动物实验计划书
动物实验中心工作计划范文

动物实验中心工作计划范文动物实验中心工作计划一、背景介绍动物实验中心是一个专门进行动物实验研究的机构,为了确保实验的科学性和伦理性,有必要制定一份详细的工作计划。
本文将提供一个动物实验中心工作计划的范文,以供参考。
二、目标和任务1. 目标:通过开展动物实验研究,促进科学知识的进步,推动医药、农业、环境等领域的发展。
2. 任务:建立科学的动物实验管理制度,进行合理有效的实验设计和实施,确保实验的安全性和可靠性。
三、工作计划1. 实验项目选择与评估a. 定期召开研究会议,评估已有和新提出的实验项目的科学性和伦理性。
b. 根据科研方向和资源限制,优先选择具有最大科学价值和社会影响力的实验项目。
c. 与相关科研机构和专家协商,确定合适的实验方案和方法。
2. 动物管理与养护a. 建立动物管理数据库,详细记录实验动物的基本信息、养护记录和健康状况。
b. 严格按照动物福利法律法规和道德准则,提供适宜的饲养环境和合理的饲料。
c. 定期进行动物健康检查和疾病预防,确保实验动物的健康和完整。
3. 实验设备维护与更新a. 建立设备维护计划,定期检查和保养实验设备,确保其正常运行。
b. 定期评估实验设备的可靠性和安全性,提出设备更新和改善的建议。
c. 配备必要的应急设备和救援措施,以应对突发情况和设备故障。
4. 数据管理与分析a. 建立数据管理系统,确保实验数据的完整性和安全性。
b. 根据实验设计和要求,进行数据分析和结果解读,为研究人员提供科学依据。
c. 定期进行研究成果总结和发布,促进学术交流和科研合作。
5. 项目安全与伦理管理a. 制定严格的实验室安全操作规程,提供必要的安全培训和防护措施。
b. 定期评估实验活动对人员安全和环境的潜在风险,并采取相应的控制措施。
c. 建立伦理委员会,审核和监督实验项目的伦理合规性,确保动物的权益和福利。
四、工作计划的实施与监督1. 实施:根据工作计划中的任务和时间节点,分解具体的工作内容,明确责任人和工作流程,并确保各项任务按时完成。
设计一个动物实验方案

设计一个动物实验方案第1篇设计一个动物实验方案一、实验背景与目的随着生物科学和医学研究的深入,动物实验在科研领域扮演着不可或缺的角色。
本实验方案旨在研究某新型药物对特定疾病的治疗效果及安全性,为后续临床应用提供科学依据。
二、实验对象与分组1. 实验对象:选用成年健康的大鼠作为实验动物。
2. 分组:将实验动物随机分为三组,分别为:- 对照组:不接受药物治疗;- 实验组1:接受低剂量药物治疗;- 实验组2:接受高剂量药物治疗。
三、实验方法1. 实验前准备:- 对实验动物进行适应性喂养,确保其生理状态稳定;- 对实验动物进行编号,便于观察与记录;- 准备实验所需的药物、器械及实验场地。
2. 实验步骤:- 对照组:正常饲养,不接受药物治疗;- 实验组1:按照设定的低剂量给药方案,给予药物治疗;- 实验组2:按照设定的高剂量给药方案,给予药物治疗。
3. 实验观察与记录:- 观察实验动物的进食、活动、粪便等一般情况;- 记录实验动物的体重、体温等生理指标;- 定期进行血液学、生化学、病理学等相关检查,评估药物治疗效果及安全性。
4. 实验周期:根据药物作用周期及实验目的,设定实验周期为4周。
四、实验评价标准1. 药物治疗效果评价:- 观察实验动物疾病症状的改善程度;- 对比实验组与对照组的生理指标变化;- 评估药物对疾病的治疗效果。
2. 安全性评价:- 观察实验动物的一般情况,如进食、活动等;- 监测实验动物的体重、体温等生理指标;- 检查血液学、生化学、病理学等相关指标,评估药物安全性。
五、实验合规性保障1. 遵循我国相关法律法规,确保实验动物福利与伦理。
2. 实验过程中,对实验动物进行人道关怀,减轻其痛苦。
3. 严格遵守实验操作规程,确保实验数据真实、可靠。
4. 加强实验废弃物处理,防止对环境造成污染。
六、实验结果与分析1. 对实验数据进行统计分析,采用t检验、方差分析等方法,比较各组间的差异。
2. 分析药物剂量与治疗效果之间的关系,为后续临床应用提供依据。
动物实验设计方案

动物实验设计方案背景动物实验是科学研究中常用的手段之一,可以帮助科学家们了解动物行为、生理机制以及疾病的发展等方面。
设计一个合理的动物实验方案是确保实验结果准确可靠的关键步骤。
本文档旨在介绍一个典型的动物实验设计方案,涵盖实验目的、实验材料与方法、数据记录与分析等内容,旨在帮助研究人员设计和实施动物实验、整理数据及分析结论。
实验目的本实验的目的是研究X因子对小鼠行为和生理的影响。
通过观察小鼠在不同处理下的行为变化和生理指标变化,评估X因子对小鼠的影响程度,探索其可能的作用机制。
实验材料与方法1. 实验动物选取健康、年龄相近的雄性C57BL/6小鼠作为实验对象。
体重范围控制在20-30g之间。
2. 实验组设计将小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。
实验组接受处理a,对照组接受处理b。
3. 实验条件•温度:22±2℃•相对湿度:40%-60%•光照:12小时日光/12小时黑暗4. 实验处理实验组接受处理a,对照组接受处理b。
具体处理细节如下:•实验组:给予小鼠X因子处理。
•对照组:给予小鼠生理盐水处理。
两组小鼠接受处理后,观察以下指标的变化:•行为观察:通过视频记录小鼠在特定任务下的活动情况。
•生理指标:如血压、心率等。
5. 数据记录对实验过程中所观察到的数据进行记录,包括但不限于以下内容:•每只小鼠的体重•小鼠在特定任务下的运动情况•血压、心率等生理指标的变化6. 数据分析对实验数据进行统计分析,并采用适当的统计方法进行处理。
实验步骤1.准备工作:清洁实验设备、准备实验所需材料。
2.小鼠处理:将小鼠随机分为实验组和对照组,按照实验处理方式进行处理。
3.观察记录:在特定的任务下,观察小鼠的行为变化,并利用视频记录仪记录小鼠的活动情况。
4.生理指标测定:测量小鼠的血压、心率等生理指标。
5.数据记录:详细记录每只小鼠的体重、行为变化和生理指标等数据。
6.数据分析:对实验数据进行统计分析,得出结论。
动物实验工作计划怎么写范文

动物实验工作计划怎么写范文一、实验目的本次动物实验的目的是研究新型药物对于心脏病的治疗效果。
心脏病是一种常见的严重疾病,对于心脏病的治疗一直是医学界的重要课题。
本次实验将利用动物模型,评估新型药物对于心脏病的治疗效果,为临床应用提供科学依据。
二、实验动物的选择本次实验将使用小鼠作为实验动物。
小鼠是一种常见的实验动物,其生殖能力强,寿命短,易于管理,并且具有与人类相似的生理和病理特点,因此被广泛应用于临床前药物研究中。
三、实验设计1. 实验组和对照组本次实验将设置实验组和对照组,实验组将接受新型药物治疗,对照组将接受常规治疗或安慰剂。
通过比较两组之间的实验结果,评估新型药物的治疗效果。
2. 实验时间本次实验将持续4周,每周对实验动物进行一次评估,以评估新型药物对心脏病的长期治疗效果。
3. 实验指标本次实验将评估实验动物的心脏功能、血液生化指标和心肌组织病理变化情况,以评估新型药物的治疗效果。
四、实验步骤1. 实验动物的选取本次实验将选取健康小鼠作为实验动物,每组30只,体重范围相近,性别比例均衡。
2. 实验动物的适应期在实验前,实验动物将进行1周的适应期,以适应实验环境,减少外界环境对实验结果的影响。
3. 实验操作实验组将按照药物说明书的剂量和方法进行药物治疗,对照组将接受常规治疗或安慰剂。
每周对实验动物进行体重测量、心脏超声检查、血液生化指标测定,并在实验结束后对心肌组织进行病理检查。
五、实验安全和伦理考虑1. 实验动物的福利在实验过程中,将严格监控实验动物的生理和行为状态,确保实验动物不受到伤害。
实验动物在实验结束后将得到妥善安置。
2. 实验所需条件实验室将建立符合严格标准的动物实验室,确保实验环境符合实验要求,同时保证实验动物的生理和心理健康。
3. 伦理审查本次实验将经过伦理审查委员会的审查和批准,确保实验过程符合伦理要求。
六、实验数据处理和分析实验结果将进行统计分析,通过比较实验组和对照组之间的差异,评估新型药物的治疗效果。
动物实验方案模板

动物实验方案模板1. 概述本文档是一个动物实验方案的模板,旨在帮助研究人员完整、清晰地撰写动物实验方案。
动物实验是科学研究的重要组成部分,合理的实验设计和规范的实验操作对于保证实验的可靠性和科学性至关重要。
2. 研究目的在本节中,描述研究的目的和预期结果。
明确说明实验所要解决的科学问题和研究假设。
3. 实验对象3.1 动物种类在本节中,详细描述所选动物的物种、品系、性别、年龄等信息。
同时,需要说明所选动物对研究目的的适用性和相关的实验先例。
3.2 实验动物的来源说明实验动物的来源,包括该动物的供应商、养殖方式、饲养条件和健康状况等信息。
3.3 实验动物的饲养和管理详细描述实验动物的饲养和管理要求,包括饲养设施、饲料配方、水质要求、饲养密度、环境温湿度等信息。
4. 实验设计4.1 实验组设计在本节中,描述实验组的划分和设计。
明确每个实验组的动物数量、处理方法和实验时间等信息。
4.2 对照组设计在本节中,描述对照组的划分和设计。
明确每个对照组的动物数量、处理方法和实验时间等信息。
4.3 随机化和盲法说明是否采用随机化和盲法,并详细描述其步骤和原则。
5. 实验操作5.1 实验前准备在本节中,描述实验前准备工作,包括实验仪器设备的校准和准备、实验材料的准备和标识等。
5.2 实验操作步骤在本节中,详细描述实验操作的步骤和方法,包括动物的处理、实验药物的给予和实验观测的时间和方法等。
5.3 实验数据记录和分析在本节中,描述实验数据的记录和分析方法。
包括数据的收集、整理和统计分析等。
6. 实验伦理6.1 动物保护和福利在本节中,说明实验所遵循的动物保护和福利准则。
明确动物实验的合理性和科学性,以及对动物造成的潜在痛苦和不适的最小化处理措施。
6.2 实验伦理审查说明是否已经通过实验伦理审查,并提供伦理审查委员会的批准文件或备案号。
7. 数据分析和结果呈现7.1 数据分析方法在本节中,描述实验数据的统计分析方法,包括所使用的统计学方法、软件工具和显著性水平等。
动物实验计划书模板

动物实验计划书模板
一、实验目的
明确实验的目的和意义,以及对科学研究的贡献。
二、实验动物
1.物种:描述实验动物的种类和品系。
2.年龄:提供实验动物的平均年龄或范围。
3.性别:说明实验动物的性别比例。
4.健康状况:描述实验动物的健康状况和接种疫苗情况。
三、实验方法
1.实验设计和分组:描述实验设计、分组情况和样本量。
2.实验操作:详细描述实验过程中的操作步骤,包括手术、给药、处理等。
3.数据收集:明确实验过程中需要收集的数据指标和采集方式。
四、实验步骤
1.实验前准备:包括动物饲养、动物适应等。
2.实验操作过程:详细描述实验步骤,包括实验前的准备、手术操作、给药、样本采集等。
3.实验后处理:包括动物护理、观察和记录等。
五、预期结果
根据实验目的和实验方法,预测实验结果和可能的意义。
六、风险评估
1.动物风险:评估实验过程中可能对动物造成的伤害和死亡风
险。
2.人员风险:评估实验过程中可能对操作人员造成生物危害和化学危害等风险。
3.风险控制措施:提出针对上述风险的预防和控制措施。
七、伦理审查
1.伦理审查委员会:说明伦理审查委员会的组成和职责。
2.伦理审查流程:描述伦理审查的流程和要求。
3.伦理审查结果:提供伦理审查委员会对实验计划书的审查意见和批准情况。
实验动物策划方案
实验动物策划方案1. 背景实验动物在科学研究中起着重要的作用,为了保证实验的有效性和可靠性,有必要对实验动物进行策划和管理。
本文档旨在提出一个实验动物策划方案,确保实验动物的合理使用和保护。
2. 目标本方案的目标是确保实验动物的合法合规使用,并确保其福利和保护。
3. 策划内容3.1 实验动物种类选择在策划实验时,应选择适当的实验动物种类,根据实验的目的和要求,选择最合适的实验动物种类进行研究。
同时应遵循伦理规范,避免使用濒危物种或存在道德争议的动物。
3.2 实验动物生命周期管理为了确保实验动物的福利和保护,应对实验动物的生命周期进行管理和监控。
具体措施包括:3.2.1 饲养环境提供适宜的饲养环境,包括温度、湿度、通风等条件的控制。
确保实验动物的生活条件符合其自然生活环境的要求,确保动物的舒适度。
3.2.2 饲养标准制定饲养标准,包括饲料的供应、饲养密度的控制、饮水的提供和饲养过程中的疾病防控等。
确保实验动物的健康状况和行为正常。
3.2.3 疾病监测和治疗定期进行实验动物的健康检查,检测和预防传染病。
一旦发现疾病,应及时采取相应的治疗和防控措施,保证实验动物的健康。
3.3 实验动物使用程序为了确保实验的合法合规,应遵循以下实验动物使用程序:3.3.1 实验计划提案在实验开始前,应提交实验计划提案,包括实验的目的、流程、所需实验动物和使用数量等信息。
3.3.2 实验动物伦理审查提交实验计划提案后,需要进行实验动物伦理审查。
专门的伦理委员会负责评估实验计划的合理性、动物使用数量的合理性以及动物福利保护措施的完善性。
3.3.3 实验许可申请获得实验动物伦理审查通过后,需向相关管理部门申请实验许可。
管理部门将评估实验计划的科学性和合法性,发放合格的实验许可证。
3.4 实验动物福利监测为了确保实验动物的福利,应进行定期监测和评估实验动物的福利状况。
监测内容包括实验动物的行为、健康状况、食欲、个体生长等方面的表现。
《上海交通大学实验动物研究计划(AnimalProtocol)(201901版)》
上海交通大学实验动物研究计划(Animal Protocol)(201601版)1)本研究计划是从动物伦理学角度出发,依实验动物使用的减少、替代、优化的3R原则进行填写。
2)在开展动物实验前,请首先将本计划书电子版e-mail至上海交通大学实验动物伦理与使用委员会(IACUC)工作邮箱(iacuc@)。
3)接收后将由IACUC主任指定人员进行格式审查,符合要求后,递交给IACUC委员会成员进行审核,审核意见经汇总并由IACUC工作邮箱反馈给申请者。
4)每月的最后一天为本月提交截止期限。
审核意见反馈时间一般为每月提交截止期限后20个工作日。
5)研究计划被批准后,经PI签字后正式生效。
请课题组递交一式一份纸质版到动物中心204房间,由IACUC主任审核签字,确认研究计划编号,开始订购动物。
1基本资料:□初审□复审;如果是复审,请填写已有的研究计划号()请列出本研究计划中所有动物实验操作人员:注:上岗证编号:可为上海市或我动物中心颁发的上岗证职责可为:课题设计、主要操作、辅助操作、手术操作、实验动物管理等,要求尽量细化。
2 动物需求及购买2.1 动物研究需要:□一年□两年□三年2.2 实验类型:□体外动物研究□在体动物研究□繁殖类动物研究2.3 动物购买:所有动物委托上海交通大学实验动物中心购买,实验负责人将动物合格证复印保存。
2.4 动物需求信息:2.4.1现有动物2.4.2需购买动物2.5 动物运输:动物运输必须符合实验动物中心的规定。
如实验动物中心之间运送动物,描述运输方法及注意事项。
□请上海交通大学实验动物中心代为联系动物提供方及运输措施。
具体应使用专用的实验动物运输车,具有温湿度调控系统。
由运输商提供运输措施。
□特殊要求,请说明:3 研究目的及实验设计3.1 研究目的:3.2 动物实验计划设计背景及您查阅文献的结果:(请附2个或以上查询数据库、参考文献)3.3 使用动物理由:3.4 动物实验步骤:请详细描述动物实验步骤,提供的内容需校实验动物伦理与使用委员会(IACUC)了解动物实验从开始至结束的所有过程;请明确每只动物是如何使用的,动物使用总量应与2.4项动物数量相符。
动物实验发展规划的范文
动物实验发展规划的范文动物实验发展规划是指根据当前社会和科技的发展情况,对动物实验工作进行系统性规划和安排,以提高动物实验工作的质量和效率。
近年来,随着科技的不断发展,动物实验在医学、生物科学、药物研发等领域发挥着重要作用,因此制定动物实验发展规划是非常必要的。
首先,要加强对动物实验工作的监督和管理,建立健全的管理制度和规范,确保动物实验符合伦理要求和法律法规。
同时,加强对动物实验人员的培训和考核,提高其专业水平和操作技能。
其次,要加强动物实验设施和设备的建设,提高实验条件和设备设施的标准化水平,确保动物实验的安全性和可靠性。
同时,开展国际合作,引入国外先进的动物实验技术和设备,提高我国动物实验水平。
同时,要加强对动物实验的伦理和风险评估,确保动物实验的合理性和安全性。
同时,开展对动物实验方法和技术的研究和创新,提高动物实验的效率和准确性。
最后,要加强对动物实验结果的评估和应用,推动动物实验成果向实际应用转化,为人类健康和科学研究提供更多的支持。
总之,制定动物实验发展规划是非常重要的,通过规划和安排,可以有效提高动物实验工作的质量和效率,为人类的健康和科学研究提供更多的支持。
动物实验作为医学和科学研究中的重要手段,在推动人类健康和科学发展方面发挥着不可替代的作用。
因此,动物实验的发展规划需要结合国家政策和发展需求,明确未来发展方向和目标。
首先,需要进一步加强对动物实验伦理的研究和规范,保障动物实验的合理性和道德性。
同时,加强对动物权益的保护,探索和倡导替代实验方法,减少对动物的实验使用。
其次,需要加强基础研究和技术创新,推动动物实验方法和技术的进步。
通过引进和研发先进的实验方法和技术,提高实验效率和准确性,同时不断优化实验操作流程,降低实验成本。
此外,要加强对动物实验结果的应用和转化,促进动物实验成果向临床应用和产业化方向转化。
推动动物实验成果的知识产权保护和产业化合作,加快实验成果的转化速度,为医药和生物科技产业的发展提供更多有力支持。
动物实验个人工作计划
一、前言动物实验是现代科学研究的重要手段之一,尤其在生物学、医学等领域发挥着至关重要的作用。
为了提高我的实验技能,确保实验结果的准确性和可靠性,我制定了以下个人工作计划。
二、工作目标1. 提高实验技能,熟练掌握常用动物实验操作技术。
2. 增强实验设计能力,提高实验结果的可信度。
3. 加强团队协作,提高实验效率。
4. 深入学习动物实验伦理,确保实验过程合法合规。
三、具体工作内容1. 实验技能培训(1)参加实验室举办的实验技能培训课程,学习动物实验的基本操作,如动物抓取、固定、给药等。
(2)通过观看教学视频、阅读相关书籍,自学动物实验技术,如显微镜操作、细胞培养、分子生物学技术等。
(3)在导师指导下,参与实验室常规动物实验,积累实践经验。
2. 实验设计能力提升(1)学习实验设计原则,掌握实验设计方法,如随机分组、对照设置、重复实验等。
(2)参加实验设计培训班,提高实验设计能力。
(3)在导师指导下,参与实验项目的设计,学会从实验目的、方法、预期结果等方面进行思考。
3. 团队协作与沟通(1)积极参与实验室团队活动,加强与同事的沟通交流。
(2)在实验过程中,与团队成员保持密切合作,共同解决问题。
(3)定期召开实验进展会议,汇报实验成果,分享经验。
4. 动物实验伦理学习(1)学习《中华人民共和国实验动物管理条例》等相关法律法规,了解动物实验伦理要求。
(2)参加动物实验伦理培训课程,提高动物实验伦理意识。
(3)在实验过程中,严格遵守动物实验伦理规范,确保实验动物福利。
四、工作计划实施1. 制定详细的时间表,明确每个阶段的工作目标和任务。
2. 每周安排一定时间进行实验技能学习和实践。
3. 每月进行一次实验设计能力评估,分析不足,制定改进措施。
4. 定期参加团队会议,总结实验经验,分享学习心得。
5. 每季度进行一次动物实验伦理自查,确保实验过程合法合规。
五、预期成果通过实施本工作计划,我期望在以下几个方面取得显著成果:1. 熟练掌握常用动物实验操作技术,提高实验效率。
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动物实验计划书篇一:实验计划书实验计划书题目:巴氏杆菌的分离及鉴定实验方案组数:第三组组长:李扬帆组员:苏晓娟王逸涵海旭南孙春亮刘长宝刘珊陈红刘明超卢宁年级:08级专业:动物医学专业实验目的:(1)掌握多杀性巴氏杆菌分离的基本要领和方法(2)掌握多杀性巴氏杆菌培养的原理和方法(3)掌握有关多杀性巴氏杆菌的生化试验(4)通过多杀性巴氏杆菌的分离与鉴定,掌握大肠杆菌的分离和鉴定程序,由此推广到生产实践的应用中去。
试剂:琼脂、牛肉膏、蛋白胨、葡萄糖、乳糖、氯化钠、吲哚试剂、草酸铵结晶紫,革兰氏碘液,95%酒精,石炭酸复红,蒸馏水,生理盐水,二甲苯,香柏油,1%中性红水溶液,无菌的脱纤绵羊或家兔鲜血,靛基质试剂,3%过、胆盐、枸橼酸盐、蔗糖、酵母膏、硫代硫酸钠、0.4%酚红水溶液、磷酸氢二钾实验器材:灭菌的手术刀,镊子,刀片,玻璃皿、染液缸、接种环、试管夹、载玻片、擦镜纸、滤纸、显微镜、酒精棉、超净工作台、恒温箱、高压灭菌锅、试管、培养皿、接种针、漏斗、铁架台、玻璃棒等。
病料采集:取巴氏杆菌致死的小鼠,腹部向上固定于蜡盘上,用酒精棉球消毒体表,打开腹腔,暴露肝脏,用剪刀在火焰烧灼灭菌,在肝脏表面烫之杀死表面杂菌,随即在灼烧部位刺一小孔,用灭菌接种环深入灼烧部位小孔中,将接种棒轻轻旋转2次,借以达到取足采料的目的。
涂片染色镜检:美兰染色:巴氏杆菌致死的小鼠,肝脏或脾脏触片,或心血涂片,以碱性美兰液或瑞氏染色液染色,如发现典型的两极着色的短杆菌革兰氏染色:巴氏杆菌致死的小鼠,肝脏或脾脏触片,或心血涂片,革兰氏染色阴性分离培养鉴定:增菌培养:血清肉汤培养基:在血清肉汤中培养,开始轻度浑浊,4-6d后液体变清朗,管底出现黏稠沉淀,振摇后不分散,表面形成菌环。
分离培养:①取巴氏杆菌致死的小鼠,腹部向上固定于蜡盘上,用酒精棉球消毒体表,打开腹腔,暴露肝脏,用剪刀在火焰烧灼灭菌,在肝脏表面烫之杀死表面杂菌,随即在灼烧部位刺一小孔,用灭菌接种环深入灼烧部位小孔中,将接种棒轻轻旋转2次,借以达到取足采料的目的。
②在血液平板上划线培养,37℃培养24h,观察菌落形态、大小、溶血状况等。
多杀性巴氏杆菌在血液平板上长成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落。
③挑取疑似菌落4-6个:分别作以下实验Ⅰ用血琼脂平板进行分离培养,血液平板上长成淡灰色、圆形、湿润、露珠样小菌落,无溶血现象,革兰氏染色为阴性球杆菌Ⅱ用麦康凯琼脂进行分离培养,麦康凯培养基上不生长Ⅲ将此菌接种在三糖铁培养基上可生长,并使底部变黄。
④多杀性巴氏杆菌的纯培养细菌生化试验:(1)甲基红试验(mR试验):原理:细菌分解葡萄糖产酸,使培养液呈酸性,滴加甲基红试剂呈红色。
方法:细菌接种于葡萄糖蛋白胨水培养基结果:阳性反应:呈红色阴性反应:无变化(2)吲哚试验(靛基质试验)原理:细菌分解色氨酸产生靛基质,与靛基质试剂结合形成红色的化合物而呈色。
方法:细菌接种于蛋白胨水培养基,37℃培养2-3天,沿试管壁缓慢加入靛基质试剂,静置5分钟,观察结果结果:阳性反应:红色环状物阴性反应:无变化(3)氧化酶试验:阳性加2-3滴试剂于滤纸上,用牙签挑去一个菌落到纸上涂布,观察菌落的反应。
阳性反应在5-10s内有粉红到黑色,15min后可出现假阳性反应。
用95%酒精配制的1%的(:动物实验计划书)(4)触酶试验:阳性将3%过氧化氢在载玻片上,挑菌观察有无气泡产生即可。
阳性反应者有气泡,无则为阴性。
(5)VP试验:阴性取24h的纯培养物,接种于葡萄糖蛋白胨水培养基中,置于37℃培养48-72小时,取出后在培养基中先加入VP试剂甲液0.6ml,再加入乙液0.2ml。
静止在试管架上,15min后培养液呈红色者为阳性。
(6)糖发酵试验:原理:细菌分解糖产酸使培养液呈酸性,指示剂表现呈色反应。
方法:细菌接种于糖发酵管内,37℃培养24小时,观察结果。
结果观察:培养基为黄色者,记为+;变黄且产气泡者,记为(+);否则记为-葡萄糖发酵管,乳糖发酵管,蔗糖发酵管,果糖发酵管,麦芽糖发酵管,各两个结果:阳性反应:从蓝紫色变为黄色阴性法应:仍呈蓝紫色(7)明胶穿刺试验:取纯培养物穿刺接种至半固体琼脂培养基,穿刺线应在培养基中间,直至管底,拔出时应原路返回。
结果说明:若该菌有鞭毛,能运动,则部分或全部半固体琼脂变浑浊。
不运动者只在穿刺线上生长。
(8)抑菌试验取菌,用棉签用棉签致密接种于血清琼脂平板上,用无菌镊子将各种抗菌药物圆纸片,分别贴于培养基表面,各片距离要相等。
37度培养24h,观察结果。
血清学鉴定毒力因子检测及抗原鉴定:取纯培养物用0.5%氯化钠溶液洗下制成浓菌液,并分成2份。
一份经100度加热1小时(如仍有不凝集性,则在121度下处理2小时)。
另一份用0.5%福尔马林37度作用24~48小时。
分别用各种抗o血清和抗oK血清对上述菌液做玻板凝集实验。
如该菌株含K抗原,则各种抗o血清不能使福尔马林处理的菌液凝集,但可被各种抗oK血清中的一种凝集。
经100度或者121度加热的菌液可被一种抗o血清凝集,但可能与别的抗o血清发生交叉凝集,可用试管凝集法按凝集效价来排除。
H抗原一般不做鉴定。
试验项目分配篇二:实验计划书实验计划书(初定)此为初步计划书,还有很多不成熟甚至错误之处xxxxxxx年xx月xx 号,望老师给予指出!本实验总体上分为三大步。
(1)生理实验部分:本部分主要进行papaya 硬度和细胞壁相关酶类活性的测定。
(2)分子实验部分:本部分主要是获得papaya细胞壁相关酶类的基因序列以及由Rna差异表达谱获得细胞壁代谢酶基因等的表达特征。
(3)验证实验部分:本部分主要通过实时荧光定量PcR的方法(RealtimeQ-PcR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。
生理实验部分是第一步需要实施的,也是比较独立的部分,初步定为40天左右的时间结束。
分子实验和验证实验部分是本实验的核心,这两部分紧密结合,需要同步进行,首先是各种样本(cK,ETH,1-mcP)的获得,随后是各样本的Rna提取,然后委托深圳华大基因公司进行转录组测序并从转录组中筛选细胞壁代谢相关的基因序列,采用5RacE及3RacE的方法,获得这些基因的全长序列以及构建差异表达谱进行相关差异基因筛选等生物信息分析,最后通过实时荧光定量PcR的方法(RealtimeQ-PcR)验证并初步确定与“橡皮化”相关的细胞壁代谢酶基因的家族成员。
一,买果。
二,采后预处理:采后立即运回实验室,剔除病果和机械损伤果,选用形状、大小、外观颜色相对一致的番木瓜果实,剪留0.5cm长果柄为实验材料。
先用1.0g/L的次氯酸钠溶液洗果10min,再用0.5g/L的施保功溶液浸泡果实10min,取出晾干后备用。
三,样品分组(四组):1.对照组:果实用PE(聚乙烯)保鲜袋包装,轻绑袋口,置于低温(15℃)的恒温箱中贮藏。
2.1.0μl/L的1-mcP处理(橡皮化果实):在室温条件下(25℃),用浓度1.0μl/L的1-mcP密闭熏蒸处理果实24h,取出果实后用PE保鲜袋包装,轻绑袋口,置于15℃(冷藏)、RH(相对湿度)为90%的条件下贮藏。
3.0.5g/L的乙烯利处理:在室温条件下(25℃),用浓度0.5g/L的乙烯利处理果实3分钟,取出果实后用PE保鲜袋包装,轻绑袋口,置于15℃(冷藏)、RH为90%的条件下贮藏。
四,实验过程:贮藏过程中每隔2d(催熟果实)和5d取样一次,鲜果或-70℃贮存,为以后进行基因表达水平的研究。
取样的同时,进行以下生理指标的测定:1.果实硬度:使用果实硬度计(FHm-1型,日本产)进行测定。
2.PG(多聚半乳糖醛酸酶)活性:称取1g果肉,加入5mL(先加3mL,后用2mL冲洗)0.05mol/L,pH4.6的柠檬酸缓冲液低温存放(含5%nacl和1.8mm的EdTa(乙二胺四乙酸)),冰浴研磨匀浆。
然后在10000转离心30min,将上清液进行透析,用0.05mol/L,pH4.6的柠檬酸缓冲液作为透析液,透析液不含EdTa和nacl。
透析条件:4℃条件下放24小时,中间换一次缓析液,透析完的溶液用于酶活力的测定。
该操作在冰浴下进行。
PG活性测定:PG活性测定以1%多聚半乳糖醛酸(PGa,美国Sigma公司)为底物,反应混合液为:1%PGa0.5mL、醋酸钠缓冲液(pH4.6)1.5mL、酶提取液0.5mL,0.5mL的水(总反应体系为3mL),40℃反应60min,立即加入1mLdnS(3,5-二硝基水杨酸)终止反应。
再加入沸水中煮沸10min后冷却,于波长540nm下定量分析酶水解生成的半乳糖醛酸含量。
以3mL蒸馏水+1mLdnS作为对照(cK)。
以每小时释放1mg的d-半乳糖醛酸(美国Sigma公司)为1个酶活性单位(U)。
以标准d-半乳糖醛酸绘制标准曲线。
试验重复3次。
对照不加酶液,以缓冲液代替。
3.PmE(果胶甲酯酶)酶活性:取2g果肉,加3mL预冷的1mol/Lnacl和2gPVP(聚乙烯基吡咯烷酮)置于研钵中,充分研磨后,转移到离心管中,再用2mLnacl润洗,倒入离心管中,于冰浴中放置1小时,每隔20min震荡一次,在4℃下,10000转离心30min,收集上清液,用0.01mol/LnaoH调至pH为7.5,于4℃保存备用。
测定:在试管中依次加入1.5mL0.5%(w/v)的果胶放冰箱备用,有效期5天、0.5mL0.01%溴麝香酚兰指示剂棕色瓶(pH为7.5),1.0mL水,0.5mL酶液(酶液最后加入),总反应体系为3.5mL。
立即将试管放入37℃的水浴锅中30min,以蒸馏水为cK。
取出试管后冷却,迅速测定其在620nm波长一分钟内的变化。
以每min变化0.01为一个活力单位(U),以U/g.Fw表示。
4.纤维素酶(cX):取0.625g羧甲基纤维素钠溶于0.2mol/L(pH为4.6)的醋酸钠缓冲液中,加几滴氢氧化钠调PH值到7.0,放低温下溶解,定容至100mL。
酶液的制备同PG。
活性测定:反应体系为1mLcmc(羧甲基纤维素钠)溶液,酶液1mL,醋酸钠缓冲液(pH4.6)1.0mL(总反应体系为3mL),40℃保温60min,取出加入3,5一二硝基水杨酸(dnS)1mL终止反应;加入沸水中煮沸5min,冷却后用分光光度计在540nm处比色测定吸光度值。
以3mL蒸馏水+1mLdnS作为对照(cK)。
每小时由底物生产1μmol葡萄糖所需的酶量定义为一个酶活力单位(U)。
纤维素酶活力(U/g)=〔葡萄糖含量(mg)×酶液提取总体积(mL)×5.56〕/〔反应液中酶液加入量(mL)×样品重(g)×时间(h)〕式中5.56——1mg葡萄糖的微摩尔数(1000/180=5.56);用3,5-二硝基水杨酸测定生成的葡萄糖做标准曲线。