水质微生物的检测
实验室中水质微生物的检测与管理
实验室中水质微生物的检测与管理摘要：水是人类赖以生存的，所以确保水质安全是异常重要的。
我国对对水质微生物样品检测要求也不断加深，本文作者结合工作经验，详细阐述了对微生物实验室样品检测与管理的流程及相关环节。
关键词：水质;微生物;检测;样品采集;1、样品的采集一般情况下,为保证水样采集,采集的水质监测样品必须有代表性,同一水源、统一时间采集几类检测指标的水样时,应先采集供微生物学指标检测的水样。
采样时应直接采集,不得用水样涮洗已灭菌的采样瓶,并避免手指和其他物品对瓶口的沾污。
首先水质监测微生物实验室先备齐采集微生物样品的无菌采样玻璃瓶,通常情况下采样瓶需经过180℃高温干热灭菌两小时的灭菌消毒处理。
采样时不可搅动水底的沉积物。
水源水采样点通常应选择汲水处。
表层水采集应该在河流、湖泊可以直接汲水的场合。
采样时注意不能混入漂浮于水面上的物质。
若采集湖泊、水库等具有一定深度的水样时,可用直立式采样器。
出厂水的采集点应设在出厂进入输送管道以前处。
管网水的采集应注意采样时间。
夜间可能析出可沉渍于管道的附着物,取样时应打开水龙头放水数分钟,排出沉积物。
采集用于微生物学指标检验的样品前应对水龙头进行消毒。
不同的生物检测项目,需要不同的采样方法。
二次供水的采集应包括水箱(或蓄水池)进水、出水以及末梢水。
采集出厂水、管网水水样时, 250 ml采样瓶内应提前加0·5 gNa2S2O3灭菌。
自来水采样应采用无菌操作的取样,方法为用火焰在龙头表面烧灼片刻(3~5 s)或用75%酒精对其表面进行擦拭消毒,然后放水5~10 min,无菌操作采集自来水(手不要接触到无菌瓶口和瓶塞)。
井水采样也需要无菌操作来取样,方法为将取水桶洗干净放入井中数分钟(3-5 min),尽量不取表面水,提水后将水灌入无菌瓶中(手不要接触到无菌瓶口和瓶塞,新井要3个月后采样送检)。
采样完成后应填好现场采样记录表,注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等相关信息。
水质微生物检测
第二节饮用水种类及卫生微生物指标
一、饮用水分类 1、生活饮用水：供人生活的饮水和生活用水 2、包装饮用水： • 饮用天然矿泉水 • 饮用天然泉水 • 其他天然饮用水 • 饮用纯净水 • 饮用矿物质水 • 其他包装饮用水
二、饮用水介绍
（一）、生活饮用水 • 新发布的产品标准 GB5749-2006 • 标准检验方法为 GB/T5750-2006 • 水质检验项目由原35项增加至106项，旧标准微生
0 MPN/100mL
0 CFU//250mL 0 CFU//250mL 0 CFU//50mL
各类水质的微生物指标要求(续)
瓶 装 饮 用 纯 净 GB17324 － 水卫生标准 1998
菌落总数 ≤ 大肠菌群 ≤
霉菌和酵母 ≤
致病菌（沙门氏菌、
志贺氏菌、金黄色葡萄
球菌）
瓶（桶）装饮用 GB19298 － 水卫生标准 2003
• PH：水中微生物适宜范围是pH6.5～8.5，这与一般自然水 的pH值范围相适应。 海水的pH7.5～8.5，海水中多数微生 物生长的最适pH7.2～7.6；
• 化学物质：有机物，无机物：氨、硝酸盐、磷酸盐、硫酸 盐、碳酸盐，金属离子：汞、铜；
• 营养物质：异养微生物，营养贫乏时，微生物倾向吸附颗 粒。
第三节生活饮用水微生物检测
一、水样中微生物项目检测方法 GB/T 5750.12
1 菌落总数
1 平皿计数法
2 总大肠菌群大肠菌群
1 多管发酵法
2 滤膜法
4大肠埃希氏菌
二、水微生物的种类
• 水微生物的种类很多，有细菌、真菌、病毒、藻 类和原生动物；
• 水中大多数微生物属于异养微生物，它能利用水 中有机物质生长，另一类为自养微生物，它只需 无机物质就能合成新的细胞。
平板菌落计数法水中微生物的检测
2、由于细菌易吸附玻璃器皿表面，菌液加入后应 尽快倒培养基，立即摇匀；
3、倾注平板时的培养基温度冷却至45℃左右。 4、计数时，30―300个菌落的稀释度计算每毫升
的菌数最为合适 5、同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊
菌落计数方法及原则：
1）若只有一个稀释度的平均菌落数在30-300范围 时，则将该菌落数乘以稀释倍数报告之。
2）若有两个稀释度，其生长的菌落数均在 30~300之间，则视二者之比值来决定，若 其比值小于2应报告两者的平均数。若大于 或等于2则报告其中较小的菌落总数。
3）若所有稀释度的平均菌落数均大于300， 则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释 倍数报告之
水中细菌总数的测定
——平板菌落计数法
一、细菌总数测定的意义
水中细菌总数往往同水中有机物污染的程度呈 正相关，它是评价水质污染程度重要指标之一
细菌总数：指水样在一定条件下培养后，1mL水样 所含菌落的总数。
我国生活饮用水标准（GB5749-85）规定，细 菌总数不得超过100个/ml
含细菌10-100个/ml的水体为极清洁
代表性：多采几个部位，液体样品需经过震摇，以 获得均匀稀释液。
2 水样的10倍稀释
第一步 稀释 水样 第二步： 接种平板
注意：稀释 度的选择
平板混合分离法： 将菌液分离样品摇匀，用无菌移液管取1 ml的
菌液移至无菌培养皿中，然后将融化，凉至45℃ 左右的培养基，在每个培养皿内各倒入约15 ml， 摇匀，凝固，制成平板。
4）若所有稀释度的平均菌落数均小于30， 则应以按稀释度最低的平均菌落数乘以稀 释倍数报告之
探析水质环境检测中的微生物检测质量控制
探析水质环境检测中的微生物检测质量控制摘要：水质检测中的水中微生物检测对于防治水污染、制定水环境标准等方面具有重要作用，基于此，本文概述了微生物检测技术，简述了水质环境检测中的常用微生物检测技术，对水质环境检测中的微生物检测质量控制要点进行了探讨分析。
关键词：微生物检测技术；水质环境检测；质量控制；要点目前水质环境检测方法主要自动监测，常规监测，应急监测等，其中微生物检测是其重要内容，为了保障水质环境检测的有效性，以下水质环境检测中的微生物检测质量控制进了探讨分析。
一、微生物检测技术概述微生物检测技术主要是指利用微生物对水体中的其他生物作出一系列反应，从而来反应出具体的水质情况。
此过程中包含环境分析学，物理及生物检测学。
微生物检测技术，能弥补常规物理及化学反应测试中的一些劣势。
虽然在现实使用过程中，微生物检测技术对水污染的具体程度无法作出准确量化的表达，且只是在化学检测技术的基础上作出一些辅助性的检测。
但其对水污染处理的作用非常重要，且在水污染处理过程中占据特殊地位。
二、水质环境检测中的常用微生物检测技术分析水质环境检测中的常用微生物检测技术主要有：（1）生物传感器技术。
在水质环境微生物检测工作中，生物传感器检测技术也是微生物检测工作必不可少的技术类型。
生物传感器技术对固化生物体内部某种功能有着明显的效果，可以推动微生物某种表现特性，转化成为一种的传感器，可以实现对水体当中微生物种类和含量的准确判断。
（2）PCR技术。
在水质环境的微生物检测工作当中，PCR技术是其中一个比较常用的微生物检测方法， PCR技术也被亦称之为聚合酶链式反应，其具有以下特性：第一，在环境水体资源的检测工作当中，可以实现对病原微生物的快速检测；第二，在环境微生物基因的克隆当中作用比较明显，通过PCR技术的有效应用，不但可以有效提高水质环境当中微生物的检测精确度，同时还可以大大提高微生物检测的工作效率。
三、水质环境检测中的微生物检测质量控制要点分析1、微生物样品采集的质量控制要点分析。
微生物检测技术在水质监测中的应用
微生物检测技术在水质监测中的应用随着社会的持续发展，人们对于环境保护和健康的关注越来越加重要。
水是人类生存的必需品，但是地球上的水资源已经越来越受到污染和破坏。
因此，水质监测是对于公众健康和环境保护至关重要的工作。
而微生物检测技术是一种非常有效的水质监测方法，它能够直接探测水体中的细菌、病毒等微生物，从而能够更加准确地评估水质状况。
接下来，我们将从多个方面探讨微生物检测技术在水质监测中的应用。
一、微生物检测技术在水污染检测中的作用微生物检测技术是一种基于微生物的生理、生化特性及其相互关系等特征的分析检测，是通过寻找细菌、病毒等微生物的存在来准确判断水质的好坏。
通过微生物检测技术，我们可以快速、准确地检测出水体中的各种微生物污染物，如大肠杆菌、沙门菌等，从而针对性地提出解决方案。
例如，在饮用水的检测中，微生物检测技术可以判断水体是否受到病原体的污染，通过对水质的判断，进而保障公众的饮用健康。
二、微生物检测技术在污染源追踪中的应用微生物检测技术不仅仅能够检测水质污染，还能够对污染源进行有效的追踪。
通过对水体中的微生物进行分析，我们可以确定其来自于哪个地点，从而可以快速找到污染源点，并采取措施及时消除。
例如，在工业废水管道泄漏事件中，微生物检测技术可以检测废水中的微生物菌群，从而推断出废水泄漏点的位置。
采取针对性的措施，及时控制事故的发生，避免污染事故造成的影响和后果。
三、微生物检测技术在环境监管中的应用微生物检测技术在环境监管中的应用也非常广泛。
通过对环境中的微生物进行监测，我们可以掌握环境中微生物菌群变化的情况，评价环境生态系统的稳定性和健康状况。
例如，在河流生态系统监测中，微生物检测技术可以评估水体自净能力，监测水体中氮、磷等营养物质的含量，评价水体中藻类、浮游动物等的数量变化，从而全面了解生态系统的健康状况。
四、微生物检测技术在水食品安全中的应用水食品安全是一个非常重要的问题，尤其针对农村地区的居民尤为重要。
水质大肠杆菌检测标准
水质大肠杆菌检测标准水质大肠杆菌是一种常见的水污染指标微生物，其存在往往代表着水体受到了粪便污染，可能存在病原微生物，对人体健康构成潜在威胁。
因此，对水质中的大肠杆菌进行检测具有重要意义。
本文将介绍水质大肠杆菌检测的标准及相关内容。
一、样品采集。
1. 采样地点。
样品采集应根据实际情况选择合适的采样点，通常应选择水流平缓、水深适中的采样点，避免选择有明显污染源的地方进行采样。
2. 采样容器。
采样容器应为无菌容器，避免使用含有抗菌剂的容器，避免对样品造成影响。
3. 采样方法。
在采样时，应尽量避免接触手部或其他物体，避免污染样品。
采样时应尽量避开表层水体，直接将容器浸入水中采集样品。
二、样品保存与运输。
1. 样品保存。
采集后的样品应尽快送至实验室进行检测，若无法立即送检，应在4℃条件下保存，避免样品中微生物的生长。
2. 样品运输。
样品在运输过程中应避免剧烈晃动和温度变化，以免对样品造成影响。
三、检测方法。
1. 培养法。
培养法是一种常见的大肠杆菌检测方法，通过在含有培养基的平板上培养样品中的微生物，并通过特定的培养条件，观察培养基上是否有大肠杆菌的生长。
2. PCR法。
PCR法是一种分子生物学方法，通过特定的引物扩增样品中的DNA，再通过特定的检测手段，判断样品中是否存在大肠杆菌。
四、检测标准。
根据《水质污染物排放标准》（GB 3838-2002）的规定，水体中大肠杆菌的限量标准为每100毫升不得超过500个。
若水样中大肠杆菌数量超过此标准，则代表水质受到了污染。
五、检测结果的解读。
当检测结果显示水样中的大肠杆菌数量超过标准限量时，应立即采取相应的水质改善措施，避免对周围环境和人体健康造成潜在威胁。
同时，应对水源进行全面排查，找出污染源并进行治理。
六、结论。
水质大肠杆菌的检测标准对于保障水质安全具有重要意义，正确的采样和检测方法能够有效地保障水质的监测工作。
同时，检测结果的解读和后续处理也是非常重要的环节，需要引起足够的重视和关注。
实验室生活饮用水微生物检测SOP(一)
实验室生活饮用水微生物检测SOP（一）引言概述：实验室生活饮用水微生物检测SOP是为了确保实验室饮用水的安全与卫生，检测水中的微生物污染情况，并采取相应的措施进行处理。
本文将详细介绍实验室生活饮用水微生物检测的步骤和要点。
正文：一、实验室生活饮用水微生物检测前的准备工作1. 准备所需的检测设备和试剂，包括培养基、平板计数器、显微镜等。
2. 清洗和消毒检测设备，确保设备的洁净和无菌。
3. 确保实验室供水管道的安全和干净，避免水源污染。
二、水样采集和处理1. 选择合适的水样采集器具，如钢质水样容器或无菌采样瓶。
2. 在采集水样前进行必要的洗手和佩戴消毒手套，以避免污染水样。
3. 选取水源合适的位置采集水样，尽量避免水源受到外界污染。
4. 采集水样后立即送至实验室进行处理，避免样品在运输过程中受到污染。
三、水样预处理1. 对水样进行过滤，以去除大颗粒物质和悬浮物。
2. 进行稀释处理，确保微生物数量在检测范围内。
3. 根据需要进行pH调节或添加抑菌剂，以保证后续检测的准确性和可靠性。
四、微生物检测方法1. 采用培养法进行微生物定量分析，包括总菌落计数和特定菌群检测。
2. 根据需求选择合适的培养基和培养条件，如温度、pH值等。
3. 加入样品到培养基中，进行平板计数或液体培养，并进行恰当的菌落计数。
4. 进行特定菌群的检测，如大肠杆菌、沙门氏菌等，采用相应的培养基和检测方法。
5. 采用显微镜观察法进行微生物形态和特征的检测，确保检测结果的准确性。
五、结果分析和处理1. 根据检测结果进行微生物数量统计和分析，比较检测结果与相关标准的符合情况。
2. 如发现微生物污染超过标准限值，及时采取措施进行处理和消毒。
3. 记录检测结果，并保留相关文件和数据，以备日后参考和审查。
总结：实验室生活饮用水微生物检测SOP的实施可以确保实验室饮用水的卫生安全。
通过准备工作、水样采集和处理、微生物检测方法的选择和结果分析处理，可有效地监测和控制实验室饮用水中的微生物污染，保障实验室工作人员的身体健康和实验室环境的卫生安全。
水环境中微生物检测原理简析
水环境中微生物检测原理简析水是人类生活不可或缺的重要资源，保证水质安全对于保护人类健康和生态平衡至关重要。
水环境中微生物检测是评价水质的关键指标之一。
微生物检测技术可以帮助监测水质，及时掌握水质情况，保障饮用水和环境水的安全。
本文将对水环境中微生物检测原理进行简要分析，希望为相关领域的研究人员提供一定的指导。
一、微生物检测的重要性微生物是水体中的生物污染指标，包括细菌、真菌、病毒等微生物，它们对水质具有重要的指示作用。
水中微生物的种类与数量反映了水体的综合污染情况，也直接影响了水的卫生水平。
在水环境中，微生物检测可以预测水的富营养化程度、生物降解程度、水中病原微生物等情况，对于科学评估水质状况、掌握水环境变化、制定治理策略具有重要意义。
二、微生物检测方法1. 常规培养法：常规培养法是一种最为常见的微生物检测方法，适用于细菌、真菌等微生物的检测。
其原理是将水样涂布在含有营养物质的培养基上，利用微生物在一定条件下生长繁殖的特性，通过观察和计数菌落形成来确定水中微生物的种类与数量。
这种方法简单易行，但需要一定的培养时间，且对于某些难以培养的微生物无法有效检测。
2. 荧光显微镜法：荧光显微镜法是利用荧光染料染色后观察水样中微生物的检测方法。
荧光显微镜可以将微生物在荧光染料作用下在显微镜下呈现出特定的颜色和形态，在此基础上进行定量测定。
这种方法可以快速、准确地观察出水样中微生物的数量和形态，具有较好的灵敏度和特异性。
3. PCR法：PCR法是一种分子生物学技术，通过扩增目标DNA序列来检测水样中微生物的数量和种类。
该方法具有高度的特异性和灵敏度，能够检测到数量极少的微生物。
由于PCR法需要设备复杂，操作技术要求较高，且往往只能检测特定的微生物，因此在微生物检测中的应用相对较少。
以上几种微生物检测方法各有优缺点，选取合适的方法需要结合具体的检测要求和实际情况进行考虑。
在水环境中微生物检测中，往往需要综合运用几种方法进行检测，以达到全面、准确地评价水质的目的。
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水质微生物
一、水质微生物及指示菌
在各种水体,特别是污染水体中存在有大量的有机物质,适于各种微生物的生长,因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基.水体中的微生物主要来源于土壤,以及人类的动物的排泄物及污染.水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约.
一般认为,水中微生物以革兰氏阴性杆菌占有较大优势.与其他水体相比,河水及溪水中革兰氏阳性菌相对较多,这是因为陆地微生物冲洗污染的缘故.
水体中的致病性微生物一般并不是水中原有微生物,大部分是从外界环境污染而来,特别是人和其它温血动物的粪便污染.水中常见的致病性细菌主要包括：志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、小肠结炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌等.
在实际控制中,对水质卫生质量的评价和控制,是无法对各种可能存在的致病微生物一一进行检测,而一般利用对指示菌的检测和控制,来了解水体是否受到过人畜粪便的污染,是否有肠道病原微生物存在的可能,从而评价水的质量,以保证水质的卫生安全.
目前,世界各国一般认为大肠菌群是指示水质受粪便污染较好的指示菌.
我国水质控制也采用大肠菌群作为指示菌,GB5749-85中华人民共和国国家标准生活饮用水卫生标准规定,生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个.
在某些情况下,水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况.这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数.目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量,除采用大肠菌群等指标外,一般还采用细菌总数这个指标.我国GB5749-85中华人民共和国国家标准生活饮用水卫生标准中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个.
二、水质微生物检验方法
GB5750-85中华人民共和国国家标准生活饮用水标准检验法提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法.
一细菌总数的检测：
国家标准中,细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24h培养后,所生长的细菌菌落的总数.
对生活饮用水,直接吸取1ml水样于平皿中,加入营养琼脂后混匀,37℃培养24h,进行计数.
对水源水,根据情况对样品进行10倍梯度稀释,选择适宜稀释液1ml,加注平皿,营养琼脂混匀,37℃培养24h,进行计数.
按照规定格式报告每毫升水中细菌总数.
二总大肠菌群的检测：
国家标准中,利用总大肠菌群作为粪便污染的指标.总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的,37℃生长时能使乳糖发酵,在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌.水样中总大肠菌群数的含量,表明水被粪
便污染的程度,而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能.
国家标准提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法.
多管发酵法检测总大肠菌群,分为三步：初发酵试验,平板分离,复发酵证实试验.初发酵试验,采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h,观察产酸产气情况.对阳性管培养物,接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基,观察菌落特征,并进行革兰氏染色和镜检.对典型和可疑菌落,接种于乳糖蛋白胨培养液,进行复发酵证实试验,并根据标准所附检数表报告结果.
其中,对生活饮用水,初发酵试验接种水样总量300ml,即100ml接种2管,10ml接种10管,采用两个稀释度,12支发酵管.对水源水,初发酵试验接种水样总量55.5ml,即10ml接种5管,1ml接种5管,0.1ml 接种10管,共采用三个稀释度,15支发酵管.两种接种方法,所用的检数表是不同的.
滤膜法检测总大肠菌群,就是利用微孔滤膜,过滤一定量水样,将水样中含有的细菌截留在滤膜上,然后将滤膜帖放在选择性培养基上如品红亚硫酸钠培养基,经培养和证实试验后,直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落,并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数.
三、说明：
1．菌落总数测定中,应选择合适的稀释度进行.生活饮用水,国家标准规定每毫升不得超过100个,因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养.
2．培养时间.与食品中菌落计数不同,测定水中细菌总数,培养时间采用24h.
3．总大肠菌群的测定方法,由于饮用水和水源水可能的污染程度不同,因此采用不同的接种量,检数表也不相同.
4．当接种量超过1毫升时,一般采用多倍浓度培养液.如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL,加入
100mL水样后,总体积为150mL,培养液恢复到正常浓度.
5．滤膜法检测总大肠菌群,一般在检测较大量低浊度水样时采用,大量水样滤过滤膜后,水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。