细胞松弛素B对猪孤雌囊胚DNA甲基化和组蛋白乙酰化的影响

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组蛋白的甲基化和乙酰化

组蛋白的甲基化和乙酰化组蛋白是一种存在于细胞核中的蛋白质，它在维持染色体结构和功能中起着重要的作用。

组蛋白的甲基化和乙酰化是两种常见的修饰方式，对基因表达和细胞功能具有重要调控作用。

甲基化是指在组蛋白上加上一个甲基（CH3）基团的化学修饰过程。

这个过程由一系列酶催化，并且可以在不同的位点上进行。

甲基化可以起到两种不同的作用：一种是直接影响DNA的结构，抑制基因的转录和表达；另一种是通过与其他蛋白质结合，招募特定的蛋白复合物来调节染色体的结构和功能。

甲基化的位点和程度可以决定基因的启动或关闭，从而影响细胞的发育和分化。

乙酰化是指在组蛋白上加上一个乙酰基（CH3CO）基团的修饰过程。

乙酰化主要发生在组蛋白的氨基酸残基上，特别是赖氨酸残基。

乙酰化可以通过增加组蛋白的正电荷来改变其电荷性质，从而影响染色体的结构和功能。

乙酰化还可以提供特定的结合位点，招募其他蛋白质结合并调节基因的表达。

乙酰化的位点和程度也可以决定基因的启动或关闭，从而影响细胞的功能和命运。

组蛋白的甲基化和乙酰化在细胞中是高度动态的过程，可以受到内外环境的调控。

甲基化和乙酰化的酶活性可以受到DNA序列、细胞因子和信号通路的调控。

这些修饰可以在细胞分裂、细胞分化和细胞应激等过程中发生变化，从而影响基因的表达和细胞的功能。

甲基化和乙酰化在遗传学、表观遗传学和癌症研究中具有重要意义。

通过研究组蛋白的甲基化和乙酰化状态，可以揭示基因组的结构和功能，理解基因调控的机制。

甲基化和乙酰化的异常可以导致基因的异常表达和细胞功能的异常，进而导致疾病的发生和发展。

因此，研究组蛋白的甲基化和乙酰化对于深入了解生物学和疾病机制具有重要意义。

组蛋白的甲基化和乙酰化是细胞基因表达和功能调控的重要机制。

这些修饰可以通过改变染色体的结构和功能来影响基因的表达和细胞的命运。

研究组蛋白的甲基化和乙酰化状态对于理解生物学和疾病机制具有重要意义，有望为疾病的诊断和治疗提供新的靶点和策略。

氧分压_培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响

关键词：猪；体细胞核移植；氧分压；生长因子；培养基
Effect of Oxygen Tension, Culture Media and Growth Factors on in vitro Development of Porcine Somatic Cloned Embryos
PAN Deng-ke, LIU Ji, FENG Shu-tang, MU Yu-lian, ZHANG Li
Key words: Pig; Somatic cell nuclear transfer; Oxygen tension; Growth factor; Culture medium
收稿日期：2006-11-22；接受日期：2007-02-14 基金项目：国家“十五”科技攻关项目（2004BA717B）作者简介：潘登科（1972-），男，吉林九台人，博士，研究方向为猪转基因克隆和干细胞。Tel：010-62815893；Fax：010-62899982；E-mail：pand@
。通讯作者冯书堂（1945-），男，河北大名人，研究员，研究方向为小型猪培育和生物技术。E-mail：fst508@
4期
பைடு நூலகம்
潘登科等：氧分压、培养基及生长因子对猪体细胞克隆胚胎体外发育的影响
1187
0 引言
【研究意义】目前，体细胞克隆猪效率较低，克隆胚胎的囊胚发育率在 10%左右，囊胚细胞数约 25～ 35，而体内囊胚的细胞数约为 200。Machaty 等[1]研究发现体外培养的囊胚总细胞数低于体内胚，Koo 等[2] 发现猪的体细胞克隆胚胎（NTEs）以及体外受精胚胎（IVFEs）的细胞数，均明显低于体内胚胎，这反映了猪的体外培养体系还不理想。因此，胚胎体外培养体系的改进将推动猪胚胎体外生产技术的发展，提高体细胞克隆猪的效率。【前人研究进展】近年来猪孤雌激活以及体细胞核移植胚胎的培养方面已经取得了较大进展，但与体内生产的胚胎相比，体外培养胚胎的早期发育率还很低，发育环境不理想[3]。胚胎培养基是影响胚胎发育的一个重要因素。目前，用于猪早期胚胎体外培养比较成功的培养基有 NCSU-23、 PZM-3 和 G2[4]等，其中 NCSU-23 是最常用的[5]。然而该培养基尚有不足，如胚胎发育延迟，细胞数较少。用 Yoshioka 研究出的 PZM-3 培养猪的体内受精胚，囊胚率和细胞数都得到了提高[6]。氧浓度影响胚胎体外培养是近期研究的一个热点[7~11]。胚胎体外培养通常采用 5% CO2，95%空气（20% O2）的气相环境；另一种培养气相是 5% CO2﹕5%～7% O2﹕88%～90% N2，接近生殖道的氧浓度[12]。理论上，低氧可减少培养中自由基和活性氧（ROS）的形成，而活性氧对细胞有毒害作用，易造成 DNA 损伤和脂质过氧化反应[13]。由于猪的卵黄富含脂滴，猪胚胎对脂质过氧化反应特别敏感，因此低氧可能有利于胚胎的发育。目前，两种气相究竟哪种更好还有争议，研究表明有的培养基在低氧环境下更有利于胚胎发育，而有些培养基在普通气相较好。胚胎在体内发育过程中，母畜生殖道分泌的生长因子对附植前的胚胎发育起着重要的作用[14]，如胰岛素、胰岛素样生长因子、表皮生长因子（EGF）以及碱性成纤维因子（bFGF）等。在体外培养胚胎过程中，向培养液内添加生长因子是否对胚胎的发育具有促进作用，研究表明各种类型胚胎在不同阶段的添加效果并不统一[15~17]，对胚胎囊胚发育率和总细胞数的影响也不一致。【本研究切入点】目前，猪的胚胎体外培养的系统仍还不够理想，胚胎体外发育能力较差。【拟解决的关键问题】研究对不同氧分压、几种培养基及添加生长因子（EGF 和 bFGF）对体细胞核移植克隆胚胎的囊胚发育率及囊胚细胞数的影响，优化猪体细胞克隆胚胎体外培养条件，提高克隆胚胎的

细胞生物学练习题及参考答案

细胞生物学练习题及参考答案一、单选题（共55题，每题1分，共55分）1.下列哪个因素的主要作用是使基因的转录活性降低？（）A、H3和H4组蛋白乙酰化B、H1组蛋白的磷酸化C、常染色质异染色质化D、DNA甲基化程度降低正确答案：C2.下面关于Rb蛋白的作用的描述，不正确的一项是（）。

A、Rb蛋白的活性受磷酸化调节B、Rb蛋白作为分子开关，控制着E2F的作用C、Rb蛋白能够被Cdk4、Cdk6/细胞周期蛋白D复合物磷酸化D、Rb蛋白可抑制G2期所需的多种蛋白质的合成正确答案：D3.核糖体大亚基与小亚基结合形成完整的核糖体主要发生在（）。

A、细胞质基质B、高尔基体C、核仁D、内质网膜正确答案：A4.肾上腺素和胰高血糖素都能同G蛋白偶联受体结合，并激活糖原的分解，因此，肾上腺素和胰高血糖素必须（）。

A、具有非常相似的结构，并与相同的受体结合B、同不同受体结合并激活不同的第二信使C、同具有不同的配体结合位点但有相同功能的受体结合D、同相同的受体结合，但一个在细胞外，一个在细胞内正确答案：C5.一氧化氮受体是（）。

[南开大学2011研]A、腺苷酸环化酶B、G蛋白偶联受体C、受体酪氨酸激酶D、鸟苷酸环化酶正确答案：D6.有关纤连蛋白，下面说法错误的是（）。

[南开大学2007研]A、纤连蛋白的膜蛋白受体为整合素家族成员之一，具有与RGD高亲和性结合部位B、纤连蛋白是高分子量糖蛋白，各亚单位在C端形成二硫键交联C、不同的亚单位是不同基因的表达产物，每个亚单位有数个结构域构成D、血浆纤连蛋白是二聚体，由相似的A链及B链组成，整个分子呈V型，细胞纤连蛋白是多聚体正确答案：C7.有关原核细胞与真核细胞的比较，下列说法错误的是（）。

[南开大学2007研]A、真核细胞基因表达有严格的时空关系，并具有多层次的调控B、现有资料表明真核细胞由原核细胞进化而来，自然界真核细胞的个体数量比原核细胞多C、真核细胞内膜系统分化，内部结构和功能的区域化和专一化，各自行使不同的功能D、真核细胞内有一个较复杂的骨架体系，原核细胞内并没有明显的骨架系统正确答案：B8.下列没有细胞壁的细胞是（）。

细胞生物学测试题

细胞生物学测试题一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1、不属于细胞凋亡的变化的是A、细胞器完整B、细胞膜通透性增加C、DNA在核小体连接区被降解为约200碱基对的片段D、线粒体浓缩,跨膜电位改变,细胞色素C释放E、核固缩,碎裂正确答案：B2、戊二醛作为固定剂所作用的主要细胞成分是A、核酸B、蛋白质C、脂类D、糖类E、无机盐正确答案：B3、染色体的核小体是含有由四种组蛋白分子构成的A、2个二聚体排列于四聚体两侧B、八聚体C、异二聚体D、异四聚体E、四聚体正确答案：B4、内膜系统中能够分解转化胞内脂肪酸为乙酰辅酶A进而被细胞再利用的细胞器是A、过氧化物酶体B、溶酶体C、线粒体D、高尔基复合体E、内质网正确答案：A5、果蝇的母体效应基因bicoid基因的mRNA分布在卵母细胞的什么部位A、靠近将来发育成背部的一侧B、均匀分布于细胞中部的细胞质中C、靠近将来发育成头部的一侧D、靠近将来发育成尾部的一侧E、靠近将来发育成腹部的一侧正确答案：C6、COPⅡ的装配与去装配依赖于A、衔接蛋白B、Sar1蛋白C、发动蛋白D、溢断蛋白E、ARF蛋白正确答案：B7、核仁结构的颗粒组分主要是A、常染色质B、rRNA分子C、核糖体亚基前体D、核仁组织区染色体E、异染色质正确答案：C8、角蛋白基因突变导致A、重症肌无力B、阿尔茨海默病C、家族性高胆固醇血症D、维生素C缺乏病E、单纯性大疱性表皮松解症正确答案：E9、间期核内转录活跃的DNA称为A、核仁相随染色质B、兼性异染色质C、核仁内染色质D、异染色质E、常染色质正确答案：E10、细胞衰老的表现不包括A、不溶性蛋白质增多B、细胞硬度增加C、细胞脱水收缩D、新陈代谢减慢E、细胞体积变大正确答案：E11、构成微绒毛的主要成分是A、单微管B、肌动蛋白C、三联微管D、肌球蛋白E、二联微管正确答案：B12、下列不是网格蛋白的特点的是A、需要衔接蛋白协助来进行自组装B、形成三脚蛋白复合物C、囊泡表面具有八边形的结构D、由三条重链和三条轻链构成E、由36个三脚蛋白复合物组成封闭篮网结构正确答案：C13、为细胞培养箱供应二氧化碳气体的目的在于A、降低氧气的浓度B、抑制细菌生长C、缓冲和维持细胞培养基的pH值D、作为必需的养分E、中和胰蛋白酶的作用正确答案：C14、从网织红细胞分化成红细胞属于A、正常的细胞分化过程B、细胞的转分化C、先转分化再去分化D、先去分化再转分化E、细胞的去分化正确答案：A15、染色质的基本结构单位是A、串珠链B、核小体C、30nm染色质纤维D、袢环E、组蛋白核心正确答案：B16、具有增加膜稳定性作用的成分是A、膜脂B、膜糖C、胆固醇D、磷脂E、膜蛋白正确答案：C17、下列关于衰老细胞中生物大分子和代谢的变化的描述不正确的是A、大多数酶分子失活B、复制和转录受抑制C、不饱和脂肪酸被氧化D、蛋白质含量增多E、mRNA含量降低正确答案：D18、现阶段所使用流式细胞仪不具备的功能是A、核型分析B、活细胞与死细胞的甄别C、细胞中DNA含量分析D、多种靶蛋白在细胞样品中表达情况的同步分析E、分选特定表型细胞正确答案：A19、判断细胞凋亡的主要形态结构是A、细胞皱缩B、染色质凝集C、微绒毛减少D、凋亡小体形成E、细胞膜完整正确答案：D20、关于Caspase家族编码产物的作用,以下正确的是A、具有蛋白酪氨酸激酶活性B、诱发衰老C、促进细胞凋亡D、生长因子受体E、生长因子正确答案：C21、DNA袢环模型中描述每个袢环包含核小体数目为A、8个B、315个C、200个D、30个E、18个正确答案：E22、与透射电镜成像相关的术语是A、二次电子B、衍射C、相差D、荧光E、电子透过正确答案：E23、关于DNA甲基化的说法错误的是A、DNA甲基化后仍能够与蛋白质结合B、DNA甲基化促进基因表达C、DNA甲基化参与珠蛋白基因选择性表达D、DNA甲基化与染色质结构改变相关E、DNA甲基化发生在胞嘧啶上正确答案：B24、核小体组蛋白包括A、2B、2C、4D、2个E、1个F、2个G、2个H、3、1个正确答案：D25、CFTR蛋白缺失将造成哪种离子的转运障碍A、HCO3-B、ClC、NaD、CaE、K正确答案：B26、在电镜下,核被膜的结构不包括A、核周间隙B、核纤层蛋白C、外核膜D、内核膜E、核孔复合体正确答案：B27、脂双层中含量最高的脂类成分是A、膜脂B、胆固醇C、磷脂D、膜糖E、膜蛋白正确答案：C28、主要由二联管参与构成的结构是A、微绒毛B、纤毛C、基体D、中心粒E、纺锤体正确答案：B29、连接RNA多核苷酸长链的主要化学键是A、肽键B、高能磷酸键C、磷酸二酯键D、氢键E、糖苷键正确答案：C30、MORF4基因能表达一种与细胞衰老死亡有关的转录因子,该基因突变可导致细胞永生化,而将MORF4基因片段导入到缺失MORF4基因的永生化细胞后,可使永生化细胞衰老。

组蛋白的甲基化和乙酰化

组蛋白的甲基化和乙酰化组蛋白是一类含有大量赖氨酸和苏氨酸的蛋白质，它是染色质的基本单位。

组蛋白的修饰在细胞的生命活动中起到重要的调控作用。

其中，甲基化和乙酰化是最为常见和重要的修饰方式。

本文将分别介绍组蛋白的甲基化和乙酰化，并阐述它们在细胞功能和疾病发生中的作用。

一、组蛋白的甲基化甲基化是指在组蛋白的赖氨酸残基上加上一个甲基基团。

该修饰方式通常发生在赖氨酸的氮原子上。

甲基化修饰可以通过甲基转移酶来实现，其中最为重要的甲基转移酶是组蛋白甲基转移酶（PRMT）。

甲基化修饰可以在组蛋白的不同位置进行，如赖氨酸的侧链上、赖氨酸的氨基端和羧基端等。

甲基化修饰可以对染色质结构和功能产生重要影响。

首先，甲基化修饰可以改变染色质的结构，使其更加紧密，从而影响DNA的可及性和基因的表达。

其次，甲基化修饰可以参与转录调控，影响基因的启动子活性和转录因子的结合。

此外，甲基化修饰还可以参与染色质的重塑和DNA修复等生命活动过程。

甲基化修饰在细胞功能和疾病发生中具有重要作用。

例如，甲基化异常与多种疾病的发生密切相关，如肿瘤、心血管疾病和神经系统疾病等。

甲基化异常可以导致基因的过度沉默或过度激活，从而破坏细胞的正常功能。

因此，研究甲基化修饰在疾病中的作用机制，对于疾病的早期诊断和治疗具有重要意义。

二、组蛋白的乙酰化乙酰化是指在组蛋白的赖氨酸残基上加上一个乙酰基团。

乙酰化修饰通常发生在赖氨酸的氨基端上。

乙酰化修饰可以通过乙酰转移酶来实现，其中最为重要的乙酰转移酶是组蛋白乙酰转移酶（HAT）。

乙酰化修饰可以在组蛋白的不同位置进行，如赖氨酸的侧链上、赖氨酸的氨基端和羧基端等。

乙酰化修饰可以对染色质结构和功能产生重要影响。

首先，乙酰化修饰可以使组蛋白的正电荷减少，从而减弱组蛋白与DNA之间的静电相互作用，使染色质更松散，增加DNA的可及性和基因的表达。

其次，乙酰化修饰可以提供转录因子结合位点，促进转录因子的结合，从而增强基因的转录活性。

关于猪卵母细胞孤雌激活技术概述

关于猪卵母细胞孤雌激活技术概述摘要：孤雌激活随着近年来体细胞克隆技术的兴起而成为了又一研究热点，而猪由于其生理结构与人的相似性，所以其卵母细胞的孤雌激活更具有特别的研究价值，文章就孤雌激活的概念、机理、方法、影响因素等方面全面论述了猪卵母细胞孤雌激活的研究概况。

关键词：猪；卵母细胞；孤雌激活孤雌生殖(parthenogenesis)作为一种生殖方式在无脊椎动物和低等脊椎动物中较为常见，在鱼类、两栖类、爬行类和鸟类等脊椎动物中也存在孤雌生殖的现象，但哺乳动物在自然状态下则未见有孤雌生殖现象。

孤雌生殖的关键是提高卵母细胞的激活率，通过人工模拟自然条件下卵母细胞的自然激活机理(卵母细胞的自发激活和精子穿入引起卵母细的激活)创造更多更好的激活方法，从而进一步提高卵母细胞的孤雌激活率，一直是孤雌生殖研究的重点内容，具有重要的研究价值。

一方面可把卵子活化的各个过程(如皮质反应、减数分裂的恢复和发育到第l次卵裂过程)分开来研究，对于阐明哺乳动物卵激活过程的信号偶联过程、细胞周期阻滞的恢复、受精机制和发育机理具有重要意义。

另一方面，卵母细胞激活是细胞核移植和胞质内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection，ICSI)的关键环节，卵母细胞的激活率的高低直接关系到ICSl技术的效率，目前，卵母细胞激活率很低是核移植和胞质内单精子注射成功率低的重要原因之一。

同时，由于猪的生理结构与人的诸多相似，被医学界认为是人类器官移植的最佳提供者，且猪的数量充足，妊娠周期短，产仔多，容易饲养，取材容易，充分满足临床需要，未来在生物医学方面有潜在的重要应用前景，这使猪的孤雌激活技术成为近年来的研究热点，这对于畜牧业和生物医学具有重大理论和实践意义。

1. 卵母细胞孤雌激活的概念孤雌生殖是指无雄性配子的任何作用，由雌性配子产生个体的繁殖[1]。

孤雌生殖的关键是提高卵母细胞的激活率，而卵子在自然条件下的激活是由精子穿入刺激引起的，即由于精子的进入启动M Ⅱ期卵母细胞继续发育，这一过程称为卵母细胞的激活。

组蛋白的乙酰化修饰

组蛋白的乙酰化修饰组蛋白的乙酰化修饰是一种重要的表观遗传修饰方式，它能够影响基因表达、细胞分化以及生物体发育等过程。

在本文中，我们将深入探讨组蛋白乙酰化修饰的机制、功能以及在疾病中的作用。

组蛋白是构成染色质主要蛋白质之一，它能够包裹DNA形成染色体。

组蛋白分为四种类型，其中组蛋白H3和H4是核心组蛋白，它们在染色质结构以及DNA复制中起着重要作用。

组蛋白的N-端富含亮氨酸、赖氨酸、组氨酸等氨基酸，这些氨基酸可以被乙酰化、甲基化、泛素化等多种方式修饰。

乙酰化修饰是组蛋白最为常见的修饰形式之一。

乙酰化是指乙酰基（CH3CO-）与氨基酸的氨基结合，形成酰化产物。

组蛋白的乙酰化通常发生在N-端的赖氨酸上，它能够影响组蛋白的电荷、染色质结构以及DNA与组蛋白的相互作用。

乙酰化修饰的机制涉及到乙酰转移酶（HAT）和去乙酰化酶（HDAC）两类酶。

HAT能够将乙酰基转移至组蛋白的赖氨酸上，而HDAC则能够将乙酰基从组蛋白上去除。

这两类酶的平衡调节是组蛋白乙酰化修饰的关键。

组蛋白乙酰化修饰对基因表达的调控是其最为重要的功能之一。

研究表明，组蛋白乙酰化修饰可以增加染色质的松弛程度，使得DNA 序列更加容易被转录因子识别和结合，从而促进基因的转录。

此外，乙酰化修饰还能够影响组蛋白的稳定性以及组蛋白与其他蛋白质的相互作用，进而对基因的表达产生调控作用。

组蛋白乙酰化修饰在细胞分化和生物体发育中也发挥着重要作用。

研究表明，在胚胎发育过程中，组蛋白的乙酰化水平会发生动态变化，不同时期的胚胎表现出明显的组蛋白乙酰化模式。

此外，组蛋白乙酰化修饰还可以促进细胞分化和成熟，维持细胞的稳态。

除此之外，组蛋白乙酰化修饰还与多种疾病的发生发展密切相关。

例如，某些肿瘤细胞中组蛋白的乙酰化水平明显升高，这可能与肿瘤细胞的增殖和转移有关。

此外，一些神经系统疾病、心血管疾病等也与组蛋白乙酰化修饰的异常有关。

组蛋白的乙酰化修饰是一种重要的表观遗传修饰方式，它能够影响基因表达、细胞分化以及生物体发育等过程。

组蛋白的乙酰化

百泰派克生物科技
组蛋白的乙酰化
组蛋白是真核生物染色质中的一种碱性蛋白质，可与DNA双螺旋形成DNA-组蛋白
复合物。

在不同的组蛋白酶作用下，组蛋白会发生不同的修饰，如甲基化、乙酰化、磷酸化和泛素化等。

组蛋白修饰在一定程度上会导致转录激活或基因沉默，从而调控基因表达，影响免疫系统和免疫反应，甚至导致肿瘤等疾病的发生。

在乙酰化转移酶（HAT）的作用下，组蛋白的N端碱性氨基酸集中区的特定赖氨酸
残基可以共价结合乙酰基发生乙酰化修饰，从而激活转录反应；乙酰化修饰与磷酸化修饰一样，是可逆的修饰过程，在组蛋白去乙酰化酶（HDAC）催化下，组蛋白能发生去乙酰化，抑制基因表达。

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Q ExactiveHF质谱平台结合Nano-LC，
提供组蛋白翻译后修饰分析服务技术包裹，可对各种组蛋白修饰如乙酰化、甲基化、泛素化、磷酸化和ADP核糖基化等进行定性和定量鉴定，还可根据需求提供定制化的检测方案，欢迎免费咨询。

常见组蛋白修饰调控滋养层细胞谱系分化的研究进展2024

常见组蛋白修饰调控滋养层细胞谱系分化的研究进展2024摘要胎盘是决定妊娠建立及维持胎儿正常生长发育的重要器官，其介导了母胎间的复杂对话。

滋养层细胞是执行胎盘功能的一类重要细胞类型，在胎盘发育过程中，滋养层干细胞可分化为多种滋养层细胞亚型，从而维持胎盘的结构和功能。

组蛋白修饰可通过调控染色质的结构及基因转录参与滋养层细胞谱系的建立和维持。

本文系统性总结了重要组蛋白甲基化及乙酰化修饰调控滋养层干细胞分化及胎盘发育的复杂作用及机制。

【关键词】胎盘；组蛋白修饰；滋养层干细胞滋养层细胞是执行胎盘功能的特化上皮细胞类型，参与了子宫螺旋动脉重塑、母胎血液循环建立、营养物质交换、激素分泌等重要生理过程［1-2］。

在胎盘发育过程中，滋养层干细胞分化形成不同的滋养层细胞亚型，以维持胎盘结构完整性及功能多样性［2］。

滋养层干细胞可通过自我更新维持一定的分化潜能，其干性缺失及后期分化异常可导致胎盘结构及功能障碍，与子痫前期、宫内生长受限、流产等不良妊娠结局密切相关［3-7］。

现有研究表明，组蛋白修饰作为一种重要表观遗传调控方式，可通过调节滋养层细胞谱系分化过程中特异基因的时空表达参与滋养层细胞干性的维持及命运决定［8］。

本文主要针对代表性组蛋白甲基化及乙酰化修饰在滋养层干细胞分化中的作用进行综述。

一.,滋养层细胞分化与胎盘发育在人类胚胎发育早期，受精卵通过卵裂逐步形成由外周的滋养外胚层(trophectoderm,TE)及内侧的内细胞团(innercellmassJCM)组成的囊胚，从而构成胚胎植入及后续胎盘发育的起点［9］。

所有胎盘滋养层细胞亚型均来自于滋养外胚层细胞，主要包括细胞滋养层细胞(cytotrophoblast,CTB)、合胞体滋养层细胞(Syncytiotrophoblast,STB)及绒毛外滋养层细胞(extravilloustrophoblast,EVT)等［10-11］。

在胚胎植入过程中，与子宫内膜上皮细胞接触的滋养层细胞发生初级合体化形成初级合体滋养层细胞，介导胚胎侵入子宫内膜上皮［12］。

5-aza-dc和TSA对广西陆川猪体细胞核移植的影响

７５ｐ／Ｌ细胞松弛素ＢＣ）．．ｍｇ（Ｂ。
养培养箱中培养１ｈ左右，检查其融合情况。１２４胚胎培养．．将融合后的重构胚胎用ＮＳ一ＣＵ２＋／ＬＢＡ＋．ｇｍＬＢ洗涤２遍，３４ｍｇｍＳ７５／Ｃ然后转移到预先在Ｃ：Ｏ培养箱中平衡至少２ｈ的用石蜡油覆盖的ＮＳ－３＋４ｍｇｍ７５Ｉ／ＬＣＣＵ２／Ｌ＋．ｇｍＢ液￣
制组蛋白的去乙酰化作用，使核小体组蛋白乙酰化
乙酰化，使有重要作用的基因没有表达或异常表达Ｊ。在重编程中一些印记以及非印记基因能否
正常重新程序化关系到胚胎的后期发育。在诸多物
收稿日期：０１２－６２１－０２基金项目：国家自然科学基金资助项目（０６０９；３８０３）农业部“ 转基因生物新品种培育重大专项项目（０９Ｘ８１－３）广西２０Ｚ００００Ｂ；２自然科学基金重点项目（００ＸＮＦ０３２）广西大学创新２１ＧＳＤ１０１；团队建设计划项目（００２１）作者简介：秦小娥（９２，，１８一）女广西桂林人，硕士，主要从事哺乳动物胚胎工程研究，为通讯作者。・
处理供体细胞和重构胚。结果显示，－ｚ－ｃ联合ＴＡ处理供体细胞、５ＡａｄＳ重构胚以及连续处理供体细胞和重构胚，桑椹胚率均显著
高于对照组（００）但各组问囊胚率差异不显著。说明５ａａｃ联合ＴＡ处理供体细胞和克隆胚能提高猪克隆胚的发育能Ｐ＜．５，－－ｚｄＳ力，尽管差异不显著。

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ａｎｄＨ３Ｋ９ｍｅ３ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄ．Ｔｈｅｓｅｒｅｓｕｌｔｓｐｒｏｖｉｄｅａｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｂａｓｉｓｆｏｒｔｈｅ
ｃｒｅａｓｅｄ。ｂｕｔｔｈｅｌｅｖｅｌｏｆＡｃＨ３Ｋ９ｈａｄｎｏｏｂｖｉｏｕｓｃｈａｎｇｅ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆ５ｈｍｃ／５ｍｃ
摘要：以猪电激活孤雌胚胎为研究对象，通过添加细胞松弛素Ｂ（ＣＢ）对胚胎发育过程中ＤＮＡ甲基化和组蛋白乙酰
化的变化进行了研究。利用荧光定量ＰＣＲ检测了囊胚中ＤＮＡ甲基转移酶（Ｄｎｍｔ１，Ｄｎｍｔ３ａ，Ｄｎｍｔ３ｂ）、组蛋白乙
＊Ｃ０ｒｒＰｓ０
，ｚｇａｕｔｈｏｒ
收穗日期：２０１５ — １１ — ０６基金项目：国家“ ９７３计划” 资助项目（２０１１ＣＢ９４４２０４）作者简介：侯蛹逍（１９９９一），女，硕士。＊通讯作者
ｒａｔｅ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｐｅｒｃｅｎｔａｇｅｏｆａｐｏｐｔｏｔｉｃｃｅｌｌｓｉｎｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｓ．ＴｈｅｍＲＮＡｌｅｖｅｌｓｏｆＤｎｍｔｌ，
Ｄｎｍｔ３ａ，Ｄｎｍｔ３ｂ，ＨａｔｌａｎｄＨｄａｃｌａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ — ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅ（Ｂａｘ，Ｃａｓｐ３）ｗｅｒｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅ —
ＨＯＵＸｉａｏ — ｘｉａｏ，ＷＡＮＧＹｕ — ｔｉａｎ，ＴＡＮＧＢｏ，ＺＨＡＮＧＸｕｅ — ｍｉｎｇ，ＬＩＺｉ — ｙｉ ’ （１．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＡｎｉ —
ｅａｒｌＳｃｉｅｎｃｅ，ＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００６２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｔａｔｅ＆ＬｏｃａｌＪｏｉｎｔＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＬａ —
ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢｏｎＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎｄｈｉｓｔｏｎｅａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎｏｆｐｏｒｃｉｎｅｐａｒｔｈｅｎｏｇｅｎｅｔｉｃｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｓ
ＡｃＨ３Ｋ９的表达无明显变化；而５ｈｍｃ／５ｍｃ和Ｈ３Ｋ９ｍｅ３的表达明显升高。该结果为进一步研究猪胚胎发育过程中的表观遗传变化提供了试验依据。关键词：猪；孤雌囊胚；细胞松弛素Ｂ；ＤＮＡ甲基化；组蛋白乙酰化
侯螨逍，王雨田，唐博，张学明，李子义，。（１．吉林大学动物科学学院，吉林长春１３００６２；２．吉林大学
第一医院转化医学研究院人类疾病动物模型国家地方联合工程实验室，吉林长春１３００６１）
酰转移酶（Ｈａｔ１）、组蛋白去乙酰化酶（Ｈｄａｃ１）以及凋亡相关基因（Ｂａｘ，Ｃａｓｐ３）ｍＲＮＡ水平的表达，并通过免疫荧光染色检测了囊胚中５ｈｍｃ／５ｍｃ，ＡｃＨ３Ｋ９，Ｈ３Ｋ９ｍｅ３的表达水平。结果显示：５ｍｇ／ＬＣＢ处理４ｈ能够显著提高
ｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＡｎｉｍａｌＭｏｄｅｌｓｏｆＨｕｍａｎＤｉｓｅａｓｅｓＡｃａｄｅｍｙｏｆＴｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ｔｈｅＦｉｒｓｔ
ＤＮＡｍｅｔｈｖｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（Ｄｎｍｔｌ，Ｄｎｍｔ３ａ，Ｄｎｍｔ３ｂ），ｈｉｓｔｏｎｅａｃｅｔｙｌｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（Ｈａｔ１），ｈｉｓｔｏｎｅ
ｄｅａｃｅｔｙｌａｓｅ（Ｈｄａｃ１）ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓ — ｒｅｌａｔｅｄｇｅｎｅ（Ｂａｘ，Ｃａｓｐ３）ｉｎｔｈｅｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｕｓｉｎｇ
ｃａｔｅｄｔｈａｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｗｉｔｈ５ｍｇ／ＬＣＢｆｏｒ４ｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｃｌｅａｖａｇｅｒａｔｅａｎｄｂｌａｓｔｏｃｙｓｔ
ＢｅｔｈｕｎｅＨＯＳｐｉｔａｌ，ＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００６１，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎｄｈｉｓｔｏｎｅａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎｐｌａｙｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｉｎａｎｉｍａｌｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．ＴｈｅｐｒｅｓｅｎｔｓｔｕｄｙｗａｓｄｅｓｉｇｎｅｄｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ（ＣＢ）ｏｎＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎｄｈｉｓｔｏｎｅａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎｏｆｐｏｒｃｉｎｅｐａｒｔｈｅｎｏｇｅｎｅｔｉｃｅｍｂｒｙｏｓ．ＴｈｅｍＲＮＡｌｅｖｅｌｓｏｆ
１６６
中国兽医学报２０１６年１月第３６卷第１期ＣｈｉｎＪＶｅｔＳｃｉＪａｎ．２０１６Ｖｏ１．３６Ｎｏ．１
细胞松弛素Ｂ对猪孤雌囊胚ＤＮＡ甲基化和组蛋白乙酰化的影响
ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔｑＰＣＲ．ａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｌｅｖｅｌｓｏｆ５－ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ（５ｈｍｃ）／５一ｍｅｔｈｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ
ｆｕｒｔｈｅｒｓｔｕｄｙｏｆｅｐｉｇｅｎｅｔｉｃｃｈａｎｇｅｓｉｎｐｏｒｃｉｎｅｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐｏｒｃｉｎｅ；ｐａｒｔｈｅｎｏｇｅｎｅｔｉｃｂｌａｓｔｏｃｙｓｔ；ｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ；ＤＮＡｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ；ｈｉｓｔｏｎｅａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ
（５ｍｃ），ＡｃＨ３Ｋ９，Ｈ３Ｋ９ｍｅ３ｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄａｌｓｏｂｙｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｏｏｒｒｅｓｕｌｔｓｉｎｄｉ —
中图分类号：￥８１４；￥８５２．１６文献标志码：Ａ文章编号：１００５ — ４５４５（２０１６）０１ — ０１６６ — ０６
ＤＯＩ：１０．１６３０３／ｊ．ｃｎｋｉ．１００５ — ４５４５．２０１６．０１．３１
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成熟及胚胎培养耗材，购自Ｃｏｒｎｉｎｇ公司（ＵＳＡ），ＣＢ贮存液浓度１０ｇ／Ｌ。胚胎操作液、成熟液、培养
猪孤雌囊胚的卵裂率和囊胚率（Ｐ＜０．０５），减少囊胚细胞凋亡数量；ＤＮＡ甲基转移酶（Ｄｎｍｔｌ，Ｄｎｍｔ３ａ，Ｄｎｍｔａｂ）、