实验一更年安片薄层色谱鉴别
更年安胶囊薄层色谱鉴别的注意事项
更年安胶囊薄层色谱鉴别的注意事项嘿，朋友们！今天咱来聊聊更年安胶囊薄层色谱鉴别那些事儿。
这可真不是能小瞧的呀！就好像做饭一样，每一个步骤都得恰到好处，不然这“菜”可就不香啦！你想想看，要是在鉴别过程中马马虎虎，那能得出准确的结果吗？这可不是闹着玩的呀！就好比走在一条小路上，你得一步一个脚印，稳稳当当的，不然一不小心就会摔个大跟头。
首先呢，样品的制备可不能马虎。
得把那更年安胶囊里的东西好好弄出来，就像精心挑选食材一样。
要是这里弄不好，后面的一切不都白费啦？这就好像建房子，根基没打好，那房子还能牢固吗？然后就是展开剂的选择啦！这可太重要啦。
就跟给菜加调料似的，得选对了味道才好。
不同的展开剂可能会带来完全不同的结果呢。
这可不是开玩笑的，要是选错了展开剂，那得出的图谱可能就乱七八糟，跟你想要的完全不一样。
还有啊，操作环境也得注意。
不能太潮湿，也不能太干燥，这就像人一样，得在一个舒适的环境里才能好好工作呀。
不然，这实验能顺利进行吗？这可不是瞎操心哦，你想想，如果环境不合适，那些小细节可能就会被影响，结果不就不准确啦？在点样的时候呢，也得小心翼翼的，就像给画上色一样，不能一下子涂太多，也不能涂太少。
得恰到好处，这样出来的图谱才会清晰漂亮呀。
要是点样点得乱七八糟，那还能看得出个啥呀？显色的时候也是，得掌握好火候。
不能太急，也不能太慢。
这就跟煮饺子似的，火候不对，饺子可就不好吃啦。
得耐心等待，让它恰到好处地显色，这样才能看到清晰的斑点。
哎呀，说了这么多，其实就是想告诉大家，更年安胶囊薄层色谱鉴别可不是一件简单的事儿啊！每一个步骤都得用心去做，不能有一丝马虎。
这就像人生一样，每一步都得走得稳稳当当的，才能走向成功呀！所以啊，大家在做更年安胶囊薄层色谱鉴别的时候，一定要认真仔细，可别敷衍了事哦！不然，最后吃亏的可是自己呀！这可不是吓唬你们，这是真真切切的经验之谈呀！希望大家都能做好这个鉴别，得出准确可靠的结果，让我们的实验都能顺顺利利的！。
中药制剂分析实验
中药制剂分析实验一、中药制剂分析实验的一般知识（一）中药制剂分析实验的任务和要求中药制剂分析是一门实践性很强的学科。
中药制剂分析实验的任务是使学生加深对中药制剂分析基本理论的理解，掌握中药制剂分析的基本操作技能，学习中药制剂分析实验的基本知识，养成严格、认真和实事求是的科学态度，提高观察、分析和解决问题的能力，为将来参加工作打下良好的基础。
为了完成上述任务，提出以下要求：1、实验前认真预习，领会实验原理，明确本次实验的目的和要求，了解实验步骤和注意事项，做到心中有数，实验前可以先写好实验报告的部分内容，查好有关数据，以便实验时及时、准确地记录和进行数据处理。
2、实验时要严格按照规范操作进行，仔细观察实验现象，认真记录有关数据。
要善于思考，学会运用所学理论知识解释实验现象，研究实验中的问题。
3、要认真写好实验报告，实验报告要清楚、简练、整洁。
4、学生进入实验室必须严格遵守实验室规则，服从带教老师的指导。
5、爱护实验室的仪器设备，不准将实验室的仪器设备私自带出室外。
使用时，经老师允许后，按照仪器使用说明书进行操作，使用完毕要进行登记。
实验中如有仪器损坏应立即报告老师。
6、严格遵守操作规程及实验时应注意的事项，在使用不熟悉其性能的仪器和药品之前，应查阅有关资料或请教指导教师，不要随意进行实验，以免损坏仪器，浪费试剂，使实验失败，更重要的是预防发生意外事故。
7、实验过程中应注意防火灾、防爆炸、防腐蚀、防污染工作，牢固树立“安全第一”意识。
浓酸、浓碱具有强烈的腐蚀性，切勿溅在皮肤和衣服上。
用浓酸溶解样品时，应在通风厨中操作。
8、实验室严禁吸烟，不许会客，不许带入食物。
9、使用易燃的有机溶剂时，应远离火焰和热源。
低沸点有机溶剂应在水浴上加热，用过的此类溶剂应倒入回收瓶，不要倒入水槽。
10、实验结束后，一切仪器试剂应放回原处，玻璃仪器要清洗干净，一些有毒、有腐蚀性的废液应倒入废液缸内。
11、实验台面要擦试干净，由值日生负责安全卫生工作，包括清理实验室，检查水、电的开关，清除垃圾和污物，关好门窗后方可离开实验室。
HPLC测定更年安胶囊中大黄素的含量
HPLC测定更年安胶囊中大黄素的含量侯宜;尹建元;李宏斌;李艳艳;张莹;李巍;孟庆雯;孟勤【摘要】目的建立更年安胶囊中大黄素含量的高效液相色谱法(HPLC)测定方法,为工业生产的质量控制提供依据.方法采用HPLC测定更年安胶囊中大黄素含量,具体条件为:Shimpack VP-ODS C18(150 mm×4.6 mm,5 μm) 色谱柱,甲醇-0.1%磷酸水溶液(77∶23)为流动相;检测波长为254 nm,柱温为40℃.结果大黄素在0.04～0.32 μg范围内有良好线性关系,回归方程为Y=1 060+2 513102X,r=0.999 1,平均回收率98.6%,RSD为1.88%(n=6);以精密度实验、稳定性实验和重复性实验考察的RSD分别为0.86%、2.33%和1.88%.结论 HPLC测定更年安胶囊中大黄素含量方法可靠,简单可行,可为控制更年安胶囊的内在质量提供科学依据.【期刊名称】《吉林大学学报（医学版）》【年(卷),期】2010(036)006【总页数】3页(P1186-1188)【关键词】更年安胶囊;大黄素;高效液相色谱法【作者】侯宜;尹建元;李宏斌;李艳艳;张莹;李巍;孟庆雯;孟勤【作者单位】吉林大学药学院组织工程教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院天然药物化学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学化学学院新民化学中心,吉林,长春,130021;吉林大学药学院天然药物化学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院天然药物化学教研室,吉林,长春,130021;吉林大学药学院天然药物化学教研室,吉林,长春,130021;东北师范大学附属中学,吉林,长春,130021;吉林大学药学院药学实验中心,吉林,长春,130021【正文语种】中文【中图分类】R284.1更年安胶囊由地黄、泽泻、麦冬、首乌藤、制何首乌等15味中药组成，具有滋阴潜阳，除烦安神的功效，主要用于治疗更年期潮流汗出、眩晕耳鸣、烦燥失眠及血压增高等症。
薄层色谱鉴别
一、复习提问
1、薄层色谱法原理？
2、薄层色谱法的操作步骤。
二、引入课题
波曾色谱法快速、简便、灵敏，是目前中药化学学
[实验目的]
1、掌握中药的薄层色谱法鉴定的实验技术。
2、掌握丹参等中药薄层色谱鉴定的特征和方法。
3、熟悉含有不同类别化学成分中药薄层色谱鉴别的条件及方法。
展开剂要求新鲜配制，不要多次反复使用。
丹参鉴定展开剂为：石油醚-乙酸乙酯（4：1）
6、检测
如果化合物本身有颜色，就可直接观察它的斑点。如果本身无色，可先在紫外灯光下观察有无荧光斑点（有苯环的物质都有），用铅笔在薄层板上划出斑点的位置；对于在紫外灯光下不显色的，可放在含少量碘蒸气的容器中显色来检查色点（因为许多化合物都能和碘成黄棕色斑点），显色后，立即用铅笔标出斑点的位置。
2、供试品溶液制备
取丹参粉末1g，加乙醚5ml，置具塞试管中，振摇，放置1h，滤过挥干，残渣加乙酸乙酯1ml使溶解。
3、对照药材及对照品溶液制备
（1）对照药材溶液制备
取丹参对照药材，同供试品溶液制备方法操作制备。
（2）对照品溶液制备
取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含2mg的溶液。
4、点样
点样用的毛细管为内径＜lmm的管口平整的毛细管。
点样前，可先用铅笔在薄层板一端距底边10mm处轻轻划一横线，作为起始线，然后用毛细管吸取样品在起始线上小心点样，如需重复点样，则应待前次点样的溶剂挥发后方可重点。若在同一块板上点几个样，样品点间距离为10mm以上。样点直径不大于3mm。
5、展开
薄层的展开在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放入层析缸中（小板可用广口瓶代替），使色谱器内空气饱和5－10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中，密闭，上行展开，薄层板浸入展开剂中的深度一般要求液面距离样点原点约5mm，也就是样点的位置必须在展开剂液面之上，展开至规定距离后（一般当展开剂上升到离前端5－10mm时），取出薄层板放平晾干，用铅笔划溶剂前沿的位置后，即可显色检测。
更年灵胶囊中女贞子的薄层色谱鉴别
更年灵胶囊中女贞子的薄层色谱鉴别
荚志鹏
【期刊名称】《海峡药学》
【年(卷),期】2005(17)4
【摘要】目的对更年灵胶囊中女贞子的薄层色谱鉴别.方法采用TLC法对处方中女贞子进行定性鉴别,在原有标准的基础上增加齐墩果酸的定性鉴别从而改进其质量标准.结果与结论方法准确,直观,能有效地控制该制剂的质量.
【总页数】1页(P100-100)
【作者】荚志鹏
【作者单位】三明市药品检验所中药室,三明,365000
【正文语种】中文
【中图分类】R927
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3.露源胶囊中枸杞子、女贞子的薄层色谱鉴别研究 [J], 徐芳琴;马晨超;曹金一;杨志福;石小鹏;爱东
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5.补肾强身胶囊中女贞子的薄层色谱鉴别法 [J], 石李芳;
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7各种类型中药制剂的分析
碱性酒石酸铜试液的标定：
标液：葡萄糖液 指示剂：1%亚甲蓝
•
蔗糖、麦芽糖掺杂物检出方法: 1、间苯二酚试验：存在5-羟甲基糠醛，出现樱 红色或暗红色则为阳性反应 2、紫外吸收：在200～40O nm间测定吸收光谱， 掺杂品在285 ±1nm处有强吸收峰，正品无此现 象
•
第三节 固体中药制剂
• 丸剂、片剂、散剂、冲剂、栓剂等
供试品液D：水洗聚酰胺柱用95%乙醇30 ml洗 脱，洗脱液弃去，继用3mol/L氨乙醇液40ml 洗脱，洗脱液水浴浓缩至干，加入lml甲醇溶解
•
阴性对照液：如上法同步进行 桂皮醛的鉴别：分别吸取供试品液A 细辛挥发油的鉴别：分别吸取供试品液A 麻黄碱的鉴别：供试品液B 芍药苷的鉴别：分别吸取供试品液C 甘草酸的鉴别：分别吸取供试品液D
7各种类型中药制剂的分 析
2020年5月25日星期一
第七章 各种类型中药制剂的分析 研究和设计中药制剂的分析方法的根据：剂型的 特点、被测成分的理化性质、存在状态、以及各 种成分之间相互产生干扰的程度等 含药材粉末的制剂：显微检定检查法可做为重要 方法 常用的提取法：冷浸、回流提取、超声提取等 成分含量较高：考虑选择容量法或重量法用于含 量测定 成分含量较低：选用灵敏度高方法
对照品：阿魏酸
供试品溶液2：等量硅藻土研匀，7%硫酸提取，在 水浴上加热回流，石油醚提取，挥干，残渣加无 水乙醇
薄层色谱鉴别方法验证
薄层色谱鉴别方法验证
薄层色谱鉴别方法验证主要涉及以下步骤：
1. 杂质对照品法：适用于已知杂质并能制备杂质对照品的情况。
取供试品溶液和一定浓度的杂质对照品溶液，分别点样与同一薄层板上，展开，斑点定位。
供试品溶液除主斑点外的其他斑点与相应的杂质对照品溶液或系列浓度杂质对照品溶液的相应主斑点进行比较。
判断药物中杂质限量是否合格。
2. 显色方法：喷雾显色和浸渍显色。
喷雾显色中，显色剂溶液以气溶胶的形式均匀的喷洒在纸和薄层。
浸渍显色中，挥去展开剂的薄层板，垂直的插入盛有展开剂的浸渍槽中，设定浸板及抽出速度和规定在显色剂中浸渍的时间。
3. 专属显色剂法：某些化合物在特定的条件下，能与特定的试剂反应产生颜色，这种颜色是专属的，可以用来鉴别化合物。
4. 比移值法：在一定的色谱条件下，特定化合物的Rf值是一个常数，因此有可能根据化合物的Rf值鉴定化合物。
5. 薄层扫描法：用一定波长的光照射在经薄层层析后的层析板上，对具有吸收或能产生荧光的层析斑点进行扫描，用反射法或透射法测定吸收的强度，以检测层析谱。
对于中成药复方制剂，亦可用相应的原药材按需要组合作阴、阳对照，然后比较其薄层扫描图谱加以鉴别。
以上步骤仅供参考，建议咨询专业人士获取更准确的信息。
心安宁片成品检验记录
1.外观标准规定：应完整光洁、色泽均匀，有适宜的硬度 结果： 。
结果判定：□符合规定 □不符合规定 检验人/日期： 2.性状 标准规定：本品为糖衣片，除去包衣后显黄棕色至棕褐色；气微，味甘。
结果： 。
结果判定：□符合规定 □不符合规定 检验人/日期： 3.鉴别3.1薄层色谱 室温： ℃ 相对湿度： % 仪器：1. 水浴锅2. 薄层色谱摄影仪（紫外）3. 薄层显色喷雾泵4. 型电子分析天平 感量：1mg5. 精密电子分析天平 感量：0.01mg6. 超声波清洗机供试品溶液的制备：取本品10片，糖衣片除去包衣，研细，加甲醇30 ml ，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇5ml 使溶解，作 为供试品溶液。
对照品溶液的制备：精密称定葛根素对照品 g ，置 ml 容量瓶中，加甲醇制成每1ml 含 mg 的溶液，作为对照品溶液。
（配置批号： ）（对照品来源：中国食品药品检定研究院；批号： ）。
薄层板：硅胶G 薄层板展开剂：三氯甲烷-甲醇-水(7：2.5：0.5) 点样量：供试品、对照品溶液各5μl对照品图供试品展 距： cm检视方法：紫外光灯(365nm)下检视。
标准：供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。
结果： 结果判断：□符合规定 □不符合规定 检验人/日期： 3.2薄层色谱 室温： ℃ 相对湿度： % 仪器：1. 水浴锅2. 薄层色谱摄影仪（紫外）3. 薄层显色喷雾泵4. 型电子分析天平 感量：1mg5. 精密电子分析天平 感量：0.01mg 供试品溶液的制备：取本品20片，糖衣片除去包衣，研细，加甲醇30ml ，加热回流1小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml 使溶解，用乙酸乙酯振摇提取3次，每次20ml ，合并提取液，蒸干，残渣加乙酸乙酯1ml 使溶解，作为 供试品溶液。
对照品药材的制备：取制何首乌对照药材 g, 加甲醇30ml ，同法制成对照药材溶液。
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实验一更年安片薄层色谱鉴别一．目的要求1 掌握薄层荧光法的原理及操作。
2 掌握薄层色谱法在中药制剂鉴别中的应用。
二．基本原理更年安片由地黄、泽泻、五味子、制何首乌等药味组成，可利用薄层色谱法对五味子和制何首乌进行鉴别。
五味子中主要有效成分为木脂素类，五味子甲素为其主要有效成分之一，可吸收UV光，在硅胶GF254薄层板上形成暗斑，用对照药材和对照品进行对照，可鉴别制剂中五味子；制何首乌中主要有效成分为蒽醌类，主要为大黄素和大黄素甲醚等成分，在可见光下呈黄色，在氨蒸气中斑点呈红色，紫外光（254nm或365nm）照射下产生荧光，在硅胶G薄板上可在可见光、紫外光或显色后检视其斑点，用对照药材和对照品进行对照，可鉴别制剂中何首乌。
三．仪器与试药1、双槽层析缸、玻璃板10×20cm、三用紫外线分析仪、分析天平(0.01mg)。
2、硅胶G、硅胶GF254。
3、五味子、何首乌（中国药品生物制品检定所）4、五味子甲素、大黄素、大黄素甲醚（中国药品生物制品检定所）5、更年安片（市售）四．操作步骤（一）五味子鉴别1．薄层板制备：含0.3%的羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶GF254薄层板（实验前自制）。
2．供试品溶液制备：取更年安片20片，除去糖衣，研碎，加氯仿30mL，置水浴上加热回流90分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，作为供试品溶液。
3．对照溶液制备：取五味子对照药材0.5g，同上法制成对照药材溶液。
取五味子甲素对照品，加氯仿制成每1mL含1mg的溶液，作为对照品溶液。
4．薄层层析：将薄层板的边缘修饰整齐，作好标记。
用毛细管吸取上述三种溶液各4μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以石油醚（30~60℃）-甲酸乙酯-甲酸（15﹕5﹕1）的上层溶液为展开剂，预平衡15~30分钟，展距10cm，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。
供试品色谱中，分别在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（二）何首乌鉴别1．薄层板制备：含0.5%氢氧化钠溶液的硅胶G板（实验前自制）。
2．供试品溶液制备：取更年安片，除去糖衣，研碎，加甲醇100mL，置水浴中加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL使溶解，再加盐酸2mL，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用乙醚20mL分2次提取，合并乙醚提取液，蒸干，残渣加氯仿1mL使溶解，作为供试品溶液。
3．对照溶液的制备：取何首乌对照药材1.5g，同上法制成对照药材溶液。
取大黄素、大黄素甲醚对照品，加甲醇制成每1mL各含1mg的混合溶液，作为对照品溶液。
4．薄层层析：将薄层板边缘修饰整齐，作好标记。
用毛细管吸取上述三种溶液各2μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-醋酸乙酯-甲酸（15﹕2﹕1）为展开剂，预平衡15~30分钟，展距10cm，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，分别在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，显相同的橙色荧光斑点；置氨气中熏后，可见光下检视，斑点变为红色。
五．思考题硅胶GF254、硅胶G、硅胶H有何不同？实验中如何选择和使用？实验一薄层扫描法测定六味地黄丸中熊果酸的含量一、目的要求1、掌握薄层扫描法测定中药制剂含量的方法。
2、掌握薄层扫描仪的使用方法。
3、掌握薄层定量的点样和展开技术。
二、基本原理薄层扫描法是利用某种波长的单色光对薄层板上经显色后呈现的斑点扫描，通过测定该斑点对光的吸收度而确定其含量。
本实验采用双波长反射式锯齿扫描，测定六味地黄丸中熊果酸的含量。
六味地黄丸由熟地黄160g、山茱萸（制）80g、牡丹皮60g、山药80g、茯苓60g、泽泻60g组成。
三、仪器与试药1.薄层扫描仪、分析天平、索氏提取器、定量毛细管。
2.薄层涂布器、薄层展开缸。
3.薄层层析用硅胶G、其它试剂均为分析纯。
4. 熊果酸对照品（中国药品生物制品检定所）。
5. 六味地黄丸（市售品）。
四、操作步骤1.供试品溶液的制备取水蜜丸，小蜜丸5g，精密称定，或大蜜丸5g，精密称定。
加水30ml，60℃水浴温热使充分溶散，加硅藻土2g，搅匀，滤过，残渣用水30ml洗涤，100℃烘干，研成细粉，连同滤纸一并置索氏提取器内，加乙醚适量，加热回流提取4小时，提取液回收乙醚至干，残渣用石油醚（30～60℃）浸泡两次，每次15ml（浸泡约2分钟），倾去石油醚，残渣加适量无水乙醇-氯仿（3:2）混合液，微热使溶解，定量转移至5ml量瓶内，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.对照品溶液的制备取熊果酸对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
3.测定法精密吸取大蜜丸或小蜜丸供试品溶液10μl，或水蜜丸5μl，对照品溶液2μl与4μl，分别交叉点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯-甲酸（20:5:8:0.1）为展开剂，展开，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热5～7分钟，至斑点显色清晰，取出，在薄层板上覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，进行扫描测定，波长：λs=520nm，λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。
中国药典2000年版规定，本品含山茱萸以熊果酸（C30H48O3）计，水蜜丸每1g不得少于0.20mg；小蜜丸每1g不得少于0.13mg；大蜜丸每丸不得少于1.17mg。
五、思考题1.锯齿扫描与线性扫描的适用范围有何区别。
2.外标一点法与外标两点法应如何选择。
实验二可见分光光度法测定大山楂丸中总黄酮的含量一、目的要求1、掌握用分光光度法测定中药制剂中总黄酮含量。
2、掌握可见分光光度计的使用方法。
二、基本原理大山楂丸由山楂、神曲和麦芽组成，主要功能为开胃消食，其中山楂主要成分为有机酸、黄酮类及多种维生素。
黄酮类化合物具有OOH、OOHO、OHOH结构，可与铝盐、铅盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色配合物，可用可见分光光度法测定其含量。
本实验利用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液中，与Al3+产生高灵敏度的橙红色配合物（λmax=510nm），从而用可见分光光度法（比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
三、仪器与试药1、可见分光光度计、分析天平、索氏提取器。
2、乙醇（A.R）、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、1mol/l氢氧化钠溶液。
3、槲皮素（中国药品生物制品检定所）。
4、大山楂丸（市售品）。
四、操作步骤1、标准液的配制：精密称取槲皮素对照品100mg，置500ml容量瓶中，加95%乙醇250ml使溶解，然后加50%乙醇稀释至刻度，即得0.2mg/ml的对照品溶液。
2、标准曲线的制备：精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于10ml容量瓶(6个)中，各加50%乙醇溶液使成5ml，精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6分钟，加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，再放置6分钟，加入1%氢氧化钠溶液4ml，分别用50%乙醇稀释至刻度，摇匀，放置15分钟。
以第一瓶作空白，用可见分光光度计在510nm处测其吸收度，作A-C标准曲线（或计算其回归方程）。
3、样品液的制备：精密称取120℃干燥2小时的大山楂丸6.5g，置索氏提取器中，用95%乙醇125ml回流提取1.5小时，将提取液移至250ml容量瓶中，补加蒸馏水至刻度，摇匀即得。
4、含量测定：精密量取提取液1ml，平行做3组，按上述标准曲线制备方法进行测定，并由标准曲线或回归方程计算样品中总黄酮的含量。
五、注意事项1、实验证明，提取时间为1.5小时，基本能提尽样品中黄酮。
2、实验证明，样品显色后，在30分钟内测定总黄酮含量，无明显改变，超过30分钟，含量有所改变。
六、思考题1、比色法操作的注意事项是什么？2、总黄酮与单体黄酮的测定方法有何不同？722分光光度计的操作规程1.打开电源开关，预热仪器30 min。
2. 选定所需波长。
3. 打开暗盒、调零(当T灯亮时，按键，屏幕应显示000.0)。
4. 将参比液装入比色皿，放入比色架中，盖上暗盒盖，此时光路开启，让参比溶液置于光路部分，调百((当A灯亮时，按键，屏幕应显示0.000或当T灯亮时，按键，屏幕应显示100.0)5. 将待测液推入光路，读取吸光度值。
(A灯亮时)。
6. 每当改变波长测量时，必须重新校正透光率100%。
7. 仪器使用完毕，取出比色皿，洗净、晾干，关闭电源开关，拔下电源插头，复原仪器。
实验三高效液相色谱法测定三黄片中大黄素和大黄酚含量一．目的要求1、掌握高效液相色谱法原理及高效液相色谱仪的使用。
2、掌握高效液相色谱仪在中药制剂定量分析中的应用。
二．基本原理三黄片为中国药典2000年版（一部）所收载，由大黄、盐酸小檗碱、黄芩浸膏组成，大黄为君药，其主要有效成分为大黄素和大黄酚等蒽醌类成分，标准中利用高效液相色谱法测定了该制剂中大黄素和大黄酚的含量。
三．仪器与试药（1）高效液相色谱仪（紫外检测器）（2）微量注射器（10μL）（3）分析天平（4）水浴锅、分液漏斗、蒸发皿（5）甲醇（色谱纯）（6）重蒸馏水（7）C18色谱柱（8）大黄素、大黄酚对照品（中国药品生物制品检定所）（9）三黄片（市售品）（10）乙醇、氯仿、醋酸乙酯（A.R）（11）微孔滤膜（0.45μm，有机相）四．操作步骤1．色谱条件：C18反相键合硅胶柱；甲醇--0.1%磷酸溶液（85﹕15）为流动相；检测波长为254nm。
理论板数按大黄素峰计算不低于2000。
2．对照品溶液的制备：分别精密称取大黄素和大黄酚对照品适量，加无水乙醇-醋酸乙酯（2﹕1）制成每1mL含大黄素0.01mg、大黄酚0.025mg的混合溶液，即得。
3．供试品溶液的制备：取三黄片20片，除去包衣，精密称定，研细（过三号筛），精密称取适量（约相当于1片的重量），置锥形瓶中，精密加乙醇25mL，密塞，称定重量，置水浴上加热回流1小时，放冷，用乙醇补足减失的重量，滤过，精密量取续滤液10mL，置烧瓶中，水浴蒸干，加30%乙醇-盐酸（10﹕1）溶液15mL，置水浴中加热水解1小时，立即冷却，用氯仿强力振摇提取4次，每次15mL，合并氯仿液，置水浴上蒸干，残渣用无水乙醇-醋酸乙酯（2﹕1）溶解，移置25mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，取续滤液，即得。
4．测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。
五．思考题影响理论板数的因素有哪些？实验中色谱柱一定时将如何提高理论板数？实验三牛黄解毒片中黄芩苷的含量测定一、目的要求1、掌握中药制剂中黄芩苷的测定方法。
2、熟悉高效液相仪的使用方法。
二、基本原理利用高效液相色谱法进行分离牛黄解毒片中的黄芩苷，在λmax315nm处进行检测，为了减小实验条件波动对分析结果的影响，采用随行外标一点法定量。