高三一轮复习学生作业：第十四单元第1讲 基因工程的基本工具与操作程序 Word版含解析
第1讲基因工程的基本工具与操作程序一、单项选择题1. (2016·无锡一模)下列有关基因工程的叙述,正确的是( )A. 限制性核酸内切酶只在获得目的基因时使用B. 重组质粒的形成是在细胞内完成的C. 目的基因必须整合到受体细胞的DNA中才能复制D. 通过基因工程育种可以定向地改造生物的性状2. 关于限制性核酸内切酶的叙述,不正确的是( )A. 这类酶主要是从原核生物中分离出来的B. 这类酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列C. 大多数这类酶的识别序列由6个核苷酸组成D. 这类酶在识别序列的中心轴线处切开时产生的是黏性末端3. (2016·南通一模)限制性内切酶Hin dⅢ和XhoⅠ的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,下列相关叙述正确的是( )A. 两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同B. 两种限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCTC. 分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒D. 实验中可通过控制反应时间、酶的浓度等控制酶切效果4. (2016·泰州一模)将经过扩增的DNA和质粒用相同的限制酶进行如下图所示的切割,电泳得到纯净的B片段和D片段,将两种片段置于适宜的缓冲液中用DNA连接酶处理。
如果只考虑两个片段的环状连接,则能形成不同核苷酸序列的环状DNA的种类是( )A. 6种B. 3种C. 2种D. 1种5. (2016·天津五校联考)为达到相应目的,必须通过分子检测的是( )A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B. 产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D. 21三体综合征的诊断6. (2016·扬州一模)下列关于核酸分子杂交和抗原—抗体杂交的叙述,正确的是( )A. 核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交B. 抗原—抗体杂交的原理为碱基互补配对原则C. 核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录D. 抗原—抗体杂交常以目的基因产物作为抗体7. (2016·连云港调研)质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内。
某细菌质粒上的标记基因如下图所示,通过标记基因可以推知外源基因(目的基因)是否转移成功。
外源基因插入的位置不同,细菌在培养基上生长情况也不同,下图示外源基因在质粒中可插入的位置有a、b、c点。
某同学根据实验现象对其插入的位点进行分析,其中分析正确的是( )实验现象在含四环素培养基上生长情况能生长8. (2015·重庆卷)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是( )A. 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得B. 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C. 借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来D. 启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用9. (2016·南京二模)用限制酶Eco R Ⅰ、KpnⅠ和二者的混合物分别降解一个1000 bp(1 bp即1个碱基对)的DNA 分子,降解产物分别进行凝胶电泳,在电场的作用下,降解产物分开,凝胶电泳结果如下图所示。
该DNA分子的酶切图谱(单位:bp)正确的是( )10. (2016·南师附中)如下页图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中Pst Ⅰ、SmaⅠ、Eco RⅠ、ApaⅠ为四种限制酶。
下列说法错误的是( )A. 图示过程是基因工程的核心步骤B. 构建基因表达载体时需要用到限制酶SmaⅠC. 抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来D. 除图示组成外,基因表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构二、多项选择题11. (2016·东海模拟)切割DNA的工具是限制酶,主要是从原核生物中分离纯化而来,DNA连接酶可将DNA片段连接起来。
下列有关限制酶和DNA连接酶的叙述,正确的是( )A. 限制酶种类很多,一种限制酶可以识别不同的核苷酸序列B. 在原核生物中,限制酶的作用是切割异源DNA,保护自身安全C. DNA连接酶按其来源分有两类:E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶D. E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端12. (2013·江苏卷)小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应,为了克服这个缺陷,可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因)后再重组表达。
下列相关叙述正确的是( )A. 设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列B. 用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列C. PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶D. 一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞13. (2014·广东卷)利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示,下列叙述正确的是( )A. 过程①需使用逆转录酶B. 过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因C. 过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞三、非选择题14. (2016·南京一模)白僵菌可感染农业害虫,常作为防治害虫的菌剂。
由于白僵菌对除草剂草丁膦敏感,且杀死害虫的能力较弱,科研人员对其进行基因工程改造,流程如下图所示。
请回答:(1)从苏云金芽孢杆菌中获取的毒蛋白基因,通过技术可在体外大量扩增。
该扩增过程需要种引物,所需添加的酶是。
(2)图中形成重组质粒1过程需要的限制酶是,其作用是破坏DNA分子中的。
(3)将重组质粒2导入经处理成为感受态的白僵菌。
一段时间后用含有的平板培养基进行筛选,获得含有Bar基因的重组白僵菌。
(4)科研人员将重组白僵菌喷涂于植物叶片上,以此饲喂饥饿处理的害虫,记录单位时间内的,以判断重组白僵菌的杀虫效果。
15. (2016·常州一模)我国科学家屠呦呦因青蒿素的研究荣获2015年诺贝尔生理学和医学奖。
青蒿素是目前世界上最有效的治疗疟疾药物,为青蒿植株的次级代谢产物,其化学本质是一种萜类化合物,其生物合成途径如图1所示。
正常青蒿植株的青蒿素产量很低,难以满足临床需求,科学家为了提高青蒿素产量,将棉花中的FPP合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达,获得了高产青蒿植株,过程如图2所示。
请回答:图1图2(1)研究人员从棉花基因文库中获取FPP合成酶基因后,可以采用技术对该目的基因进行大量扩增,该技术除了需要提供模板和游离的脱氧核苷酸外,还需要提供、等条件。
(2)图2中的①为,形成过程中需要等酶;棉花FPP合成酶基因能够和质粒连接成①的主要原因是。
(3)若②不能在含有抗生素Kan的培养基上生存,则原因是。
(4)由题意可知,除了通过提高FPP的含量来提高青蒿素的产量外,还可以通过哪些途径来提高青蒿素的产量?(试举一例)。
第1讲基因工程的基本工具与操作程序1. D【解析】构建基因表达载体时用同种限制酶切割目的基因和质粒;重组质粒的形成是在细胞外完成的,然后再导入受体细胞;重组质粒上有复制原点,不整合到受体细胞的DNA中也可复制;由于目的基因是已知的基因,可以定向地改变生物的性状。
2. D【解析】限制性核酸内切酶在识别序列的中心轴线两侧将DNA片断切开时,产生的是黏性末端。
3. D【解析】限制性内切酶Hin dⅢ和XhoⅠ的识别序列均为6个,所以在DNA中出现的概率相同,均为1/46;两者切出的黏性末端分别为—AGCT和—TCGA;由于黏性末端不同,故用两种酶切割目的基因和质粒后不能形成重组质粒。
4. A【解析】只考虑两个片段的环状连接,能形成的环状DNA有B片段与B片段同向连接的、B片段与B片段反向连接的、D片段与D片段同向连接的、D片段与D片段反向连接的、B片段与D片段同向连接的及B片段与D片段反向连接的,共6种。
5. B【解析】可通过将受体菌接种在含链霉素的培养基中筛选携带链霉素抗性基因的受体菌,A错误;抗人白细胞介素的杂交瘤细胞应通过抗原—抗体杂交技术筛选产生,B正确;在棉花田中人工放入害虫可检验转基因抗虫棉的抗虫效果,C错误;可利用显微镜检测21三体综合征,D错误。
6. C【解析】核酸分子杂交可以是两条脱氧核苷酸链的杂交,也可以是DNA单链和RNA的杂交;抗原—抗体杂交的原理是抗体能与对应的抗原发生特异性结合;核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录;抗原—抗体杂交中目的基因产物常作为抗原。
7. B【解析】根据题意和图示分析可知:a是抗四环素基因,如果外源基因插入到a中,会破坏此基因结构,使细菌在含有四环素的培养基上不能生长;b是抗青霉素基因,如果外源基因插入到b中,会破坏此基因结构,使细菌在含有青霉素的培养基上不能生长。
8. C【解析】由于胰岛素基因只在胰岛B细胞中表达,因此在肝细胞中无胰岛素基因的转录产物mRNA,A错误;胰岛素基因的转录启动于启动子,而不是复制原点,B错误;抗生素抗性基因可作为标记基因在含有抗生素的培养基中将受体细胞筛选出来,C正确;终止密码子位于mRNA上,不位于DNA上,启动子和终止子均在胰岛素基因的转录中起作用。
9. C【解析】根据限制酶KpnⅠ切割后,降解产物只有一种,推测该DNA分子是环状DNA,且只有1个KpnⅠ识别位点。
根据限制酶Eco RⅠ切割后,降解产物为200 bp和800 bp,推测该DNA分子上有2个Eco RⅠ识别位点。
再根据限制酶Eco RⅠ和KpnⅠ混合切割,得到200 bp和400 bp两种片段,选项C的图谱是合理的。
10. B【解析】图示过程为基因表达载体的构建过程,是基因工程中的核心步骤;构建过程中需要将目的基因完整切割下来,此时要用到限制酶PstⅠ、Eco R Ⅰ;抗卡那霉素基因是标记基因,目的是便于鉴定和筛选含有目的基因的细胞;基因表达载体包括启动子、目的基因、终止子和标记基因等。
11. BCD【解析】限制酶具有专一性,能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开;DNA连接酶据来源的不同可分为E·coli DNA连接酶和T4 DNA连接酶,其中E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌,T4 DNA连接酶来源于T4噬菌体,E·coli DNA连接酶只能连接黏性末端,T4DNA连接酶还可以连接平末端。
12. BD【解析】设计的引物应能与表达载体两端的序列进行互补配对;PCR方法扩增目的基因只需要知道基因两端的序列进而设计合适的引物即可,而不必知道其全部序列;PCR中应用耐高温的DNA聚合酶;根据目的基因的编码产物选择合适的受体细胞,以利于基因的表达。
高三生物一轮复习 第十四单元 第1讲 基因工程的基本工具与操作程序作业
付兑市石事阳光实验学校第1讲基因工程的基本工具与操作程序一、单项选择题1. (2016·一模)下列有关基因工程的叙述,正确的是( )A. 限制性核酸内切酶只在获得目的基因时使用B. 重组质粒的形成是在细胞内完成的C. 目的基因必须整合到受体细胞的DNA中才能复制D. 通过基因工程育种可以向地改造生物的性状2. 关于限制性核酸内切酶的叙述,不正确的是( )A. 这类酶主要是从原核生物中分离出来的B. 这类酶能够识别双链DNA分子的某种特核苷酸序列C. 大多数这类酶的识别序列由6个核苷酸组成D. 这类酶在识别序列的中心轴线处切开时产生的是黏性末端3. (2016·一模)限制性内切酶Hin dⅢ和XhoⅠ的识别序列及切割位点分别为A↓AGCTT和C↓TCGAG,下列相关叙述正确的是( )A. 两种限制酶的识别序列在DNA分子中出现的概率不同B. 两种限制酶切割形成的黏性末端都是—AGCTC. 分别用这两种酶切割目的基因和质粒后能形成重组质粒D. 中可通过控制反时间、酶的浓度控制酶切效果4. (2016·一模)将经过扩增的DNA和质粒用相同的限制酶进行如下图所示的切割,电泳得到纯净的B片段和D片段,将两种片段置于适的缓冲液中用DNA连接酶处理。
如果只考虑两个片段的环状连接,则能形成不同核苷酸序列的环状DNA 的种类是( )A. 6种B. 3种C. 2种D. 1种5. (2016·五校)为达到相目的,必须通过分子检测的是 ( )A. 携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B. 产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选C. 转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴D. 21三体综合征的诊断6. (2016·一模)下列关于核酸分子杂交和抗原—抗体杂交的叙述,正确的是( )A. 核酸分子杂交是指两条脱氧核苷酸链的杂交B. 抗原—抗体杂交的原理为碱基互补配对原则C. 核酸分子杂交可检测目的基因的存在和转录D. 抗原—抗体杂交常以目的基因产物作为抗体7. (2016·)质粒是基因工程中最常用的载体,它存在于许多细菌体内。
高三一轮复习生物：基因工程的基本操作程序课件
基因工程的基本操作程序
1.目的基因的获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定
阅读教材第8-11页，思考以下问题： 1. 什么是目的基因？ 2. 获么？其概念、原理、结果分别是什么？ 6. PCR需要哪些条件？ 7. PCR的大致过程是？ 8. 什么情况下可以用人工合成法合成DNA？
三、将目的基因导入受体细胞
阅读教材12-13页，思考以下问题： 1. 什么是转化？ 2. 基因工程中的受体细胞有哪些？ 3. 用什么方法将目的基因导入受体细胞？ 4. 农杆菌转化法利用了农杆菌的什么特性？ 5. 农杆菌转化法的操作过程？
6. 用花粉管通道法导入受体细胞的目的基因需要和载体结 合吗？
花粉管通道法
植物花粉在柱头 上萌发后，花粉管要 穿过花柱直通胚囊。 花粉管通道法就是在 植物受粉后，花粉形 成的花粉管还未愈合 前，剪去柱头，然后， 滴加DNA（含目的基 因），使目的基因借 助花粉管通道进入受 体细胞。
转基因抗虫棉
2. 将目的基因导入动物细胞
方法：显微注射法
具有全 能性
目的基因表达载体提纯cDNA的构建某种生物某个时期的mRNA
逆转录酶
cDNA（单链DNA）
DNA聚合酶
双链DNA
与运载体连接分基因的比较类型 大小cDNA小
基因组大基因中启动子无
有
基因中内含子
无
有
基因多少
某种生物的部分基因 某种生物的全部基因
2.基因表达载体的组成：
复制原点＋启动子＋插入基因＋终止子＋标记基因
复制原点：
DNA复制从特定部位开 始，这一部位叫复制 原点。原核生物只有 一个复制原点，真核 生物有多个复制原点。
高三生物一轮复习基础练习：基因工程的基本工具和基本操作程序
基因工程的基本工具和基本操作程序练习一、选择题1.某同学拟用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA连接酶为工具，将目的基因(两端含相应限制酶的识别序列和切割位点)和质粒进行切割、连接，以构建重组表达载体。
限制酶的切割位点如图所示。
下列重组表达载体构建方案合理且效率最高的是( )A.质粒和目的基因都用酶3切割，用E.coli DNA连接酶连接B.质粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA连接酶连接C.质粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA连接酶连接D.质粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA连接酶连接2.图甲、乙中的箭头表示三种限制性内切核酸酶的酶切位点，Amp R表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。
下列叙述错误的是( )A.在构建重组质粒时，可用PstⅠ和Hin dⅢ切割质粒和外源DNAB.在酶切过程中，不能破坏质粒中全部的标记基因C.若只用PstⅠ处理质粒和外源DNA分子片段，无法避免自身环化和反向连接D.导入重组质粒的大肠杆菌可以在含氨苄青霉素的培养基中生长3.用氨苄青霉素抗性基因(Amp R)、四环素抗性基因(Tet R)作为标记基因构建的质粒如图所示。
用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒，构建基因表达载体(重组质粒)，并转化到受体菌中。
下列叙述错误的是( )A.若用Hin dⅢ酶切，目的基因转录的产物可能不同B.若用PvuⅠ酶切，在含Tet(四环素)培养基中的菌落，不一定含有目的基因C.若用SphⅠ酶切，可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否D.若用SphⅠ酶切，携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落4.“DNA粗提取与鉴定”实验的基本过程是：裂解→分离→沉淀→鉴定。
下列叙述错误的是( )A.裂解：使细胞破裂释放出DNA等物质B.分离：可去除混合物中的多糖、蛋白质等C.沉淀：可反复多次以提高DNA的纯度D.鉴定：加入二苯胺试剂后即呈现蓝色5.提取DNA时，向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水并搅拌，过滤后所得滤液进行下列处理后再进行过滤，在得到的滤液中加入特定试剂后容易提取出DNA相对含量较高的白色丝状物的处理方式是( )A.加入适量的木瓜蛋白酶B.37～40 ℃的水浴箱中保温10～15分钟C.加入与滤液体积相等的、体积分数为95%的冷却的酒精D.加入NaCl调节浓度至2 mol/L→过滤→加入NaCl调节浓度至0.14 mol/L6.下列关于DNA粗提取与鉴定的叙述，错误的是( )A.用同样方法从等体积兔血和鸡血中提取的DNA量相近B.DNA析出过程中，搅拌操作要轻柔以防DNA断裂C.预冷的乙醇可用来进一步纯化粗提的DNAD.用二苯胺试剂鉴定DNA需要进行水浴加热二、非选择题7.用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。
高考必刷题基因工程的基本工具和操作程序 含答案
基因工程的基本工具及操作程序1某重点实验室课题研究组欲将一株野生杂草的抗病基因转给一双子叶农作物．该农作物含有高茎基因，植株过高容易倒伏，科学家欲通过基因工程操作抑制高茎基因的表达．基于上述目的科学家进行了基因工程的相关操作，结合所学知识分析下列问题：（1）课题研究组已经获得了抗性基因，欲体外大量扩增该目的基因需采用__ _技术，该技术的基本反应过程：目的基因受热变性后解链为单链，_ __与单链相应互补序列结合，然后在__ _的作用下进行延伸．（2）基因工程操作的核心是_ __，该过程用到的工具酶有__ _．本研究中，欲将目的基因转入受体细胞，常采用__ _法．答案：（1）PCR引物Taq酶（热稳定性DNA聚合酶）（2）基因表达载体的构建DNA连接酶和限制酶农杆菌转化3 RT-PCR是将RNA逆转录（过程Ⅰ）和cDNA的聚合酶链式扩增反应（过程Ⅱ）相结合的技术，具体过程如图1所示，图2为某兴趣小组设计的引物。
请分析回答下列问题：（1）过程Ⅰ主要涉及的酶是______。
进行过程Ⅱ的反应体系中常用的酶是______，二者都能催化______键的形成。
（2）过程Ⅰ和过程Ⅱ利用的原料______（填“相同”或“不同”或“不完全相同”）。
一般情况下，引物A和B的长度越长，G和C比例越高，则过程Ⅱ内循环步骤中的______（填“变性”或“退火”或“延伸”）温度设定就越高。
（3）该兴趣小组实验后发现几乎不能得到扩增产物，据图2分析其原因是__ ____。
改正后，过程Ⅱ中拟对m个单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上至少需要____ __个引物B。
（4）利用RT-PCR技术获取真核生物的目的基因通过转基因技术______（选填“可以”或“不可以”）在原核细胞中正确表达。
2答案：（1）逆转录酶Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）磷酸二酯（2）相同退火（3）引物B自身会出现局部碱基互补配对（自身折叠）而失效m×（2n-1）（4）可以5 将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图．请据图回答：（1）获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在______酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在______作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的______序列，推测出响应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的______序列，再通过化学方法合成所需基因．（2）利用PCR技术扩增DNA时，需要在反应体系中添加的有机物质有______、______、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成．（3）由A和载体B拼接形成的C通常称为______．（4）在基因工程中，常用Ca2+处理D，其目的是___ ___．答案：（1）逆转录；DNA聚合酶；氨基酸；脱氧核苷酸；（2）引物；模板（A基因）；（3）基因表达载体；（4）使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子；6 酵母菌的维生素、蛋白质含量高，可生产食品和药品等．科学家将大麦细胞的LTP1基因植入啤酒酵母菌中，获得的啤酒酵母菌种可产生LTP1蛋白，并酿出泡沫丰富的啤酒．基本的操作过程如下：（1）该技术定向改变了酵母菌的性状，这在可遗传变异的来源中属于_ __．（2）获取LTP1基因需要用到限制酶，此酶可以断开两个脱氧核苷酸间的___ （化学键）；然后用__ _技术扩增LTP1基因；为了将LTP1基因导入酵母菌细胞内，所用的运载体是质粒，除此之外，还有__ _和动植物病毒也可作为基因工程中的运载体．（3）此操作中可以用分别含有青霉素、四环素的两种选择培养基进行筛选，则有C进入的酵母菌在选择培养基上的生长情况是：在含有青霉素的培养基上_ __（能，不能）存活，在含有四环素的培养基上__ _（能，不能）存活．（4）C的组成部分中有一个叫做_ __，它是RNA聚合酶识别和结合部位．（5）除了看啤酒泡沫丰富与否外，还可以用__ _来检测LTP1基因在啤酒酵母菌中是否表达LTP1蛋白．答案：（1）基因重组（2）磷酸二酯键PCRλ噬菌体的衍生物（3）能不能（4）启动子（5）抗原-抗体杂交7 如图甲为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图．图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离，1Kb=1000个碱基对长度．请据图回答：（1）质粒A、C不能作为目的基因运载体的理由分别是_ __、__ _．（2）如果是两两重组，可能有___种长度的重组结果．（3）基因工程中检测筛选含有目的基因的重组质粒是一个重要的步骤．现运用_ __酶切质粒，完全酶切后进行电泳观察，若出现长度为1.1kb和__ _kb，或者_ __kb和_ __kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）．（4）将筛选含有目的基因的重组质粒导入大肠杆菌的载体可以是__ _（多选）．A．质粒B．动物病毒C．噬菌体D．植物病毒（5）PvuⅠ能识别的序列和切点是-G↓GATCC-请画出质粒被切割形成黏性末端的过程图．答案：（1）缺少标记基因复制原点被限制酶切割（2）3（3）EcoRⅠ5.6 3.1 3.6（4）A C（5）。
高考高考生物一轮复习专题一基因工程基因工程的基本工具、基因工程的基本操作程序课件新人教选修3
2．外源基因在受体内表达的理论基础 (1)________ 基因 是控制生物性状的独立遗传单位。
中心法则 (2)遗传信息的传递都遵循______________ 。
(3)生物界共用一套____________ 遗传密码 。 3．基因工程的基本工具 (1) 限 制 性 核 酸 内 切 酶 ： 切 割 DNA 的 工 具 是
复制 ，有一个 条件：能在宿主细胞中保存下来并大量_______
限制性核酸内切酶 切 割 点 ， 有 特 殊 的 遗 传 至 多 个 ___________________
_____________ 标记基因 ，便于筛选。
质粒 种 类 ： __________( 常用)、λ 噬菌体的衍生物、
______________ 动植物病毒 。
【典例精析】 【例 1】下列有关基因工程叙述错误的是( A ) A． 基本原理是 DNA 具有双螺旋结构以及遗传信 息传递和表达方式相同 B．最常用的载体是质粒 C． 工具酶主要有限制性核酸内切酶和 DNA 连接 酶 D．该技术人为地增加了生物变异的范围，实现 种间遗传物质的交换
【解析】基本原理是 DNA 具有双螺旋结构以及 生物共用一套遗传密码子，A 错误；基因工程中最常 用的载体是质粒，B 正确；基因工程所用工具酶主要 有限制性核酸内切酶和 DNA 连接酶，C 正确；基因 工程技术能人为地增了生物变异的范围 ，实现种间遗 传物质的交换，D 正确。
2.DNA 连接酶与 DNA 聚合酶的比较 DNA 连接酶 DNA 聚合酶 都是催化两个 作用实质 核苷酸之间形 成磷酸二酯键 是否需模板 不需要 需要 连接 DNA 链 单链 单链 将单个核苷酸加到 在两个 DNA 片 已存在的核酸片段 作用过程 段之间形成磷 的 3′端的羟基上， 形 酸二酯键 成磷酸二酯键 将存在的 DNA 作用结果 片段连接成重 合成新的 DNA 分子 组 DNA 分子
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栏 目 导 航
过基础 ·自我排查 抓核心 ·解疑释惑 验效果 ·随堂演练
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抓核心 ·解疑释 惑
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第1讲 基因工程的基本工具与操作程序
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析考情·明确考向
考查内容 等级要求 五年考情
素养体现
基因工程的
诞生
A
生命观念：熟练说出DNA 重组技术的基本工具及其
作用、特点；
科学思维：简述基因工程
2018年T32； 基本操作程序，以及各步 2017年T33； 骤的一般方法、原理，构
二、 基因工程的基本工具
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三、 基因工程的操作程序 1. 基本操作程序
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