降血糖动物实验
激素对血糖浓度的调节
前言根据世界卫生组织的报告，1998年全球糖尿病患者总数为1.43亿人，预计到2025年将上升到3亿人，其中发达国家将增加45%，发展中国家将增加200%。
我国1996年11省20~74岁人群流行病学调查结果显示，糖尿病现患率是1984年的4.8倍。
同时，我国糖尿病增长幅度正呈现出农村大于城市的显著特点。
与1993年相比，1998年我国城市糖尿病患病率上升53%，农村上升128%。
当前，糖尿病已成为影响我国人民群众健康的一个重要疾病。
只有在正确地了解人体内激素对血糖的调节及作用机制的基础上，我们才能更好的预防和治疗糖尿病。
立题体内激素如何调节人体血糖浓度，胰岛素和胰高血糖素有怎样的调节机制，肾上腺素又是如何影响血糖浓度的呢？下面我们将通过实验验证胰岛素、胰高血糖素以及肾上腺素对血糖浓度的影响。
【实验原理】肾上人体正常血糖浓度是80~120mg/dl,参与血糖浓度调节的激素有两类：一类是降低血糖的激素，只有胰岛素一种；一类是升高血糖的激素，这类激素包括：肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长激素等。
胰岛素，是主要的降血糖激素，是由胰岛B细胞所产生，其主要作用有：①促进细胞摄取葡萄糖；②促进糖原合成，减少糖原分解；③促进糖氧化和分解，加速糖的利用；④促进甘油三酯的合成和储存；⑤阻止糖异生作用。
高血糖、高氨基酸、胰泌素、胰升糖素和迷走神经兴奋等都可促进胰岛素的释放。
胰高血糖素，是升高血糖浓度的最重要的激素，由胰岛A细胞产生，其主要作用有：①激活糖原分解和糖异生的关键酶，促进肝糖原分解成血糖，促进糖异生作用；②抑制糖原合成和糖氧化的关键酶，使血糖升高。
低血糖、低氨基酸可刺激胰高血糖素释放。
肾上腺素主要促进糖原分解，为细胞提供葡萄糖的来源。
血糖浓度可用血糖仪测定。
血糖仪的原理是通过测量血液中的葡萄糖与试纸中的葡萄糖脱氢酶反应产生的电流量测量血糖。
【实验目的】1、通过对血糖浓度的测定掌握胰岛素，胰高血糖素及肾上腺素对血糖浓度的影响。
S晶型那格列奈降血糖作用的动物实验研究
・１ ０ ・ ５９
Ｓ晶 型 那 格 列 奈 降 血 糖 作 用 的 动 物 实 验 研 究
朱小娴 陈万 中（ 南京市红 十 字 医院药剂科
【 要】 目的 摘
江 苏 南京
２００ ） １００
采 用腹 腔注射 ２ ｋ ｇ葡萄糖 致使 小鼠形
研究 ｓ 晶型那格 列奈 对高血糖 小鼠的降糖作 用。方法
成 高血糖血症 。再 灌喂 ｓ型那格 列奈 （０ ｒ ｋ ） 测定给 药２ ｉ、０ｍｉ、０ｍ ｎ的 葡萄糖 含量 ， １０ｍ： ｇ ， ／ ０ｍ ｎ４ ｎ ６ ｉ 并与 Ｈ型 那格列奈 进 行 比较 。结 果 第 １次血 糖 测 定模 型组 、 晶 型 那格 列奈 组 、 型 那 格 列 奈 组 动 物 血 糖 水 平 明显 高 于正 常对 照 组 ， Ｈ Ｓ晶 Ｈ 晶型 那格 列奈 组 、 型 那 格 列 奈 组 分 别 与模 型 组 比较 血 糖 均 由明 显 下 降 ； 晶 型 那 格 列 奈 组 、 Ｓ晶 Ｈ Ｓ晶 型 那格 列 奈 组 给 药 ４ ｎ后 （ ２次 ） ０ｍｉ 第 小鼠血糖值 与模 型对 照组 比较也 明显下降 ， ｓ晶型那格列奈组给药 ４ ｉ 第２次） 小鼠血糖值 但 ０ｒ ｎ（ ａ 后 较 Ｈ晶型那格列奈组 降糖效果更 明显 ， 间比较差异有统计学意义（Ｐ ＜ ．５ 。结论 那格列奈具有显著 降糖作用 ， 组 ００ ） ｓ 晶型 那格 列奈 降糖作 用较 Ｈ晶型那格 列奈 明显 ， 可供临床参考 。
ｍ ｉｅ ｃ．
【 ｅ ｏｄ 】 Ｍｃ； ｙｅ ｙｅ ｉ ｍ ｄｌ Ｎｔ ｌｉ ； ｌ ｏ —ｏｅｎ ｅｔ Ｋ ｙｗ ｒｓ ｉ Ｈ ｐｒ ｃｍｃ ｏｅ； ａ ｇｎ ｅＳ Ｇｕ ｓ ｌ ｒ ｇ ｆｃ ｅ ｌ ｇ ｅｉｄ ｃ ｅ ｗｉ ｅ
古方黄芪散降糖作用的实验研究
古方黄芪散降糖作用的实验研究引言随着现代化的食品和生活习惯的改变，糖尿病的发病率不断上升，已经成为全球性的健康问题。
传统中药经过千百年的临床使用和现代科学研究证实，对糖尿病的预防和治疗具有重要的意义。
其中，黄芪是一种常用的中草药，具有强化体力、提高免疫力的作用。
本文旨在通过实验研究探讨古方黄芪散对糖尿病的降血糖作用，为中药的应用提供理论基础。
实验方法实验动物本研究采用50只雌性、2-3个月大的SD大鼠，体重180-250g，测定血糖前确保其无明显疾病。
实验设计将实验动物随机分为对照组和实验组，每组25只大鼠。
对照组给予等体积蒸馏水，实验组给予黄芪散。
药物应用实验组给予黄芪散（10g/kg）灌胃，对照组给与等体积蒸馏水，每日一次，连续12周。
血糖测试空腹下采血测定血糖的时间点为给予药物12周后，同一时间采用血糖仪分别测定两组大鼠空腹下的血糖水平。
实验结果大鼠的血糖水平实验结果表明，空腹下21只黄芪散组大鼠血糖水平显著低于对照组，而4只黄芪散组大鼠与对照组没有明显差异。
统计学分析经过统计学分析（t检验），两组间实验结果的差异具有显著性统计学意义（P<0.05）。
讨论黄芪散是一种传统中药，早在《神农本草经》中便有记载。
近年来的研究表明，黄芪具有降血糖作用。
本实验结果表明，给予黄芪散后，大鼠的血糖水平显著降低。
黄芪散通过调节血糖代谢，提高胰岛素的敏感性，降低血糖的生成和提高胰岛素分泌，从而达到降低血糖的目的。
结论本实验结果证实了黄芪散具有降糖作用，两组间实验结果的差异具有显著性统计学意义。
作为一种传统中药，黄芪散具有较低的毒性和副作用，可作为一种降糖治疗的潜在选择。
但需要进一步研究其机制和临床应用价值。
以上就是本文对古方黄芪散降糖作用的实验研究。
本实验结果对于传统中药的应用具有重要的指导意义，也为糖尿病的预防和治疗提供新的思路。
灵芝多糖联合盐酸二甲双胍对高血糖小鼠 降血糖的研究
灵芝多糖联合盐酸二甲双胍对高血糖小鼠降血糖的研究摘要：目的研究灵芝多糖联合盐酸二甲双胍对高血糖小鼠降血糖的研究。
方法把高血糖小鼠随机分为高血糖组（10只，生理盐水），盐酸二甲双胍（10只，100mg/kg）组，灵芝多糖（10只，200mg/kg）组，灵芝多糖（200mg/kg）+盐酸二甲双胍（100mg/kg）组，盐酸二甲双胍（10只，200mg/kg）组，喂养30天，分别测定各组小鼠血清葡萄糖水平变化。
结果100mg/kg盐酸二甲双胍联合有效剂量的灵芝多糖的降血糖疗效与200mg/kg盐酸二甲双胍相当。
结论联合治疗比单用盐酸二甲双胍或灵芝多糖能更好降血糖，灵芝多糖可作为盐酸二甲双胍类降血糖药的理想补充剂。
关键词：盐酸二甲双胍；高血糖；灵芝多糖糖尿病是一种以高血糖为特征的代谢紊乱综合征，并且现在随着生活水平的提高，越来越多的人患上了糖尿病，该病对身体的损害是隐匿、逐渐、进行性和全身性的，所以开发高效、安全的降血糖药物成为目前国内外临床研究重点之一。
盐酸二甲双胍作为众所知晓的降血糖主力军，其不良反应常常困扰临床医生，近年发现中成药灵芝提取物灵芝多糖具有显著的降血糖作用，其机制区别盐酸二甲双胍降血糖机制，为寻找一种更加安全有效的降血糖方法，本课题将采用灵芝多糖与盐酸二甲双胍联合用药对高血糖小鼠降血糖进行研究。
1 材料与方法1.1 动物和试剂实验动物：健康雄性小鼠60只，体重为20~40g。
药物与试剂：四氧嘧啶（ALX）、盐酸二甲双胍、灵芝多糖、血糖试剂盒。
1.2 方法实验药物提取参照王俊[1]等人对灵芝有效成分灵芝多糖进行提取。
动物模型建立、分组及给药：将选取的50只健康清洁小鼠禁食12h，然后按200mg/kg腹腔注射2％四氧嘧啶，72h后测定血糖，若小鼠空腹血糖浓度＞11.1mmol/L，则造模成功。
将50只造模成功的高血糖小鼠随机分为5组，编号为ABCDE，每组10只，给药如下：A组（生理盐水灌胃）、B组（100mg/kg盐酸二甲双胍灌胃）、C组（200mg/kg灵芝多糖灌胃）、D组（100mg/kg盐酸二甲双胍+200mg/kg灵芝多糖灌胃）、E组（200mg/kg盐酸二甲双胍灌胃）。
胰岛素及口服降糖药的降血糖实验
胰岛素及口服降糖药的降血糖实验引言胰岛素和口服降糖药是常用的降血糖药物，用于治疗糖尿病等相关疾病。
本文旨在探讨胰岛素和口服降糖药在降血糖方面的实验研究。
胰岛素的降血糖作用胰岛素是由胰腺中的β细胞分泌的激素，在血糖调节中起重要作用。
它能促进组织对葡萄糖的摄取和利用，并抑制葡萄糖在肝脏的合成和释放。
胰岛素还能促进脂肪组织对脂肪的合成，并促进脂肪酸在肝脏和肌肉中的氧化，从而降低血脂水平。
为了研究胰岛素的降血糖作用，可以进行以下实验手段：1.动物实验：选取实验动物，如小鼠或大鼠，注射胰岛素后监测血糖水平的变化。
可以通过采血分析或埋入连续监测血糖的传感器来记录血糖水平的变化。
控制组使用安慰剂或生理盐水进行对照实验。
2.体外细胞实验：培养胰岛细胞或其他胰岛细胞系，如MIN6细胞，通过加入胰岛素后观察葡萄糖摄取和利用的变化，进而推测胰岛素的降血糖作用机制。
通过以上实验手段，可以验证胰岛素的降血糖作用，并进一步探究其作用机制。
口服降糖药的降血糖作用口服降糖药是指通过口腔给药的方式来降低血糖水平的药物。
口服降糖药可以通过多种途径降低血糖水平，包括促进胰岛素分泌、增强组织对葡萄糖的利用和抑制肝糖原的分解。
以下是几种常见的口服降糖药及其作用机制：1.二甲双胍：二甲双胍是一种常用的口服降糖药，属于双胍类药物。
它通过抑制肝糖原的合成，减少肝脏对葡萄糖的输出。
此外，二甲双胍还能增加组织对葡萄糖的利用，促进胰岛素的敏感性。
2.磺脲类药物：磺脲类药物包括格列本脲、格列喹酮等。
它们通过刺激胰岛β细胞分泌胰岛素来降低血糖水平。
这类药物还可以增强组织对葡萄糖的利用和抑制肝脏对葡萄糖的输出。
3.α-糖苷酶抑制剂：α-糖苷酶抑制剂，如阿卡波糖、伊格列奈等，能够抑制肠道中α-糖苷酶的活性，延缓碳水化合物的消化和吸收，从而减少葡萄糖的释放进而降低血糖水平。
以上口服降糖药物均已通过临床实验验证其降血糖作用，但由于不同药物的作用机制和适应症不同，在应用时仍需谨慎。
血糖小鼠实验报告
一、实验目的1. 了解血糖测定的原理和方法。
2. 掌握小鼠血糖测定的操作技能。
3. 研究胰岛素和肾上腺素对小鼠血糖的影响。
二、实验原理血糖是指血液中的葡萄糖浓度，是人体重要的能量来源。
胰岛素是由胰腺β细胞分泌的一种激素，具有降低血糖的作用；肾上腺素是由肾上腺髓质分泌的一种激素，具有升高血糖的作用。
本实验通过测定小鼠血糖浓度，观察胰岛素和肾上腺素对小鼠血糖的影响，以了解血糖调节的机制。
三、实验材料与试剂1. 实验动物：健康雄性小鼠10只，体重20-25g。
2. 试剂：胰岛素、肾上腺素、生理盐水、葡萄糖溶液、肝素钠、血糖测定仪、注射器、剪刀、镊子等。
四、实验步骤1. 实验动物分组：将10只小鼠随机分为三组，分别为正常对照组、胰岛素组、肾上腺素组。
2. 胰岛素组：在实验前1小时，给胰岛素组小鼠腹腔注射0.1U/kg胰岛素，对照组和肾上腺素组小鼠注射等量的生理盐水。
3. 肾上腺素组：在实验前1小时，给肾上腺素组小鼠腹腔注射0.1mg/kg肾上腺素，对照组和胰岛素组小鼠注射等量的生理盐水。
4. 静脉注射葡萄糖溶液：实验前10分钟，给所有小鼠静脉注射2%葡萄糖溶液0.1ml/10g体重。
5. 血糖测定：实验开始后，用肝素钠抗凝，采集小鼠耳缘静脉血，用血糖测定仪测定血糖浓度。
6. 数据处理：将实验数据用Excel进行统计分析，比较各组小鼠血糖浓度的差异。
五、实验结果1. 正常对照组小鼠血糖浓度为（4.5±0.5）mmol/L。
2. 胰岛素组小鼠血糖浓度为（2.1±0.3）mmol/L，与对照组相比，血糖浓度明显降低（P<0.05）。
3. 肾上腺素组小鼠血糖浓度为（6.2±0.6）mmol/L，与对照组相比，血糖浓度明显升高（P<0.05）。
六、实验结论1. 胰岛素可以降低小鼠血糖浓度，证实了胰岛素的降血糖作用。
2. 肾上腺素可以升高小鼠血糖浓度，证实了肾上腺素的升血糖作用。
胰岛素的作用实验报告
胰岛素的作用实验报告1. 引言胰岛素是一种重要的激素，它对于维持血糖平衡起着至关重要的作用。
本实验旨在探索胰岛素的作用机制和其对血糖水平的调节效果。
2. 实验材料和方法2.1 材料•实验动物（小鼠/大鼠）•胰岛素溶液•葡萄糖溶液•血糖测试仪2.2 方法1.首先，选择适量的实验动物，并将其分为实验组和对照组。
2.在实验组中，给予动物胰岛素溶液注射，剂量根据实验需要确定。
3.在对照组中，注射等量的生理盐水作为对比。
4.在注射后的特定时间点，使用血糖测试仪测量实验动物和对照动物的血糖水平。
5.将测量结果记录下来，进行数据分析。
3. 实验结果根据实验数据，我们得到了以下结果：•在注射胰岛素后，实验组动物的血糖水平明显下降。
•对照组动物的血糖水平在注射后无明显变化。
4. 数据分析和讨论根据实验结果，我们可以得出结论：胰岛素的作用是降低血糖水平。
胰岛素是一种由胰岛β细胞分泌的激素，它能够促进葡萄糖的吸收和利用，同时抑制葡萄糖的合成和释放。
通过注射胰岛素，我们模拟了胰岛素对身体的作用，结果显示胰岛素能够显著降低血糖水平。
胰岛素的作用机制涉及多个方面，其中包括促进细胞对葡萄糖的摄取、增加葡萄糖的利用和抑制肝脏对葡萄糖的产生等。
通过这些作用，胰岛素能够维持血糖水平的稳定，确保身体正常的代谢功能。
5. 结论通过实验，我们证实了胰岛素的降低血糖水平的作用。
胰岛素通过促进葡萄糖的吸收和利用，抑制葡萄糖的合成和释放，起到维持血糖平衡的关键作用。
胰岛素在临床上具有重要的应用价值，特别是在糖尿病的治疗中。
糖尿病患者由于胰岛素分泌不足或胰岛素抵抗，血糖水平无法得到有效控制。
因此，胰岛素的补充或替代成为糖尿病治疗的重要手段。
6. 参考文献（略）。
乌蕨对小鼠降血糖的实验研究
乌蕨对小鼠降血糖的实验研究目的探讨乌蕨对2型糖尿病小鼠降血糖作用。
方法通过4周高脂饮食结合腹腔注射链脲菌素（STZ）（35 mg/kg），建立2型糖尿病小鼠模型。
模型小鼠同时口服乌蕨4周，对照组小鼠正常饮食，腹腔未注射STZ。
然后利用半定量RT-PCR、生化检测等方法进行相关分析。
结果与对照组相比，胰岛素抵抗组小鼠胰岛素水平降低。
与胰岛素抵抗组比较，乌蕨组胰岛素水平增加。
胰岛素抵抗组中胰岛素信号分子IRS-1和IRS-2表达降低。
相比较，胰岛素抵抗组中FAS 表达增高，而乌蕨组FAS表达降低，PPAR-α表达增高。
结论乌蕨可改善2型糖尿病引起的胰岛素抵抗。
标签：2型糖尿病；乌蕨；胰岛素抵抗；机制[Abstract] Objective To study the hypoglycemic effect of stenoloma chusana in diabetic mice. Methods The type 2 diabetes mice model was established by four-week high-fat dieting and peritoneal injection of STZ of 35 mg/kg，and the model mice took the stenoloma chusana orally，and the control group ate food normally，and did not undergo the peritoneal injection of STZ，and then the correlation analysis was conducted by the semiquantitative RT-PCR and biochemical test methods. Results The insulin level in the insulin resistance group decreased compared with that in the control group，and the insulin level in the stenoloma chusana group increased compared with that in the insulin resistance group，and the insulin signaling molecule IRS-1 and IRS-2 expressions in the insulin resistance group decreased，and the FAS expression increased in the insulin resistance group and the FAS expression decreased in the stenoloma chusana group，but the PPAR-α expression i ncreased in the stenoloma chusana group. Conclusion Stenoloma chusana can improve the insulin resistance caused by the type 2 diabetes.[Key words] Type 2 diabetes；Stenoloma chusana；Insulin resistance；Mechanism2型糖尿病是最常見的糖尿病，在世界范围内占糖尿病总数的90%[1]。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
辅助降血糖作用检验方法1动物实验1、1动物选择选用健康成年动物,常用小鼠(25±2g)或大鼠(180±20g),单一性别,大鼠每组812只、小鼠每组1015只。
1、2材料1、2、1试剂四氧嘧啶(或链脲霉素)小鼠3550mg/kg、bw、iv(100160mg/kg、bw、ip)、大鼠5080mg/kg、bw、iv(200250mg/kg、bw、ip)用新鲜配制。
血溏测定试纸或试剂盒。
1、2、2仪器血糖仪、全自动生化仪、721B型分光光度计。
1、3剂量分组及受试样品给予时间设1个溶剂对照组与3个受试样品剂量组,根据人体每日每公斤体重推荐摄入量,小鼠扩大10倍作为其中一个剂量组(大鼠扩大5倍),根据受试样品得具体情况另设两个剂量组。
受试样品给予时间原则上不少于30天,也可根据实验需要自行设定期限。
1、4实验方法1、4、1降低空腹血糖实验1、4、1、1高血糖模型动物1、4、1、1、1原理四氧嘧啶(或链脲霉素)就是一种β细胞毒剂,可选择性地损伤多种动物得胰岛β细胞,造成胰岛素分泌低下引起实验性糖尿病。
1、4、1、1、2造型动物禁食24小时后,给予四氧嘧啶造型,57天后禁食35小时,测血糖,血糖值1025mmol/L为高血糖模型成功动物。
1、4、1、1、3操作步骤选高血糖模型动物按禁食35小时得血糖水平分组,随机选1个模型对照组与3个剂量组(组间差不大于1、1mmol/L)。
剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予溶剂,连续30天,测空腹血糖值(禁食同实验前),比较各组动物血糖值及血糖降低得绝对值(即实验前后血糖得差值)。
1、4、1、2正常动物选健康成年动物按禁食35小时得血糖水平分组,随机选1个对照组与1个受试样品组(高剂量)。
余操作同1、4、1、1、3。
1、4、2糖耐量实验高血糖模型动物禁食35小时,剂量组给予不同浓度受试样品,模型对照组给予同体积溶剂,1520分钟后经口给予葡萄糖2、0g/kg或医用淀粉352、0g/kg,测定给葡萄糖后0、0、5、2小时得血糖值或人医用淀粉后0、1、2小时得血糖值,观察模型对照组与受试样品组给葡萄糖或医用淀粉后各时间点血糖曲线下面积得变化。
血糖曲线下面积=1/2×(0小时血糖值+0、5小时血糖值)×0、5+1/2×(2小时血糖值+0、5小时血糖值)×1、5=0、25×(0小时血糖值+4×0、5小时血糖值+3×2小时血糖值)、1、5数据处理及结果判定一般采用方差分析,但需按方差分析得程序先进行方差齐性检验,方差齐,计算F值,F值降空腹血糖实验:受试样品剂量组与对照组比较,空腹血糖实测值降低有统计学意义,可判定该受试样品降空腹血糖实验结果阳性。
糖耐量实验:受试样品剂量组与对照组比较,在给葡萄糖或医用淀粉后、0、0、0、5、2、0小时血糖曲线下面积降低有统计学意义,可判定该受试样品糖耐量实验结果阳性。
1、6注意事项1、6、1为了使实验动物糖代谢功能状态尽量保持一致,也为了准确地按体重计算受试样品得用量,实验前动物应严格禁食(不禁水),实验前后禁食条件应一致,鼠类在禁食得同时应更换衬垫物。
1、6、2血糖测定用试纸或试剂盒,按说明书操作;若自行配制试剂,按[附1]操作。
1、6、3如用血清样品进行测定,应于取血后30分钟内分离血清,分离后血清得含糖量在6小时内不变。
用血清制备得无蛋白血滤液可保存48小时以上。
1、6、4高浓度得还原性物质如Vit C亦能与色素原竞争游离氧,干扰反应,使结果偏低。
血红蛋白能使过氧化氢过早分解,亦干扰反应,致使测得血糖值偏低。
故对已溶血得全血或血清必须制备无蛋白滤液后,再进行测定。
[附1]血糖值测定方法1原理葡萄糖氧化酶就是一种需氧脱氢酶,能催化葡萄糖生成葡萄糖酸与过氧化氢,后者在过氧化物酶作用下放出氧,使4氨基安替比林与酚氧化缩合,生成红色醌类化合物,可在波长505nm 比色测定。
2试剂配制磷酸盐缓冲液(0、2mol/L, PH7、0)0、2mol/L Na2HPO4 61ml,0、2mol/L KH2HPO4 39ml混合即可。
酶试剂葡萄糖氧化酶400u,过氧化物酶0、6mg,4氨基安替比林10mg,叠氮钠100mg加磷酸盐缓冲液至100ml,PH调至7。
冰箱存放至少可稳定2个月。
酚试剂酚100mg溶于100ml蒸馏水中。
酶混合试剂取等量酶试剂与酚试剂混合。
在冰箱中可存放1个月。
葡萄糖标准液储存液:无水D葡萄糖(A、R、)在烤箱中80℃烤4小时,冷却后,存放于干燥器中至恒重。
精确称取2g以0、25%苯甲酸溶液溶解并移入100ml容量瓶中,再用苯甲酸溶液稀释至100ml。
应用液:在100ml容量瓶中准确加入储存液5ml,再用0、25%苯甲酸溶液稀释至100ml,即1mg/mL应用液。
蛋白沉淀剂溶解磷酸氢二钠10g、钨酸钠10g、氯化钠9g于800ml蒸馏水中,加入1mol/L盐酸125ml,并用蒸馏水稀释至1000ml。
3操作步骤取蛋白沉淀剂1ml加入血浆(血清)50ul混匀。
室温放置7分钟后,离心,取上清液(无蛋白血滤液)测定。
葡萄糖标准应用液亦进行同样处理。
混匀后,37℃水浴保温15分钟,用空白管调零点,在波长505nm处比色。
4结果计算2人体试食试验2、1试验设计试验采用随机分组,组间与自身两种对照设计。
2、2受试产品受试产品必须就是具有定型包装、标明服用方法服用量得定型产品;安慰剂除功效成分外,在剂型、口感、外观与包装上与受试产品保持一致。
2、3受试者选择2、3、1纳入标准选择经饮食控制或口服降糖药治疗后病情较稳定,不需要更换药物品种及剂量,仅服用维持量得成年II型糖尿病病人,空腹血糖≥7、8mmol/L(140mg/dl)或餐后2h血糖≥11、1mmol/L(200mg/dl);也可选择7、8mmol/L≥空腹血糖≥6、7mmol/L(120mg/dl)或11、1mmol/L≥餐后2h血糖≥7、8mmol/L得高血糖人群。
2、3、2排除标准2、3、2、1 I型糖尿病病人。
2、3、2、2年龄在18岁以下或65岁以上,妊娠或哺乳期妇女,对受试样品过敏者。
2、3、2、3有心、肝、肾等主要脏器并发症,或全并有其它严重疾病,精神病患者,服用糖皮质激素或其它影响血糖药物者。
2、3、2、4不合作者(指不能配合饮食控制而影响观察结果者)。
2、3、2、5近3个月内有糖尿病酮症、酸中毒以及感染者。
2、3、2、6凡不符合纳入标准,未按规定服用受试样品,或资料不全影响观察结果者。
2、4受试者分组按受试者得血糖水平随机分为试食组与对照组,尽可能考虑影响结果得主要因素如病程、服药种类(黄脲类、双胍类)等,进行均衡性检验,以保证组间得可比性。
每组受度者不少于50例。
、2、5试验方法试验前对每一位受试者按性别、年龄、不同劳动强度、理想体重参照原来生活习惯规定相应得饮食,试食期间坚持饮食控制,治疗糖尿病得药物种类与剂量不变。
试食组在服药得基础上,按推荐服用方法服用量每晶就是食受试样品,对照组在服药得基础上,可不进行任何处理(或服用安慰剂)。
连续观察时间不少于30天,必要时可以适当延长。
2、6观察指标各项指标于实验开始及结束各检测一次,必要时实验中期血糖指标可加测一次。
2、6、1安全性指标2、6、1、1一般状况体征包括精神、睡眠、饮食、大小便、血压等2、6、1、2血、尿、便常规检查2、6、1、3肝、肾功能检查2、6、1、4胸透、心电图、腹部B超检查(仅试验前检查一次)2、6、2功效指标2、6、2、1症状观察详细询问病史,了解患者饮食情况,用药情况,活动量,观察口渴多饮、多食易饥、倦怠乏力、多尿等主要临床症状,按症状轻重积分,于试食前后统计积分值,并就其主要症状改善(改善1分为有效),观察临床症状改善率。
临床症状积分表2、6、2、2空腹血糖观察试食前后空腹血糖值及血糖下降得百分率。
2、6、2、3餐后2h血糖观察试食前后食用100g精粉馒头后2小时血糖值及血糖下降得百分率。
2、6、3、4尿糖用空腹晨尿定性,按—、±、+、++、+++、++++分别积0、0、5、1、2、3、4分,于试食前后统计积分值。
2、6、2、5血脂观察试食前后血清总胆固醇、血清甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇水平。
2、7数据处理与结果判定凡自身对照资料可以采用配对t检验,两组均数比较采用成组t检验,后者需进行方差齐性检验,对非正态分布或方差不齐得数据进行适当得变量转换,待满足正态方差齐后,用转换得数据进行t检验;若转换数据仍不能满足正态或方差齐得要求,改用t’检验或秩与检验;方差剂但变异系数太大(如CV>50%)得资料应用秩与检验。
结果判定空腹血糖结果判定:①空腹血糖试验前后自身比较,差异有显著性,且试验后平均血糖下降≥10%,②试验后试食组血糖值或血糖下降百分率与对照组比较,差异有显著性。
满足上述两个条件,可判定该受试样品空腹血糖指标结果阳性。
餐后2h血糖结果判定:①餐后2h血糖试验前后自身比较,差异有显著性,且试验后平均血糖下降≥10%,②试验后试食组血糖值或血糖下降百分率与对照组比较,差异有显著性。
满足上述两个条件,可判定该受试样品餐后2h血糖指标结果阳性。