最全的动物疫病实验室检测方法
(完整版)动物免疫抗体血清学检测技术
2019.5.10
内容
一、血清学检测的意义 二、血清学检测内容和方法 三、血凝和血凝抑制实验 四、酶联免疫吸附实验 五、虎红平板凝集实验（初筛）
一、血清学检测的意义
动物免疫接种已经成为目前防御疫病传播的首选措施，只有给动 物进行有效的免疫接种后，才能产生一定的保护力，从而防止疫 病的侵入和蔓延。因此在群体接种疫苗前后对抗体水平进行检测， 准确了解动物疫病发生、传播和流行情况，掌握畜禽免疫抗体水 平和动物疫病保护情况， 从而更有效地采取综合防控措施。因此， 做好动物免疫抗体检测工作有着十分重要的临床意义和经济意义。
血凝素（HA） 柱状
血凝试验（HA)原理：
血凝抑制试验：
当病毒的悬液中先加入特异性抗体，且这种抗体的量足以抑制病毒颗粒或 其血凝素，则红细胞表面的受体就不能与病毒颗粒或其血凝素直接接触。 这时红细胞的凝集现象就被抑制，称为红细胞凝集抑制反应，也称血凝抑 制反应，利用这种特性设计的试验称血凝抑制试验 (HI) 。 该试验是目前WHO进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。 目的：检测有无病毒感染和免疫状态。
注意的关键点是：加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。 加样太快，无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易 导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。
ELISA的比色测定主要由酶标仪进行。此处强调以下 几点：
（1）酶标仪不应安置在阳光或强光照射下，室温宜 在15－30℃，使用前先预热仪器15－30分钟，测读 结果更稳定。各种酶标仪性能不同，使用前应详细 阅读说明书。
血凝试验操作步骤
4个100%血凝单位（即4HA100） 抗原的稀释倍数=使100%红细胞凝集的抗原最高稀释倍数/4
动物疫病实验室检测规范化流程
动物疫病实验室检测规范化流程1.采样前消毒工作台，保证采样过程无污染。
Before sampling, disinfect the workbench to ensure the sampling process is not contaminated.2.佩戴防护衣、口罩、手套等个人防护用品。
Wear personal protective equipment such as protective clothing, masks, and gloves.3.用专用器具采集样本，避免污染。
Collect samples with dedicated tools to avoid contamination.4.将样本标本装入标注清晰、密封良好的容器中。
Place the sample specimens in well-labeled and tightly sealed containers.5.将样本及时送往实验室进行检测。
Promptly transport the samples to the laboratory for testing.6.在实验室中建立标本接收区和标本处理区域。
Establish a specimen reception area and specimen processing area in the laboratory.7.在标本处理区域进行标本解封、分装等操作。
Carry out operations such as specimen unsealing and subpackaging in the specimen processing area.8.使用严密的生物安全柜进行病毒和细菌的分离与培养。
Use a tight biosafety cabinet for virus and bacteria isolation and culture.9.制备所需的病毒和细菌检测试剂。
动物疫病实验室检验采样方法
动物疫病实验室检验采样方法NY/T 541—2002前言动物病料样品的采集是动物疾病诊断、流行病学调查或免疫监测所不可缺少的重要步骤，在各国的兽医学标准中都把这一部分纳入第一重要内容，广泛应用于动物疾病流行病学调查、动物检疫和科研教学。
世界动物卫生组织[World Organization for Animal Health(英)，Office Intentional des Epizootic(法)，OIE]推荐的诊断方法中，也将该部分内容列为第一部分内容。
本标准是依据世界动物卫生组织(OIE)《诊断试验和疫苗标准手册》(2000版)(Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines ，2000)第1·1.1章"Sampling Methods"的技术要求编写的。
本标准与该章的非原则性差异在于:——本标准结合本国实践经验对操作程序和条件作了更具体的陈述和规定；——本标准根据GB/T1.1-2000的规定和汉语习惯将该章的陈述性文本改为规范性标准文件。
本标准的附录A为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出。
本标准由全国动物检疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:农业部动物检疫所。
本标准主要起草人:吴延功、杜元钊、朱万光、刘佩兰、仰惠芬。
1范围本标准规定了动物疫病诊断实验室的样品采集方法。
本标准适用于病因(原)学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。
2样品采集的一般原则和采集前的准备2.1样品采集所遵循的一般原则2.1.1凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜的血液，万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。
只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。
2.1.2采取病料的种类，根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料；进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品的数量应满足统计学的要求。
动物疫情测报方法
动物疫情测报方法
一、流行病学调查
（一）调查内容
疫病发生情况，包括发病时间、发病地点、发病动物种类、发病数、死亡数、免疫情况、存栏量等。
（二）调查范围
各动物疫情测报单位主要以报告点所辖区域开展流行病学调查，并保持相对稳定，每个县级测报单位应设立3个以上报告点。
（三）调查时间和数量
每个报告点每月进行一次动物流行病学调查，每次至少调查2个村，每个村20个散养户，抽查规模猪、牛、羊、禽场（户）各一个。
当发现疑似动物疫病时，应扩大调查范围，并由县级测报单位做必要的实验室检测
（四）调查方法
由报告员定期定点深入场、户进行调查，据实填报。
二、实验室监测
（一）免疫效果监测
为了及时了解各种动物疫病疫苗的免疫效果，掌握疫苗免疫后在畜禽体内的抗体消长规律，科学指导养殖场（户）制定免疫程序，正确把握免疫时间，合理有效地开展免疫工
作，而定期采集畜禽血清进行相应疫病的抗体检测。
（二）疫情监测
为了切实了解各种动物疫病的流行规律和疫情动态，及时发现疫情及疫情隐患，运用血清学或病原学监测方法对畜禽群进行定期检测。
动物疫病控制—实验室检测
项目五：动物疫病控制
如何进行寄生虫学检测？
2.虫体检查--2：
• 蛛形纲虫虫体检查法：通常采用煤油浸泡法,将病料置于载 玻片上,滴加数滴煤油,上覆另一载玻片,用手搓动两玻片使 皮屑粉碎,镜检。对蜱等其他蛛形纲虫,常采用肉眼检查法。
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
如何进行寄生虫学检测？
定、酶免疫技术等，如猪瘟荧光抗体染色法检测猪瘟病毒。 • 检测病毒核酸：主要针对不同病原微生物具有特异性核酸序
列和结构进行检测。如核酸杂交技术、核酸扩增技术和基因 芯片技术等已研制出多种商品化试剂盒,
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
如何进行病毒学检测？
2.病毒的分离培养：
• 病料处理：主要作除菌处理，方法有滤器除菌、高速离心除 菌和利用抗生素处理3种。
猪 瘟 NY/SY 156-2000
正向间接血凝试验（IHA）
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
什么是动物疫病分子生物学监测？
分子生物学监测又称基因监测。主要是针对不同病原 微生物所具有的特异性核酸序列和结构进行测定。如PCR 技术、核酸探针技术、DNA芯片技术等。
动物防疫技术
一次性静脉 采血管
猪前腔静脉采血
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
免疫抗体监测的程序是什么？
鸡翅静脉采血
猪耳静脉采血
猪前腔静脉采血
牛颈静脉采血
动物防疫技术
项目五：动物疫病控制
免疫抗体监测的程序是什么？
3.抗体检测方法 ：常见动物疫病免疫抗体检测标准及方法， 如下表：
分类
国家 强制 免疫 的重 大动 物疫
• 显微镜检查：制片干澡后，滴加香柏油,用油浸镜观察细菌 的形态结构和染色特性。
动物疫病实验室检验采样方法
动物疫病实验室检验采样方法 (NY/T541-2002)1 范围本标准规定了动物疫病诊断实验室的样品采集方法。
本标准适用于病因(原)学、病理组织学、血清学、免疫学等实验室检验所需样品的采集。
2 样品采集的一般原则和采集前的准备2.1 样品采集所遵循的一般原则2.1.1 凡发现患畜(包括马、牛、羊及猪等)有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患畜的血液，万不得已时局部解剖作脾脏触片的显微镜检查。
只有在确定不是炭疽后，方可进行剖检。
2.1.2 采取病料的种类，根据不同的疾病或检验目的，采其相应的脏器、内容物、分泌物、排泄物或其他材料；进行流行病学调查、抗体检测、动物群体健康评估或环境卫生检测时，样品的数量应满足统计学的要求。
采样时应／jxjD,．谨慎，以免对动物产生不必要的刺激或损害和对采样者构成威胁。
在无法估计病因时，可进行全面的采集。
检查病变与采集病料应统筹考虑。
2.1.3 内肌病料的采取，如患畜已死亡，应尽快采集，最迟不超过6h。
2.1.4 血液样品在采集前一般禁食8h。
2.1.5 应做好人身防护，严防人畜共患病感染。
2.1.6 应防止污染环境，防止疫病传播，做好环境消毒和病害肉尸的处理。
2.2 使用器械的消毒刀、剪、镊子等用具煮沸消毒30min，使用前用酒精擦拭，用时进行火焰消毒。
器皿(玻制、陶制等)经103kPa高压30min，或经160C干烤2h灭菌；或放于0．5％一1％的碳酸氢钠(NaHCr~)水中煮沸10min 15rain，水洗后，再用清洁纱布擦干，保存于酒精、乙醚等溶液中备用。
注射器和针头放于清洁水中煮沸30rain。
一般要求使用“一次性”针头和注射器。
采取一种病料，使用一套器械与容器，不可用其再采其他病料或容纳其他脏器材料。
采过病料的用具应先消毒后清洗。
检查过传染性海绵状脑病的器械要放在2mol／L的氢氧化钠(NaOH)溶液中浸泡2h以上，才可再使用。
3 样品的采集3.1 血液3.1.1 采血部位大的哺乳动物可选用颈静脉或尾静脉采血，也可采胫外静脉和乳房静脉血。
动物疫病实验室检测规范化流程
动物疫病实验室检测规范化流程英文回答：Animal Disease Laboratory Testing Standardization.Standardization of laboratory testing procedures is essential for ensuring the accuracy, reliability, and consistency of diagnostic results in animal disease laboratories. A standardized testing protocol provides a set of guidelines that outlines the specific steps and techniques to be followed during the testing process. This helps to minimize variability between different operators and laboratories, resulting in more reliable and comparable results.The establishment of a standardized testing protocol involves the following steps:Validation: The testing protocol should be validated to ensure its accuracy, sensitivity, and specificity. Thisinvolves testing a known sample with the protocol and comparing the results to a reference standard.Documentation: The standardized testing protocol should be documented in detail. This includes describing the equipment, reagents, and procedures used, as well as the interpretation of results.Training: Laboratory personnel should be trained on the standardized testing protocol to ensure that they are following the procedures correctly.Quality control: A system for quality control should be implemented to monitor the performance of the standardized testing protocol and ensure that it is consistently producing reliable results.The benefits of using a standardized testing protocol in animal disease laboratories include:Improved accuracy and reliability of results: By following a standardized protocol, laboratories canminimize variability between different operators and laboratories, resulting in more accurate and reliable diagnostic results.Enhanced comparability of results: When different laboratories use the same standardized protocol, they can be confident that their results are comparable, allowingfor more effective disease surveillance and outbreak investigations.Increased efficiency and cost-effectiveness: Standardized testing protocols can help to increase efficiency and cost-effectiveness in the laboratory by reducing the need for duplicate testing and by streamlining the testing process.Improved communication and collaboration: Standardized testing protocols provide a common language for communication between laboratories, facilitating the sharing of information and collaboration on disease investigations.In addition to the steps outlined above, the following considerations are important for the successful implementation of standardized testing protocols in animal disease laboratories:Collaboration: Standardization efforts should involve collaboration between different laboratories, regulatory agencies, and professional organizations.Flexibility: Standardized protocols should be flexible enough to accommodate minor variations in equipment and reagents, as well as to allow for the incorporation of new technologies and advances in diagnostic methods.Continuous improvement: Standardized testing protocols should be reviewed and updated regularly to ensure that they remain current and effective.中文回答：动物疫病实验室检测规范化流程。
动物性病原微生物的实验室检测常规方法简述 (1)
动物病原微生物的常规实验室检测方法简述随着我国动物养殖业的飞速发展，动物传染病逐渐呈现出非典型性症状和混合感染的征状日趋严重，许多病例仅靠临床和病理诊断很难进行确诊，而实验室检测已逐渐成为动物病原微生物确诊的依据。
目前，动物病原微生物实验室检测经常使用的方法主要包括病原学诊断，血清学诊断、分子生物学诊断。
本文对动物病原微生物的实验室诊断方法进行简要的概括，为实验室诊断的初学者提供一些参考。
1 病原学检测1.1 涂片镜检对于送检样品首先一般要进行涂片镜检，首先将样品涂片，然后根据临床诊断疑似感染病原情况进行染色，常用的染色方法主要有革兰氏染色、美蓝染色、姬姆萨染色和抗酸性染色法等，最后在光学显微镜下观察微生物形态，得出初步的结论。
对于疑似的病毒性感染需要进行电镜观察，电镜是以电子束来代替可见光束，观察物体时，分辨率就没有波长要在可见光谱之内的限制，因此其放大倍数和分辨率都比光学显微镜高得多。
病毒颗粒极其微小，在17-300nm之间，光学显微镜无法观察，只有电镜才可以发现其形态。
1.2 分离培养病原分离是病原微生物检测应用较广泛的方法，细菌、真菌、螺旋体和支原体需要将样品处理后接种到其特定的培养基中进行扩增培养，然后划线或涂到固体培养基上进行分离培养，通过其生长形态、生化特性作出鉴定。
立克次体、衣原体、病毒则需要将样品接种到鸡胚或特定的细胞分离病毒，通过病变情况鉴定病原。
分离培养需要的时间较长，且分离的病原可能不是致病主要因素，但是它是病原微生物的基本鉴定方法，是病原学检测的基础。
1.3 动物接种将样品处理后或分离培养的病原根据其不同的特性接种对待检病原敏感的实验动物，通过观察其是否发病和发病症状来进行判断，甚至还可以对发病实验动物继续分离培养病原。
2 分子生物学检测2.1 PCR多聚酶链式反应，是目前病原检测的最常用的分子生物学技术，具有高敏感性的特征，即使少量的感染也可以检出，同时该方法也是许多其它检测方法的基础。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
最全常见疫病实验室检测方法目录常见疫病实验室检测方法 (1)目录 (1)常见ELISA操作方法 (3)亚洲 1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒 (3)猪瘟抗原检测试剂盒 (6)猪瘟病毒抗体阻断ELISA试验 (12)猪瘟单抗酶联免疫吸附试验 (14)口蹄疫结构蛋白检测方法（3ABC-I-ELISA） (16)口蹄疫抗体液相阻断-酶联免疫吸附试验 (18)PRRS抗体间接酶联免疫吸附试验 (22)犬细小病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (24)犬瘟热病毒抗体酶免测定试剂盒说明书 (26)常见PCR操作方法 (28)猪伪狂犬病毒PCR诊断试剂剂盒 (28)猪圆环病毒PCR诊断试剂盒 (31)常见RT-PCR操作方法 (34)口蹄疫病毒分子检测诊断试剂盒 (34)H5亚型禽流感病毒RT-PCR检测试剂盒说明书(20次) (36)新城疫病毒RT-PCR 检测试剂盒 (38)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒 (41)凝集、血凝实验操作方法 (44)弓形虫间接血凝试验(lHA)试剂使用说明书 (44)伪狂犬病乳胶凝集试验试剂盒 (45)猪细小病毒病乳胶凝集试验〈LAT〉诊断试剂盒使用说明书 (46)猪传染性萎缩性鼻炎乳胶凝集试验〈LAT〉操作程序 (47)猪瘟正向间接血凝试验试剂使用说明书及实验操作程序 (48)口蹄疫正向间接血凝试验 (51)高致病性禽流感血凝（HA）和血凝抑制（HI）试验程序 (52)琼脂扩散试验 (54)鸡马立克氏病 (54)禽流感琼脂凝胶免疫扩散试验 (56)荧光抗体检测 (58)猪瘟荧光抗体试验操作程序 (58)对狂犬病疑似动物脑组织的直接免疫荧光(dFA)检测 (59)血清学诊断检测常用试剂配方 (61)禽流感HA和HI试验用溶液的配制 (61)补充实验 (64)猪流感病毒H1亚型Hl试验抗原与阴、阳性血清说明书 (64)猪流感病毒RT-PCR检测 (67)猪瘟病毒RT-PCR诊断试剂盒猪繁殖与呼吸综合症（Nsp2 1594~1680变异株）RT-PCR检测实验 (69)一、布鲁氏菌病试管凝集试验抗原与阴、阳性血清 (72)二、布鲁氏菌病虎红平板凝集试验 (73)动物结核病诊断操作规程 (74)常见ELISA操作方法亚洲 1 型口蹄疫抗体液相阻断ELISA 检测试剂盒一试剂盒内含物.说明书亚洲 1 型口蹄疫阳性对照血清( 己稀释浓度为 1:8) .96 孔 ELISA 板亚洲 1 型口蹄疫阴性对照血清.液体稀释槽 3% 双氧水.U 型96孔抗原抗体反应板 25×PBST洗涤液(稀释时准确量取).封板膜豚鼠抗血清稀释液.灭活亚洲Ⅰ型口蹄疾病毒抗原 (用冰决包裹 ) 终止液.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒兔抗血清包被缓冲液(碳酸盐)胶囊.亚洲Ⅰ型口蹄疫病毒豚鼠抗血清底物 (柠檬酸 -磷酸盐)缓冲液片剂.兔抗豚鼠血清IgG-辣根过氧化物酶结合物 OPD 片剂二器材准备 ( 需用户自备 )1.移液器:5-50µl移液器、0.2—10µl移液器、50—200µl移液器、50—300µl 12道移液器各一把。
2.移液枪尖 (若干)。
3.抗原抗体反应板:微量血凝板(U型、V型均可)5块,本试剂盒配备两块,用于被检血清的稀释和抗原抗体反应。
注:抗原抗体反应板可重复使用,实验后,用水冲洗干净,然后用无离子水沸水浴30秒,晾干,待用。
4.超纯水 , 无离子水或蒸馏水。
三、试剂准备(需用户完成)1.包被缓冲液(PH9.6)将本试剂盒配备的碳酸盐缓冲液胶囊1粒小心打开,将胶囊内粉末倒入100ml无离子水中溶解即可。
4℃存放,1月内有效。
2. 洗涤液(PBST)将本试剂盒配备的 25 倍浓缩 PBST 液(可能有结晶形成,用时微热溶化)用无离子水或蒸馏水做1:25稀释。
(如果PH降低,务必用NaOH调至7.4)3.底物溶液取1片柠檬酸—磷酸盐片剂(本试剂盒配备)溶于100mL无离子水中,溶化后,取50mL 溶液, 再加1片邻苯二胺(OPD)片剂,充分溶解,分装（5mL/ 瓶或 10Ml∕瓶 ), 避光之-2O℃保存。
用前避光溶化 ,临时每1mL上述溶液加 10µL 本试剂盒配备的 3% 的双氧水(H202) 。
务必加双氧水!四、操作步骤1.用包被缓冲液稀释亚洲 1 型口蹄疫病毒兔抗血清至工作浓度(1:1000), 在ELISA 板上每孔加 50µl, 振荡 , 封板或置湿盒内，室温过夜。
2. 抗原抗体(阴阳性对照血清及待检血清)反应根据不同的需要,选择图1-2中的一种布局在抗原抗体反应板上操作。
图 1 为抗体滴度测定 (定量) 检测 10 份样品布局图;图 2 为抗体滴度测定( 定量 )检测 20 份样品布局图。
以图 1 为例 , 在 U 型血凝板上按 50 µl/孔量用 PBST 将待检血清从1:4开始做2倍连续稀释至 1:512。
同时,按图示稀释阴阳性对照血清 , 然后每孔加入 50 µl 用PBST 稀释到使用浓度的亚Ⅰ洲型口蹄疫病毒抗原 (1:4,即1份病毒抗原、加3份PBST), 病毒抗原对照孔加100µl。
振荡混匀,封板,4℃过夜。
加入病毒抗原后血清的稀释度变为从1:8开始的2倍稀释。
3.用洗涤液 (1×PBST) 洗 ELISA板5 次,在洗水纸上甩干,再将抗原抗体混合物从抗原抗体反应板上按次序转移至ELISA板上的相对应孔,每孔50µl封板,37℃温育1小时。
4.同上洗板5次, 甩干。
用豚鼠抗血清稀释液稀释亚洲1型口蹄疫病毒豚鼠抗血清至工作浓度 (1:1000), 每孔加50µl,封板,37℃温育1小时。
5.同上洗板 5 次 , 甩干。
用 l×PBST 稀释兔抗豚鼠酶结合物至工作浓度(1:500), 每孔加 50 µl 封板 ,37 ℃温育 1 小时。
6. 同上洗板5次,每孔加50µl底物溶液 (务必加双氧水),37℃温育15分钟。
每孔再加50µl终止液终止反应,立即在492nm波长下读取光吸收值(OD492nm值)。
五结果判定1. 试验认可标准每块板设 4 孔病毒抗原对照,病毒抗原对照不加任何血清,直接用PBST稀释至使用浓度,与血清/病毒抗原复合物同步加入ELISA板孔,50µl/孔,病毒抗原对照OD492nm 值应在1.5±0.5范围内。
阳性对照抗体效价应在1:1024±1滴度以内,阴性对照血清抗体效价应＜1:8。
2.病毒抗原对照平均OD492nm 值50%计算(临界值)抗原对照是4孔,弃去最高和最低OD492nm值,计算剩余2孔的平均OD492nm值,再除以2,即50%对照值。
该值即为临界值，表示阻断50%反应的对照OD492nm值。
3.结果判定以病毒抗原对照平均OD492nm 值的50%为临界值,被检血清稀释孔OD492nm值大于临界值的孔为阴性孔,小于或等于临界值的孔为阳性孔,阳性孔的OD492nm值等于临界值时所对应的稀释度为该份血清的抗体滴度。
例如病毒抗原对照平均OD492nm值为1.2,则其50%为0.60。
若某一待检血清在1:128时OD492nm值为0.6,则该份待检血清的抗体滴度为1:128 。
若临界值处于两个滴度之间 ,如处于1：64与1：128之间，则抗体滴度取中间值为1:9O。
定性检测中 , 两个重复孔只要有一孔为阳性孔 , 则抗体滴度判定为1:128, 两孔均为阳性孔 , 则判定为抗体滴度＞1:128 。
ELISA抗体效价≥1:128,判定为亚洲 1 型口蹄疫抗体阳性。
ELISA抗体效价与保护力的关系:牛、羊:抗体效价≥1:128,99% 保护；效价≤1:16, 不保护；效价在1:22-90之间,50%保护。
猪瘟抗原检测试剂盒Classical Swine Fever Virus Antigen Test kit(CSFVAg)概述猪瘟病毒(CSFV)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、边界病病毒(BDV)都是瘟病毒科黄病毒属的成员。
猪瘟病毒自从成为一种重要的病原体以来，给养猪业造成了巨大的经济损失，并引起猪的严重死亡。
感染高致病力猪瘟病毒后，猪在出现临床症状前会排出大量的病毒。
耐过急性或亚急性感染的动物会产生抗体并且不再散毒。
低致病力温和病毒会造成猪的隐性感染，病猪将会持续或间歇排出病毒直至死亡。
怀孕母猪与猪瘟病毒接触后可能通过胎盘感染胎儿。
先天性感染可能导致流产，木乃伊胎儿，死产和/或弱仔及畸形胎儿。
先天性感染低毒力病毒的结果是产出持续性感染的仔猪，仔猪出现免疫耐受，不表现任何症状向外排毒。
猪也有可能感染BVDV或BDV。
尽管这些感染通常呈温和经过并且是自限性的，但将它们同猪瘟病毒有效区分是很重要的。
原理本ELISA检测试剂盒是用来检测外周血白细胞、全血、细胞培养物以及组织样本中的猪瘟病毒抗原。
采用双抗体夹心ELISA，将CSFV单克隆抗血清包被微量反应板，可与样品中的CSEV抗原结合。
猪瘟病毒的特异性单克隆抗体形成了夹心的上层。
形成的单克隆抗体+样品+单克隆抗体夹心可以用辣根过氧化物酶标记物检测。
加入与辣根过氧化物酶反应的底物，在酶的作用下形成有色产物。
通过酶标仪测定其吸光度。
可以用450nm单波长或450nm 与620m双波长测定各孔吸光度。
试剂本试剂盒采用96孔板，可以一次检测92个样品(每个样品1孔，每个对照2孔)或46个样品(每个样品2孔，每个对照2孔)；或分6次使用，每次用2个板条，设2个对照，测定6个样品(每个样品2孔)。
为了检测结果的准确性，最好每个样本都设重复。
试剂数量1、多克隆羊抗血清包被板条8孔×12条(96孔)2、10倍浓缩样品稀释液(10x) 55ml足以配制550mL直接使用的1x稀释液3、10倍浓缩洗涤液(10x) 125ml足以配制1、25L直接使用的洗涤液工作浓度(1x)4、CSFV单克隆抗体，含防腐剂4ml5、阳性对照，含有防腐剂 1.5ml6、阴性对照，含有防腐剂 1.5ml7、100倍浓缩辣根过氧化物酶标记物(100x)，辣根过氧化物酶标记抗鼠IgG，含有防腐剂200μl8、酶标抗体稀释液15ml9、底物液，TMB/H2O2溶液12ml10、终止液，1M HCI(小心，强酸) 12ml注意事项1、仔细阅读并遵守操作说明；2、试剂盒试剂于2～7℃冷藏保存。
建议将浓缩的洗涤液(10x)保存在18～25℃室温，以免形成结晶。
3、所有试剂在使用前必须恢复至室温。
4、未使用的包被板应该密封保存在配备的塑料袋中，于2～7℃冷藏保存。
5、不要将不同批次的说明书以及试剂盒成分混合使用。