第四章定量分析

5. 测定方法
要求供试品溶液的A应在 0.3 ～ 0.7 对照品比较法：Cx=(Ax/Ar)Cr; 含量%=Cx×D/W×100 % 常用方法 吸收系数法： 含量%= (E1%1cm )x/(E1%1cm )r ×100 % 计算分光光度法：VitA的三点校正法 比色法

硫喷妥钠的含量测定：取供试品0.2500g，用水稀释至500ml， 精密取1ml用0.4%NaOH溶液定量稀释至100ml，作为供试品 溶液；另取硫喷妥对照品用0.4%NaOH溶液配制浓度为 5.0µ g/ml作为对照品溶液。照分光光度法，在304nm波长处
F = 实际浓度/规定浓度
（2）剩余滴定法
T （ V V ） F 百分含量 % ms
T——滴定度，每1ml滴定液相当于被测组分的mg数 V——滴定时，供试品消耗滴定液的体积（ml） V0——滴定时，空白消耗滴定液的体积（ml） F——浓度校正因子 ms——供试品的质量

双相滴定法测定苯甲酸钠含量。取本品0.3220g, 加水15ml，乙醚30ml与甲基橙3滴，用 0.1062mol/L盐酸滴定，至水层显橙红色，分取 水层，置具塞锥形瓶中，加乙醚20ml，振摇， 继续滴定至持续橙红色，消耗盐酸体积21.05ml。 计算样品中苯甲酸钠含量。苯甲酸钠分子量 144.1。
测定方法： 外标法，有外标标准曲线法和外标一点法
外标一点法：一种浓度对照物对比样品中待测组分含量 前提：截距接近0，对照品浓度与待测组分浓度接近
AX 含量(C x ) C R AR

外标法特点：
1）不需要校正因子，不需要所有组分出峰
2）结果受进样量、进样重复性和操作条件影响大
→每次进样量应一致，否则产生误差
第四章 药物的含量测定方法与验证
定量方法特点：
分析方法
容量分析法
方法优点
方法缺点
适用对象
化学原料药含 量测定 制剂中溶出度、 释放度测定
简便、准确度 专属性差 好、精密度高
光谱分析法
简便、快速、 专属性差 灵敏度高
色谱法
灵敏度高、 专属性好
操作相对复杂 （低）制剂的 含量测定
第一节 定量分析方法的分类与特点
积分别为5467824和6125843，样品液中药物和内标的峰面积
分别为5221345和6122845，计算本品的含量
内标一点法
6125843 0.3 1.352 f AR 5467824 0.362 CR CS CX AX 5221345 f ' 1.352 0.346 6122845 AS 0 . 3 ' CS
1% A E1 cm cl
c (g/100m l) c (g/m l)
A
1% E1 cml
A
1% E1 cml 100
A
% E l cm 百分含量 ms
nV %
对乙酰氨基酚的含量测定方法为
精密称取本品40.1mg，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠
含量（CX）=f
AX A’S/CS’
a．内标物须为原样品中不含组分 b．内标物与待测物保留时间应接近且R>1.5 c．内标物为高纯度标准物质，或含量已知物质
内标法优点：
进样量不超量时，重复性及操作条件对结果无影响
只需待测组分和内标物出峰，与其他组分是否出峰
无关 。
内标法缺点： 制样要求高；须寻找合适内标物
分别测得供试品和对照品的吸收度为0.520和0.545，已知1mg
硫喷妥相当于1.091mg的硫喷妥钠，试计算硫喷妥钠的含量
对照品比较法
c供 c对
A供 A对
0.520 5.0 1.091 100 500 106 0.545 % 100% 104.1% 0.25
（2）吸收系数法
醇、乙பைடு நூலகம்、水（缓冲液）作流动相。一般色谱柱使用温度
不超过40℃，流动相pH控制在28之间。
检测器 作用—— 用来连续监测经色谱柱分离后的流出物的
组成和含量变化的装置。
目前最常用的检测器主要有： 紫外-可见检测器
荧光检测器
电化学检测器 蒸发光散射检测器 质谱检测器
二极管阵列检测器色谱图
常规色谱图 三维色谱图 光谱图
溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置
100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度， 摇匀。在257nm的波长处测定吸收度为0.570，按C8H9NO2 的百分吸收系数为715计算。
0.570 100 50 1000 % 715 100 100% 99.4% 40.1
器；且激发光源、样品池和检测器成直角。 3. 含量测定 常用的方法为对照品比较法: Cx = (Rx-Rxb)/(Rr-Rrb) ×Cr Ch.P2010收载利血平片
三、色谱分析法 色谱分析法的特点与适用范围

高灵敏度，可达10-15g/ml ～ 10-12g/ml 高专属性，强分离能力

高效能，可多组分同时定量分析
正常峰和不正常峰如何判断？
用拖尾因子（对称因子）：T T= W0.05h/2A
T：0.95 ~ 1.05
对称峰
> 1.05 拖尾峰
< 0.95 前沿峰
3. 测定方法：内标法
过 程 ： m s m i 混 匀 进 样 测 A i和 A s
校正因子（f）=
对内标物要求：
AS/CS AR/CR

间接银量法：定量加入过量的AgNO3 ，过量的 硝酸银以硫氰酸铵为滴定剂，硫酸铁铵为指示剂 滴定。
CCl3C(CH3)2OH + 4NaOH
回流 (CH3)2CO + 3NaCl + HCOONa + 2H2O △
NaCl + AgNO3
定量过量
AgCl↓ + NaNO3
(Ksp=1.56×10–10 )
0.0999 （25.05 15.05 ） 13.01 0.1 含量% 100% 99.9% 0.1301 1000
片剂含量测定结果的计算
每片含量 标示量 % 100 % 标示量 测得量（ g ） 平均片重（ g ） 供试品重（ g ） 100 % 标示量（ g / 片）
0.3g/片）。
V × T × F ×平均片重 标示量%=
W ×标示量
×100 %
=
25.02 ×12.31/1000 ×0.1005/0.1×0.3584
×100 %
0.3729 ×0.3
= 99.17%
二、光谱分析法
（一）紫外-可见分光光度法（200nm～760nm)
灵敏度高，可达10-7g/ml ～ 10-4g/ml
1. 对HPLC仪器一般要求 色谱柱、流动相按品种项下要求。
色谱柱的理论板数：n = 5.54(tR /Wh/2)2
2. 系统适用性 试验 分离度：R = 2（tR1 – tR2)/(W1 + W2); 要大于1.5
重复性：RSD≤2%
拖尾因子：T = W0.05h/2A 应在0.95 ～ 1.05
TVF 平均片重 ms 标示量 % 100 % 标示量
烟酸片含量测定
取本品10片精密称定为3.5840g，研细，精密称取
0.3729g，置100 mL锥形瓶中水浴加热溶解后，放冷。加酚 酞指示剂3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1005mol/L)滴定至粉 红色消耗25.02 mL。每1mL氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当 12.31mg的烟酸。求供试品中烟酸的标示百分含量（标示量
1. 特点
准确度高，RSD（%）< 2%
仪器价格低廉操作简单，易普及，应用广
2. 定量：朗伯-比耳定律
A = E1%1cmCl
3. 仪器校正和检定
波长校正用汞灯中较强谱线237.38,253.65,275.28,296.73, 313.16,334.15,365.02,404.66,425.83,546.07nm与576.96nm 或用仪器中氘灯的486.02nm与656.10nm进行校正。 吸收度的检定：用K2CrO7(60mg)+0.005mol/LH2SO4液至1000ml 波长(nm) 235(最小) 257(最大) 313(最小) 350(最大)
E1%1cm
124.5
试剂 NaI NaNO2
144.0
浓度(g/ml) 1.00 5.00
48.62
测定波长 220nm 340nm
106.6
透光率(%) ＜ 0.8 ＜ 0.8
杂散光检查：
4. 对溶剂的要求:
220～240nm 241～250nm 251～300nm 300nm以上
溶剂+吸收池A ＜0.40 ＜0.20 ＜0.10 ＜0.05
色谱法分类： PC；TLC；柱色谱；GC，HPLC
高相液相色谱法分类：吸附；分配；离子交换；排
阻色谱等。
高效液相色谱仪
色谱柱 色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、柱容量大和 性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用
正相HPLC：极性填充剂，弱极性流动相
反相HPLC：固定相极性小于流动相极性，大多C18柱、甲
不经有机破坏的分析方法 经有机破坏的分析方法
一、不经有机破坏的分析方法 1、直接测定法

金属元素不直接与碳原子相连的含金属有机药物或 C-M键结合不牢的有机金属药物，在水溶液中可电
离，不须破坏直接采用适当的方法测定

如葡萄糖酸钙中的钙离子-EDTA络合滴定
2、经（酸、碱）水解后测定法

方法原理（卤素）：将含卤素的有机药物溶于适 当溶剂中，加氢氧化钠或硝酸银溶液加热回流使 其水解，将有机结合的卤素，经水解作用转变为 无机卤素离子，然后采用间接银量法测定。如三 氯叔丁醇的测定。