高中生物选修三专题2细胞工程(含解析)

2021-2021高中生物选修三-专题2-细胞工程（含解析）

一、单选题

1.下列对动物核移植技术的描述错误的是( )

A. 哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植，动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植

B. 体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核

C. 体细胞核移植过程中通常采用去核卵母细胞作为受体细胞

D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制

2.以绵羊红细胞刺激小鼠脾脏B淋巴细胞，再将后者与小鼠骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，并筛选出特定杂交瘤细胞生产单克隆抗体。下列说法正确的是：

A. 抗体能识别绵羊整个红细胞

B. 抗体只识别绵羊红细胞表面的特定分子

C. 抗体能识别绵羊所有体细胞

D. 抗体只识别绵羊所有体细胞表面的特定分子

3.关于单克隆抗体的生产和应用，错误的是（）

A. 单克隆抗体可制成诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点

B. 专一抗体检验阳性筛选特定的杂交瘤细胞

C. 对小鼠注射特定抗原以获取所需的T细胞

D. “生物导弹”在原位杀死癌细胞，不损伤正常细胞

4.细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列选择错误的是（）

A.选择去核的卵细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率

B.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量细胞

C.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得优质的突变体

D.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗

5.一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个细胞经过分裂和分化形成胚胎，再植入第三只羊的内发育，产下一只羊羔．这种克隆技术具有多种用途，但是不能（）A. 有选择地繁殖某一性别的家畜 B. 繁殖家畜中的优秀个体

C. 用于保护濒危物种

D. 改变动物的基因型

6.一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件

①无毒的环境②无菌的环境③合成培养基需加血浆

④温度与动物体温相近⑤需要氧气⑥需要二氧化碳

A. ①②③④⑤⑥

B. ①②③④

C. ①③④⑤⑥

D. ①②③④⑥

7.某同学列表比较了动、植物细胞工程的有关内容，你认为其中有错误的是（）

比较内容植物细胞工程动物细胞工程

A 特殊处理酶解法去除细胞壁用胰蛋白酶处理制成细胞悬浮液

B 融合方法物理方法、化学方法、生物方法物理方法、化学方法

C 典型应用人工种子、种间植物单克隆抗体的制备

D 培养基区别蔗糖是离体组织赖以生长的成分常加入动物血清

A. A

B. B

C. C

D. D

8.下列有关植物细胞工程的叙述，正确的是（）

A. 在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般都发生改变

B. 植物细胞只要在离体状态下即可表现出全能性

C. 植物组织培养的目的都是获得完整的植株

D. 植物组织培养过程中培养基成分有水、无机盐、糖、维生素、有机添加物和相关激素

9.动物细胞培养的顺序是( )

①原代培养②传代培养③胰蛋白酶处理组织，形成分散的悬浮细胞

A. ③①②

B. ①②③

C. ②①③

D.

①③②

10.“生物导弹”是指（）

A. 单克隆抗体

B. 杂交瘤细胞

C. 产生特定抗体的B淋巴细胞

D. 在单抗上链接抗癌药物

二、填空题

11.如图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题．

（1）X、Y、Z细胞的名称分别是________、________ 、________ ．

（2）①过程类似于植物组织培养技术中的________ 过程．与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较________

（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________

（4）④处需要筛选，其目的是筛选出________

（5）若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能测到放射性32P的细胞器是________

12.新兴生物工程能使免疫学在应用方面更上一层楼，为人类带来福音．一方面新兴生物工程可以为免疫活性物质及疫苗的制备开辟新途径，解决免疫治疗及免疫预防方面的难题；另一方面，新兴生物工程还可以为解决器官移植所面临的供体不足和免疫排斥两大难题提供可能．

（1）利用________ 技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径，与传统方法获取的同类产品相比，它的显著优点是________

（2）干扰素及部分疫苗都可以通过________ 技术制造的工程菌来大规模生产，如国内应用较普遍的重组CHO乙肝疫苗；

（3）对大面积烧伤病人，借助________ 技术可获取大量自身健康皮肤用于移植．

（4）通过向供体动物基因组中导入某种调节因子，以抑制________ 的表达，或设法将之去除，再结合________ 技术，可培育出无免疫排斥的转基因猪器官；

（5）________ 的分离和培养成功也为解决上述难题开辟了新途径，因其具有________ 性，可在体外诱导分化产生各种人造组织器官．

13.如图为单克隆抗体制备流程示意图．

（1）制备单克隆抗体过程中要用到________ 和________ 技术．

（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是________ ．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的________ ，以保证生命活动的正常进行．（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1mL细胞稀释液，其目的是________

（4）若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是________

（5）最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是________

14.如图是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图．

（1）过程①和②得到的Y细胞称为________ ．得到的单克隆抗体最主要的优点是

________ ．

（2）④过程需要________ 酶，⑥过程需要用________ 处理受体细胞．

（3）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的空间结构是否相同？________ 为什么？________

（4）如果想用棉花生产该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用________ ，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过________ 技术获得能产抗体的转基因棉花植株．

15.单纯疱疹病毒I型（HSV﹣1）可引起水泡性口唇炎．利用杂交瘤技术制备出抗HSV﹣1

的单克隆抗体可快速检测HSV﹣1．回答下列问题：

（1）在制备抗HSV﹣1的单克隆抗体的过程中，先绐小鼠注射一种纯化的HSV﹣1蛋白，一段时间后，若小鼠血清中抗________ 的抗体检测呈阳性，说明小鼠体内产生 ________ 了反应，再从小鼠________ 的中获取B淋巴细胞．将该B淋巴细胞与小鼠的________ 细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是________和

________ ．

（2）若要大量制备该蛋白的单克隆抗体，可将该杂交瘤细胞注射到小鼠的________ 中使其增殖，再从________ 中提取、纯化获得．

（3）通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别这种HSV﹣1蛋白，其原因是该抗体具有________和________ 等特性．

16.如图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题．

（1）X、Y、Z细胞的名称分别是________ 、________ 、________ ．

（2）①过程类似于植物组织培养技术中的________ 过程．与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较________ ．②过程的实质是________

（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________ ．

（4）④处需要筛选，其目的是________ ．

（5）若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞，能检测到放射性32P的细胞器是________、________ ．

17.动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a，b，c 代表动物细胞工程的几项技术①②③依次表示其结果．据图回答

（1）若a是核移植技术，①的产生反映了________

（2）若b是体外技术，则必须对精子用一定浓度的化学药物进行________ 处理；所用的化学药品是________ 或钙离子载体A23187溶液．并且b获得的卵________ （填可或不可）直接用于胚胎移植；如果选择牛的含X染色体的精子进行人工授精，生产②牛的目的是

________ ．

（3）若c是胚胎分割技术，为了提高胚胎的利用率进行胚胎分割时要平均分割的是

________ ．否则会影响________ ，一般情况下③中个体的基因型________ 和表现型

________ ．

（4）按照a是核移植技术，b是体外技术，c是胚胎分割技术，则①②③属于无性生殖的是________ ．

18.为治疗某种遗传性糖尿病，研究人员完成如下工作．

（1）图1中①是取自患者体细胞的________ ，过程②表示________ 技术．

（2）重组细胞在体外培养时，培养液中除了加入诱导物外，还应加入水、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、________ 等必需的营养成分，并在含5% CO2的无菌、恒温培养箱中进行，CO2的作用是________ ；培养时，为防止接触抑制应适时用________ 处理，一般________ 培养的细胞遗传物质未发生改变．

19.生物工程在医疗卫生方面得到了广泛应用，请回答下列问题．

（1）利用________ 技术制备的杂交瘤细胞，可用于制备单克隆抗体．与体内抗体相比，单克隆抗体具有理化性质单一、________ 、可大量制备等优点．

（2）干扰素、胰岛素等物质可以通过工程菌来大量生产．该技术中目的基因和运载体要用同种________切割，以产生相同的________ ．

（3）在完成体外的过程中，对已取得的精子要进行________ 处理，为了获取更多的卵细胞，一般要对雌性个体注射________ ，使其超数排卵．

（4）利用细胞培养技术可以获取自身健康的皮肤，用于皮肤移植．在此过程中通入CO2的目的是________ ，在培养液中加入________ 酶，可防止细胞出现接触抑制现象．

三、实验探究题

20.某实验室做了下图所示的实验研究,请据图回答:

（1）与纤维母细胞相比,过程①形成的诱导干细胞的全能性较________。

（2）过程②是诱导干细胞中基因________的结果。

（3）过程③需要用________进行筛选,得到的Z细胞还需进行________培养和________,经多次筛选,就可以得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。

（4）科学家找到一种“无限增殖调控基因”能激发细胞不断分裂,通过基因工程技术将该基因导入待定的________细胞(填细胞名称),来制备单克隆抗体,基因导入并成功表达后,该细胞将具有________的特点,在上述操作中用到了PCR扩增仪,其作用是________。

四、综合题

21.下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病（基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合

成胰岛素）的过程设计图解，据图回答：

（1）图中①、②所示的结构分别是________、________ ，④过程常用的方法是________。（2）图示治病的方法叫做________ ，与一般的异体移植相比最大的优点是________。22.以下是生物学技术制备抗体的两个途径模式简图。

（1）上图中过程①的完成采用的方法有:________，依据的生物学原理________。

（2）过程④要用到的酶有________，过程⑥采用的方法叫________。

上图中的质粒本身含有氨苄青霉素抗性基因和M、N两种限制酶（两种酶切割序列完全不同）切割位点。若用限制酶M和N切割，通过凝胶电泳分离，分析得到下表。

分子量(kb) 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.0 8.0 9.0 10.0

酶M + + +

酶N + +

酶M+酶N + + + + +

凝胶电泳结果（1kb=1000对碱基，+表示检测到该片段的存在）

（3）该质粒长度为________kb，在该质粒中，M酶与N酶的切割点分别有________、________个。

（4）氨苄青霉素抗性基因的作用是________。

23.在人源化单克隆抗体研制成功之前，单克隆抗体大都来自鼠源。但鼠源单抗在人体内使用时，会产生较强的免疫原性，为解决这一问题，发明了嵌合抗体。大致过程如图所示：

（1）图示中获得“肿瘤抗原免疫小鼠”的操作是________。鼠源单克隆抗体的生产应用的动物细胞工程技术有________。

（2）嵌合抗体能降低鼠源抗体的“免疫原性”，从图中可以推测，免疫原性的产生主要与抗体的________（选填“V区”、“C区”）有关。

（3）基因嵌合表达载体转染细胞的方法是________，转染成功的细胞具有的特点是：能分泌抗体和________能力。

（4）嵌合抗体的生产属于________工程范畴。图示中的嵌合抗体能比较有效的治疗

________。

答案解析部分

一、单选题

1.【答案】D

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【分析】因为动物体细胞的分化程度高于胚胎细胞，所以动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎核移植；体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核；因为卵母细胞较大，含有细胞质多，且含有促进全能性表达的物质，所以体细胞核移植过程中通常采用去核卵母细胞作为受体细胞；通过体细胞核移植方法生产的克隆动物的细胞质基因不是来自体细胞，所以不是对体细胞动物进行了100%的复制。故选D

【点评】本题意在考查考生的理解能力，属于容易题。

2.【答案】B

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【分析】抗体能特异性的识别绵羊红细胞表面的特定分子，也就是抗原决定簇；选B。

3.【答案】C

【考点】单克隆抗体的制备过程，单克隆抗体的优点

【解析】【分析】单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，可制成诊断试剂，具有准确、高效、简易、快速的优点，A对；单克隆抗体制备过程中需用专一抗体检验阳性筛选特定的杂交瘤细胞，B对；杂交瘤细胞由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成，不需获得T细胞，C错；“生物导弹”由抗癌药物和单克隆抗体结合形成，利用单克隆抗体的特异性，在原位杀死癌细胞，不损伤正常细胞，D对。

4.【答案】B

【考点】细胞工程的操作水平、对象、条件及手段

【解析】【解答】卵细胞的细胞质中含有促进全能性表达的物质，因此选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率，A不符合题意；高度分化的细胞已经失去分裂能力，因此选择高度分化的动物体细胞进行培养不会获得大量细胞，B符合题意；愈伤组织细胞处于分生状态，遗传物质可能发生改变，因此选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得有用的突变体，C不符合题意；茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，D不符合题意。

故答案为：B

【分析】细胞工程中，选用去核卵（母）细胞的原因：卵（母）细胞大，容易操作；卵（母）细胞质多，营养丰富；含有促使细胞全能性表达的物质．

5.【答案】D

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【解答】解：A、动物性别由性染色体决定的，性染色体位于细胞核中，核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体．因此，可以有选择地繁殖某一性别的家畜，A正确；B、用核移植的方法得到的动物称为克隆动物．利用体细胞克隆技术可以繁殖家畜中的优秀个体，B正确；C、利用体细胞克隆技术可以用于保护濒危物种，C正确；D、克隆技术属于无性繁殖，克隆动物的基因型与供核动物相同，不能改变动物的基因型，D错误．故选：D．

【分析】1、克隆动物可用于有选择性的繁殖某一性别的家畜，用于保护濒危物种，但不能改变动物的基因型，动物的基因型与供核动物相同．核移植技术不改变动物的基因型，核移植技术获得的动物因为有细胞质基因的影响、生活环境的差异、可能发生基因突变造成核移植动物与供核动物性状不完全相同．2、体细胞核移植的应用：a．加速家畜的遗传改良进程，促进优良种群繁育；b．转基因克隆动物做生物反应器，生产珍贵的医用蛋白；c．克隆动物的组织、器官做移植的供体．d．研究克隆动物和克隆细胞可使人类更深入地了解胚胎发育及衰老过程

6.【答案】A

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【分析】动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它

分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。动物细胞培养需要满足以下条件①无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。②营养：合成培养基成分：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常需加入血清、血浆等天然成分。③温度：适宜温度：哺乳动物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4。④气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。故选A。

7.【答案】B

【考点】细胞工程的操作水平、对象、条件及手段

【解析】【解答】解：A、植物细胞工程中，用纤维素酶和果胶酶除去细胞壁，动物细胞工程中，应胰蛋白酶处理组织，得到单个细胞制成细胞悬浮液，A正确；

B、诱导植物原生质体融合的方法有物理方法和化学方法，而诱导动物细胞融合的方法有物理方法、化学方法、生物方法，B错误；

C、植物组织培养技术可用于制备人工种子，植物体细胞杂交技术可用于培育种间植物，动物细胞融合技术可用于制备单克隆抗体，C正确；

D、植物组织培养时，培养基中的蔗糖是离体组织赖以生长的成分，同时还能调节渗透压，而动物细胞培养时，培养基中要加入动物血清等天然成分，D正确．

故选：B．

【分析】1、植物组织培养和动物细胞培养的比较

2、植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较：

8.【答案】D

【考点】细胞工程的操作水平、对象、条件及手段

【解析】【解答】A、在植物组织培养过程中，细胞的遗传物质一般不会发生改变，A错误；

B、植物细胞表现出全能性的条件有：离体、一定的营养条件、无菌、适宜的外界环境等，B错误；

C、植物组织培养的目的不一定是获得完整的植株，也可能是获得细胞代谢产物，C错误；

D、植物组织培养过程中培养基成分有水、无机盐、糖、维生素、有机添加物和相关激素（生长素和细胞分裂素），D正确．

故选：D．

【分析】1、植物细胞表现全能性的条件：

①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；

②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）．

2、植物组织培养技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产．

9.【答案】A

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【分析】动物细胞培养就是从动物机体上取出相关的组织，将它们分散为单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖,A 正确。

10.【答案】D

【考点】单克隆抗体的优点

【解析】【解答】解：生物导弹是指单克隆抗体上连接放射性同位素、化学药物或细胞毒素，能够借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞．

故选：D．

【分析】单克隆抗体是由单个B淋巴细胞进行无性繁殖形成的细胞系所产生出的化学性质单一、特异性强的抗体．

生物导弹：单克隆抗体+放射性同位素、化学药物或细胞毒素（借助单克隆抗体的定位导向作用将药物定向带到癌细胞，在原位杀死癌细胞．疗效高，副作用小，位置准确．）

二、填空题

11.【答案】骨髓瘤细胞；浆细胞；杂交瘤细胞；脱分化；高；灭活的病毒；能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；核糖体、线粒体

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】解：（1）图中的X细胞表示骨髓瘤细胞，在体外能无限增殖；Y细胞表示机体受抗原刺激产生的（效应）B细胞即浆细胞，能够产生特异性抗体；Z细胞表示骨髓瘤细胞和（效应）B细胞融合形成的杂交瘤细胞．

（2）①过程将已经分化的细胞培养成分化程度低的细胞过程，类似于植物组织培养技术中脱分化．与纤维母细胞相比，诱导干细胞的分化程度较低，全能性较高

（3）③过程表示动物细胞融合，常用灭活的病毒作为诱导剂诱导动物细胞融合．

（4）④处需要进行筛选，目的是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．

（5）放射性32P标记的核苷酸是合成DNA或RNA的原料，Z细胞中含有DNA的细胞器只有

线粒体，含有RNA的细胞器有线粒体和核糖体．所以能测到放射性32P的细胞器有核糖体、线粒体．

【分析】据图分析，单抗是指将骨髓瘤细胞与B细胞形成的杂交瘤细胞，所以X为骨髓瘤细胞，Y为效应B细胞，Z为杂交瘤细胞，植物组织培养过程为脱分化和再分化过程，则①类似于脱分化过程，②是再分化过程，③是诱导细胞融合，采用的方法是物理、化学或灭活的病毒，④筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．

12.【答案】细胞融合；特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）；转基因（基因工程）；动物细胞培养；抗原决定基因；克隆；胚胎干细胞；全能性

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】（1）利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）．

（2）工程菌是基因工程中常用的受体细胞．

（3）大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植．（4）利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体．

（5）胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植．

【分析】利用细胞融合技术发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径．单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高、并可大量制备（产量高）；工程菌是基因工程中常用的受体细胞；大面积烧伤的病人们可以采用动物细胞培养技术获得大量自身健康皮肤进行移植；利用基因工程获得无免疫排斥的转基因猪器官，可以向动物基因组中加入某种调节因子，以抑制抗原决定簇基因，再结合克隆技术获得基因个体；胚胎干细胞具有发育全能性，可以在体外分化成各种组织由于器官移植．

13.【答案】动物细胞培养；动物细胞融合；筛选杂交瘤细胞；种类和数量（浓度）；使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）；核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜；能无限增殖并分泌特异性抗体

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】（1）单克隆抗体利用了细胞融合技术将淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，然后再利用动物细胞培养技术对细胞进行培养和筛选．

（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是筛选杂交瘤细胞．在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的种类和数量（浓度），以保证生命活动的正常进行．

（3）从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是将产生特定抗体的杂交瘤细胞筛选出来，使得到的抗体纯度更高．

（4）单克隆抗体属于分泌蛋白，分泌蛋白的合成、加工和分泌经过了核糖体（合成场所）、内质网（加工和运输）、高尔基体（进一步加工和分泌）和细胞膜（通过细胞膜的胞吐运出细胞）．

（5）最终筛选获得的杂交瘤细胞结合了两个细胞的优点，即能无限增殖并分泌特异性抗体．

【分析】据图分析，将特定的抗原注射小鼠，筛选出产生抗体的淋巴细胞；与骨髓瘤细胞融合，转移到HAT培养基中培养，未融合的细胞死亡，而杂交瘤细胞存活；杂交瘤细胞分开培养，选育出产生高特异性抗体的细胞．

14.【答案】杂交瘤细胞；特异性强、灵敏度高、并可能大量制备；逆转录；Ca2+（或CaCl2）；不同；抗体2形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工，抗体1形成过程经过内质网和高尔基体的加工；农杆菌；植物组织培养

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】解：（1）细胞A是经过免疫的B淋巴细胞，它和骨髓瘤细胞融合，得到的Y细胞称为杂交瘤细胞，交瘤细胞分泌的单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、并可能大量制备．

（2）④过程以mRNA为模板产生DNA（基因）需要逆转录酶，⑥过程将目的基因导入微生物细胞需要用Ca2+（或CaCl2）处理受体细胞．

（3）抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的空间结构不同，因为抗体2是大肠杆菌生产的，其形成过程没有经过内质网和高尔基体的加工，抗体1是杂交瘤细胞生产的，其形成过程经过内质网和高尔基体的加工．

（4）如果想用棉花产生该种抗体，则⑥导入受体细胞过程的受体细胞通常选用土壤农杆菌，经过筛选后再侵染棉花体细胞，转化成功后通过植物组织培养技术，即脱分化和再分化过程，获得能产抗体的转基因棉花植株．

【分析】据图分析，细胞A表示效应B细胞，细胞Y表示杂交瘤细胞，结构甲表示基因表达载体，①过程表示动物细胞融合，②过程表示杂交瘤细胞的培养，③过程表示提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示导入受体细胞．

15.【答案】 HSV﹣1蛋白；体液免疫；脾脏；骨髓瘤；无限增殖；产生专一抗体；腹腔；腹水；纯度高；特异性强、灵敏度高

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】（1）若小鼠血清中抗HSV﹣Ⅰ的抗体检测呈阳性，则小鼠体内产生了相应的抗体，而抗体是体液免疫过程中产生的，说明小鼠发生了体液免疫反应，再从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞．将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合，再经过筛选、检测，最终可获得所需的杂交瘤细胞，该细胞具有双亲的特点，即既能在体外培养条件下无限增值，又能产生专一抗体．

（2）克隆化培养时，将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中（体内培养）或培养基中（体外培养）使其增殖，再从腹水中或培养液中提取、纯化获得大量制备抗该蛋白的单克隆抗体．（3）单克隆抗体可准确地识别这种HSV﹣I蛋白，其原因是单克隆抗体具有纯度高、特异性强和灵明度高等特性．

【分析】根据题干分析，HSV﹣1蛋白作为抗原引起免疫反应生成抗HSV﹣1蛋白的抗体，单克隆抗体的制备过程是从小鼠的骨髓中取B细胞，与小鼠的骨髓瘤细胞融合，筛选既能无限增殖又能产生抗体的细胞，植入小鼠腹腔中增殖，从腹水中提取，单克隆抗体具有特异性强和灵敏度高的特点．

16.【答案】骨髓瘤细胞；抗原刺激过的B淋巴细胞；杂交瘤细胞；脱分化；高；基因的选择性表达；灭活的病毒；筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞；核糖体；线粒体

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】（1）图中的X细胞表示骨髓瘤细胞，在体外能无限增殖；Y细胞表示受抗原刺激过的（效应）B细胞，能够产生特异性抗体；Z细胞表示骨髓瘤细胞和（效应）B细胞融合形成的杂交瘤细胞．

（2）①过程将已经分化的细胞培养成分化程度低的细胞过程，类似于植物组织培养技术中脱分化．与纤维母细胞相比，诱导干细胞的分化程度较低，全能性较高．②过程是细胞分化的过程，其实质是基因的选择性表达．

（3）③过程表示动物细胞融合，常用灭活的病毒作为诱导剂诱导动物细胞融合．

（4）④处需要进行筛选，目的是筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．

（5）放射性32P标记的核苷酸是合成DNA或RNA的原料，Z细胞中含有DNA的细胞器只有线粒体，含有RNA的细胞器有线粒体和核糖体．所以能测到放射性32P的细胞器有核糖体、线粒体．

【分析】据图分析，单抗是指将骨髓瘤细胞与B细胞形成的杂交瘤细胞，所以X为骨髓瘤细胞，Y为效应B细胞，Z为杂交瘤细胞，植物组织培养过程为脱分化和再分化过程，则①类似于脱分化过程，②是再分化过程，③是诱导细胞融合，采用的方法是物理、化学或灭活的病毒，④筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞．

17.【答案】动物细胞核的全能性；获能；肝素；不可；产雌性牛生产牛奶；内细胞团；分割后胚胎的恢复和进一步发育；相同；相同；①③

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【解答】（1）核移植技术反应了动物细胞核具有全能性．

（2）体外必须对精子用一定浓度的化学药物进行获能处理，所用的化学药品是肝素或钙离子载体A23187溶液．并且获得的卵不可直接用于胚胎移植；一般要发育到桑椹胚或囊胚阶段才进行移植，如果选择牛的含X染色体的精子进行人工授精，生产牛目的是产雌性牛生产牛奶．

（3）为了提高胚胎的利用率进行胚胎分割时要平均分割的是内细胞团，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，一般情况下胚胎分割技术所得个体的基因型完全相同，表现型也相同．

（4）体外产生子代的方式是有性生殖，而核移植技术、胚胎分割技术产生子代的方式属于无性生殖．

【分析】1、动物细胞核移植技术表明动物细胞核具有全能性．

2、体外包括精子的采集和获能、卵母细胞的采集和培养、体外，该技术产生的动物称为试管动物．

3、胚胎分割的特点：来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆的方法之一．

18.【答案】细胞核；核移植；动物血清；调节培养液的PH值；胰蛋白酶；原代

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【解答】（1）由以上分析可知：图1中①是取自患者体细胞的细胞核，过程②表示核移植技术．

（2）动物细胞培养的条件：①无菌、无毒的环境：消毒、灭菌；添加一定量的抗生素；定期更换培养液，以清除代谢废物．②营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．③温度和PH．④气体环境：95%空气和5%的CO2，其中CO2的作用是调节细胞培养液的pH．培养时，为防止接触抑制应适时用胰蛋白酶处理，一般原代培养的细胞遗传物质未发生改变．

【分析】分析题图：①是取自患者体细胞的细胞核；②表示核移植过程；③表示采用基因工程技术，将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞的过程．再将导入目的基因的胚胎干细胞定向诱导形成胰岛样细胞，经过选择后输入患者体内．

19.【答案】（动物）细胞融合；特异性强、灵敏度高、纯度高；限制性内切酶；黏性末端；获能；促性腺激素；维持培养液的pH稳定；胰蛋白

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】（1）利用动物细胞融合技术制备的杂交瘤细胞，可用于制备单克隆抗体．与体内抗体相比，单克隆抗体具有理化性质单一、特异性强、灵敏度高、纯度高、可大量制备等优点．

（2）转基因技术中目的基因和运载体要用同种限制性内切酶切割，以产生相同的黏性末端．（3）在完成体外的过程中，对已取得的精子要进行获能处理，为了获取更多的卵细胞，一般要对雌性个体注射促性腺激素．

（4）动物细胞培养过程中，通入CO2的目的是维持培养液的pH稳定，在培养液中加入胰蛋白酶，使动物细胞分散成单个细胞，防止细胞出现接触抑制现象．

【分析】1、动物细胞培养和动物细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础．单克隆抗体与常规的血清抗体相比．最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备．

2、基因工程的工具有：限制性核酸内切酶、DNA连接酶和运载体．需要限制酶来切割以获取目的基因，同时需要相同的限制酶切割运载体以获取与目的基因相同的黏性末端，再通过DNA连接酶连接目的基因和运载体．

3、动物细胞培养：取动物组织块→剪碎组织→用胰蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养．

三、实验探究题

20.【答案】（1）高

（2）选择性表达

（3）选择性培养基；克隆化；抗体检测

（4）浆(受体)；既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体；大量获得目的基因

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】(1)纤维母细胞为体细胞,与之相比,诱导干细胞的全能性较高。(2)过程②是

诱导干细胞的分化,实质是基因选择性表达的结果。(3)过程③需要用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞(Z细胞),得到的杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测,经多次筛选,才能得到足够数量的能分泌所需抗体的细胞。(4)浆细胞中导入“无限增殖调控基因”,使其既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体,可用于制备单克隆抗体。PCR扩增仪用于扩增特定DNA,可获得大量目的基因。

【分析】解答此题要理清单克隆抗体的制备过程

四、综合题

21.【答案】（1）细胞核；内细胞团（或胚胎干细胞）；显微注射法

（2）体外基因治疗；没有排斥反应

【考点】动物细胞核移植技术

【解析】【解答】（1）图中①分别是供体细胞的细胞核，②所示内细胞团，因为这些细胞还未分化，具有全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官，图中③将细胞核移植到去核的卵细胞中，表示核移植技术；④将健康胰岛B细胞基因导入内细胞团中，表示转基因技术（或重组DNA技术）。（2）图示方法所得细胞的细胞核来自于患者自身，与一般的异体移植相比最大的优点是没有免疫排斥反应，由于主要过程是在体外进行的，所以该种基因治疗所属类型为体外基因治疗。【分析】本题主要考查动物细胞核移植技术的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。

22.【答案】（1）用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒；细胞膜具有流动性

（2）逆转录酶、DNA聚合酶；感受态法

（3）16；3；2

（4）作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】解：(1) 过程①是诱导动物细胞融合，采用的方法有:用物理方法（离心、振动、电刺激）、聚乙二醇（PEG）、灭活的病毒，依据的生物学原理是细胞膜具有流动性。

(2) 过程④为逆转录，要用到的酶有逆转录酶、DNA聚合酶。过程⑥为将构建的重组质粒导入大肠杆菌细胞内，最常用的转化方法是用CaCl2或Ca2+处理，增大细胞壁的通透性,使其

成为感受态细胞，即采用的方法叫感受态法。(3)上图中的质粒为环状DNA。表中信息显示：单独用限制酶M切割，得到1.0、5.0和10.0 kb的3个片段，说明有3个酶M的切割点；单独用限制酶N切割，得到7.0和9.0 kb的2个片段，说明有2个酶N的切割点。综上分析，该质粒长度为1.0＋5.0＋10.0＝16.0 kb。(4) 氨苄青霉素抗性基因的作用是作为标记基因（鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将有目的基因的受体细胞筛选出来）。

【分析】本题以“制备抗体的两个途径模式简图”为情境，综合考查学生对基因工程、生产单克隆抗体等相关知识的识记和理解能力。据图分析，细胞A表示效应B细胞，细胞Y表示杂交瘤细胞，结构甲表示基因表达载体，①过程表示动物细胞融合，②过程表示杂交瘤细胞的培养，③过程表示提取信使RNA，④过程表示逆转录，⑤表示基因表达载体的构建，⑥表示导入受体细胞．分析表格和审清题意是解答本题的切入点．题干中提出，mtDNA是存在于人类细胞线粒体中双链闭合环状的DNA分子，因此限制酶在切割时，用酶M得到3个片段，则有3个切点，用酶N得到2个片段，则有2个切点．

23.【答案】（1）给小鼠注射肿瘤抗原；动物细胞培养和动物细胞融合

（2）C区

（3）显微注射法；无限增殖

（4）蛋白质；肿瘤

【考点】单克隆抗体的制备过程

【解析】【解答】（1）图示中获得“肿瘤抗原免疫小鼠”的操作是给小鼠注射肿瘤抗原。鼠源单克隆抗体的生产应用的动物细胞工程技术有动物细胞培养和动物细胞融合。（2）据图可知，免疫原性的产生主要与抗体的C区有关。（3）把目的基因导入卵常用显微注射法。基因嵌合表达载兼具有淋巴细胞和体细胞的特点，体转染成功的细胞应该具有的特点是：分泌抗体和无限增殖能力。（4）嵌合抗体的生产属于蛋白质工程范畴，图示中的嵌合抗体具有特异性，能比较有效的治疗肿瘤。

【分析】在制备过程中需要将抗原首先注入生物体内，是其产生具有免疫能力的B淋巴细胞，再用动物细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合，并筛选出能大量增殖和产生特异性抗体的杂交瘤细胞，最后经过体外或体内培养，获取单克隆抗体。