化植物尤其是拟南芥(Arabidopsis thaliana)细胞壁中的纤维素并释放出大量且具有生物活性的原生质体的试剂盒。
使用本试剂盒分离出的原生质体可用于质粒DNA转染以及原生质体融合等实验研究。
植物原生质体是指去除掉细胞壁后由细胞膜包被的具有生命活力的植物细胞体。
植物细胞壁的主要成分为纤维素(cellulose)，半纤维素(hemicellulose)和果胶(pectin)等。
植物细胞壁组分被适当的酶消化降解后，就能释放出无细胞壁包被的植物原生质体。
原生质体是开展一系列植物细胞研究的重要材料，可以用于短时间基因表达(transient gene expression)、病毒感染(viral transfection)、体细胞杂交(somatic hybridization)、电生理研究(electrophysiological study)和形态学研究(morphological study)等，从而在植物亚细胞定位(subcellular localization)、蛋白活性分析以及蛋白与蛋白相互作用(protein-protein interaction)等研究方面发挥重要作用。
使用本试剂盒处理拟南芥叶片所获得的原生质体效果图(图1)：图1. 碧云天生产的植物原生质体分离试剂盒(Plant Protoplasts Isolation Kit)分离制备的拟南芥原生质体效果图。
ELISA方法检测转基因产品(蛋白质检测方法)
(一)适用范围本办法适用于转基因大豆及其初级加工产品中CP4 EPSPS蛋白的检测，也适用干含有CP4 EPSPS蛋白的其他转基因植物检测。
(二)试验原理酶标板表面包被有特异的单克隆捕捉抗体。
当加上测试样品时，捕捉抗体与抗原特异性结合，未结合的样品成分通过洗涤除去。
洗涤之后，加入与辣根过氧化物酶偶联的多克隆抗体，该抗体可与CP4 EPSPS蛋白的另一个抗原表位特异结合，洗涤之后，加入辣根过氧化物酶的显色底物。
H RP可催化底物产生色彩反应，色彩信号与抗原浓度在一定范围内呈线性关系。
显色一定时光后，加入终止液终止反应。
在450nm波长测每一孔的光密度。
(三)试剂1．检测试剂盒通常提供的试剂(1)大豆抽提缓冲液缓冲液，pH7.5,(2)大豆分析缓冲液磷酸盐缓冲液，Tw een-20,BS A,pH7.4(3)包被有单克隆捕捉抗体的酶标孔。
(4)与辣根过氧化物酶偶联的兔抗。
(5)偶联抗体稀释剂10％热灭活的小鼠血清。
(6)显色底物。
(7)终止液0.5％。
(8)10倍浓缩的洗涤缓冲液PBS,Tw een-20,pH7.1,(9)与基质匹配的阴性和阳性标准品，如0.1%、0.5%、1%、2%、5％。
2．其他需要预备的试剂(1)70％的溶液(体积比)取700m L甲醇加水定容至1000 m L。
(2)95％的。
(四)仪器设备1．通常试验室仪器设备。
2.酶标仪；多通道移液器。
3．孔径450 um的滤膜；孔径150 um的滤膜。
(五)操作步骤1．样品的预处理取500g以上大豆，粉碎、微孔滤膜过滤。
在操作过程中当心避开污染，避开局部过热。
定性检测的微孔滤膜孔径应为450 um，保证孔径小于450um的粉末质量占大豆样品质量的90％以上。
定量检测的样品先用孔径为450 um的微孔滤膜过滤后，再经孔径为150um的微孔滤膜过滤，过滤得到的样品量只要能满足检测要求即可。
对于其他类型的材料采纳类似的办法处理。
在检测不同批次样品之间应将处理大豆样品的全部设备举行彻底清洁。
转基因植物及其产品的检测方法
转基因植物检测依据
启动子、目基因、终止子；选择标记基因 • 启动子：CaMV 35s和土壤农杆菌的nos启动子 • 终止子：土壤农杆菌的nos终止子 • 目的基因：近百种 • 选择标记基因：
✓抗生素抗性基因：新霉素磷酸转移酶基因npt-Ⅱ/ 潮霉素磷酸转移酶hpt
✓除草剂抗性基因：bar基因和als基因
组织化学染色：检测gus基因表达产物的方法 萤光测定法：
– gus基因 – 萤光素酶 – gfp基因
NanoLuc™ 萤光素酶
转基因植物检测 ---外源基因表达产物的检测
免疫学检测法：
– ELISA： – 试剂条检测： – Western blot：
转基因植物 及其产品的检测方法
转基因植物（GMO）
• 自1983年首例转基因植物问世以来，其商 业化种植面积和经济效益迅速扩大。
✓ 提高农产品产量、品质 ✓提高植物对生物和非生物胁迫的抗性
• 转基因植物及其食品的生物安全性
✓对环境的影响及生态效应 ✓食品的安全性
• 转基因植物及产品的检测
定性及定量
转基因植物检测---外源基因检测
PCR检测：
– 常规PCR – 多重PCR – 巢式PCR – 实时荧光定量PCR – PCR-ELISA – PCR-genescan
核酸杂交检测
– 印记杂交 – 斑点杂交 – 细胞原位杂交
基因芯片技术
– GMO芯片试剂盒
转基因植物检测 ---外源基因表达产物的检测
斑马鱼直接PCR的方法及说明
斑马鱼直接PCR的方法及说明斑马鱼直接PCR试剂盒是基于一种新的，第三代（3G）的DNA聚合酶，通过改进工程常见的植物衍生的PCR抑制剂如多酚和多糖耐受的分子进化。
包是从原油样品植物DNA 快速扩增的优化，含DNA的粗提取方法进行了抑制剂，纯化的DNA。
斑马鱼直接PCR试剂盒主要特点包括：1快速PCR技术直接从植物组织中如叶盘，种子和天然植物提取物。
2简化工作流程为转基因筛选。
3改进的PCR成功率和可重复性。
4从样品类型的漫长而艰难的目标有效放大。
斑马鱼直接PCR试剂盒描述斑马鱼直接PCR试剂盒是由于组织内的植物组织的类型和潜在的PCR抑制剂中的多样性是一个具有挑战性的应用。
斑马鱼直接PCR试剂盒是DNA从天然植物样品成功扩增的优化，含DNA粗提取方法进行了抑制，以及纯化的DNA。
斑马鱼直接PCR试剂盒包含一个新的DNA聚合酶，工程通过分子进化过程中，为提高普通植物来源的PCR抑制剂如多酚和多糖的耐受性。
在强大的放大在很宽的范围内的植物种类的样品，扩增子长度的酶结果的独特的特点，与粗提取方法。
该套件包含4个独立的部分组成：1）该厂PCR缓冲液（2X）是准备使用含有除DNA聚合酶，引物和模板的成分的鸡尾酒。
这2个缓冲区包含3毫米氯化镁；2）kapa3g植物DNA聚合酶是一个融合工程TaqDNA聚合酶的基础（A型）和改进的古细菌（B型）DNA聚合酶。
这种混合酶结合专有的抗体灭活酶*变性步骤之前；3）该厂PCR 增强剂是作为改善困难的样品和检测氯化镁滴定未能改善结果PCR性能的一个可选的添加剂；4）额外的MgCl2（25毫米）是检测需要的MgCl2优化提供。
斑马鱼直接PCR试剂盒应用斑马鱼直接PCR试剂盒是专为从各种植物样品包括长度的DNA片段的扩增≤5KB：含有携带抑制剂植物DNA粗提物直接从叶盘，种子样品，和其他植物组织样品样品中含有植物来源的化合物浓度显著斑马鱼直接PCR试剂盒包含一个新的DNA聚合酶工程通过过程的分子进化提高耐常见植物源性抑制剂。
转基因_检测_实验报告
一、实验目的通过本实验，学习并掌握转基因检测的基本原理和方法，验证转基因植物或生物体内是否存在特定目标基因，为转基因生物的安全评估提供技术支持。
二、实验原理转基因检测主要基于分子生物学技术，通过PCR（聚合酶链反应）、Southern blotting、Western blotting等方法，检测转基因生物体内是否存在目标基因及其表达产物。
三、实验材料1. 转基因植物或生物样品2. 靶标基因DNA或cDNA3. DNA提取试剂盒4. PCR试剂5. Southern blotting试剂6. Western blotting试剂7. 仪器：PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统、离心机等四、实验方法1. DNA提取（1）取一定量转基因植物或生物样品，按照DNA提取试剂盒说明书进行操作，提取总DNA。
（2）对提取的DNA进行定量，确保其浓度和纯度符合实验要求。
2. PCR检测（1）根据靶标基因设计特异性引物，进行PCR扩增。
（2）将PCR产物进行电泳分析，观察扩增条带。
3. Southern blotting检测（1）将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳，转移至尼龙膜上。
（2）用靶标基因探针进行杂交，洗涤后进行化学显色。
4. Western blotting检测（1）将转基因植物或生物样品制备成蛋白质提取物。
（2）进行SDS-PAGE电泳，转移至NC膜上。
（3）用靶标蛋白抗体进行免疫检测，洗涤后进行化学显色。
五、实验结果与分析1. PCR检测通过PCR扩增，成功得到预期大小的靶标基因片段，说明转基因植物或生物体内存在目标基因。
2. Southern blotting检测通过Southern blotting检测，成功将PCR产物与靶标基因探针进行杂交，说明转基因植物或生物体内存在目标基因。
3. Western blotting检测通过Western blotting检测，成功检测到目标蛋白的表达，说明转基因植物或生物体内存在目标基因的表达产物。
TAKARA植物DNA提取试剂盒说明书
加入 Extraction Solution 2 振荡仪振荡 5 秒，轻微离心
加入 Extraction Solution 3 振荡仪振荡 5 秒，轻微离心
50℃温浴 15 分钟
上层水相移至新的 Microtube 中 加入异丙醇混匀后，12,000 rpm 4℃离心 10 分钟
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8. 轻微离心 2 秒钟以内，于 50℃温浴 15 分钟。 注：长时间离心 Extraction Solution 3 将会分层， 务必控制在 2 秒钟以内。
9. 12,000 rpm 4℃离心 15 分钟。 10. 取上层水相移至新的 1.5 ml Microtube 中，上层水
相约 400 μl。注意尽量不要混入水相以外的物质。 11. 添加等量的异丙醇，轻柔混匀。
除去上清，加入 1 ml 70％乙醇清洗沉淀 12,000 rpm 4℃离心 3 分钟
●实验例
除去上清，沉淀干燥后用 TE Buffer 溶解
实验例 1：从植物组织中提取基因组 DNA
将拟南芥的幼芽、西红柿的幼芽和菠菜叶用剪刀剪至 3 mm 以下角形状，分别称取 20 mg 和 50 mg 放入
1.5 ml Microtube 中，于-20℃冻结后按“操作方法”进行基因组 DNA 的提取，基因组 DNA 使用 20 μl TE
淀。 注：沉淀过度干燥将导致难以溶解，请注意。
注 1. 回收的基因组 DNA 溶液可直接作为 PCR 反应的 模板或直接进行限制酶切断等反应。 使用 20 μl TE Buffer 溶解基因组 DNA 时，PCR 反应液（25 μl 反应体系）或限制酶酶切反应液（20 μl 反应体系）中添加的 DNA 溶液在 0.5～2 μl 之 间为好。
植物基因组DNA提取试剂盒(北京天根)
植物基因组DNA提取试剂盒1 取植物新鲜组织约100 mg或干重组织约30 mg，加入液氮充分研磨。
2 将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μL 65℃预热缓冲液GP1的离心管中（实验前在预热的GP1中加入巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒混匀后，将离心管放在65℃水浴20 min，水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3 加入700 μL氯仿，充分混匀，12,000 rpm（~13,400×g）离心5 min。
注：若提取富含多酚或淀粉的植物组织，可在第3步前，用酚：氯仿/1:1进行等体积抽提。
4 小心的将上一步所得水层上相转入一个新的离心管中，加入700 μL缓冲液GP2，充分混匀。
5 将混匀的液体转入吸附柱CB3中，12,000 rpm（~13,400×g）离心30 s，弃掉废液。
（吸附柱容积为700μL左右，可分次加入离心。
）6 向吸附柱CB3中加入500 μL缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（~13,400×g）离心30 s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7 向吸附柱CB3中加入600 μL漂洗液PW（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000 rpm（~13,400×g）离心30 s，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8 重复操作步骤7。
9 将吸附柱CB3放回收集管中，12,000 rpm（~13,400×g）离心2 min，倒掉废液。
将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中的乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10 将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μL洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，12,000 rpm（~13,400×g）离心2 min，将溶液收集到离心管中。
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转基因检测试剂盒(植物)介绍
在今年年初，农业农村部制定了《2020年农业转基因生物监管工作方案》，该方案的主要就是为了切实做好农业转基因生物安全监管工作，保障我国农业转基因生物研究与应用的健康发展。
一直以来，转基因作物及其产品的检测技术是转基因生物安全管理的基础和技术保障，随着转基因技术研究和应用的不断扩大，国际贸易日益频繁，引种交流力度加大，每年都涌现出大量新的转化体和新的加工品，因此，只有通过准确检测和科学溯源，才能确保标识制度的实行，才能实现对转基因作物及其产品的有效监督和有力监管。
那么，对于不可见的转基因物质我们该如何快速有效地检测呢？可以使用转基因检测试剂盒。
Cry1C 转基因检测试剂盒也叫转基因植物蛋白浓度测定试剂盒，可用于转基因作物叶片蛋白浓度测定，转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗，双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。
【Cry1C转基因检测试剂盒原理】
转基因Cry1C 试剂盒系用特异性抗Cry1C 单抗包被的微孔板和酶标记抗Cry1C 单抗，双抗体夹心法检测Cry1C 基因表达产物，可以高灵敏度和特异性的检测转基因植物中的Bt-Cry1C 蛋白。
【Cry1C转基因检测试剂盒试剂准备】
试剂盒中的20×浓缩洗涤液30 ml 加570 ml 灭菌ddH2O 溶解稀释至1×洗涤液，
5×抽提液（30 ml）加120 ml ddH2O 稀释至1×抽提液，4℃存放备用。
【样品准备】
称取约20 mg 叶片，加0.5 ml 1×抽提液（使用前30 min 放置室温）研磨至匀浆，室温放置30 min，测定前把样品上清液稀释5-20 倍。
测定茎干和胚乳中的Bt 蛋白时，样品称取约40 mg，加1 ml 1×抽提液研磨。
【Cry1C 转基因检测试剂盒注意事项】
1. 测定中需使用的所有试剂和96 孔板提前30 min 放置室温温育（否则会影响试验准确性），注意12 连管必须温育后再从平板上取下，未使用完的预包被板条应置于有干燥剂的封口袋中密封保存；
2. 试剂使用前应充分摇匀；
3. 摇动平板混匀时注意避免样品之间交叉污染；
4. 使用洗涤液漂洗时，洗涤液需要填满每个小孔，进行充分漂洗；
5. 研磨好的样品如果不能一次全部测量，可以暂时在4 ℃避光保存，但是最好在24 h 内测定；
6. 结果判读请在反应终止后15 min 内完成。
【储存条件及有效期】
试剂盒储存于2-8℃，切勿冻存；未开封试剂盒有效期12 个月，开封后3 个月内用完。
（见包装盒上标签有效期）
以上就是对转基因检测试剂盒(植物)的介绍，托普云农除了供应转基因检测试剂盒之外，还供应转基因测试纸，主要分为抗虫试纸、抗除草剂试纸、抗虫试剂盒，具有特异性强、灵敏度高、通用性广和反应速度快、耐储存等优点。
如有需要，可详细咨询！。