黄芪甲苷对照品溶液稳定性考察报告

1.考察目的

本报告是依据《对照品溶液稳定性考察方案》及该实验室贮存环境来评估对照品溶液的稳定性，确定该溶液的有效期，为对照品溶液的合理使用提供依据。

2.仪器

对照品溶液稳定性考察实验过程中使用的设备：

3.考察步骤

3.1 对照品溶液稳定性考察过程中使用的对照品物质如下

3.2 测试过程

色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱

流动相的配制：乙腈-水（32: 68）为流动相；

检测器：蒸发光散射检测器

对照品溶液的配制：精密取黄芪甲苷对照品一定量于容量瓶中，用甲醇（色谱纯）定容至刻度，即得。

系统适用性试验结果：理论板数大于4000。

4.储存条件

考察用的对照品储存于容量瓶中，用封口胶封口。

考察用的对照品溶液储存在冰箱里，温度控制在2-8 C。

5.结论

每个测试时间点的结果都是用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值来重新计算用于考察期的对照品溶液的含量值。计算标准偏差。要求与零时间点的相对标准偏差不得过 2.0%

6.变更

变更申请人：批准人：

7.结论

总结人：批准人：

8.检测图谱数据（见后附页）。

XXXX公司

验证证书

报告名称：

验证证书编码：

验证完成日期：

上述验证项目已按验证方案进行验证，各项验证结果符合标准要求，予以批准。特此证明。

验证领导小组：年月日

注：1.变更应注明原因，变更相关人员进行申请。

2.验证报告发生变化应经过验证小组批准。

黄芪甲苷的测定方法

黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较黄芪甲苷为黄芪的主要活性成分之一。能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。近年来，对黄芪甲苷的含量测定方法的研究很多。本人就几种常用方法作一比较。 1高效液相色谱法(I-R_C法) HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。 1．1 HPLC—uv法黄芪甲苷属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。苏瑞强Ⅲ等采用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为97．52％，RSD为3．10％。 1．2 HPLC一示差折光检测法由于黄芪甲苷在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。 1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中黄芪甲苷的含量。色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。该法简便、稳定性好、重珊陆好、灵敏度高，且由于在流动相中加入磷酸，可使基线平稳，样品峰与其他峰达到基线分离。郑志仁等H将药材置索氏提取器提取1 h后采用RP—HPLC法测定提取液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Nueleosil c 18柱，流动相为乙腈一水(1：2)，检测波长为205rim。结果黄芪甲苷线性范围是l0．64～53．20I．L g／mL，加样回收率为92．66％。 1．4 HPLC—ELSD法蒸发光散射检测原理是使流动相溶剂喷雾汽化，进入加热管后溶剂挥发；被分析检测的物质颗粒经镭射光产生散射，散射光由光电倍增管收集得到响应，光散射检测器的响应大小决定由被分析物质的颗粒的数量和大小，而不受流动相溶剂的干扰；不要求被检测组分有特定的化学结构。赵灵芝等15]采用HPLC—ELSD法测定黄芪中黄芪甲苷的含量，以Blite—ODS柱为色谱柱，乙腈一水(36：64)为流动相，流速为0．8ml／rain；ELSD参数中漂移管温度为100℃，N 流速为2．74ml／min。结果黄芪甲苷线性范围是2．016～12．096g，加样回收率为97．43％，RSD为1．57％。该法灵敏度高，分离度好，干扰少，前处理简便，回收率高，重现性好。周春玲等对甲醇一水(4o：6o)、四氢呋喃一水(25：75)及乙腈一水(1：21等不同流动相进行了试验，并考察了黄芪甲苷的分离情况及检测灵敏度，同时通过观察峰面积、基线噪音和信噪比，研究了漂移管温度和气体流速等ELSD参数条件。结果表明，采用乙腈一水(1：2)为流动相时，分离情况最好；最佳的测定参数是漂移管温度为105 oC，气体流速为2．96L／rain；样品加样回收率为100．5％，RSD为3．23％。该法分离度好，精密度和重珊性俱佳，回收率高。 1．5 HPLC—MS法高效液相一质谱(HPLC—Ms)联用仪是当前天然药物的成分、药理与临床研究中最重要的联用仪器，能解决复杂成分样品的定性、定量问题。顾泳川等[61建立HPLC—MS法测定大鼠尿中黄芪甲苷的含量，并对其尿药动力学进行研究。采用Diamonsil TMC18柱为色谱柱；乙腈一水(40：60)为流动相；电喷雾离子化接口的四级质谱检测器，内标为地高辛，选择性离子检测(sIM1。实验中尿样加入地高辛混匀离心后，上清液通过已活化的固相萃取小柱，用3ml水淋洗，残渣用2ml甲醇洗脱，N：吹干后用流动相溶解。该法专属性好，方法灵敏度高，最低检测限为lOng／ml，杂质干扰小，操作简便，是检测体内黄芪甲苷的一种新型有效的分析方法。 2 薄层扫描法fLcs法) TLCS法多采用双波长扫描法，能消除有机成分的干扰及操作误差，使测定的灵敏度和准确度提高，一般有内标法和外标法。 2．1普通TLCS法实验中样品用氢氧化钾液提取除去酸性成分，以正丁醇萃取使背景干扰少，用大孔树脂分离皂苷除去样品中糖类等水溶性杂质，并在层析缸中放一小杯氨水，使斑点分离明显；采用硅胶G板，以氯仿一甲醇一水(65：35：lO) 为展开剂，在氨饱和蒸气环境下展开，喷以10％硫酸乙醇溶液后加热显色。加样回收率为97．39％，RSD为1．4％。将样品超声提取后，在硅胶GF254板上以氯仿一醋酸乙酯一甲醇(8：

士的宁标准品溶液稳定性验证方案和报告

编码：士的宁对照品变更生产厂家验证方案方案起草：_________________日期：年月日方案审核：__________________日期：年月日方案批准：__________________日期：年月日陕西香菊药业集团有限公司

1.目的：确定上海诗丹德生物技术有限公司生产的士的宁对照品是否可以用于替代中检院生产士的宁对照品，用于我公司郁金银屑片以及马钱子药材、马钱子粉含量测定使用。 2.背景：由于中检院生产的士的宁对照品于2015年下半年开始断货，至今不能采购到中检院生产对照品士的宁，而我公司用于郁金银屑片、马钱子药材、马钱子粉含量测定按照《中国药典》2015年版一部必须使用到士的宁标准品，因此通过本次验证来确定上海诗丹德生物技术有限公司所生产的标准品是否可以替代中检院生产的士的宁标准品，用于我公司郁金银屑片、马钱子粉、马钱子药材的含量测定。 3. 稳定性研究： .标签：用于对照品溶液变更厂家研究的的溶液瓶上需注明“用于对照品厂家变更验证，且必须注明生产厂家、对照品批号、称量重量、配置人、配置日期等相关信息”。 .对照品溶液配制：根据《中国药典》2015年版一部郁金银屑片、马钱子粉、马钱子药材的含量测定项下对照品溶液制备方法：取士的宁对照品适量，精密称量，加三氯甲烷制成每1ml含士的宁的溶液，再精密吸取2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含士的宁）。 .分析方法和接受标准: 3.3.1分析方法：色谱条件与系统适应性试验色谱条件与系统适应性以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈L庚烷磺酸钠与L磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值至）（21：79）为流动相；检测波长254nm。理论塔板数按士的宁峰计算应不低于5000。对照品溶液的制备取士的宁对照品适量，精密称量，加三氯甲烷制成每1ml 含士的宁的溶液，再精密吸取2ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。（每1ml中含士的宁）分别制备两份士的宁对照品溶液（贴上“对照品配置标签”），混匀，定容后对两份对照品溶液分析三次，三次检测峰面积数的RSD值不得过%，以中检院的士的宁对照品为对照测定上海诗丹德对照品的有效含量。通过测定含量与标示含量的差值分析是否可以替换中检院士的宁标准品。

2021年对照品稳定性研究报告

类别：确认报告编号：欧阳光明（2021.03.07）部门：质量管理部页码：共页，第页对照品稳定性确认报告版次：□新订□替代：实施日期：年月日授权：现授权下列部门拥有并执行本方案（复印数：）复印序列号：目录一、概述 1 确认目的 2 确认依据 3 确认计划 4 确认职责二、确认准备 1、确认所需文件 2、确认仪器、人员的检查

三、对照品稳定性考察内容 1、稳定性研究的对照品的标识 2、对照品溶液配制 3、对照品溶液储条件 4、测试时间点 5、程序和可接受标准 5.1 HPLC 对照品考察方法 5.2紫外分光光度法对照品考察方法 5.3 薄层扫描法对照品考察方法 5.4 GC 对照品考察方法四、验证结果评定与报告五、偏差变更一、概述 1、目的：本方案的目的是为了研究在方法中未规定有效期的对照品溶液的稳定性。 2、验证依据目前在药典和质量标准中均未规定对照品溶液的有效期，为保证分析的准确性，控制检验成本，因此在没有规定有效期的情况下我们来研究对照品溶液的稳定性，确定对照品溶液的有效期。对照品溶液的有效期适用于常规分析方法，我公司主要有液相、气相、薄层、紫外等方法。 3 验证时间安排验证时间安为 _____年_____月______日至_____ 年_____月______日。 1、 30ug/ml 栀子苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 2、 70ug/ml 芍药苷对照品稀乙醇溶液稳定性考察评定与报告表 3、 5ug/ml 阿魏酸对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 4、 0.75mg/ml 三七皂苷Rb1、0.75mg/ml 三七皂苷Rg1、0.15mg/ml 三七皂苷R1对照品的甲醇混合溶液稳定性考察评定与报告表 5、 80ug/ml 葛根素对照品30%的乙醇溶液稳定性考察评定与报告表 6、 0.4mg/ml 盐酸麻黄碱对照品的甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 7、 10ug/ml 黄芩苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 8、 15ug/ml 麝香酮对照品的无水乙醇溶液稳定性考察评定与报告表 9、 0.043mg/ml 芍药苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 10、 50ug/ml 红景天苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 11、 60ug/ml 黄芩苷对照品稀乙醇溶液稳定性考察评定与报告表

黄芪叶中黄芪甲苷含量测定论文

黄芪叶中黄芪甲苷含量测定论文黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿托毒等功效.黄芪药用价值很高，临床上常用来治疗非特异性免疫功能低下、乙肝和心血管系统疾病.黄芪甲苷作为黄芪成分之一，它具有降压、抗炎、稳定红细胞膜、提高血浆CAMP含量，促进小鼠再生肝DNA合成和增强免疫功能等多种作用.因此在研究黄芪过程中，我们对其成分黄芪甲苷进行了含量测定方法研究，本文用HPLC法测定黄芪甲苷的含量，其样品浓度的范围在0.01～0.2mg/ml之间与峰面积呈线性，该法灵敏度高，重现性好，可准确地测定黄芪甲苷的含量。 1仪器与试剂 Waters高效液相色谱仪：包括510型泵，991光电二极管阵列型检测器，U6K 型进样器；NECPowerMate型计算机，黄芪甲苷标准品购自辽宁省药品检验所。甲醇、正丁醇为分析纯，乙腈为色谱纯、水为去离子水。试验用黄芪叶6月份采自沈阳医学院草药园。 2方法与结果 2.1色谱条件色谱柱为NucleosilC18柱(4.6mm×250mm，5μm);流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8ml/min；检测波长为205nm；速度为0.4mm/min。 2.2标准曲线制作精密称取黄芪甲苷标准品2.128mg，加流动相定容至2ml，配制成1.064mg/ml的标准品溶液，分别以10、20、30、40、50μl进样测定，以峰面积对进样量作线性回归，得回归方程为Y＝－5.6×10-5＋6.9365×10-4X(Y为峰面积，X为黄芪甲苷量)，r＝0.9994，黄芪甲苷标准品在10.64～5 3.20μg范围内与峰面积呈良好线性关系。 2.3提取方法的选择用3种不同提取方法(索氏提取器提取1h；80℃温浸提取1h和超声波提取1h)提取样品，后2种提取方法测得黄氏甲苷含量略低，故选索氏提取器提取方法。 2.4流动相的选择实验试用多种溶剂系统，最后确定以乙腈-水＝1∶2为流动相，黄芪甲苷分离效果最好，保留时间也较适宜。色谱图见上图2(ABC)。 2.5样品液制备将黄芪叶阴干后研成粉过40目筛，然后精密称取5.00g，放置索氏提取器中，用100ml80%甲醇加热提取2h，提取液减压蒸去甲醇，用20ml

药物稳定性试验指导原则(2015版药典)分析

范围：药物制剂。责任：检验员、QA监控员、化验室主任、质保科科长、质量部负责人。内容：稳定性试验的目的是考察原料药或药物制剂在温度、湿度、光线的影响下随时间变化的规律，为药品的生产、包装、贮存、运输条件提供科学依据，同时通过试验建立药品的有效期。稳定性试验的基本要求是：（1）稳定性试验包括影响因素试验、加速试验与长期试验。影响因素试验用1批原料药进行。加速试验与长期试验要求用3批供试品进行。（2）原料药供试品应是一定规模生产的。供试品量相当于制剂稳定性实验所要求的批量，原料药物合成工艺路线、方法、步骤应与大生产一致。药物制剂的供试品应是放大试验的产品其处方与生产工艺应与大生产一致。药物制剂如片剂、胶囊剂，每批放大试验的规模，片剂至少应为10 000片，胶囊剂至少应为10 000粒。大体积包装的制剂如静脉输液等，每批放大规模的数量至少应为各项试验所需总量的10倍。特殊剂型、特殊品种所需数量，根据具体情况另定。(3)供试品的质量标准应与临床前研究及临床试验和规模生产所使用的供试品质量标准一致。(4)加速试验与长期试验所用供试品的包装应与上市产品一致。(5)研究药物稳定性，要采用专属性强、准确、精密、灵敏的药物分析方法与有关物质(含降解产物及其他变化所生成的产物)的检查方法，并对方法进行验证，以保证药物稳定性试验结果的可靠性。在稳定性试验中，应重视降解产物的检查。（6）由于放大试验比规模生产的数量要小，故申报者应承诺在获得批准后，从放大试验转入规模生产时，对最初通过生产验证的3批规模生产的产品仍需进行加速试验与长期稳定性试验。本指导原则分两部分，第一部分为原料药，第二部分为药物制剂。 1.原料药原料药要进行以下试验。 1.1影响因素试验此项试验是在比加速试验更激烈的条件下进行。其目的是探讨药物的固有稳定性、了解影响其稳定性的因素及可能的降解途径与降解产物，为制剂生产工艺、包装、贮存条件与建立降解产物的分析方法提供科学依据。供试品可以用一批原料药进行，将供试品置适宜的开口容器中(如称量瓶或培养皿)，摊成≤5mm厚的薄层，疏松原料药摊成≤10mm厚薄层，进行以下

液相色谱对照品或者标准品溶液稳定性验证方案

GMP文件验证篇盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案方案编号: SOP-COD0400 年月

验证方案审批表验证方案名称盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案验证方案编号SOP—COD0400 方案起草人起草日期方案审核部门审核人审核日期审核意见化验室质量部批准意见批准人批准日期执行日期

盐酸小檗碱对照品溶液有效期验证方案目录 1.目的 2.背景 3.稳定性研究 .标签 .对照品溶液配制 .贮存条件 .测试时间点 .分析方法和接受标准 4.参考文件 5.结果报告 6.附件

1.目的：确定盐酸小檗碱对照品溶液的有效期。 2.背景：因药典中没有规定对照品溶液的有效期，因此，对于没有规定有效期的盐酸小檗碱对照品溶液进行4个月的研究，来观察其稳定性，并规定其内部使用有效期。本方案适用于常规方法—高效液相色谱法。 3. 稳定性研究： .标签：用于对照品溶液效期研究的溶液瓶上需注明“用于对照品溶液效期研究”。 .对照品溶液配制：根据《中国药典》2010版一部中药成方制剂—黄连上清片的含量测定项下对照品溶液制备方法。 .贮存条件：按规定将配制好的盐酸小檗碱对照品溶液用封口膜封好，放在2～8℃的冰箱内贮存。注意：用于分析前需放置至室温。 .测试时间点：分别在0天、7天、14天、30天、2个月、3个月、4个月内测试。 .分析方法和接受标准: 3.5.1分析方法：高效液相色谱法。色谱条件与系统适应性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈L磷酸二氢钾溶液（35：65）为流动相；检测波长345nm,理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000. 对照品液的制备取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成1 ml含20ug的溶液。分别制备两份盐酸小檗碱对照品溶液（贴上“用于对照品溶液效期研究”的贴签），在零时间点，对两份对照品溶液分析两次，互相复核含量。在零时间点以外的测试时间点，分别新鲜配制一份对照品溶液，并用新鲜配制的对照品溶液和用于研究效期的两份对照品溶液分析两次。用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值，来重新计算用于研究效期的两份对照品溶液的含量值。

对照品溶液稳定性研究操作规程

山东xx制药有限公司对照品溶液稳定性研究报告文件类别：操作文件颁发部门：质量管理部持有部门：分发号：生效日期：分发部门：中心检验室、质量管理部

1.目的：为研究检验方法中未规定效期的对照品溶液的稳定性，特制定此规程。 2.范围：本规程适用于检验方法中未规定效期的对照品溶液。 3.依据：《药品生产质量管理规范》、《中华人民共和国药典》、《确认与验证管理规程》以及各品种质量标准。 4.责任：质量控制部部长、QC主管、QC检验员对规程的实施负责。 5.正文： 5.1.稳定性研究方案：各品种检验中使用的对照品溶液如需在一定时期内重复使用，QC检验员应制定稳定性研究方案，经组长或QC主管审核，质量控制部负责人批准后方可进行。稳定性研究方案中应明确对照品溶液的名称和浓度，配制过程、检测方法（包括检测前对照品溶液的稀释）、贮存条件、拟研究的时间及测试时间点等。稳定性研究方案应有编号，编制规则：P+方案制定日期（两位年两位月）+两位流水号，如：P120801：5.2.稳定性研究的实施： 5.2.1.标签：所有用于对照品溶液效期研究的溶液标签上都需标注“用于对照品溶液效期研究”。 5.2.2.对照品溶液配制：对照品溶液的配制应按品种规定的方法进行。 5.2.3.储存条件：对照品溶液一般密封储存在2～8℃冰箱内，用于验证分析前需放置至室温。在研究过程中对照品溶液应始终保存在指定的贮存条件下。 5.2.5.程序和接受标准 5.2.5.1.程序：分别制备两份对照品溶液，在零时间点，对每份对照品溶液分析两次，互相复核。在零时间点以外的测试时间点，新鲜配制一份对照品溶液。对新鲜配制的对照品溶液和用于研究效期的两份对照品溶液分析两次。用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值，来重新计算用于研究效期的两份对照品溶液的含量值。 5.2.5.2.接受标准：在每次分析前，观察测试用的对照品溶液与新鲜配制的对照品溶液的外观是否一致。如果溶液异常（如出现浑浊），则停止对照品溶液的测试。在零时间点，每份对照品溶液互相复核的结果相对偏差不得过1.0%。在每个分析测试点，对照品溶液的活性成分的含量与零点的相对偏差不得过1.0%。 5.3.验证结果评定与报告：对照品溶液效期研究结束后，QC 检验员需要起草报告总结分析数据，报告应有编号（将相应方案中的P替换为R）。报告经组长或QC主管审核、质量控制部负责人批准后，确定的有效期可以生效。QC检验员在有效期生效后应登记台账以便于查对。 5.4.如有必要，可在增加中期报告或进行进一步的稳定性研究。 6.附则： 6.1.相关文件：无。

HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量

HPLC法测定黄芪叶中黄芪甲苷的含量【摘要】目的建立一种准确、简便测定黄芪甲苷含量的分析方法。方法色谱柱为Nucleosil C18柱(4.6mm×250mm，5μm)；流动相为乙腈-水＝1∶2；流速为0.8ml/min；检测波长为205 nm；速度为0.4mm/min。灵敏度为0.1 AUFS,测定了黄芪甲苷的含量，平均回收率为96.1%，RSD为2.15%。结果样品浓度在0.01～0.2mg/ml之间与峰面积成良好的线性关系。结论本方法的重复性好、精密度高、稳定性强。【关键词】 HPLC 黄芪叶黄芪叶中黄芪甲苷【Abstract】 0bjective: Establishes one kind accurately, easily to determine Astragaloside the content the analysis method. Method: The chromatographic column is Nucleosil the C18 column (4.6mm×250mm,5μm); Flowing for methyl cyanide - water =1∶2; The speed of flow is 0.8ml/min; The examination wave length is 205 nm; The speed is 0.4mm/min. The sensitivity is 0.1 AUFS, has determined the Astragaloside content. The average returns-ratio is 96.1%, RSD is 2.15%. Result:Sample density in 0.01～0.2mg/ml becomes the good linear relationship with the peak area.Conclusion: This method's duplication is good, accuracy high, stable. 【Key words】 HPLC Leaf of the Astragalus Astragaloside 黄芪为常用中药，素有“补药之长”之称，具有益气固表，利尿

对照品溶液稳定性研究方案

对照品溶液稳定性研究方案 Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】

对照品溶液稳定性研究方案文件类型：方法研究编号：文件编号：﹡﹡ 页（）作者分析师：审核：主管/经理批准：质量部经理：签名：日期： 1.目的：本草案目的是为了研究在方法中未规定对照品溶液的效期饿稳定性。 2.背景目前，在药典中没有规定对照品溶液的效期（部分方法研究报告中提供对照品溶液的效期）。因此，对于没有规定有效期的对照品溶液可以研究至少一个月的时间，来确定对照品溶液的稳定性。对于对照品溶液的研究适用于常规分析方法，例如液相，气相，薄层，紫外等分析方法。 3.稳定性研究：标签所有用于对照品溶液效期的溶液标签上都需要标注“用于对照品溶液效期研究”。对照品溶液配制

对照品溶液的配制遵循相应的分析方法。储存条件对照品溶液密封储存在2～8℃冰箱中（其他储存条件需在总结报告中说明），用于验证分析前需放置至室温。测试时间点测试时间可以用参照下表，更改的时间点需在总结报告中说明。备注：×=测试点，【×】=可选择点程序和接受标准方法分别制备两份对照品溶液，在零时间点，对每份对照品溶液分析两次，互相复核。在零时间点以外的测试时间点，新鲜配制一份对照品溶液。对新鲜配制的对照品溶液和用于研究效期的两份对照品溶液分析两次。用新鲜配制的对照品溶液的平均响应值，来重新计算用于研究效期的两份对照品溶液的含量值。在每次分析前，观察测试用的对照品溶液与新鲜配制的对照品溶液的外观是否一致。如果溶液异常（如出现浑浊），或者色谱图中出现显着的杂质峰，则停止对照品溶液的测试。在每次分析前，必须首先保证系统满足方法的系统适应性（如重复性，拖尾因子，分离度，理论塔板数等等）。在零时间点，每份对照品溶液互相复核的结果不得过。在每个分析测试点，对照品溶液的活性成分的含量与零点的差异不得过。 UV方法

黄芪甲苷对照品溶液有效存储期限的验证

黄芪甲苷对照品溶液有效存储期限的验证发表时间：2016-10-12T10:47:16.447Z 来源：《医药前沿》2016年10月第28期作者：吴海英邓金明徐智雷黄一[导读] 可见通过此条件储存的黄芪甲苷对照品溶液储备液，在一个月内可以用于黄芪甲苷含量测定，且可以保证检测的准确性。（浙江爱生药业有限公司浙江杭州 310018）【摘要】目的：验证黄芪甲苷对照品溶液（0.2mg/ml）在特定的储存条件下储存一个月。方法：对黄芪甲苷含量检测的准确性方法分别将制备两份供试品溶液A、B，在第1天（配制当天）与新鲜配置的0.2mg/ml黄芪甲苷对照品溶液进行色谱分析。在第7、14、21、28、35天同样将供试品溶液A、B进行色谱分析。结果：两份对照品储备液在各个时间点所检测的外观与供试品相比，没有出现异常情况；以及储备液在各时间点测得的含量与供试品相比，在第0天的绝对差值均小于2.0%，而各测试点与第一天的RSD值均小于2.0%。结论：将0.2mg/ml黄芪甲苷对照品溶液存储于棕色容量瓶，封口膜密封，2℃～8℃的冰箱中，在一个月内均可以用于检测黄芪甲苷含量，并可以保证检测的准确性。【关键词】黄芪甲苷对照品溶液；存储期限；验证【中图分类号】R94 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）28-0367-02 黄芪为豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根，其具有补气升阳，固表止汗，利水消肿，生津养血，行滞通痹，托毒排脓，敛疮生肌之功效，属于传统中药。黄芪用药已有2000多年的历史，应用十分广泛。黄芪最初的记载源于《神农本草经》[2]，被列为上品，功用为“主痈疽，久败疮，排脓止痛，大风癞疾，五痔，鼠疮，补序，小儿百病”；汉末张仲景的《伤寒杂病论》中，使用防己黄芪汤治疗因表虚不固，外受风邪的“风湿”和“风水”证[3]；唐代孙思邈的著作《备急千金药方》[4]和《千金翼方》[5]中，含有黄芪的药方多至两百多剂；宋代官修医书《太平惠民和剂局方》中包含黄芪的人参养肺园方可用于治疗肺胃俱伤，气奔于上，客热熏肺，咳嗽气急[6]；南宋严用和著作《济生方》中的归脾汤，通过将黄芪、白术、茯苓、龙眼肉、枣仁、人参、木香、甘草等多味中药制成汤剂，用于补益心脾气血，治疗思虑过度，劳伤心脾，健忘怔忡的症状[7]。黄芪现归于2015年版《中国药典》一部，根据其中所规定的中药材标准，采用的含量测定方法是将供试品与黄芪甲苷对照品溶液和毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品溶液通过高效液相色谱法进行含量测定与对比[1]。本研究即是在考虑了黄芪作为传统中药的广泛使用率，以及黄芪甲苷对照品溶液的极大需求量，而通过试验，对黄芪甲苷对照品溶液的存储期限进行探索性验证。 1.试剂与仪器 1.1 试剂黄芪甲苷对照品（中国食品药品检定研究院提供，编号：110781-201314）、供试品溶液（存于棕色瓶中，封口膜密封，在2℃～8℃冰箱中贮存一个月内的2mg/ml的黄芪甲苷溶液）、色谱甲醇（国药集团化学试剂有限公司提供）、纯化水（浙江爱生药业有限公司提供）1.2 仪器液相色谱仪（安捷伦Agilent 1260 Infinity）、蒸发光散射检测器（Alltech蒸发光散射检测器ELSD-2000）、FA2104分析天平（上海横平仪器仪表厂） 2.实验方法方法 2.1 供试品溶液的制备制备2份供试品溶液A、B。精密称取黄芪甲苷对照品10mg(称取量不能少于10mg)，置50ml容量瓶中，加甲醇适量，振摇溶解，用甲醇稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液。存于棕色瓶中，封口膜密封，2℃～8℃冰箱中贮存。用前取出。待溶液温度升至室温后使用。 2.2 对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。 2.3 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水（75:25）为流动相；用蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于5000。 2.4 试验方法取制备的两份供试品溶液与新鲜配制一份浓度为0.2mg/ml的黄芪甲苷对照品溶液，在零时间点（第1天，即配制当天），精密吸取对照品溶液5μl、20μl与供试品溶液A、B各20μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算。在零时间点以外的测试点（第7天、第14天、第21天、第28天、第35天），将供试品溶液A、B按照上述流程，注入液相色谱仪，测定计算，即得。 3.结果与分析 3.1 零时间点液相结果表1 供试品零时间点液相色谱结果

黄芪甲苷的测定方法

黄芪甲苷含量测定几种常用方法的比较为黄芪的主要活性成分之一。能抗炎降压、镇痛镇静和促进再生肝DNA水平。现代药理研究表明，黄芪甲苷具有改善白细胞变形能力、改善心肌收缩及舒张功能、促进胰岛素分泌和清除自由基等药理作用。近年来，对的含量测定方法的研究很多。本人就几种常用方法作一比较。 1高效液相色谱法(I-R_C法) HPLC法因其分离度好、灵敏性高，适用范围广等优点，已广泛用于黄芪甲苷的含量测定、稳定性、药理和临床研究中。 1．1 HPLC—uv法属于四环三萜类皂苷，紫外末端吸收f max200．8 nm)。紫外检测灵敏度低，干扰因素多，目前 HPLC法是最常用的检测器是紫外检测器。苏瑞强Ⅲ等采用 HPLC法测定黄芪甲苷的含量，色谱柱为YWG—C18柱0．9 mm x250 mm，5 m)，流动相为乙腈一水(1：2．3)，检测波长为 203nm，结果线性范围为0．86—5．27 I,L g／mL，加样回收率为 97．52％，RSD为3．10％。 1．2 HPLC一示差折光检测法由于在紫外区仅有微弱的末端吸收，溶剂噪音对结果有较大的影响，且其前处理繁杂。池玉梅等四应用HPLC示差折光检测法测定黄芪精 12I服液中黄芪甲苷的含量，色谱柱为Hypersi|ODS 2(4．6ram X 200ram，5 I,Lm)，流动相为甲醇一水(67：33)，结果黄芪甲苷线性范围是1-5 g／ml，回收率为98．1％，RSD为2．02％。该法简单方便，重现性好，灵敏度高，结果准确、可靠。 1．3 RP—HPLC法路玫等[3j采用RP—HPLC法测定黄芪注射液中的含量。色谱柱为Nova—PakC18柱0．9ram xl5Omm，4la,m)，流动相为乙腈一水一磷酸(1：2：O．1)，检测波长为203nm，柱温为40％。实验中将样品蒸干，采用水饱和的正丁醇溶解，用氨试液洗涤后蒸干，残渣用甲醇溶解。结果加样回收率为94．7％，RSD为2．6％。该法简便、稳定性好、重珊陆好、灵敏度高，且由于在流动相中加入磷酸，可使基线平稳，样品峰与其他峰达到基线分离。郑志仁等H将药材置索氏提取器提取1 h后采用RP—HPLC法测定提取液中的含量，色谱柱为Nueleosil c 18柱，流动相为乙腈一水(1：2)，检测波长为205rim。结果黄芪甲苷线性范围是l0．64～ 53．20I．L g／mL，加样回收率为92．66％。 1．4 HPLC—ELSD法蒸发光散射检测原理是使流动相溶剂喷雾汽化，进入加热管后溶剂挥发；被分析检测的物质颗粒经镭射光产生散射，散射光由光电倍增管收集得到响应，光散射检测器的响应大小决定由被分析物质的颗粒的数量和大小，而不受流动相溶剂的干扰；不要求被检测组分有特定的化学结构。赵灵芝等15]采用HPLC—ELSD法测定黄芪中的含量，以Blite—ODS柱为色谱柱，乙腈一水(36：64)为流动相，流速为0．8ml ／rain；ELSD参数中漂移管温度为100℃，N 流速为2．74ml／min。结果黄芪甲苷线性范围是2．016～ 12．096g，加样回收率为97．43％，RSD 为1．57％。该法灵敏度高，分离度好，干扰少，前处理简便，回收率高，重现性好。周春玲等对甲醇一水(4o：6o)、四氢呋喃一水(25：75)及乙腈一水 (1：21等不同流动相进行了试验，并考察了的分离情况及检测灵敏度，同时通过观察峰面积、基线噪音和信噪比，研究了漂移管温度和气体流速等ELSD参数条件。结果表明，采用乙腈一水(1：2)为流动相时，分离情况最好；最佳的测定参数是漂移管温度为105 oC，气体流速为2．96L／rain；样品加样回收率为100．5％，RSD为3．23％。该法分离度好，精密度和重珊性俱佳，回收率高。 1．5 HPLC—MS法高效液相一质谱(HPLC—Ms)联用仪是当前天然药物的成分、药理与临床研究中最重要的联用仪器，能解决复杂成分样品的定性、定量问题。顾泳川等[61建立 HPLC—MS法测定大鼠尿中黄芪甲苷的含量，并对其尿药动力学进行研究。采用Diamonsil TMC18柱为色谱柱；乙腈一水 (40：60)为流动相；电喷雾离子化接口的四级质谱检测器，内标为地高辛，选择性离子检测(sIM1。实验中尿样加入地高辛混匀离心后，上清液通过已活化的固相萃取小柱，用3ml水淋洗，残渣用2ml甲醇洗脱，N：吹干后用流动相溶解。该法专属性好，方法灵敏度高，最低检测限为lOng／ml，杂质干扰小，操作简便，是检测体内的一种新型有效的分析方法。 2 薄层扫描法fLcs法) TLCS法多采用双波长扫描法，能消除有机成分的干扰及操作误差，使测定的灵敏度和准确度提高，一般有内标法和外标法。 2．1普通TLCS法实验中样品用氢氧化钾液提取除去酸性成分，以正丁醇萃取使背景干扰少，用大孔树脂分离皂苷除去样品中糖类等水溶性杂质，并在层析缸中放一小杯氨水，使斑点分离明显；采用硅胶G板，以氯仿一甲醇一水(65：35：lO) 为展开剂，在氨饱和蒸气环境下展开，喷以10％硫酸乙醇溶液后加热显色。加样回收率为97．39％，RSD为1．4％。将样品超声提取后，在硅胶GF254板上以氯仿一醋酸乙酯一甲醇 (8：6：0．8)展开，254 BITI紫外光灯下定位，双波长( s=228 nm， It=370 nm)反射式锯齿扫描测定，平均加样回收率为 99．5％，RSD为2．5％。

黄芪中黄芪甲苷的含量测定技术

龙源期刊网 https://www.360docs.net/doc/5a3435882.html, 黄芪中黄芪甲苷的含量测定技术作者：刘伟来源：《中国科技博览》2013年第33期论文摘要：目的建立荧光分析法测定黄芪药材中黄芪甲苷的含量方法。方法利用大茴香酸在硫酸介质中与黄芪甲苷反应产生强烈荧光的特性进行测定黄芪中黄芪甲苷含量。结果最大激发波长Ex为320 nm，最大发射波长Em为387nm。测定样品的平均回收率为97.22%，RSD=2.31%（n=5）。结论该方法灵敏度高，选择性好，结果无干扰，可广泛应用于黄芪药材的质量控制。主题词：黄芪黄芪甲苷中图分类号：R927.2 黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.var.mongholicu（Bge.）Hsiao或膜荚黄芪A.membranaceus（Fisch.）Bge的干燥根，具有补气固表、利尿脱毒，排脓，敛疮生肌等功效。黄芪为常用中药，在中药制剂中以黄芪为君药的产品非常多，因此如何控制黄芪的质量至关重要。黄芪甲苷是黄芪主要有效成分之一，也是黄芪皂苷中具有代表性的单体，在抗衰老、调节免疫功能、保护心肌和大脑缺血等多方面具有显著作用。黄芪甲苷仅在200 nm处有末端吸收，对HPLC色谱法紫外检测器检测不利，噪音对结果影响较大，灵敏度也较低。2005年版《中国药典》采用蒸发光散射检测器测定，具有分离度好，应用范围宽，流动相无干扰等优点，但操作繁琐，价格昂贵，不利于制药公司及基层医疗单位普及。本文根据浓硫酸条件下黄芪甲苷与大茴香酸反应产物具有荧光的特性，采用荧光分光光度法测定不同产地、不同生长年限黄芪药材中黄芪甲苷的含量，以期为黄芪的质量控制提供客观的定量评价依据。 1 仪器与试药 Perkin Elmer instruments LS45 Luminesence Spectrometer（美国PerkinElmer 公司LS45型荧光分光光度计），HX-200A型高速中药粉碎机，万分之一电子天平 FA/JA 1004型。72%的硫酸溶液，2%大茴香酸的无水乙醇溶液，石油醚、氯仿、正丁醇（三者均为天津市东丽区天大化学试剂厂产品），甲醇（天津市科密欧化学试剂开发中心产品），无水乙醇（天津市耀华化学试剂有限责任公司产品），以上试剂均为分析纯。黄芪甲苷对照品购于中国药品生物制品检定所（批号110781-200613）。黄芪药材采集或购于山西，内蒙两省，经山西中医学院中药鉴定教研室牛燕珍副教授鉴定为蒙古黄芪。 2 方法和结果

对照品稳定性研究报告

类别：确认报告编号：部门：质量管理部页码：共页，第页对照品稳定性确认报告版次：□新订□替代：实施日期：年月日授权：现授权下列部门拥有并执行本方案（复印数：）复印序列号：

目录一、概述 1 确认目的 2 确认依据 3 确认计划 4 确认职责二、确认准备 1、确认所需文件 2、确认仪器、人员的检查三、对照品稳定性考察内容 1、稳定性研究的对照品的标识 2、对照品溶液配制 3、对照品溶液储条件 4、测试时间点 5、程序和可接受标准 5.1 HPLC 对照品考察方法 5.2紫外分光光度法对照品考察方法 5.3 薄层扫描法对照品考察方法 5.4 GC 对照品考察方法四、验证结果评定与报告五、偏差变更 1、 30ug/ml 栀子苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 2、 70ug/ml 芍药苷对照品稀乙醇溶液稳定性考察评定与报告表 3、 5ug/ml 阿魏酸对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 4、 0.75mg/ml 三七皂苷Rb1、0.75mg/ml 三七皂苷Rg1、0.15mg/ml 三七皂苷R1对照品的甲醇混合溶液稳定性考察评定与报告表 5、 80ug/ml 葛根素对照品30%的乙醇溶液稳定性考察评定与报告表 6、 0.4mg/ml 盐酸麻黄碱对照品的甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 7、 10ug/ml 黄芩苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 8、 15ug/ml 麝香酮对照品的无水乙醇溶液稳定性考察评定与报告表 9、 0.043mg/ml 芍药苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 10、 50ug/ml 红景天苷对照品甲醇溶液稳定性考察评定与报告表 11、 60ug/ml 黄芩苷对照品稀乙醇溶液稳定性考察评定与报告表

对照品溶液稳定性确认方案

对照品溶液稳定性确认方案编号:VDP-DZP-001-00 对照品溶液名称：起草人：起草日期：审核人：审核日期：批准人：批准日期：

1.目的：本草案目的是为了研究在HPLC含量测定特定存放条件下方法中未规定对照品溶液的有效期稳定性。 2.背景：目前，在2015版《中国药典》中没有规定对照品溶液的有效期。对照品因量小价格昂贵，为获取企业利润最大化，避免不必要的费用支出。因此，对于没有规定有效期的对照品溶液研究至少需要半年的时间，来确定对照品溶液的稳定性。对于对照品溶液的研究适用于常规分析方法，例如液相，气相，薄层，紫外等分析方法。 3.稳定性研究： 3.1标签所有用于对照品溶液效期的溶液标签上都需要标注“用于对照品溶液效期研究”。 3.2对照品溶液配制对照品溶液的配制遵循相应的分析方法。称样量大于10mg，先配制成贮备液，再用溶剂稀释至规定的浓度范围。 3.3储存条件

对照品溶液密封储存在2～8℃冰箱中（其他储存条件需在总结报告中说明），用于验证分析前需放置至室温。 3.4测试时间点对照品溶液存放6个月时或7个月时。 3.5程序和接受标准 3.5.1 HPLC方法 3.5.1.1对照品溶液的制备我单位制定对照品溶液的使用期限为半年，所以需对首次配制的对照品溶液在存放6个月后进行标定。具体方法为：用新配制的对照品溶液对存放6个月、7个月的对照品溶液进行标定。新配制的对照品溶液连续进5针做系统性实验，将6个月或7个月前配制的对照品溶液作为样品进行含量测定。 3.5.1.2接受标准在每次分析前，观察测试用的对照品溶液与新配制的对照品溶液的外观是否一致。如果溶液异常（如出现浑浊），或者色谱图中出现显著的杂质峰，则停止对照品溶液的测试。在每次分析前，必须首先保证系统满足方法的系统适应性（如重复性，拖尾因子，分离度，理论塔板数等）。在6月或7月测定的含量与在零月的含量差异不超过5.0%，判定结果为对照品溶液在6个月内含量稳定。计算时以0月配制的浓度为依据。在6月或7月测定的含量与在零月的含量差异超过5.0%时，判定结果为对照品溶液在6个月内含量降解。同时用新标定的浓度和0月时的配制浓度计算校正因子。在0～6月使用该对照品溶液时，计算该对照品溶液浓度时以0月配制的浓度乘以校正因子为依据。 4参考文件：《中国药典》2015年版四部、药品GMP指南《质量控制实验室与物料系统》P91-P97。5结果报告：对照品溶液效期研究报告结束后，需要起草研究报告总结分析数据。在对照品溶液稳定性研究记录复核后，报告经主管领导签字后，新的效期可以执行。如必要，可以增加中期报告，或进行进一步的稳定性研究。 6.附件：

固相萃取高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量_图文(精)

usHIzHEN MEDIcINE AND MATERIA MEDIcA REsEARcH 2007vo L.18No.1时珍国医国药2007年第18卷第l期固相萃取一高效液相色谱法测定黄芪中黄芪甲苷的含量杨克迪,李宏,龙云飞,郑智慧,万顺刚 (广西大学化学化工学院,广西南宁 530004 摘要:目的采用固相萃取.高效液相色谱方法分析黄芪中黄芪甲苷的含量。方法采用c。。固相萃取小柱纯化黄芪提取物中的黄芪甲苷,反相高效液相色谱一紫外检测方法测定黄芪中黄芪甲苷含量。色谱柱为zorbax sB-C。。柱 (彬.6mm×150mm,5汕m,以乙腈.水(32:68为流动相,流速1.O mL/min,柱温30℃,检测波长200nm。结果黄芪甲苷进样量在 1.408—7.04灿g范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.9999。平均回收率为101.5%。结论该方法操作简便,重现性好,可作为黄芪药材或其它含黄芪制剂中黄芪甲苷含量的分析方法。关键词:固相萃取; 高效液相色谱;黄芪甲苷中图分类号:R284.2文献标识码:A 文章编号:1008旬805(200701抑04lml Detemi勰tion of AstragalosideⅣin Radix As加酗髓by SPE?HPLC YANG Ke—di,LI Hong,LONG Yun.fbi,ZHENG Zhi—hui,WAN Shun—gang (Jsc^ooZ矿吼em趣哪。凡d醌em渤Z西柳聘Peri噌,G“口,移i踟泐邝妙,№肌i昭530004,劬i凡口 Abstract:Ob.iective To establish SPE.HPLC method for the dete彻ination of as￡嘴aloside IV in Radix As￡m鼬执Methods The astragaloside IV in sample was purified with Cl R solid phase column and its content was determined wi出HPLC.UV metho(1.The astragaloside IV was sep啪ted 0n a zorba【SB-C18column(‘p4.6mm x 150mm,5斗mwith acetonitrile—water(32:68,v/v as mobile phase,and the detective wavelen#尊h

高效液相色谱仪测定黄芪中的黄芪甲苷含量

1摘要本文建立了一种根据《中国药典》2015版要求，测定中药饮片黄芪中黄芪甲苷苷含量的高效液相色谱方法，按中国药典条件，适当调整柱温，苦杏仁苷保留时间RSD%在0.17%，峰面积RSD%为1.64%。关键词：中药饮片黄芪黄芪甲苷 E800型蒸发光散射检测器高效液相色谱黄芪甲苷是一种从黄芪上提取出来的高纯度药物，有“超级黄芪多糖”之称。黄芪甲苷能增强机体免疫力、提高机体的抗病能力。黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用，还有些是黄芪多糖无法比拟的作用，其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多，抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。由于含量少，效果好，更是有“超级黄芪多糖”之称。图1 黄芪甲苷结构式 2检测部分 2.1仪器本实验使用赛那尔H6000高效液相色谱仪系统。具体配置为H6000系列的两台输液泵、一台E800蒸发光散射检测器、一台柱温箱溶剂管理器和spark Alias自动进样器；sainaer色谱工作站。 2.2 分析条件色谱柱：岛津WondaSil C18 Superb 5um 流动相：乙腈：水=32:68（V/V）流速：1ml/min 柱温：35℃ 气体流量：2.8L/min 蒸发温度：75℃ 进样量：10μL 等度洗脱

2.3 标准品溶液的配制和样品处理标准品品溶液的制备取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，即得。样品溶液的制备取干燥的黄芪切片，粉碎后，取中粉约4g，精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流4小时，提取液回收溶剂并浓缩至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml，合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水5ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径为1.5cm，柱高为12cm），以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液，继用70%乙醇80ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即制得黄芪样品溶液。 3结果 3.1 标样的色谱图图2 0.5mg/ml标准品色谱图