第七章杂环类药物分析3-57页精品文档
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第7章杂环类药物的分析优秀课件
尼可刹米+CuSO4+硫氰酸钾 → 淡绿色絮状沉淀↓
（2）开环反应：适用于,’未取代，,γ 为烷基或羧基取代的
a. 戊烯二醛反应 ⅰ 溴化氰作用于吡啶环使环上氮原子由三价变 成五价 ⅱ 吡啶环水解生成戊烯二醛 ⅲ 与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物
CONHNH2
COONa
COOH
KMnO4 或Br2
N C H3
杂
N
环
类
吡啶类
N
喹啉类
托烷类
有机 酸酯 R
药 物
R
O
N
S
N
N
R2
R1
苯并二氮杂卓类
酚噻嗪类
第二节 吡啶类药物分析
一、结构分析 1. 结构：本类药物均有吡啶环
CONHNH 2
N
N
N
C2H5 CON
C2H5
吡啶
异烟肼
尼可刹米
2.性质： （1）母核能与金属盐反应生成有色沉淀 （2）碱性:吡啶环上氮原子具有叔胺性质，
CONHNH 2
COONa
NaOH
N
NCl
COONa
NO 2
NaOH
N CHOH NO 2
NO 2
COONa
N NO 2
NO 2
NO 2
2. 酰肼基团的反应
（1）还原反应：
CONHN2H 4e
N
COOH
+ N 2 N
常用的试剂：I2、Br2、KBrO3、AgNO3
（2）缩合反应：
与芳醛缩合形成腙 如香草醛、水杨醛、二甲氨基苯甲醛
(3)溴酸钾法：
操作： 异烟 肼K B r3O 滴 定 /强 酸 中甲基橙指示终
（2）开环反应：适用于,’未取代，,γ 为烷基或羧基取代的
a. 戊烯二醛反应 ⅰ 溴化氰作用于吡啶环使环上氮原子由三价变 成五价 ⅱ 吡啶环水解生成戊烯二醛 ⅲ 与芳伯胺缩合，生成有色的戊烯二醛衍生物
CONHNH2
COONa
COOH
KMnO4 或Br2
N C H3
杂
N
环
类
吡啶类
N
喹啉类
托烷类
有机 酸酯 R
药 物
R
O
N
S
N
N
R2
R1
苯并二氮杂卓类
酚噻嗪类
第二节 吡啶类药物分析
一、结构分析 1. 结构：本类药物均有吡啶环
CONHNH 2
N
N
N
C2H5 CON
C2H5
吡啶
异烟肼
尼可刹米
2.性质： （1）母核能与金属盐反应生成有色沉淀 （2）碱性:吡啶环上氮原子具有叔胺性质，
CONHNH 2
COONa
NaOH
N
NCl
COONa
NO 2
NaOH
N CHOH NO 2
NO 2
COONa
N NO 2
NO 2
NO 2
2. 酰肼基团的反应
（1）还原反应：
CONHN2H 4e
N
COOH
+ N 2 N
常用的试剂：I2、Br2、KBrO3、AgNO3
（2）缩合反应：
与芳醛缩合形成腙 如香草醛、水杨醛、二甲氨基苯甲醛
(3)溴酸钾法：
操作： 异烟 肼K B r3O 滴 定 /强 酸 中甲基橙指示终
杂环类药物分析3
地西泮
中国药典——艾司唑仑及其片剂
• 艾司唑仑的鉴别方法：
• 取本品约10mg，加盐酸溶液(1→2)15ml，
缓缓煮沸15分钟，放冷，加亚硝酸钠和 碱性β-萘酚试液，生成橙红沉淀
（四）分解后氯化物反应
• 有机氯化合物，用氧
瓶燃烧法破坏，生成
氯化氢，可显氯化物
Cl
CH3 O N N
反应
• 中国药典（2010年版）
吸收；在242nm波长处的吸光度约为0.51，
在284nm 波长处的吸光度约为0.23。
（六）红外吸收光谱法
三、杂质检查
有关物质
有关物质
• 生产或贮藏过程中引入的中间体、副产 物和分解产物 • 药典方法： – 薄层色谱法或高效液相色谱法检查 – 方法是？
实例：地西泮的【有关物质】
• 杂质：地西泮中杂质主要为合成中间体与分解 产物（去甲基安定、2-甲氨基-5-氯二苯甲酮） • 以及某些化学结构不清的有关物质 • 原料药物：检查方法——高效液相色谱法 • 地西泮片：检查方法 ——薄层色谱法
• 中国药典（2005年版）
• 地西泮及其片剂、注射液
• 艾司唑仑及其片剂、注射液 • 方法：高低浓度对比法
四、含量测定
• 含量测定方法
– 非水溶液滴定法、紫外分光光度法、
比色法、荧光法、色谱法等 • 能否将上述方法与药物的理化性质进行
联系？
• 中国药典（2010年版）
• 收载的主要方法为
• 非水溶液滴定法、分光光度法及色谱法
• 地西泮1位氮被取代，水解后不生成含芳伯氨
基的产物
水解后呈芳伯胺反应
氯氮卓和奥沙西泮加亚硝酸钠和碱性萘酚，生 成橙红色沉淀，其反应如下：
药物分析第七章 杂环类药物分析-第二节 吩噻嗪类药物的分析
二、性质
溶解性 盐酸异丙嗪在水中极易溶解，在乙醇或氯仿中易溶， 在丙酮或乙醚中几乎不溶。 盐酸氯丙嗪在水、乙醇或氯仿中易溶，在乙醚或苯
中不溶。
奋乃静在氯仿中极易溶解，在乙醇中溶解，在水中
几乎不溶；在稀盐酸中溶解。
返 回
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
二、性质
弱碱性 药物母核中的氮原子碱性极弱， 10位取代基的 烃胺 （-NR2）、哌嗪基及哌啶基具有一定的碱性。
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
结构 性质
鉴别
检查 含量测定
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
一、结构
苯并噻嗪的衍生物
7 8
6
5
S N R
43Biblioteka R` 291
10
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
一、结构
S Cl N CH2CHCH3N(CH3)2
· HCl
返
回
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
五、含量测定
非水滴定法
所用溶剂除酸性溶剂外，也有采用中性或近中性溶剂的。 加入抗坏血酸可防止高氯酸氧化某些吩噻嗪类药物，并可 使滴定终点的电位突跃更为敏锐。
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
五、含量测定
非水滴定法
吩噻嗪的盐酸盐类药物，须先加入过量的醋酸汞冰醋酸溶 液，消除盐酸的干扰，再用高氯酸滴定液滴定。 若测定片剂与注射液，因其赋形剂与稳定剂或助溶剂的干 扰，一般不能直接测定，需经碱化提取后再用本法测定。
奋乃静
加盐酸与水，加热至80℃，加入过
氧化氢溶液数滴，即显深红色；放 置后，红色渐褪去。
溶解性 盐酸异丙嗪在水中极易溶解，在乙醇或氯仿中易溶， 在丙酮或乙醚中几乎不溶。 盐酸氯丙嗪在水、乙醇或氯仿中易溶，在乙醚或苯
中不溶。
奋乃静在氯仿中极易溶解，在乙醇中溶解，在水中
几乎不溶；在稀盐酸中溶解。
返 回
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
二、性质
弱碱性 药物母核中的氮原子碱性极弱， 10位取代基的 烃胺 （-NR2）、哌嗪基及哌啶基具有一定的碱性。
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
结构 性质
鉴别
检查 含量测定
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
一、结构
苯并噻嗪的衍生物
7 8
6
5
S N R
43Biblioteka R` 291
10
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
一、结构
S Cl N CH2CHCH3N(CH3)2
· HCl
返
回
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
五、含量测定
非水滴定法
所用溶剂除酸性溶剂外，也有采用中性或近中性溶剂的。 加入抗坏血酸可防止高氯酸氧化某些吩噻嗪类药物，并可 使滴定终点的电位突跃更为敏锐。
第七章 杂环类药物分析
第二节 吩噻嗪类药物的分析
五、含量测定
非水滴定法
吩噻嗪的盐酸盐类药物，须先加入过量的醋酸汞冰醋酸溶 液，消除盐酸的干扰，再用高氯酸滴定液滴定。 若测定片剂与注射液，因其赋形剂与稳定剂或助溶剂的干 扰，一般不能直接测定，需经碱化提取后再用本法测定。
奋乃静
加盐酸与水，加热至80℃，加入过
氧化氢溶液数滴，即显深红色；放 置后，红色渐褪去。
杂环类药物的分析
干扰病毒装配
杂环类药物能够干扰病毒 装配，通过抑制病毒外壳 蛋白的组装，阻止病毒的 释放和扩散。
破坏病毒生命周期
杂环类药物能够破坏病毒 生命周期的不同阶段，从 而阻止病毒的生长和繁殖。
抗炎作用
抑制炎症介质
杂环类药物能够抑制炎症介质的产生和释放，从 而减轻炎症反应。
抑制炎症细胞活性
杂环类药物能够抑制炎症细胞的活性，从而减少 炎症介质的产生和释放。
心血管系统反应
如心悸、心律不齐、血压波动 等，可能与药物对心血管系统 的毒性作用有关。
血液系统反应
如贫血、白细胞减少、血小板 减少等，可能与药物对骨髓造
血功能的影响有关。
不良反应的防治措施
合理用药
遵循医嘱，避免超剂量或长期用药，注意药物的 相互作用和配伍禁忌。
定期检查
定期进行相关检查，监测药物对各系统的影响， 以便及时调整治疗方案。
详细描述
生化分析法主要包括酶联免疫法、生物芯片 技术、生物传感器等。该方法具有高选择性、 高灵敏度等优点，尤其适合于生物体内药物 浓度的测定，但制备生物活性物质的过程较 为复杂，且成本较高。
04 杂环类药物的药理作用
CHAPTER
抗肿瘤作用
抑制肿瘤细胞增殖
杂环类药物能够通过抑制肿瘤细 胞DNA和RNA的合成，阻止肿瘤 细胞增殖，从而发挥抗肿瘤作用。
抗菌
抗炎
一些杂环类药物具有抗菌作用，如磺胺嘧 啶、甲氧苄啶等，可用于治疗细菌感染。
一些杂环类药物具有抗炎作用，如塞来昔 布、依托考昔等，可用于治疗关节炎、痛 风等疾病。
02 杂环类药物的合成方法
CHAPTER
化学合成法
总结词
化学合成法是杂环类药物最常用的合成方法，通过有机化学反应将原料分子转化 为目标分子。
杂环类药物的分析文档讲课文档
CONHNH2 氨制 AgNO3
N
N2 + Ag
Ag+被还原生成Ag，产生黑色浑浊，在干净的试
管壁发生银-镜反应，气泡有氮气生成。
现在九页，总共三十八页。
2. 缩和反应 (Ch.P2010鉴别）
异烟肼＋香草醛
异烟腙（黄色结晶）
测定mp
水杨醛、对二甲氨基苯甲醛
现在十页，总共三十八页。
现在十一页，总共三十八页。
显氯化物反应。 Ch.P2010 地西泮的鉴别
现在三十八页，总共三十八页。
杂环类药物的分析文档
现在一页，总共三十八页。
2.性质：
（1）碱性:吡啶环上氮原子具有叔胺性质，
pKb=8.8（水中），非水滴定；
（2）异烟肼：酰肼基有强还原性, 与芳醛 缩合,氧化还原滴定或比色测定；
（3）尼可刹米:酰胺基在碱性下可水解,放 出NH(C2H5)2↑, 用于鉴别。
（4）VU吸收
现在二页，总共三十八页。
现在二十七页，总共三十八页。
三. 含量测定
1. 非水滴定法 2. 2.紫外分光光度法
现在二十八页，总共三十八页。
1、非水碱量法： 吩噻嗪类药物母核上氮原子碱性极弱, 不能进行滴定,10位取代基上N原子为
碱性,可在非水介质中以高氯酸标准液，
以结晶紫为指示剂。
现在二十九页，总共三十八页。
• 4、UV法：
若被氧化则有四个吸收峰，可用于判断样品 中有无氧化物。
现在二十六页，总共三十八页。
• 2. 显色反应：
(1) 母 核 氧 化 呈 剂 (樱 色 红 红)色 氧化剂：H2SO4、HNO3、FeCl3、H2O2
(2) 环上 S 的 F e 3或 CP l d2C l呈色
药分第7章 杂环类药物的分析
加2,4-二硝基氯苯、
乙醇、氢氧化钠
（紫红色）
还原反应 （肼类）
AgNO3+NH3·H2O 银镜反应
有 (TLC 高低浓度对照法)
• TLC 法 • UV法 • 比浊法：加水杨醛
乙醇液
先用甲醇配制供试
品溶液浓度为40mg/ml, 再稀释成0.4mg/ml和 0.04mg/ml对照液(1)和 (2)，三者同时点样， 如有杂质斑点，与(2)
比较主斑点，不得更 深；如有1个超过时， 应不深于对照溶液(1) 的主斑点。
HPLC 法 非水滴定法
UV法 含量=？ 溴酸钾法
甲基橙指示剂
碘量法
加过量I2 ,再用 Na2S2O3 滴定之
溴量法 加过量Br2，再用 I2 标准液滴定之
§2. 吩噻嗪类：
易氧化 呈色
能与Pd2+络合呈色
UV、IR 特征吸收
UV
鉴 别 试 验
氧瓶燃烧
呈Cl- 鉴别反应
硫酸-荧光 反应
沉淀反应
加碘化铋钾生成
水解后重氮化-
偶合反应
1) 加HCl、NaNO2、 2) 碱性 -萘酚（橙红色）
有关物质和降解产物检查
地西泮中杂质
氯氮卓中杂质
HPLC 法
HPLC 法 (自学) TLC高低浓度对照法
HPLC 法
含量 测定
比色 法 (max > 400nm)
异烟腙 (ftivazide)
分解产物反应
加NaOH或HCl 生成气体
UV
Koenig 反应
有色schiff碱
（戊烯二醛反应） （染料）
沉淀反应
加Hg2+、Cu2+ 形成沉淀
缩合反应 （肼类）
药物分析：杂环类药物的分析
UV、IR广泛应用
色谱鉴别法
该类药物结构相似，不易分离和鉴别， 因此，经常采用TLC进行分离和鉴别
三、含量测定
非水溶液滴定法 紫外分光光度法 色谱法
——原料药 ——本类药物制剂
2018/12/10
16
小结 苯并二氮杂卓类药物的分析
1．掌握该类药物主要的结构特点和性质：
（1）N杂原子—弱碱性
N HCH3
水解后为芳 伯氨基
N O
地西泮（安定）
CH3 O N Cl
二苯甲酮
水解后为芳 仲氨基
N
HO
O
甘氨酸—— 茚三酮反应
8
NH2
2018/12/10
一、结构与性质
苯并二氮杂卓母核 二氮杂卓七元环 —— 弱碱性，UV ——强酸溶液中可水解
H 、H 2O
地西泮 甘氨酸
氯氮卓 2 氨基 5 氯 二苯甲酮
注意
异烟肼、尼可刹米需处理后鉴别
醇制KOH
异烟肼 BP 【鉴别】 取本品适量，加乙醇5mL，加硼砂0.1g及5%的2,4－
二硝基氯苯乙醇溶液，置水浴中煮沸蒸干，继续加热10min，
残渣加甲醇10mL搅拌后，即显紫红色。
2018/12/10 28
沉淀反应 重金属盐类
取代基
O C NHNH2
酰肼基
还原性——氧化还原反应
与羰基试剂缩合反应
O C N(C2H5)2
N
CH3 CH3OOC H N CH3 COOCH3 NO 2
酰胺基
水解
N
硝基
2018/12/10
氧化性——还原后重氮化-偶合反应
24
二、鉴别试验
第7章杂环类药物的分析
11
（2）开环反应
* 中国药典中只用于尼可刹米的鉴别，所用 芳胺为苯胺
鉴别方法：取本品1滴，加水50ml，摇匀， 分取2ml，加溴化氰试液2ml与2.5%苯胺溶液 3ml，摇匀，溶液渐显黄色。
12
b. 2，4-二硝基氯苯反应
无水条件下，吡啶类药物与2,4－二硝基 氯苯混合共热，冷却后，加醇制氢氧化钾溶 液残渣，溶液呈紫红色
pKb与
羰基缩合,氧化还原滴定或比色测定； （4）尼可刹米:酰胺基碱性下可水解,放
出NH(C2H5)2↑,用于鉴别。
7
二、鉴别：
1. 母核反应：
（1）与金属离子反应生成有色沉淀
a.异烟肼,尼可刹米+HgCl2 → 白色沉淀↓ b.异烟肼+CuSO4 → 红棕色↓（Cu2O）
杂环类药物的分析 The Analysis of Hetero drugs
1
基本要求：
一、熟悉杂环类药物的基本结构和主要化学性质； 二、掌握杂环类药物的鉴别和含量测定的基本原
理与方法； 三、了解杂环类药物的特殊杂质的来源和检查方法。
2
第一节 概述
杂环: 环状有机化合物的碳环中夹杂有 其他非碳原子的环状结构叫做杂环
而盐酸环丙沙星则无荧光的特性，可用于本类药物的鉴别或区别。 3.红外吸收光谱特征
硫酸奎宁和盐酸环丙沙星在中国药典均采用红外光谱进行鉴别， 而硫酸奎尼丁未采用此法。
（三） 无机酸盐
* 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁中有硫酸根，显硫酸根的鉴别反应
* 盐酸环丙沙星中有盐酸根，显氯化物的鉴别反应
36
四、特殊杂质检查
* 喹核碱部分立体结构不同，旋光性、碱性和溶解性不同；
* 奎宁为左旋体，碱性大于奎尼丁，极性小于奎尼丁。
（2）开环反应
* 中国药典中只用于尼可刹米的鉴别，所用 芳胺为苯胺
鉴别方法：取本品1滴，加水50ml，摇匀， 分取2ml，加溴化氰试液2ml与2.5%苯胺溶液 3ml，摇匀，溶液渐显黄色。
12
b. 2，4-二硝基氯苯反应
无水条件下，吡啶类药物与2,4－二硝基 氯苯混合共热，冷却后，加醇制氢氧化钾溶 液残渣，溶液呈紫红色
pKb与
羰基缩合,氧化还原滴定或比色测定； （4）尼可刹米:酰胺基碱性下可水解,放
出NH(C2H5)2↑,用于鉴别。
7
二、鉴别：
1. 母核反应：
（1）与金属离子反应生成有色沉淀
a.异烟肼,尼可刹米+HgCl2 → 白色沉淀↓ b.异烟肼+CuSO4 → 红棕色↓（Cu2O）
杂环类药物的分析 The Analysis of Hetero drugs
1
基本要求：
一、熟悉杂环类药物的基本结构和主要化学性质； 二、掌握杂环类药物的鉴别和含量测定的基本原
理与方法； 三、了解杂环类药物的特殊杂质的来源和检查方法。
2
第一节 概述
杂环: 环状有机化合物的碳环中夹杂有 其他非碳原子的环状结构叫做杂环
而盐酸环丙沙星则无荧光的特性，可用于本类药物的鉴别或区别。 3.红外吸收光谱特征
硫酸奎宁和盐酸环丙沙星在中国药典均采用红外光谱进行鉴别， 而硫酸奎尼丁未采用此法。
（三） 无机酸盐
* 硫酸奎宁和硫酸奎尼丁中有硫酸根，显硫酸根的鉴别反应
* 盐酸环丙沙星中有盐酸根，显氯化物的鉴别反应
36
四、特殊杂质检查
* 喹核碱部分立体结构不同，旋光性、碱性和溶解性不同；
* 奎宁为左旋体，碱性大于奎尼丁，极性小于奎尼丁。
药物分析课件杂环
分类
根据结构特征和药理作用，杂环 类药物可以分为多个类别，如嘧 啶、嘌呤、喹啉、吩噻嗪等。
杂环类药物的结构特点
01
02
03
环状结构
杂环类药物通常具有环状 结构，由多个单键和双键 交替连接而成。
杂原子
在环状结构中，除了碳原 子外，还含有其他原子如 氮、氧、硫等，这些原子 称为杂原子。
取代基
杂环类药物中，环状结构 上可以连接不同的取代基， 这些取代基可以影响药物 的性质和药理作用。
随着新药研发技术的不断进步 和临床需求的日益增长，杂环
类药物的发展前景广阔。
面临的挑战主要包括药物研 发的高风险、高投入和长周 期，以及日益严格的监管要 求和知识产权保护问题。
未来发展需要加强跨学科合作， 推动技术创新，同时注重药物 的疗效、安全性和可负担性等
方面的综合评估。
THANK YOU
非肝药酶
除肝药酶外，其他组织如肠道、肾脏、肺等也含有代谢酶，对药物的代谢也有一定作用。
药物排泄机制与排泄途径
肾脏排泄
01
大多数药物及其代谢产物通过肾脏排泄，以尿液的形式排出体
外。
胆汁排泄
02
部分药物及其代谢产物通过胆汁排泄，进入肠道后随粪便排出
体外。
其他排泄途径
03
部分药物可通过汗液、乳汁等其他途径排泄。
杂环类药物是药物研发中的重要类别之一，具有独特的药理作用和良好的治疗效果。
针对杂环类药物的创新研究，主要集中在发现新靶点、优化药物分子结构、提高药 物选择性等方面。
技术突破包括计算机辅助药物设计、高通量筛选、基因组学和蛋白质组学等技术的 应用，有助于加速杂环类药物的研发进程。
杂环类药物的未来发展前景与挑战
根据结构特征和药理作用，杂环 类药物可以分为多个类别，如嘧 啶、嘌呤、喹啉、吩噻嗪等。
杂环类药物的结构特点
01
02
03
环状结构
杂环类药物通常具有环状 结构，由多个单键和双键 交替连接而成。
杂原子
在环状结构中，除了碳原 子外，还含有其他原子如 氮、氧、硫等，这些原子 称为杂原子。
取代基
杂环类药物中，环状结构 上可以连接不同的取代基， 这些取代基可以影响药物 的性质和药理作用。
随着新药研发技术的不断进步 和临床需求的日益增长，杂环
类药物的发展前景广阔。
面临的挑战主要包括药物研 发的高风险、高投入和长周 期，以及日益严格的监管要 求和知识产权保护问题。
未来发展需要加强跨学科合作， 推动技术创新，同时注重药物 的疗效、安全性和可负担性等
方面的综合评估。
THANK YOU
非肝药酶
除肝药酶外，其他组织如肠道、肾脏、肺等也含有代谢酶，对药物的代谢也有一定作用。
药物排泄机制与排泄途径
肾脏排泄
01
大多数药物及其代谢产物通过肾脏排泄，以尿液的形式排出体
外。
胆汁排泄
02
部分药物及其代谢产物通过胆汁排泄，进入肠道后随粪便排出
体外。
其他排泄途径
03
部分药物可通过汗液、乳汁等其他途径排泄。
杂环类药物是药物研发中的重要类别之一，具有独特的药理作用和良好的治疗效果。
针对杂环类药物的创新研究，主要集中在发现新靶点、优化药物分子结构、提高药 物选择性等方面。
技术突破包括计算机辅助药物设计、高通量筛选、基因组学和蛋白质组学等技术的 应用，有助于加速杂环类药物的研发进程。
杂环类药物的未来发展前景与挑战
第七章 杂环类药物的分析
与重金属离子的沉淀反应 药物 尼可刹米 异烟肼 异烟肼，尼 可刹米
2018/11/30
试剂 CuSO4 NH4SCN CuSO4 HgCl2
现象 草绿色↓ 淡绿色↓， 红棕色 白色↓
15
尼可刹米+CuSO4+硫氰酸铵 尼可刹米 异烟肼 + HgCl2 白色
草绿色
尼可刹米
ChP（2005）
【鉴别】（3）取本品 2 滴，加水 1 ml ，摇匀，加
H H3CO O
NO2 CO2CH3 CH3 NH CH3
分解物B
硝苯地平
2018/11/30 34
色谱条件与灵敏度调节 填充剂：十八烷基硅烷键合硅胶 流动相：甲醇-水（3 ：2）；检测波长：235nm。 取对照品溶液Ⅱ20μl注入液相色谱仪，调节检测 灵敏度，使杂质A和B组分色谱峰的峰高为满量程的20%； 杂质A和B组分之间，杂质B与硝苯地平之间的分离度均
本类药物的紫外特征吸收鉴别方法 溶 剂 λmax（nm） λmin（nm）
HCl（0.01mol/L） 水 HCl（0.01mol/L） NaOH（0.1mol/L） 265 266 263 255 260 333 — 234 — — — —
药
物
E1cm1% 约420 378 285 840 860 140
2018/11/30 11
二硝基氯苯反应（Vongerichten反应）
至熔融 吡啶及其衍生物+2,4-二硝基氯苯 或混合
醇制KOH 无水条 件
紫红色
采用本法鉴别异烟肼、尼可刹米时，需适 当处理，即将酰肼氧化成羧基或将酰胺水解为 羧基后进行鉴别。如异烟肼鉴别：
2018/11/30 12
•二硝基氯苯反应
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第七章 杂环类药物分析
第三节 苯并二氮杂卓类药物的分析
1,4-苯并二氮杂卓类药物
• 目前临床应用最广泛的镇静剂 • 中国药典（2019年版）收载的品种有地西
泮、硝西泮、盐酸氟西泮、氯硝西泮、奥 沙西泮、氯氮卓、艾司唑仑、阿普唑仑等 药物 • 多为地西泮的衍生物
一、结构与性质、分析方法的关系
地西泮（diazepam ）
• 可采用非水溶液滴定法测定含量。
水解性：
• 药物的环通常较稳定，但的确存在开环的情况 • 那么如何水解？
– 在强酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲 酮衍生物
– 水解产物所呈现的某些特性可供鉴别或含量 测定之用
紫外吸收
• 药物分子结构中有共轭体系吗？ –有 – 在紫外光区有吸收吸收。 – 依此鉴别或含量测定
缓缓煮沸15分钟，放冷，加亚硝酸钠和 碱性β-萘酚试液，生成橙红沉淀
（三）分解后氯化物反应
• 有机氯化合物，用氧
瓶燃烧法破坏，生成
氯化氢，可显氯化物
反应
Cl
• 中国药典（2019年版） 地西泮
CH3 O N
N
（四）与生物碱沉淀试剂反应
• 与碘化铋钾试液反应，生成橙红色沉淀 • 地西泮注射液
（五） 紫外吸收光谱
CH3 O N
Cl
N
艾司唑仑（estazolam ）
N N
N
Cl
N
主要理化性质
溶解性：
• 地西泮： – 丙酮或三氯甲烷中易溶，在乙醇中溶解 – 水中几乎不溶。
• 艾司唑仑 – 在醋酐或三氯甲烷中易溶，在甲醇中溶解 – 在水中几乎不溶。
弱碱性：
• 二氮杂卓七元环上的氮原子碱性如何？ – 具有强碱性 – 但与苯基并合后，其碱性降低
11. 硫酸—荧光反应为地西泮的特征鉴别 反应之一。地西泮加硫酸溶解后，在紫外 光下显
A. 红色荧光 B. 橙色荧光 C. 黄绿色荧光 D. 淡蓝色荧光 E. 紫色荧色
12. 某药物经酸水解后呈茚三酮反应，溶 液显紫色，该药为
A. 氯氮卓 B. 地西泮 C. 盐酸普鲁卡因 D. 阿司匹林 E. 尼可刹米
• 分析碱性杂环类药物时，由于硅胶表面硅醇基与 碱性药物发生吸附或离子交换作用，使碱性药物 色谱峰拖尾，保留时间过长，甚至无法洗脱。
• 在流动相中加入碱性试剂，调节流动相的pH在7~8 左右，可以改善分离效能
• pH范围为2~8
实例分析：地西泮注射液含量测定
详见教材
含量测定小结
• 非水碱量法： – 地西泮、艾司唑仑原料药
（二）氯化物
• 地西泮、艾司唑仑 • 信号杂质 • 检查方法——一般杂质检查
四、含量测定
• 含量测定方法 – 非水溶液滴定法、分光光度法、比色 法、荧光法、色谱法等
• 能否将上述方法与药物的理化性质进行 联系？
• 中国药典（2019年版） • 收载的主要方法为 • 非水溶液滴定法、分光光度法及色谱法
非水溶液滴定法
• 地西泮、艾司唑仑原料药 • 采用非水滴定法测定含量
（二）紫外分光光度法
• 中国药典 • 原料药:只有 奥沙西泮原料药 • 制剂：多数药物的
– 片剂含量均匀度、片剂溶出度的测定 – 均采用 紫外分光光度法。
实例
• 艾司唑仑片 溶出度的测定 • 地西泮 含量均匀度的测定 • 【实例分析】奥沙西泮的含量测定 自学
• 利用本类药物的 – 最大吸收波长， – 最大吸收波长处的吸光度或吸光度比值 – 进行鉴别
• 中国药典（2019年版）地西泮及其片剂
地西泮的紫外鉴别方法：
• 取本品，加0.5％硫酸的甲醇溶液制成每 1ml中含5μg的溶液，照分光光度法测定， 在242nm、284nm与366nm的波长处有最大 吸收；在242nm波长处的吸光度约为0.51， 在284nm 波长处的吸光度约为0.23。
（六）红外吸收光谱法
三、杂质检查
有关物质
有关物质
• 中间体、副产物或降解产物，结构不明 • 药典方法：
– 薄层色谱法或高效液相色谱法检查 – 方法是？
实例：地西泮的【有关物质】参见材• 杂质：合成过程中因其副反应引入N-去甲基苯 甲二氮卓以及某些化学结构不清的有关物质
• 原料药物：检查方法——高效液相色谱法
二、鉴别试验
（一） 荧光反应
• 苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸 • 苯并二氮杂卓类药物溶于稀硫酸 • 产生不同颜色的荧光物质
• 苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸后，在紫 外光（365nm）下，显示不同颜色的荧光。
• 地西泮为黄绿色、硝西泮显淡蓝色、 • 氯氮卓为黄色、 艾司唑仑显亮绿色
• 苯并二氮杂卓类药物溶于稀硫酸，在紫 外光（365nm）下，显示不同颜色的荧光
• 紫外分光光度法： – 奥沙西泮原料药， – 多数药物的片剂含量均匀度、片剂溶出度的测定
• 高效液相色谱法： – 地西泮注射液、艾司唑仑 注射液
小结
• 第一节 吡啶类药物的分析 • 第二节 吩噻嗪类药物的分析 • 第三节 苯并二氮杂卓类药物的分析 • 鉴别、杂质检查、含量测定
1. 下列药物中，哪一个药物加氨制硝 酸银能产生银镜反应
• 谁水解后会产生芳香第一胺？ • 氯氮卓、艾司唑仑和奥沙西泮等药物
– 氮未被取代，水解后生成含芳伯氨基的产物 • 地西泮氮被取代，水解后不生成含芳伯氨基的产
物
CH3 O N
Cl
N
N N
N
Cl
N
氯氮卓、艾司唑仑
中国药典——艾司唑仑及其片剂
• 艾司唑仑的鉴别方法： • 取本品约10mg，加盐酸溶液(1→2)15ml，
（三）高效液相色谱法
• 本法优点： – 有效地分离、测定苯并二氮杂卓类药 物及其分解产物
• 中国药典（2019年版） – 地西泮、艾司唑仑 注射液
反相高效液相色谱法
• 固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS） • 流动相系统：水-甲醇或水-乙腈系统 • 碱性试剂有二乙胺、三乙胺等
碱性试剂有二乙胺、三乙胺等
9. 中国药典(2019年版)中地西泮原料药中 有关杂质的检查法为
A. TLC B. HPLC C. GC D. 沉淀法 E. 显色法
10. 检查盐酸氯丙嗪中“有关物质”时， 采用的对照溶液为
A. 杂质的标准溶液 B. 标准“有关物质”溶液 C. 供试品溶液 D. 供试液的稀释溶液 E. 对照溶液
A. 地西泮 B. 阿司匹林 C. 异烟肼 D. 苯佐卡因 E. 苯巴比妥
2．用于吡啶类药物鉴别的开环反应有 A. 茚三酮反应 B．戊烯二醛反应 C．坂口反应 D. 硫色素反应
3. ChP（2019）异烟肼的含量测定方 法为
A. 溴酸钾滴定法 B. 溴量法
C. TCL
D. NaNO2 E. 比色法
• 地西泮为黄色、硝西泮为蓝绿色、 • 奥沙西泮为淡黄绿色、氯氮卓为紫色、 • 艾司唑仑为天蓝色。
地西泮片的鉴别方法：
• 取本品的细粉适量（约相当于地西泮 10mg），加丙酮10ml，振摇使地西泮溶 解，滤过，滤液蒸干，加硫酸3ml,振摇 使溶解，在紫外光灯(365nm) 下检视， 显黄绿色荧光
（二）水解后芳香第一胺反应
7．盐酸氯丙嗪的含量测定方法有（多选）
A. 中和法 B. 非水滴定法 C. 紫外法 D. 旋光法
8. 中国药典（2019年版）对盐酸异丙嗪注射液 的含量测定，选用299nm波长处测定，其原因 是
A. 299nm处是它的最大吸收波长 B. 为了排除其氧化产物的干扰 C. 为了排除抗氧剂的干扰 D．在299nm处，它的吸收系数最大 E. 在其他波长处，因其无明显吸收
4. 经溴化氰或溴水氧化后，可发生开环形 成戊烯二醛反应的药物为
A. 葡萄糖 B. 皮质酮 C. 维生素C D. 土酶素 E. 异烟肼
5. 异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的 降解反应而引入哪种杂质
A. 间氨基酚 B. 水杨酸 C. 对氨基苯甲酸 D. 游离肼 E. 其他甾体
6. 可用于异烟肼鉴别的反应有（多选） A. 与氨制硝酸银的反应 B. 戊烯二醛反应 C. 坂口反应 D. 硫色素反应
• 地西泮片：检查方法 ——薄层色谱法
【实例】艾司唑仑注射液的有关物质检查
参见教材
• 请注意： • 判断方法——供试品溶液色谱图中如有
杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对 照溶液的主峰面积
几乎所有的药物均进行有关物质检查
• 中国药典（2019年版） • 地西泮及其片剂、注射液 • 艾司唑仑及其片剂、注射液 • 方法：高低浓度对比法
13. 某药物经酸水解后可用重氮化—偶合 反应鉴别，此药物是
A. 盐酸氯丙嗪 B. 氯氮卓 C. 地西泮 D. 醋酸氢化可的松 E. 维生素C
• 14. 采用紫外分光光度法测定含量的原料是 （） A 地西泮 B 奥沙西泮 C 艾司唑仑 D 氯氮卓
第三节 苯并二氮杂卓类药物的分析
1,4-苯并二氮杂卓类药物
• 目前临床应用最广泛的镇静剂 • 中国药典（2019年版）收载的品种有地西
泮、硝西泮、盐酸氟西泮、氯硝西泮、奥 沙西泮、氯氮卓、艾司唑仑、阿普唑仑等 药物 • 多为地西泮的衍生物
一、结构与性质、分析方法的关系
地西泮（diazepam ）
• 可采用非水溶液滴定法测定含量。
水解性：
• 药物的环通常较稳定，但的确存在开环的情况 • 那么如何水解？
– 在强酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲 酮衍生物
– 水解产物所呈现的某些特性可供鉴别或含量 测定之用
紫外吸收
• 药物分子结构中有共轭体系吗？ –有 – 在紫外光区有吸收吸收。 – 依此鉴别或含量测定
缓缓煮沸15分钟，放冷，加亚硝酸钠和 碱性β-萘酚试液，生成橙红沉淀
（三）分解后氯化物反应
• 有机氯化合物，用氧
瓶燃烧法破坏，生成
氯化氢，可显氯化物
反应
Cl
• 中国药典（2019年版） 地西泮
CH3 O N
N
（四）与生物碱沉淀试剂反应
• 与碘化铋钾试液反应，生成橙红色沉淀 • 地西泮注射液
（五） 紫外吸收光谱
CH3 O N
Cl
N
艾司唑仑（estazolam ）
N N
N
Cl
N
主要理化性质
溶解性：
• 地西泮： – 丙酮或三氯甲烷中易溶，在乙醇中溶解 – 水中几乎不溶。
• 艾司唑仑 – 在醋酐或三氯甲烷中易溶，在甲醇中溶解 – 在水中几乎不溶。
弱碱性：
• 二氮杂卓七元环上的氮原子碱性如何？ – 具有强碱性 – 但与苯基并合后，其碱性降低
11. 硫酸—荧光反应为地西泮的特征鉴别 反应之一。地西泮加硫酸溶解后，在紫外 光下显
A. 红色荧光 B. 橙色荧光 C. 黄绿色荧光 D. 淡蓝色荧光 E. 紫色荧色
12. 某药物经酸水解后呈茚三酮反应，溶 液显紫色，该药为
A. 氯氮卓 B. 地西泮 C. 盐酸普鲁卡因 D. 阿司匹林 E. 尼可刹米
• 分析碱性杂环类药物时，由于硅胶表面硅醇基与 碱性药物发生吸附或离子交换作用，使碱性药物 色谱峰拖尾，保留时间过长，甚至无法洗脱。
• 在流动相中加入碱性试剂，调节流动相的pH在7~8 左右，可以改善分离效能
• pH范围为2~8
实例分析：地西泮注射液含量测定
详见教材
含量测定小结
• 非水碱量法： – 地西泮、艾司唑仑原料药
（二）氯化物
• 地西泮、艾司唑仑 • 信号杂质 • 检查方法——一般杂质检查
四、含量测定
• 含量测定方法 – 非水溶液滴定法、分光光度法、比色 法、荧光法、色谱法等
• 能否将上述方法与药物的理化性质进行 联系？
• 中国药典（2019年版） • 收载的主要方法为 • 非水溶液滴定法、分光光度法及色谱法
非水溶液滴定法
• 地西泮、艾司唑仑原料药 • 采用非水滴定法测定含量
（二）紫外分光光度法
• 中国药典 • 原料药:只有 奥沙西泮原料药 • 制剂：多数药物的
– 片剂含量均匀度、片剂溶出度的测定 – 均采用 紫外分光光度法。
实例
• 艾司唑仑片 溶出度的测定 • 地西泮 含量均匀度的测定 • 【实例分析】奥沙西泮的含量测定 自学
• 利用本类药物的 – 最大吸收波长， – 最大吸收波长处的吸光度或吸光度比值 – 进行鉴别
• 中国药典（2019年版）地西泮及其片剂
地西泮的紫外鉴别方法：
• 取本品，加0.5％硫酸的甲醇溶液制成每 1ml中含5μg的溶液，照分光光度法测定， 在242nm、284nm与366nm的波长处有最大 吸收；在242nm波长处的吸光度约为0.51， 在284nm 波长处的吸光度约为0.23。
（六）红外吸收光谱法
三、杂质检查
有关物质
有关物质
• 中间体、副产物或降解产物，结构不明 • 药典方法：
– 薄层色谱法或高效液相色谱法检查 – 方法是？
实例：地西泮的【有关物质】参见材• 杂质：合成过程中因其副反应引入N-去甲基苯 甲二氮卓以及某些化学结构不清的有关物质
• 原料药物：检查方法——高效液相色谱法
二、鉴别试验
（一） 荧光反应
• 苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸 • 苯并二氮杂卓类药物溶于稀硫酸 • 产生不同颜色的荧光物质
• 苯并二氮杂卓类药物溶于硫酸后，在紫 外光（365nm）下，显示不同颜色的荧光。
• 地西泮为黄绿色、硝西泮显淡蓝色、 • 氯氮卓为黄色、 艾司唑仑显亮绿色
• 苯并二氮杂卓类药物溶于稀硫酸，在紫 外光（365nm）下，显示不同颜色的荧光
• 紫外分光光度法： – 奥沙西泮原料药， – 多数药物的片剂含量均匀度、片剂溶出度的测定
• 高效液相色谱法： – 地西泮注射液、艾司唑仑 注射液
小结
• 第一节 吡啶类药物的分析 • 第二节 吩噻嗪类药物的分析 • 第三节 苯并二氮杂卓类药物的分析 • 鉴别、杂质检查、含量测定
1. 下列药物中，哪一个药物加氨制硝 酸银能产生银镜反应
• 谁水解后会产生芳香第一胺？ • 氯氮卓、艾司唑仑和奥沙西泮等药物
– 氮未被取代，水解后生成含芳伯氨基的产物 • 地西泮氮被取代，水解后不生成含芳伯氨基的产
物
CH3 O N
Cl
N
N N
N
Cl
N
氯氮卓、艾司唑仑
中国药典——艾司唑仑及其片剂
• 艾司唑仑的鉴别方法： • 取本品约10mg，加盐酸溶液(1→2)15ml，
（三）高效液相色谱法
• 本法优点： – 有效地分离、测定苯并二氮杂卓类药 物及其分解产物
• 中国药典（2019年版） – 地西泮、艾司唑仑 注射液
反相高效液相色谱法
• 固定相：十八烷基硅烷键合硅胶（ODS） • 流动相系统：水-甲醇或水-乙腈系统 • 碱性试剂有二乙胺、三乙胺等
碱性试剂有二乙胺、三乙胺等
9. 中国药典(2019年版)中地西泮原料药中 有关杂质的检查法为
A. TLC B. HPLC C. GC D. 沉淀法 E. 显色法
10. 检查盐酸氯丙嗪中“有关物质”时， 采用的对照溶液为
A. 杂质的标准溶液 B. 标准“有关物质”溶液 C. 供试品溶液 D. 供试液的稀释溶液 E. 对照溶液
A. 地西泮 B. 阿司匹林 C. 异烟肼 D. 苯佐卡因 E. 苯巴比妥
2．用于吡啶类药物鉴别的开环反应有 A. 茚三酮反应 B．戊烯二醛反应 C．坂口反应 D. 硫色素反应
3. ChP（2019）异烟肼的含量测定方 法为
A. 溴酸钾滴定法 B. 溴量法
C. TCL
D. NaNO2 E. 比色法
• 地西泮为黄色、硝西泮为蓝绿色、 • 奥沙西泮为淡黄绿色、氯氮卓为紫色、 • 艾司唑仑为天蓝色。
地西泮片的鉴别方法：
• 取本品的细粉适量（约相当于地西泮 10mg），加丙酮10ml，振摇使地西泮溶 解，滤过，滤液蒸干，加硫酸3ml,振摇 使溶解，在紫外光灯(365nm) 下检视， 显黄绿色荧光
（二）水解后芳香第一胺反应
7．盐酸氯丙嗪的含量测定方法有（多选）
A. 中和法 B. 非水滴定法 C. 紫外法 D. 旋光法
8. 中国药典（2019年版）对盐酸异丙嗪注射液 的含量测定，选用299nm波长处测定，其原因 是
A. 299nm处是它的最大吸收波长 B. 为了排除其氧化产物的干扰 C. 为了排除抗氧剂的干扰 D．在299nm处，它的吸收系数最大 E. 在其他波长处，因其无明显吸收
4. 经溴化氰或溴水氧化后，可发生开环形 成戊烯二醛反应的药物为
A. 葡萄糖 B. 皮质酮 C. 维生素C D. 土酶素 E. 异烟肼
5. 异烟肼可由原料反应不完全或贮藏中的 降解反应而引入哪种杂质
A. 间氨基酚 B. 水杨酸 C. 对氨基苯甲酸 D. 游离肼 E. 其他甾体
6. 可用于异烟肼鉴别的反应有（多选） A. 与氨制硝酸银的反应 B. 戊烯二醛反应 C. 坂口反应 D. 硫色素反应
• 地西泮片：检查方法 ——薄层色谱法
【实例】艾司唑仑注射液的有关物质检查
参见教材
• 请注意： • 判断方法——供试品溶液色谱图中如有
杂质峰，各杂质峰面积的和不得大于对 照溶液的主峰面积
几乎所有的药物均进行有关物质检查
• 中国药典（2019年版） • 地西泮及其片剂、注射液 • 艾司唑仑及其片剂、注射液 • 方法：高低浓度对比法
13. 某药物经酸水解后可用重氮化—偶合 反应鉴别，此药物是
A. 盐酸氯丙嗪 B. 氯氮卓 C. 地西泮 D. 醋酸氢化可的松 E. 维生素C
• 14. 采用紫外分光光度法测定含量的原料是 （） A 地西泮 B 奥沙西泮 C 艾司唑仑 D 氯氮卓