维生素E含量测定方法
对维生素e鉴别实验叙述正确
对维生素e鉴别实验叙述正确
维生素E是一种水溶性维生素，在生物体中具有重要的生理功能。
维生素E主要由α-生育醇（α-tocopherol）和γ-生育醇（γ
-tocopherol）组成，二者具有抗氧化活性。
为了鉴别准确的维生素
E含量，通常要进行维生素E鉴别实验。
一、维生素E鉴别实验步骤
1）准备实验材料。
将要检测的植物抽油样品称取500mg，加入
样品滴管，把抽油样品均匀混合，然后把样品加入10ml凝胶玻璃滴
管中。
2）加入溶剂。
将碘化钠溶液5ml和硫酸钠溶液2ml加入样品滴管，使抽油样品充分溶解。
3）将溶解液加入鉴别器中。
将溶解液稀释到20ml，然后用精密秤量2ml抽油样品，加入鉴别器中，用温度控制器将温度调到400℃，让样品在高温下开花。
4）鉴定正确的维生素E含量。
当抽油样品在高温下发生反应后，根据观测所得的结果，正确地计算出抽油样品中维生素E含量。
二、维生素E鉴别实验的意义
维生素E鉴别实验可以准确的检测出抽油样品中的维生素E含量，这对于科学家们研究植物产物的营养和功能性特征是非常重要的。
此外，维生素E的鉴定结果可以帮助食品加工企业确定抽油样品的存储期限，从而确保食品质量的安全性。
此外，维生素E的正确鉴别也有助于生物制药和化学工业产品开发，可以确保产品质量。
总之，维生素E鉴别实验对于生物、医学和食品科学等多方面都有重要的意义，因此维生素E鉴定实验应该更加仔细严谨，以确保鉴别结果准确无误。
VE含量测定
内标法 供试液（样品+内标） 对照液（对照+内标） 是样品中不存在的物质 与被测组分峰靠近 能与各组分完全分离 与被测组分的量接近
内标物
★定量法:内标法加校正因子A来自i As mi msf =
mx = f
Ai
Ax
ms
实际工作中的计算方法
A对 =K 1 A
内
A样
本品含C31H52O3 = K2 应为 A内 96.0 ~ 102.0%
2、系统适用性试验： n ≥ 500（按维生素E计算） R≥2 （维生素E与内标物 正三十二烷的分离度 ） 3、供试品测定 f ×Ax ×Ms mg= As Ax：供试品峰面积 F：校正因子 As:内标物的峰面积 4、溶液配制： 内标溶液：正三十二烷的环己烷溶液（1.0mg/ml） 对照溶液：对照品溶解于内标溶液中 (1mg/ml) 供试品溶液：供试品约50mg，用内标溶液，溶解 并稀释至50ml
应该采用何种方法？
CH 3 CH 3 CH 3 C O O CH 3 O CH 3 CH 3 CH 3 CH 3 CH 3
根据化学性质： 1.可被硫酸铈定量氧化. ——铈量法 2.三氯化铁反应——生成的亚铁离子作用形成有 色结合物间接测定（三氯化铁—2，2’—联吡啶 比色法）
（一）铈量法
4、样品液的制备:样品测定管U、标准管S、空白管B 5、测定方法：测定Fu、Fs、Fb 6、计算： u b E s b
F F V = 4.0(m g / L) F F
恒波长同步荧光法系在扫描过程中使激发波长和发射波 长彼此间保持固定的波长间隔(Δλ= λem- λex = 常数) ,即 通常所说的同步荧光法,是最早提出的一种同步扫描技术 。在恒波长同步荧光法中,Δλ的选择十分重要,这将直接 影响到同步荧光光谱的形状、带宽和信号强度。在可能 条件下,选择等于斯托克斯位移的Δλ，在理论上如此，但 实际有好多情况下要根据实验来优选，例如:荧光黄，罗 丹明6g和罗丹明B的同步荧光分析中Δλ=3nm,此时所得同 步荧光谱峰信号互不干扰，而随着Δλ的增大，当Δλ=10 ，20nm时，同步荧光峰将变宽，有可能重叠。恒波长同 步荧光光谱法较多用于多组分多环芳烃的同时测定。多 环芳烃性质很相似,尽管有强的荧光,但各种化合物的激 发和发射光谱往往光谱重叠严重,用经典荧光法难以进行 混合物的直接分析。同步荧光法具有选择性好、灵敏度 高、干扰少等特点,可用于多组分多环芳烃混合物的同时
维生素E含量测定方法
维生素E（Vitamin E）是一种脂溶性维生素，其水解产物为生育酚，是最主要的抗氧化剂之一。
溶于脂肪和乙醇等有机溶剂中，不溶于水，对热、酸稳定，对碱不稳定，对氧敏感，对热不敏感，但油炸时维生素E活性明显降低。
含量测定方法名称：维生素E的测定—气相色谱法。
应用范围：该方法采用气相法测定维生素E的含量。
该方法适用维生素E。
方法原理：供试品和内标均制成甲醇溶液，进入气相色谱仪进行色谱分离并检测维生素E和内标正三十二烷的吸收值，计算出其含量。
试剂：正己烷仪器设备：仪器气相色谱仪色谱柱：以硅酮（OV-17）为固定相，涂布浓度为2%，或以HP-1毛细管柱（100%二甲基聚硅氧烷）为分析柱；理论塔板数按维生素E峰计算不低于500（填充柱）或5000（毛细管柱），维生素E峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
色谱柱和典型色谱条件：柱长30 m，柱内径0.53 mm 或0.32 mm，固定液为100%甲基聚硅氧烷柱温：265℃检测器：氢火焰离子化检测器，温度300℃进样口：温度290℃；分流进样，分流比1：20；进样量1μL载气：氮气，流速5 mL/min试样制备：1、称取供试品精密称取该品20mg，放置在棕色具有塞子的瓶中。
2、对照品溶液的制备精密称取维生素E对照品和维生素E对照品25mg，置100mL棕色量瓶中，加异辛烷80mL，避免加热，超声处理1分钟使完全溶解，并加异辛烷至刻度，摇匀，冲氮密塞，避光，0℃以下保存。
3、内标溶液的制备4、供试品溶液的制备该供试品精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，即得供试品溶液。
5、校正因子的测定另取维生素E对照品20mg，精密称定，置棕色具塞中，精密加内标溶液10mL，密塞，振摇使溶解，取1~3μL注入气相色谱仪，计算校正因子。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。
“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。
操作步骤：分别精密吸取上述供试品溶液与对照品溶液1~3μL 注入气相色谱仪测定、计算，即得。
实验六 维生素E的含量测定-液相色谱
实验六高效液相色谱法分离和测定α-ＶE一、实验目的1. 了解高效液相色谱仪的基本结构，掌握液相色谱仪的基本操作方法。
2. 掌握液相色谱分析的定性及外标定量方法。
二、原理1. 高效液相色谱的特点高压泵输送流动相，梯度洗脱，可在柱后直接检测流出液成分，通过改变溶剂极性或强度进而改变色谱柱效能，分离选择性和组分的容量因子，实现改善色谱系统分离度的目的。
2. 高效液相色谱仪(1) 高压输液系统，是提供足够恒定的高压，使流动相以稳定的流量快速渗透通过固定相。
(2) 进样系统，一般采用旋转式六通阀在高压下进样。
(3) 分离系统，在液相色谱柱中完成。
(4) 检测系统，液相色谱常见检测器有：紫外光度检测器，示差折光检测器、荧光检测器电化学检测器。
3. 高效液相色谱的类型根据固定相和分离机理的不同，高效液相色谱如下几种类型(1) 液—固吸附色谱：基于各组分在固体吸附剂表面上具有不同吸附能力而进行分离。
(2) 液—液分配色谱：组分在两相间经过反复多次分配各组分间产生差速迁移，从而实现分离。
(3) 化学键合相色谱：通过共价键将有机固定液结合到硅胶载体表面得到各种性能的固定相。
(4) 离子交换色谱：离子交换树脂上可电离的离子与流动相中带相同电荷的组分离子进行可逆交换，由于亲和力的不同彼此分离。
(5) 离子色谱：用离交换树酯作为固定相，电解质溶液为流动相，用电导检测器检测。
(6) 凝胶色谱：基于试样中各组分分子的大小和形状不同来实现分离。
4. 实验原理反向色谱与正相色谱组成相反，是以非极性或弱极性的固定液制成的固定相，以极性或相对强的极性溶剂作为流动相组成的液—液分配色谱。
但目前多是采用化学反应的方法将非极性或弱极性的有机物分子键合到载体表面，制成键合相的固定相，所以也称键合相色谱。
这种色谱的分离机理比较复杂，一般认为是液—固吸附和液—液分配并存。
在反向HPLC中常用的键合相有十八烷基硅烷(Ｃ18）、辛基硅烷(Ｃ8)氰基硅烷、氨基硅烷等。
实验九气相色谱法测定维生素E的含量
实验九气相色谱法测定维生素E的含量
一、实验目的
熟悉气相色谱法的操作方法
掌握气相色谱法测定维生素E的色谱条件的选择
掌握基于校正因子的内标一点法的含量测定
二、溶液的制备（预试情况）
内标物溶液的配制：精密称取内标物正三十二烷48mg，置50ml容量瓶中，加正己烷溶解并稀释至刻度，得到浓度为49.6mg/ml的内标物溶液。
对照品溶液的制备：精密称取维生素E对照品20.76mg,精密加入内标物溶液10ml，溶解，得到浓度为2.076mg/ml的对照品溶液。
供试品溶液的制备：精密称取样品30.4mg，精密加入内标物溶液10ml，溶解，即得。
三、色谱条件
流动相：氮气
载气流速： 30ml/min ，空气流速：300ml/min，氢气流速：30ml/min
检测器：氢焰离子化检测器
进样量：2微升
进样口温度：300度
柱温：265度
检测器温度：300度
四、数据处理及结果（）
校正因子的测定：精密吸取对照品2μl，注入气相色谱仪，计算相对校正因子（new calibration建立新的校正曲线，需要输入内标和维生素E的浓度或量，仪器自动给出绝对校正因子，RF显示项下全为NO，ISTD项下内标物选择YES，对照品选择NO，然后点击OK，即可）
样品的测定：精密吸取样品2μl，注入气相色谱仪，计算样品含量。
含量测定方法选择ISTD法，只需要打开样品图谱，即可得到含量。
维生素的检测方法
《维生素的检测》一、维生素E取样品0.18g，置于100mL的量瓶中，加无水乙醇稀释到刻度，摇30s，用干滤纸滤过，弃取初滤液，吸取50mL，置于回流瓶中，加硫酸3mL，摇匀，加热回流3小时放冷，移至于100mL量瓶中，用无水乙醇洗条容器，洗液并加入量瓶中，再加入无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取25mL/L，加乙醇(95%)20mL，水10mL/L，二苯胺硫酸溶液2滴(10g/L)，用0.01mol/L 硫酸铈标准液滴定结果用空白试验校正。
计算公式：(试样滴定数—空白滴定数)×标准液浓度×0.002364×8÷质量÷维生素E的标示量<如:50/100 33/100 25/100 20/100 等>×100二、维生素K3(亚硫酸氢钠甲苯酯含量测定)标准溶液配制：取甲萘醌对照品约0.05g，置于250mL的量瓶中，用三氯甲烷溶解，并稀释到刻度，摇匀。
吸取2mL置于100mL量瓶中，用无水乙醇稀释到刻度，摇匀。
样品溶液的配制：取样品1.3g，置于250mL量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。
吸取25mL 至于分液漏斗中，加三氯甲烷40mL/L，碳酸钠溶液5mL(1/100)，剧烈振摇30s，静止分层，分出的三氯甲烷层通过预先用三氯甲烷湿润的棉花过滤到250mL的量瓶中，再加三氯甲烷40mL迅速洗条滤器，洗液并加入量瓶中，水层用三氯甲烷萃取2次，每次约20mL，萃取液过滤，并用三氯甲烷20mL洗条滤器，洗液和全部滤并到量瓶中，用三氯甲烷稀释到刻度,摇匀.吸取2mL至于100mL量瓶中,用无水乙醇稀释到刻度,摇匀.(用分光光度计在250nm波长处平行测定吸收度,用2%三氯甲烷的无水乙醇溶液做空白).计算公式：样品溶液的吸光度×标准溶液的吸光度÷标准溶液的吸光度÷样品溶液的浓度×191.82三、维生素B1 (硝酸硫胺含量的测定)取样0.1g,加水50mL溶解后,加盐酸2mL,煮沸,立即滴加硅钨酸溶液10mL,继续煮沸2nim,用在80℃干燥至恒重有4号垂溶坩埚滤过,沉淀先用煮沸的盐酸溶液洗条2次,每次10mL,再用水10mL洗条一次,最后用丙酮洗条2次,每次5mL,沉淀物在80℃干燥至恒重.计算公式：干燥后沉淀的重量×0.1882÷样品重量÷(1－样品干燥失重,重量百分数)×100四、烟酸取样0.3g,加新沸过的冷水50mL溶解,加酚酞指示剂3滴(1g/L),用0.1monl/L氢氧化钠标准液滴定至粉红色.计算公式：滴定数×标准液的浓度×0.01231÷质量×100五、维生素B6取样0.15g,加冰乙酸20mL与乙酸贡溶液(5g乙酸贡研细加温热的冰乙酸溶解为100mL)5mL,温热溶解,放冷,加(5g/L)结晶紫指示剂1滴,用0.1monl/L高氯酸标准液滴定,至溶液显蓝紫色,并将滴定结果用空白实验校正.计算公式：(样品滴定数－空白滴定数)×高氯酸标准液的浓度×0.02056÷质量×100六、维生素B12(氰钴胺)粉剂外观及颜色：浅红色至棕色细微粒粉末状,具有吸潮性.取样品维生素B12 0.002克,置于100毫升的量瓶中.加水80毫升,充分振摇混合后稀释至刻度,摇匀,用干滤纸过滤(必要时离心),弃去初滤液作为样品测量溶液.取维生素B12(氰钴胺)对照品(干燥品)0.2克,置于1000毫升的量瓶中用水稀释至刻度,摇匀,作为对照品测定液,用水做空白对照,于1cm比色皿内,用分光光度计于361nm波长处测定样品溶液和标准液的吸收度。
维生素E的含量检验方法
维生素E的含量检验方法一、目的：建立维生素E含量标准检验方法，保证分析结果的准确性。
二、依据：GB/T5009.82-2003三、范围：本规程适用于本公司维生素E含量检验操作四、职责：质量检验员对本标准的实施负责五、正文：1、试制和溶液1.1 无水乙醚：:不含有过氧化物。
1.1.1 过氧化物检查方法:用5 mL乙醚加1mL10%碘化钾溶液，振摇1 min，如有过氧化物则放出游离碘，水层呈黄色或加4滴0.5%淀粉溶液，水层呈蓝色。
该乙醚需处理后使用。
1.1.2 去除过氧化物的方法：重蒸乙醚时，瓶中放人纯铁丝或铁末少许。
弃去10%初馏液和10%残馏液。
1.2 无水乙醇：不得含有醛类物质1.2.1 检查方法：取2mL银氨溶液于试管中，加人少量乙醇，摇匀，再加人氢氧化钠溶液，加热，放置冷却后，若有银镜反应则表示乙醇中有醛。
1.2.2 脱醛方法：取2g硝酸银溶于少量水中。
取4g氢氧化钠溶于温乙醇中。
将两者倾人1L乙醇中，振摇后，放置暗处两天(不时摇动，促进反应)，经过滤，置蒸馏瓶中蒸馏，弃去初蒸出的50 mL。
当乙醇中含醛较多时，硝酸银用量适当增加。
1.3 无水硫酸钠。
1.4 甲醇：重蒸后使用。
1.5 重蒸水：水中加少量高锰酸钾，临用前蒸馏。
1.6 抗坏血酸溶液(100 g/L)：临用前配制。
1.7 氢氧化钾溶液(1+1),1.8 氢氧化钠溶液(100 g/1)。
1.9 硝酸银溶液((50 g/L)o1.10 银氨溶液：加氨水至硝酸银溶液(3. 9)中，直至生成的沉淀重新溶解为止，再加氢氧化钠溶液(3.8)数滴，如发生沉淀，再加氨水直至溶解。
1.11 维生素E标准液：a一生育酚(纯度95%)>Y一生育酚(950o),S一生育酚(纯度95%)。
用脱醛乙醇分别溶解以上三种维生素E标准品，使其浓度大约为1 mL 相当于1 mg。
临用前用紫外分光光度计分别标定此三种维生素E溶液的准确浓度。
1. 12 内标溶液：称取苯并「e」芘(纯度98%)，用脱醛乙醇配制成每1 mL相当10 ug苯并「e」芘的内标溶液。
维生素e的测定方法
维生素e的测定方法
维生素E是一种重要的脂溶性维生素，具有抗氧化、抗衰老等作用。
对于维生素E的测定，目前主要有以下方法：
1.高效液相色谱法：该方法通过色谱分离、检测维生素E的吸收峰来确定维生素E的含量。
该方法操作简便、准确度高、灵敏度较好，适用于各种样品的测定。
2.比色法：该方法将维生素E与少量2,2'-二联苯酚在酸性条件下反应，生成具有紫色的吸收峰，根据吸光度测定维生素E的含量。
该方法操作简单、易于推广，但是因为受到其他物质的干扰较大，准确度较低。
3.氧化法：该方法将样品与氧气或过氧化氢反应，将维生素E氧化为各自二烯酸，再通过比色法或荧光法测定各自二烯酸的含量来确定维生素E的含量。
该方法准确度高、灵敏度好，但是操作相对复杂，需要一定的实验技巧。
总之，不同的测定方法适用于不同的样品和实验要求，应根据具体情况选择合适的方法进行测定。
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高效液相色谱法对维生素E粉、E油含量的测定
色谱条件
色谱柱：采用C18柱(长150 mm，内径，粒径4-5μm)
流动相：甲醇(色谱醇)+水(去离子水) 比例：(98 + 2 )
流速： ml/min
检测波长:285 nm
柱温: 25±2 ℃
进样量：20 μL
溶液制备
标准溶液的制备：
本实验室的标准品为液体油状物，因此用注射器抽取直接滴加到容量瓶中称量，把容量瓶放在分析天平托盘上然后滴加，称取维生素E标准品约(准确至,置50mL棕色量瓶中,加甲醇适量溶解并稀释至刻度,摇匀。
绘制标准曲线
把制成 mg/mL的溶液作为贮备液。
分别准确移取、、、、5mL 至10mL的棕色量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀；得到浓度分别为、、、、ml的五种溶液，分别经μm 滤膜滤过,滤液作为标准溶液。
用100μL的进样针分别从制备的不同浓度的标准溶液抽取60μL溶液，注意不能带有气泡，注入液相色谱仪,按色谱条件操作,从——ml依次进样，记色谱峰面积以标准品溶液浓度(C)为纵坐标,峰面积(A)为横坐标,按照外标法过5点绘制标准曲线。
样品溶液的制备：
维生素E粉样品溶液的制备
制备步骤为：研磨→称量→水浴溶解→定容→过滤
1.研磨把试样E粉倒入研钵中适量，用研磨棒轻度研磨至颜色有变化为止。
2.称量把称量纸放到分析天平上然后置零，把研磨好的试样用药匙转移到称量纸
上，称取维生素E 粉约1g(约相当于维生素E 0.5g ，准确至0.0002g),置50mL 棕色量瓶中。
3. 水浴溶解 加甲醇适量,置超声波水浴器中助溶20 min 。
4. 移取定容 冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀，从制备好的溶液中移取1mL
到10mL 的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀;再从制备好的10mL 容量瓶中的溶液中移取放置到10mL 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度,充分摇匀。
5. 过滤 把制备好的溶液经μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。
维生素E 油样品溶液的制备
用注射器直接抽取E 油样品滴加到放在分析天平上的容量瓶中，称维生素E 油样品约20mg,(准确至,置50mL 棕色容量瓶中,加甲醇适量溶解，置超声波水浴中助溶10min,冷却至室温,用甲醇稀释至刻度,充分摇匀；经μm 滤膜滤过,滤液作为样品溶液。
测定步骤
用100L 的进样针抽取60μL 的维生素E 粉、E 油的样品溶液,注入液相色谱仪，按色谱条件操作,得到色谱峰面积(A i )，每批次样品溶液做三个平行样，根据标准曲线上各点的峰面积(A st )，用外标法计算。
计算和结果的描述
计算公式
维生素E 的含量X 2以质量分数(%)表示
X 2=m st ×P st ×A i m i ×A st
×100%
式中：
X 2——样品中维生素E 的含量﹙%﹚
m st ——标准品的质量﹙g ﹚
m i ——样品的质量﹙g ﹚
P st ——维生素E 标准品的含量﹙%﹚
A i——样品溶液中维生素E的峰面积A st——标准溶液中维生素E的峰面积。