不同抗凝剂对凝血四项测定的影响

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常用抗凝剂对临床检测结果的影响[1]

常用抗凝剂对临床检测结果的影响[1]

综述——常用抗凝剂对临床检测结果的影响严俊当前在临床上抗凝剂的应用范围越来越广同时常用抗凝剂的选择和使用对临床检测有不同程度的影响。

包括对标本、仪器等的影响。

正确及合理的选择和使用抗凝剂已成为确保临床检测结果准确的重要前提抗凝剂的种类较多,如选择不当,会影响检验结果的准确性。

下面介绍几种生化检验常用的抗凝剂及其用途:(1)草酸钾:常用于尿素、肌酐、纤维蛋白原等测定,不能用钾、钙等测定,对LDH、丙酮酸激酶、AKP和淀粉酶有抑制作用。

(2)肝素:常用于电解质、血气分析、血氨等测定。

抗凝剂比例为50~61u肝素/5ml血。

注意钠盐可使淀粉酶升高。

(3)氟化钠:常用氟化钠—草酸钠混合抗凝剂作血糖测定的抗凝剂,氟化钠可以抑止烯醇化酶,它可避免血细胞葡萄糖酵解酶的作用,延长标本的保存时间。

(4)二乙胺四乙酸钠盐(EDTA-Na2):生化常用的抗凝剂,但不能用于钙、钠、及含氮物质的测定,对淀粉酶、肌酸激酶、AKP、ALP、5’-核苷酸酶等可抑制,对丙酮酸激酶有明显升高的作用。

(5)枸橼酸钠,测定血沉用3.8%枸橼酸钠抗凝,抗凝剂与血液比例为1:4,凝血试验需用3.2%枸橼酸钠抗凝,比例为1:9。

(6)实验室使用抗凝剂种类较多,血细胞分析及红细胞比积测定宜用EDTA·K2抗凝,保证室温下6小时RBC体积不变,抗凝剂比例为1.0~2.0mg/1ml血。

在使用全血细胞计数仪时,抗凝剂的选择对血小板和白细胞计数及分类影响很大。

本文就两种乙二胺四乙酸盐(EDTA)、肝素及草酸盐四种抗凝剂对全血细胞计数的影响进行了初探,现将实验结果报告分析如下。

四种抗凝剂对全血细胞分析结果影响的比较注:△淋巴细胞绝对计数值与对照组比较,*P>0.05,**P<0.05,***P<0.005根据ICSH推荐,全血细胞分析仪采用EDTA-K2作为抗凝剂,但价格较贵。

实验结果(1)EDTA-Na2对细胞计数几乎没有影响,与EDTA-K2结果比较,七项结果P>0.05,表明:并且试剂容易购到。

使用不同抗凝管对凝血四项检测结果的影响简析

使用不同抗凝管对凝血四项检测结果的影响简析

使用不同抗凝管对凝血四项检测结果的影响简析摘要】目的探讨用常规抗凝管和血常规管检测凝血四项指标对结果产生的影响,规范采血。

方法对40例患者分别用常规血凝管和血常规管各抽取一管血液,分离血浆后在BE全自动血凝仪Compact-XR上检测凝血四项指标(PT,APTT,TT,FIB),对用两种抗凝管抗凝血浆所得的PT,APTT,TT,FIB结果进行比较和线性回归分析,分析其相关性及结果间有无显著性差异。

结果与常规血凝管的抗凝血浆比较,血常规管抗凝血浆的PT,APTT,TT延长,FIB含量降低。

并且两种抗凝方式的PT,APTT,TT,FIB结果间相关性好,但两种抗凝方式结果间有显著性差异。

结论在现有的技术及参考范围下用血常规管来检测凝血四项指标不可取,临床上应该规范采血。

【关键词】血常规管(EDTAK2抗凝血浆)常规抗凝管(柠檬酸钠抗凝血浆)凝血四项指标【中图分类号】R446.11 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085(2013)32-0019-02血液凝固是血液由液体状态转变为凝胶状态的过程。

1964年,Macfarlane,Davies和Ratnoff分别提出了凝血过程的“瀑布学说”,这一学说认为凝血是一系列的酶解反应过程,在这一过程中,凝血因子相继通过酶解激活,由无活性的酶原转变为有活性的酶,而每步酶解反应均有放大效应[1]。

凝血功能四项指标(PT,APTT,TT,FIB)的检测对临床疾病的病程发展,诊断,预后及治疗的监测和评估有十分重要的意义。

然而这些项目的检测影响因素很多,抗凝剂的选择就是其中之一。

我院现阶段凝血项目检测都用的是常规血凝管即用柠檬酸钠抗凝管,但在实际情况中偶尔会发生不规范采血的情况,临床上会用血常规管即EDTAK2抗凝管来抽取抗凝血。

不同的抗凝管对应的是不同的抗凝剂,抗凝剂的改变会使凝血结果发生何种变化,两种抗凝管能否通用。

为了解决这个疑惑,现本人抽取40例无出血倾向和肝脏疾病患者,用两种不同的抗凝管各抽取血液,检测PT,APTT,TT,FIB的结果并对比分析,现总结分析如下。

抗凝剂对凝血四项检测结果的影响

抗凝剂对凝血四项检测结果的影响

抗凝剂对凝血四项检测结果的影响
潘建玲;付桂华;夏宝萍
【期刊名称】《中国血液流变学杂志》
【年(卷),期】2007(017)002
【摘要】在凝血四项的检测过程中,实验结果会受到很多因素的影响,常见的有受检者的状态、标本的采集、抗凝剂、仪器、操作者技术等。

临床上有的基层医院没有采用含抗凝剂的成品试管(抗凝剂为0.109mol/L枸橼酸钠),而是自己配制抗凝剂,抗凝剂的选择上也存在着误区。

本实验将不同抗凝剂对测定结果的影响做一比较。

【总页数】1页(P303)
【作者】潘建玲;付桂华;夏宝萍
【作者单位】哈尔滨医科大学第五临床医学院检验科,黑龙江大庆,163316;哈尔滨医科大学第五临床医学院检验科,黑龙江大庆,163316;哈尔滨医科大学第五临床医学院检验科,黑龙江大庆,163316
【正文语种】中文
【中图分类】R446.111
【相关文献】
1.凝血真空采血管和标本放置时间与温度对常规凝血四项检测结果的影响 [J], 周以华
2.不同离心条件和抗凝剂对凝血功能检测结果的影响 [J], 左灿;王艳兰;李海英;卿
之驹
3.不同比例抗凝剂对凝血4项检测结果的影响 [J], 白垚;廖君群;赖晓霏
4.抗凝剂和离心条件对凝血功能检测结果的影响分析 [J], 陈华英;洪流;张家明;李艳;林伟华
5.贫血患者校正抗凝剂用量对凝血四项结果的影响 [J], 林晓;金正
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不同比例抗凝剂对凝血4项检测结果的影响

不同比例抗凝剂对凝血4项检测结果的影响
例。 年龄 2 2 ~5 1 岁。
1 . 2 仪 器 与 试 剂 S y s me x公 司 生 产 的 C A 1 5 0 0血 凝 仪 和 配
套试剂 。
1 . 3 方 法
表 4 D组 与正 常参 照 组 对 血 4项 结 果 的 影 响 ( 一3 0 )
1 . 3 . 1 分组
( 收 稿 日期 : 2 0 1 3 - 0 6 — 2 l 修 回 日期 : 2 0 1 3 - 0 8 — 0 2 )
[ 6 ] 宫新 江 , 严守升 , 孙春艳 , 等. 重 组 人 角 质 细 胞 生 长 因 子 对 放 射 性 和 放疗 性 口腔黏 膜 炎 的 防 治 作 用 [ J ] . 中 国药 理 学
酸钠) 与 血 液 不 同 比例 分 为 A( 1:7 . 3 ) 、 B( 1:6 . 7 ) 、 C( 1:6 ) 、 D( 1:5 . 3 ) 4组 , 检测各组的凝血酶原 时间( P T) 、 活化
部 分 凝 血 活 酶 时间 ( AP T T) 、 凝血酶时间( T T) 、 纤 维蛋 白原 ( F i b ) 含 量 。结 果 与 正 常 参 考 组 ( 抗 凝 剂 与血 液 比例 为 l: 9 ) 比较 ,A、 B组 结 果差 异 无 统 计 学意 义( P>0 . 0 5 ) ; C、 D组结果差异有统计 学意义( P< 0 . 0 5 ) 。 结 论 凝 血 检 测 标 本 中抗 凝 剂 与 血 液 的 比 例在 一 定 范 围 内造 成 检 验 结 果 的差 异 可接 受 , 这部 分标 本 可 让 步接 受 。
按 抗 凝 剂 与 血 液 的 比 例 不 同 分 为 A、 B 、 C 、 D 4
个实验组 , A 组 抗 凝 剂 与 血 液 比例 为 1: 7 . 3 ; B组 比例 为 1: 6 . 7 ; c组 比例 为 1:6 ; D 组 比例 为 1:5 . 3 。 每 组 同 时 设 一 正 常参考组 , 抗 凝 剂 与 血 液 比例 为 l: 9 。 1 . 3 . 2 仪 器 在 控 的前 提 下 分 别 检 测 各 组 标 本 的 凝 血 酶 原 时 间

抗凝剂的检测原理及对不同项目的影响

抗凝剂的检测原理及对不同项目的影响

抗凝剂的抗凝原理:EDTA与血液中的Ca离子形成配位化合物抗凝;枸橼酸盐与血液中的Ca离子形成螯合物抗凝;肝素与抗凝血酶Ⅲ结合,增强抗凝血酶的作用,灭火丝氨酸蛋白酶,阻止凝血酶的形成和血小板的聚集。

下面进入正题,简要介绍抗凝剂对各个检测项目的影响。

一、紫管→绿管:最易发现的影响上文已提及,EDTA对生化的影响主要是使Mg和ALP显著下降。

ALP的下降主要从检测原理说起,因为ALP在检测中产生的中间产物需要在碱性溶液中转变为醌式结构,进行比色分析,而EDTA-K2在抗凝的过程中产生了氢离子,而使溶液呈中性甚至酸性,故检测受到抑制。

这与周新主编的《临床生物化学和生物化学检验》结论一致,也有文献认为是EDTA-K2结合了锌影响了ALP的活性,无论哪种说法,EDTA-K2的影响肯定会使ALP检测结果降低,其他检测项目因其检测方法的不同,导致影响不一。

二、绿管→紫管:1、对DNA检测的影响:造成假阴性的产生。

肝素可以抑制Taq 酶的活性,从而抑制PCR的扩增,干扰DNA的合成,使DNA的检测结果出现假阴性。

2、对血常规的影响:肝素抗凝主要是抑制凝血活酶与凝血酶的形成,并激活纤溶酶而发挥作用。

肝素能引起PLT 聚集及肿胀,过量的肝素可导致PLT破坏,对PLT计数影响最大。

对细胞的影响:肝素引起血小板发生凝集,造成PLT 降低,凝集的血小板颗粒在通过血液分析仪小孔时以小细胞的形式计数,LYM会明显增高,导致白细胞总数也相应的增加。

RBC、MCV、HGB 的结果无明显变化。

三、篮管→紫管:对血常规的影响:枸橼酸钠呈碱性,虽然可与Ca形成可溶性螯合物进行抗凝,但是其抗凝性较EDTA抗凝性弱,也易使PLT 聚集而致总数减少。

凝集的血小板造成LYM计数增高,WBC相应增多,但由于枸橼酸钠抗凝剂的含水量较高,会引起血液稀释,抵消了部分增加的LYM的数量,使WBC增加不明显,但此结果不可靠,同时造成RBC 、HGB 的降低,其与EDTA-K2抗凝的血液相比较,差别有显著性(P<0.01)。

血凝四项实验结果异常影响因素

血凝四项实验结果异常影响因素

血凝四项实验结果异常影响因素一、PT/APTT 时间延长影响因素A、标本采集:1、浊度法测定终点的自动化血凝仪,有溶血和较明显的黄疸及脂血的样本。

2、抗凝剂与血液比例不是1:9 。

3、抗凝剂配制错误,如枸橼酸钠含2 个结晶水仍按3.8%配制。

4、血细胞比容>55 %,抗凝剂仍用1 :9 ,引起抗凝剂比例过高。

5、标本陈旧,超过2 小时,甚至更长。

6、标本运输未加盖,致使CO2 ↑ PH ↑ 。

7、口服抗凝剂或凝血因子异常。

8、质控标本失效。

9、采血时,血浆与抗凝剂混合时振摇过于剧烈,使凝血因子破坏(轻轻混匀即可)。

10、血浆分离应2500g,10 分种。

B、复溶液:1、未用公司试剂盒同批号配制的复溶液。

2、用蒸馏水取代公司的复溶液。

3、复溶稳定时间不够。

C、操作:1、血浆与试剂比例不对(按照试剂说明书或仪器厂家的使用说明书)。

2、标本、试剂未经预温至37 ℃。

3、APTT 试剂与标本孵育小于3 分钟。

4、APTT混悬液加前未混匀。

5、试验测试温度不在37±0.5 ℃的范围。

D、试剂本身:1、APTT(鞣花酸)被冷冻(低于0 ℃)贮存或运输。

2、试剂贮存、运输温度过高,未注意冷藏运输。

3、试剂超过有效期。

4、购入了冒牌试剂。

5、质控品过期。

二、PT/APTT时间缩短影响因素A、标本采集:1、病人为高凝状态或血栓性疾病。

2、血细胞比容<25%,抗凝剂含量不够。

3、抗凝剂自配,配制错误,如对5个结晶水的枸橼酸钠仍按3.2%配制(应按3.8%配制)。

4、抗凝剂存放时间长:长霉、变质。

5、血浆于2-8 ℃运输,存放(冷凝集效应),或标本在室温中存放时间过长(超过2小时,甚至更长)。

6、血浆分离时,离心机转速不够,血浆内有较多血小板。

B、复溶液及材料:1、未用公司试剂盒内同批号配制的复溶液。

2、用蒸馏水取代公司的复溶液。

3、比色皿或试验器材污染。

C、试剂本身:1、鞣花酸和白陶土搞错,如原先用白陶土,后改用了鞣花酸,用白陶土正常值来衡量鞣花酸。

不同采血量对凝血四项测定结果的影响

不同采血量对凝血四项测定结果的影响凝血功能主要用于判断病人有无出血或血栓形成倾向,是手术前、口服抗凝剂监测、血栓诊断中经常使用而且非常实用的一项指标。

其实验室检查的准确性和可靠性直接影响临床诊断和疾病治疗,所以影响检验结果准确性的因素,显得尤为重要。

在实际工作中,凝血标本常见问题有:黄疸、脂血、溶血、标本量的过多或过少、HCT过高或者过低等。

以下,我们主要针对后两个问题来讨论不同采血量对凝血四项测定结果的影响:当HCT在20%—55%之间,或者当HCT<20%或HCT>55%时,不同采血量对凝血四项测定结果的影响;一、HCT在20%—55%之间,不同采血量对凝血四项测定结果影响。

当HCT在20%—55%之间时,有学者通过实验得出以下数据:样本血量不足与标准血量标本检测结果比较(±s)样本血量过量与标准血量标本检测结果比较(±s)不同抗凝比例下凝血四项的检验结果比较(±s)通过上述数据,我们可以看出,标本的过多或过少都会对凝血四项测定结果产生不同程度的影响。

那么,出现这样结果的原因是什么呢?我们都知道血液凝固的过程很复杂, 钙离子会参与到凝固反应的每一个步骤,作用至关重要。

根据全国临床检验操作规程规定:凝血检测采用的抗凝剂为109 mmol/L枸橼酸钠, 抗凝剂与全血比例为1∶9。

枸橼酸钠能有效的阻止凝血因子Ⅴ、Ⅷ的降解, 与血液中的Ca2+结合形成螯合物,使Ca2+失去凝血功能,凝血过程被阻断,从而阻止血液凝固。

此作用是可逆的, 如果再加入足量的Ca2+,凝血功能即可恢复正常。

当采血量为1.8 ml时, 枸橼酸钠和钙离子的比例适当, 钙离子能被枸橼酸钠完全的络合封闭, 凝血过程将被阻断;当采血量超过1.8ml时,钙离子相对的过量, 没有被络合的钙离子促进血浆的凝固, 会消耗部分的凝血因子, 因此测量的APTT和PT的结果延长;当采血量不足1.8 ml 时, 枸橼酸钠相对过量, 而测定APTT和PT加入定量的钙离子, 测定时过量的枸橼酸钠络合了部分的钙离子, 导致凝血过程中钙离子不足, 同样会导致结果延长。

常用抗凝剂对凝血项目测定的影响分析

常用抗凝剂对凝血项目测定的影响分析摘要】目的:通过观察抗凝剂肝素钠、ETDA-K及枸橼酸钠对凝血项目(PT、APTT、TT及FIB)测定的影响,以判断其他抗凝剂能否替代枸橼酸钠(1:9)在凝血标本中的使用。

方法:选择80名正常体检者作为研究对象,对每个受试者进行采样并将血样分开保存,以抽入至备有0.11mol/L枸橼酸纳(1:9)抗凝剂的试管中存放的血样作为对照组,使用EDTA-K2、肝素钠及0.11mol/L枸橼酸纳(1:4)抗凝剂分别设为观察1组、观察2组及观察3组,分别检测出这些血样本不同凝血项目的结果,比较不同抗凝剂测定结果的差异。

结果:观察1组和观察2组两组血标本的PT、APTT、TT的检测结果较对照组的结果高,差异均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);观察3组血标本的APTT与TT的检测结果较对照组的结果高,差异均具有统计学意义(P<0.05);各组FIB的检测结果虽较对照组的血标本检测结果偏低,但差异均不具有统计学意义(P>0.05)。

结论:肝素钠、EDTA-K2及枸橼酸钠(1:4)抗凝剂对凝血项目测定影响较大,不适合用于凝血项目的检测。

【关键词】抗凝剂;凝血项目;检测;影响【中图分类号】R973+.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2019)35-0253-02抗凝剂是一种或一类通过抑制血液中某种或某类凝血活酶及凝血因子,用以达到防止血液发生凝结固缩为目的的化学制剂。

不同类型的抗凝剂由于其自身的理化性能不同,其可有效作用于凝血活酶及凝血因子的种类也不同。

它们均可因抑制了血液中在发生凝血系列连锁反应中的某一种或某一类的凝血酶及因子的活性而阻断了凝血反应的继续进行,致使血液最终不能发生自然凝结。

然而,在用于不同目的而检测凝血酶及因子的凝血项目而言,不同的抗凝剂则影响着不同种类的凝血酶及因子的活性。

因此,选择适用的抗凝剂将有利于确保目的凝血项目的准确性。

笔者针对上述问题,做一次不同抗凝剂对凝血测定的影响实验,意在观察抗凝剂对凝血项目的影响,了解不同抗凝剂在不同凝血项目中的可替代性。

不同因素对凝血四项测定结果的影响效果分析

不同因素对凝血四项测定结果的影响效果分析目的研究不同因素对凝血四项测定结果的影响,探讨优良方法的临床适用性。

方法选择2012 年10 月于本院健康体检40例的血液标本,按照不同的抗凝比例和不同的放置时间测定PT、APTT、TT、FIB,分析比较各组测定的差异。

结果抽血量在1.4 mL(7∶1)、1.6 mL(8∶1)和2.0 mL(10∶1)时,与标准1.8 mL(9∶1)测定的PT、APTT、FIB、TT值比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。

室温下放置4、8 h和24 h PT、APTT、FIB、TT值测定结果与即刻测定结果比较,差异也有统计学意义(P<0.05)。

结论严格遵守标本采集和检测规范对测定数据的准确度有很大的意义,医务人员应认真掌握规范操作,为临床提供有效的指导数据。

标签:不同;影响因素;凝血四项凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB)是临床上常用的凝血四项,它在临床上的作用很广泛,比如术前凝血的评估,抗凝药物治疗监测、休克等出血性或血栓性疾病初步诊断等,如何追求可靠的检验数据历来都是研究的重要课题[1-2]。

本院针对一些临床上常出现的影响数据的因素展开了研究,现报道如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选择本院2012年10月1日~31日健康体检者40例,所有患者签署知情同意书,其中男15例,女25例;年龄20~50岁,平均(31.6±2.4)岁;且入选患者近期未使用与凝血有关药物,无出血史,肝功能、血液常规无异常。

1.2 仪器与试剂全自动血凝分析仪(法国STAGO Compact),原装配套试剂、校准物和质控品及一次性反应杯等。

一次性使用血凝真空负压采血管(湖南安信医用高分子材料有限公司,2410045)。

1.3 方法要求一名专业采血者实施标本采集,抽血者选用抽取5 mL注射器,每位体检者抽取4管血液,共20 mL。

康派X血凝仪检测凝血四项影响因素分析

康派X血凝仪检测凝血四项影响因素分析摘要】目的分析血凝仪测定PT、APT T、TT、Fib的最佳因素。

方法用德国BE 的康派X血凝仪测定20例健康体检者在不同抗凝剂、不同试管、不同操作技术相应的PT、APTT、TT、Fib值。

结果血液和枸橼酸钠之比为1:9与1:5存在差异,1:9为好;玻璃管与硅化和塑料试管相比影响检测结果;技术熟练者与技术生疏者操作的实验结果存在一定的差异。

结论检测PT、APT T、TT、Fib时要严格控制血液与抗凝剂比例,忌用玻璃管,操作者熟练后在操作。

【关键词】凝血四项血凝仪影响因素PT、APTT、Fib、TT为凝血四项,反映了血液的内源性凝血系统的各凝血因子的综合情况,此项目是我科常规检查项目,在术前必需做。

德国BE的康派X血凝仪性能稳定,操作简单,故障率低,效率高。

其原理为运用比浊离心分析法检测样品凝集前后的光散射变化。

虽血凝仪具有快速、敏感、检测项目多的优点,在急救、溶栓治疗、抗凝及术前检测等诸方面起到了重要作用,临床科室的诊断水平和诊断鉴别能力也得到了大大的提高。

但是,因为受到很多因素的影响,医生对检测的结果反映不一。

我们把日常我院工作碰到的一些对凝血四项检测结果有影响的相关因素总结如下。

1标本的采集与处理1.1 血样的采集神经紧张、剧烈运动和情绪激动都会使血小板增多,凝血及纤溶活性增强。

标本不能含有凝块,否则自动血凝分析仪对PT、APTT及TT的检测结果会缩短,Fib会降低。

最好使用含枸橼酸钠液的专用硅化采血管和大号针头采血;操做者应该熟练做到穿刺一针见血、避免淤血、防止产生气泡和组织液污染;防止组织损伤,进入外源性凝血因子;止血带不宜过紧、时间不应过长(小于3min);采血时要平稳顺利,防止产生气泡;不能从输液处或伤口侧附近采血。

尽可能单独采血,如果和其他项目一起抽血时,应取第一管为好[1]。

1.2 样本的抗凝抗凝剂的浓度关系到试验结果的准确性,建议使用血液与枸橼酸钠(0.109mol/L)1∶9抗凝。

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不同抗凝剂对凝血四项测定的影响
摘要:目的探讨不同抗凝剂对凝血四项测定的影响。

方法抽取40例健康体检
者血标本各四管,其抗凝剂分别为0.109mol/L枸橼酸钠(1:9)(作为对照组);
0.109mol/L枸橼酸钠(1:4);肝素锂;EDTA-K2,分别测其凝血四项值,比较各结果的差异。

结果0.109mol/L枸橼酸钠(1:4);肝素锂;EDTA-K2的抗凝血PT、APTT、TT较0.109mol/L枸橼酸钠(1:9)显著延长,FIB显著下降,差异具有统
计学意义(P<0.05)。

结论检测凝血四项时,应严格按照要求选用正确的抗凝
剂0.109mol/L枸橼酸钠(1:9),以保证检测结果的准确性。

关键词:抗凝剂;凝血四项;测定;影响
凝血四项包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB),是临床检验中的一项重要检测项目,是出血与血栓性疾病的重
要指标,用于术前检查、血栓前检查及监控临床口服抗凝药物患者[1-2]。

临床工作中偶有发
现护士因采血不顺致血少而把血常规的血直接倒入凝血管送检的情况,对凝血四项的测定造
成影响,从而影响临床医生对病情的判断。

本文针对此现象做实验,测定不同抗凝剂的凝血
四项进行比较与分析,意在探讨不同抗凝剂对凝血四项测定的影响。

1 材料与方法
1.1 一般材料
抽取40例健康体检者血标本2ml各四管(其抗凝剂分别为0.109mol/L枸橼酸钠(1:9)、0.109mol/L枸橼酸钠(1:4)、肝素锂;EDTA-K2,标本无黄疸、溶血、脂血等其他异
常现象。

1.2仪器和试剂 Sysmex CS-2000i全自动凝血分析仪和其配套试剂和质控品,安徽中科中
佳仪器有限公司KDC-80低速离心机。

1.3 实验方法入选标本以1500r/min离心15min,利用Sysmex CS-2000i全自动凝血分析
仪分别测定不同抗凝剂标本的凝血四项值,每份标本均测三次,取平均值,利用t检验比较
不同抗凝剂标本凝血四项值的差异。

以上检验操作过程均严格按照仪器和试剂使用说明书及科室制定的SOP文件进行。

1.4统计学处理计量资料数据以?x±s表示,利用t检验,比较不同抗凝剂标本凝血四项
结果的差异,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果
如表1所示,0.109mol/L枸橼酸钠(1:4)、肝素锂、EDTA-K2的抗凝血PT、APTT、TT
较0.109mol/L枸橼酸钠(1:9)显著延长,FIB显著下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。

3讨论
临床检验中,抗凝剂的选择是根据检验项目和检测手段来确定的,不同的抗凝剂性质各异,对血液成分有不同影响,检测凝血四项时,其抗凝剂要求不与凝血因子发生作用,且不
产生不溶性沉淀物,以免影响全自动凝血分析仪光电检测结果。

钙离子是凝血的Ⅳ因子,是凝血过程中的关键成分[3],在内源性凝血途径中,钙离子与FIXa,FVIIIa及PF3形成复合物激活FX,在外源性凝血途径和共同途径中,钙离子与FXa,
FVa及PF3形成凝血酶原复合物激活凝血酶原形成凝血酶,从而发挥其凝血作用。

而抗凝剂
枸橼酸钠、EDTA-K2 即是通过与钙离子结合使钙离子失活而发挥其抗凝作用。

本实验结果表明,相较于对照组抗凝剂0.109mol/L枸橼酸钠(1:9),抗凝剂
0.109mol/L枸橼酸钠(1:4)、EDTA-K2、肝素锂的抗凝血PT、APTT、TT显著延长,FIB显著
下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。

原因在于:(1)枸橼酸钠抗凝的原理[4]是其与血
液中的钙离子结合,形成可溶性螯合物,使钙离子失去活性而有效阻止血液凝固,它不与凝
血因子发生作用,并能阻止凝血因子V、VIII活化,是凝血试验的首选抗凝剂,在HCT正常
的情况下,其与血液的最适比例为1:9。

当其比例变为1:4时,抗凝剂相对过多,枸橼酸
钠与试剂中的钙离子结合成可溶性螯合物,且过多的液态抗凝剂起稀释作用[5],导致血液凝
固时间延长,PT、APTT、TT显著延长,FIB显著下降(FIB浓度与血液凝固时间成反比)。

(2)EDTA-K2 抗凝的原理[6]为EDTA与血液中的钙离子结合成螯合物,使钙离子失去活性而
有效阻止血液凝固,但EDTA-K2 能抑制纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体聚合,且对V因子
保护性差,而血液离体后凝血因子很不稳定,特别是V因子,活性下降很快。

因此EDTA-K2
作抗凝剂检测凝血四项时,可导致凝血时间延长,PT、APTT、TT显著延长,FIB显著下降。

(3)肝素抗凝作用[7-8]主要通过与抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)结合,而增强后者对活化的Ⅱ、Ⅸ、Ⅹ、Ⅺ和Ⅻ凝血因子的抑制作用,从而阻止凝血活酶形成,且肝素作用于AT-Ⅲ后,可使AT-Ⅲ与凝血酶结合得更快,更稳定,使凝血酶立即失活,从而导致血液凝固时间延长,甚至无
法测出APTT、TT。

综上,0.109mol/L枸橼酸钠(1:4);肝素锂;EDTA-K2,作为抗凝剂检测凝血四项时,
都会对检测结果造成影响,因此应严格按照要求使用CLSI推荐的0.109mol/L枸橼酸钠(1:9)溶液作为凝血试验的抗凝剂,以保证检测结果的准确性。

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