地中海贫血基因检测的临床应用
地中海贫血基因检测操作规程益生堂
α-地中海贫血基因检测操作规程（益生堂）一、目的：对筛查出来的地贫疑似病例和需要进行地贫产前诊断的夫妇提供进一步的确认。
二、适用范围：适用于益生堂PCR扩增、琼脂糖电泳技术等分析的操作。
三、原理：应用特异的PCR引物选择性地扩增不同类型的α-地中海贫血基因，通过琼脂糖凝胶电泳的带型分析，诊断α-地中海贫血基因缺失型。
四、操作规程（一）标本收集、标本保存、标本转运1、静脉采血：从肘静脉或手背静脉抽取静脉血1mL以上，将血液沿管壁缓慢注入加有EDTA或枸橼酸钠的试管内，轻轻混匀，即为抗凝全血。
羊水的采集：由临床医师经腹壁行羊膜穿刺取得。
采集羊水时速度不宜太快，标本抽取量也不宜太多，一般10-15mL即可。
2、标本一经采集，则应尽快送至实验室检测，抗凝全血室温放置不超过4小时，4℃保存不超过一周，-20℃保存不超过半年，应避免反复冻融。
3、标本装入试管密封，再装入塑料袋中，置冰壶或泡沬箱加冰袋密封运输，在运输过程中应避免剧烈震荡。
4、注意事项（1）抗凝时，不能用肝素抗凝。
（2）采集羊水穿刺羊膜要在妊娠16周羊水达到200mL以后才能进行。
（二）全血DNA提取操作规程1、所需试剂及仪器：试剂由益生堂生物技术（深圳）有限公司提供，包含核酸提取试剂、扩增管、模条、无水乙醇，1.5mL离心管.仪器有黑马和博日扩增仪、台式高速离心机、旋涡振荡器、真空旋转干燥仪、电泳仪、电泳槽、分子杂交仪、凝胶成像系统。
2、实验前准备工作2.1、准备好1.5mL无菌离心管及无菌吸头。
2.2、变性液在每次使用前应充分摇匀以保证提取质量。
3、操作步骤（1）在1.5mL离心管中加入250μL充分摇匀的变性液及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟。
也可选择以下操作步骤，以获得更高质量的DNA：在1.5mL离心管中加入1mL无菌水及100μL抗凝全血，充分混匀，室温放置5分钟以裂解红细胞。
13000rmp离心1分钟，弃上清，保留管底白细胞块。
地贫基因检测在临床诊断中的应用
地贫防控从婚前孕前开始！
• 技术方法：PCR-反向点杂交法 • 检测基因突变型：17个位点的19种突变
稀有地中海贫血基因检测服务
• 多技术平台综合分析
α-地贫基因检测
α -地中海贫血
α-地中海贫血（简称α-地贫）是一种由于α-珠蛋白基因突变导致肽链表 达失衡而产生的单基因遗传血液病。
多由α-珠蛋白基因的缺失突变所致。 中国地区常见的3种缺失型 α-地贫主要由 --SEA、-α3.7、 -α4.2缺失引起。
-地贫基因型与表型的关系
-地贫表现型
亚能生物β-地中海贫血基因检测试剂盒
• 利用基因芯片技术可以同时检测中国人群8个常见位点和9个少见位点 共17个位点的19种β -地贫基因突变类型
β-地中海贫血基因诊断操作流程
β-地中海贫血基因诊断结果判读
41-42N 41-42M
43M
654N 654M －32M
－28N －28M －29M
71-72N 71-72M －30M
17N 17M 14-15M
β EN β EM CAPM
31N 31M IntM
27/28M IVS1-1M IVS1-5M
654M/71-72M 17M/N
β EM/β EM 41-42M/N
β -地贫基因检测临床意义
对患者进行基因确诊 可广泛用于β -地贫的筛查，对β -地贫基因缺陷携带者进行鉴别，对于
亚能生物地中海贫血基因检测整体解决方案
α-地中海贫血基因检测试剂盒
• 技术方法：GAP-PCR法 • 检测基因突变型：-α3.7，-α4.2，--SEA
非缺失型α-地中海贫血基因突变检测试剂盒
基因检测技术在地中海贫血诊断中的意义
于基因的点突变，少数为基因缺失；α 珠蛋白生成障碍性贫
二分之一的机会成为轻型贫血患者，四分之一的机会成为中
血（ α 地中海贫血） 。 大多数 α 珠蛋白生成障碍性贫血（ 地
型或重型贫血患者。 鉴于本病缺少根治的方法，临床中、重
病理相当复杂，已知有 １００ 种以上的 β 基因突变，主要是由
轻型或轻型地贫患者，子女将有四分之一的机会完全正常、
血胎儿的价值分析［ Ｊ］ ．中国当代医药，２０１５（１０） ：４－６．
［５］ ．唐爽．绵阳地区孕前人群地中海贫血基因型分布情
况［ Ｊ］ ．医药前沿，２０１８（２６） ：３９－４０．
作者简介：
朱林，三台县人民医院。
但输血治疗后的血液学检查会与实际结果有所不同。 所以
进行遗传学和分子生物学检查才能最后确诊。 遗传学检查
可确定为纯合子、杂合子以及双重杂合子等。
·１７４·
参考文献：
［１］ 陈建文，叶菀华，李颖清． 彩色多普勒在早孕期诊断
重度 α 地中海贫血胎儿中的应用［ Ｊ］ ． 中国继续医学教育，
２０１７（９） ：８６－８９．
列一种或数种方法给予治疗。 输血和去铁治疗，在目前仍是
散发病例，北方则少见。 它的医学专用名称是珠蛋白生成障
重要治疗方法之一。
碍性贫血又称海洋性贫血，是一组遗传性溶血性贫血疾病。
地中海贫血由于遗传的基因缺陷致使血红蛋白中一种
或一种以上珠蛋白链合成缺如或不足所导致的贫血或病理
（１） 注意休息和营养，积极预防感染，适当补充叶酸和维
基因检测技术在地中海贫血诊断中的意义
朱 林
地中海贫血病例广泛分布于世界许多地区，东南亚即为
轻型地贫无需特殊治疗。 中间型和重型地贫应采取下
HKαα地中海贫血的基因诊断及临床表型分析
ＨＫαα地中海贫血的基因诊断及临床表型分析杜丽 王继成 秦丹卿 胡听听 袁腾龙 张艳霞 梁驹卿 尹爱华（广东省妇幼保健院医学遗传中心、广东省妇幼代谢与遗传病重点实验室，广东广州５１１４４２）【摘要】 目的 对ＨＫαα地中海贫血病例进行基因诊断，分析ＨＫαα病例临床表型，为遗传咨询提供指导。
方法 对在本院就诊的ＨＫαα病例进行血常规、血红蛋白电泳、基因诊断及产前诊断，分析病例的临床表型。
结果 共检测出ＨＫαα病例３３例，包括ＨＫαα／αα１５例、－－ＳＥＡ／ＨＫαα１６例、αＷＳα／ＨＫαα１例、－α４．２／ＨＫαα１例。
并对５个家庭进行了产前诊断，检出－－ＳＥＡ／ＨＫαα胎儿１例，通过遗传咨询，避免了选择性终止妊娠。
结论 结论ＨＫαα地中海贫血的基因诊断可以减少病例的漏诊或误诊，临床表型的分析可以为精准的遗传咨询提供指导。
【关键词】 地中海贫血；基因诊断；ＨＫαα【中图分类号】 Ｒ７１４．５５ 【文献标识码】 Ａ犇犗犐：１０．１３４７０／ｊ．ｃｎｋｉ．ｃｊｐｄ．２０１７．０３．００４ 通讯作者：尹爱华，Ｅ ｍａｉｌ：ｙｉｎａｉｗａ＠ｖｉｐ．１２６．ｃｏｍ【犃犫狊狋狉犪犮狋】 犗犫犼犲犮狋犻狏犲 ＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｇｅｎｅｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａａｎｄｔｏｐｒｏｖｉｄｅａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｇｅｎｅｔｉｃｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ．犕犲狋犺狅犱 Ｗｈｏｌｅｂｌｏｏｄｃｅｌｌａｎａｌｙｓｉｓ，ｃａｐｉｌｌａｒｙｚｏｎｅｅｌｅｃｔｒｏ ｐｈｏｒｅｓｉｓ（ＣＺＥ），Ｇａｐ ＰＣＲａｎｄｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ｒｅｖｅｒｓｅｄｏｔｂｌｏｔ（ＰＣＲ ＲＤＢ）ａｓｓａｙｗｅｒｅｐｅｒ ｆｏｒｍｅｄｔｏｔｈｅＨＫααＴｈａｌａｓｓｅｍｉａ，ａｎｄａｎａｌｙｚｅｔｈｅｈｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌｐｈｅｎｏｔｙｐｅｄａｔａｏｆＨＫααＴｈａｌａｓｓｅｍｉａ．犚犲狊狌犾狋狊 ３３ｃａｓｅｓｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ１５ｃａｓｅｓｏｆＨＫαα／αα、１６ｃａｓｅｓｏｆ－－ＳＥＡ／ＨＫαα、１ｃａｓｅｏｆαＷＳα／ＨＫααａｎｄ１ｃａｓｅｏｆ－α４．２／ＨＫαα．５ｐｅｄｉｇｒｅｅｓｗｅｒｅｃａｒｒｉｅｄｏｕｔｐｒｅｎａｔａｌｄｉａｇｎｏｓｉｓａｎｄ１ｆｅｔｕｓｏｆＨｂ－－ＳＥＡ／ＨＫααｗａｓｄｅｔｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅｃｏｕｐｌｅｃｈｏｏｓｅｄｔｏｃｏｎｔｉｎｕｅｔｈｅｐｒｅｇｎａｎｃｙ．犆狅狀犮犾狌狊犻狅狀狊 ＧｅｎｅｄｉａｇｎｏｓｉｓｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａｃａｎｍａｋｅａｃｃｕｒａｔｅｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ａｖｏｉｄｉｎｇｔｈｅｍｉｓｄｉａｇｎｏｓｉｓ．Ｔｈｅａｎａｌｙ ｓｉｓｏｆＨＫααｔｈａｌａｓｓｅｍｉａｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎｃａｎｐｒｏｖｉｄｅａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｇｅｎｅｔｉｃｃｏｕｎｓｅｌｉｎｇ．【犓犲狔狑狅狉犱狊】 ｔｈａｌａｓｓｅｍｉａ；ｇｅｎｅｄｉａｇｎｏｓｉｓ；ＨＫαα α地中海贫血（简称α地贫）是我国南方各省携带率最高、影响最大的遗传病，广东省育龄人群α地贫的基因携带率达１３％［１］。
β-地中海贫血基因检测(PCR-反向点杂交法)
pcr扩增
DNA提取
利用特定的试剂从血细胞中提取出DNA。
pcr扩增
使用聚合酶链式反应（PCR）技术对DNA进行扩增，使其数量增加，便于后续 的检测。反向点Fra bibliotek交制备探针
将目标基因序列设计成特定的探针，并固定在尼龙膜上。
杂交反应
将扩增后的DNA与固定在膜上的探针进行杂交，通过碱基互 补配对原则，将目标基因序列特异性地结合在膜上。
纳米技术
利用纳米材料和纳米技术提高检测的灵敏度和特异性，降 低检测误差。
要点二
基因组编辑技术
利用CRISPR-Cas9等基因组编辑技术，对β-地中海贫血基因 进行精确编辑和修复，从根本上治疗地中海贫血。
临床应用的拓展
早期筛查
将β-地中海贫血基因检测纳入新生儿筛查 计划，实现早期发现和干预，降低疾病对 患儿的影响。
β-地中海贫血基因检测(pcr反向点杂交法)
• β-地中海贫血基因检测介绍 • pcr-反向点杂交法介绍 • β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点
杂交法)流程 • β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点
杂交法)的临床意义
• β-地中海贫血基因检测(pcr-反向点 杂交法)的未来发展
01
β-地中海贫血基因检测介绍
03
耗时长：需要进行PCR扩增和杂交反应， 整个过程需要一定时间。
04
对实验条件要求高：需要严格控制实验条 件，避免交叉污染和假阳性结果。
03
β-地中海贫血基因检测(pcr-反 向点杂交法)流程
样本采集和处理
血液样本采集
从患者静脉抽取适量血液，用于 后续的基因检测。
样本处理
将采集的血液进行离心，分离出 血浆和血细胞，保留血细胞用于 后续的DNA提取。
地中海贫血基因检测临床应用
流行情况
疾病概述
第一章
省份
携带率（%）
α-地贫
β-地贫
合计
广西
17.6
6.4
24.0
广东
13.3
4.5
16.8
云南
9.8
7.3
17.1
海南
12.7
2.7
15.4
贵州
4.2
5.1
9.3
香港
7.3
1.2
8.5
重庆
5.2
2.0
7.2
江西
3.5
2.9
6.4
地中海贫血基因检测临床应用
C O N T E N T S
目 录
地中海贫血疾病概述地中海贫血的分类及临床表现地中海贫血的筛查与诊断地中海贫血的遗传咨询与产前诊断
SECTION TITLE
疾病概述
01
地中海贫血
地中海贫血是由于珠蛋白基因缺失或突变导致血红蛋白中的某种珠蛋白链合成障碍，造成α链或β链合成失去平衡而导致的溶血性贫血。是一种典型的血红蛋白病。根据合成障碍的肽链不同，可将地中海贫血分为α-地贫和β-地贫。
疾病分类
第二章
α-地贫
a2
a1
a2
a1
1
Exon 1 Exon 2 Exon 3
CD125 (CTG>CCG or Leu>Pro )
CD142 (TAA>CAA or Thr>Gln)
CD122(CAC>CAG,or His>Gln)
鼓励县、市妇保院申请试点单位试点单位需具备血红蛋白电泳初筛能力试点单位筛查及诊断费用由省、市、县财政统一拨款
孕检地中海贫血3385例筛查结果分析及临床意义
轻型为 Ｈ ｂ Ａ ２介 于 ３ ． ５ ％～ ８ ％， Ｈｂ Ｆ正 常 或 轻 度增 加
地 贫基 因携带 率为 ８ ． ５ ３ ％， Ｂ 一 地 贫 基 因携 带 率 为 红蛋 白带 。若 Ｈ ｂ Ａ ２ ≤２ ． ０ ％， 或 出现 异常血 红 蛋 白带 ２ ． ５ ４ ％ｔ ” 。一方 面 由于 血红 蛋 白的珠 蛋 白肽 链合 成 障
碍， 另 一 方 面 由 于合 成 速率 降低 致 使 血 红 蛋 白的成 ３ ． ５ ％或 出现 异 常血红 蛋 白带 （ Ｈ ｂ Ｆ ＞ ２ ． Ｏ ％） ， 则判 为 Ｂ 一
（ 不超过 ５ ％） ； 中间 型为 Ｈｂ Ｆ介 于 ５ ％～ ３ ０ ％； 重 型 为 Ｈ ｂ Ｆ介 于 ３ ０ ％一 ９ ０ ％。 若 出现 其他 异 常血红 蛋 白区带 则判 为异 常 血红 蛋 白病阁 。 １ ． ３基 因诊 断 基 因诊 断是 地贫 诊 断 的金 标 准 ， 对 于 初 筛 可疑 阳性 标 本进 行 基 因检 测 ． 用 美 国应 用 生 物
布 于世 界 多地 ， 东 南亚 是 高发 地 之一 。我 国 以广 东 、 广西 、 海南 等 沿 海 地 区人 群 携 带率 最 高 ， 广东省 仪 一 的Ｇ ２ ６全 自动琼 脂糖 电泳 仪 。地 贫诊 断 Ｈｂ电泳标 准： 成人男 女 Ｈ ｂ Ａ ２为 ２ ． Ｏ ％～ ３ ． ５ ％， 并 且未 出现异常血 （ Ｈ ｂ Ｈ、 Ｈ ｂ Ｂ ａ ｒ ｔ ｓ ） ， 判为 ０ ｌ 地贫表 型 阳性 ； 若 Ｈ ｂ Ａ ２ ＞ 地贫 表 型 阳性 。Ｂ 一 地 贫 按 病情 轻 重 可 分 如下 ３型 ：
地中海贫血基因检测
地中海贫血简介地中海贫血（thalassemia），又称海洋性贫血，简称地贫，是由于人体珠蛋白基因突变或者缺失而导致的某种珠蛋白链合成障碍，造成α，β-珠蛋白肽链合成速率的不平衡而导致的溶血性贫血。
重型地贫会引起胎儿水肿症、贫血、甚至死亡；中间型地贫患儿需经常输血，长大基本丧失劳动能力，生活质量明显下降。
地中海贫血是一种累及全世界且具有高发病率的遗传病，我国以广东、广西、海南、四川、重庆为地贫高发区（表1）。
由于目前地贫尚无有效根治办法，患儿家庭背负着极大的精神压力和经济负担。
地中海贫血基因诊断可在临床上对患者的基因型进行确诊，对家族成员基因型进行追踪及监控，并应用于婚前检查、产前诊断，以预防和减少重症地中海贫血儿的出生，降低地中海贫血发生率，提高人口素质地贫治疗现状地中海贫血目前尚无有效的疗法,因而预防重型地中海贫血患儿出生是控制本病的可行方法,为此,人群中地贫携带者的筛查、基因诊断和产前诊断显得尤为重要。
常用的诊断方法如下：1.Southern 印迹法优点：分析缺失型α-地中海贫血分子缺陷的可靠技术缺点：操作繁冗，不宜作为常规手段2.联合检测平均红细胞参数（MCV、MCH）+红细胞脆性检测+Hb（血红蛋白）电泳MCV：平均红细胞容积 MCH：平均红细胞血红蛋白量优点：这一检测方法简便、迅速，也较为普及缺点：不能有效地把缺铁性贫血区别开来，对于α-地中海贫血和β-地中海贫血的诊断也没有特异性。
3.PCR-RDB法（PCR/寡核苷酸探针反向斑点杂交法）检测中国南方常见的17种β地贫突变：CD41～42(-TCCT)、IVS-2 nt654 C →T、-28 A→G、CD71～72（+A）、CD71～72（+T）、CD17 A→T、CD26 G→A、CD31（-C）、CD27～28（+C）、CD43 G→T、-32 C→A、-29 A→G、-30 T→C、CD14～15（+G）、CAP、Int及IVS-1 nt5 G→C优点：在一次实验可同时辨别多种点突变，其准确性仅次于DNA测序缺点：突变位点附近存在的多态性位点易导致假阴性结果4.Gap-PCR采用单管四重PCR法（多重PCR技术）对其基因组DNA进行扩增，同时检测-α3.7、-α4.2、--SEA和正常对照4种等位基因型，采用1.2％琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物，通过片断大小判断患者的基因型。
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＜3个月
无 无
儿童，成人
无或轻度 无
儿童，成人
中度～重度 轻度～中度
胎儿
重度 无或轻度
肝脾肿大
血片RBC： 形态异常 血红蛋白电泳 HbF HbH包涵体 α/β 基因诊断
无 正常
正常 正常 无 1∶1 缺失1个或突变 αα/α-，ααT/αα
无或轻度 轻度
正常 正常 无或可有 0.7～0.95 缺失2个或突变 αα/--或αα/αT-
β地中海贫血及基因型
纯合子: 两个基因正常 β Gene β Gene
杂合子: 一个正常，另一个 不正常
β Gene β Gene
纯合子: 两个基因都不正常 β Gene β Gene
X
X X
β地中海贫血的基因型和临床类型
基因型 β0/β0 β+/β+ 遗传型 纯合子 纯合子 分子遗传基础 无β肽链合成 有少量β肽链合成 临床类型 重型 重型或 中间型 临床特点 重度贫血 取决于β基因缺失程 度和α基因代偿和度 Hb电泳 HbF 99.6% HbF、 HbA2
β0/β+
β0/β β+/β β+/βE β+/βS
双重杂合子
杂合子 杂合子
等位基因均有病 变，β肽链合成10%
点突变，病变基因 不成β肽链 点突变，仍可做成 β肽链 β肽链合成减少， βE肽链合成 β肽链合成减少， βS肽链合成
重型或 中间型
轻型 轻型 重型 重型
一般重于β +/β+纯合子
无症状，偶然发现 无症状，偶然发现 中重度贫血 中重度贫血
26
品质优
点突变与测序结果符合率高达100%
三家临床医院广东省妇幼保健院、广西省妇幼保健院及湖北省妇幼保 健院结果汇总见下表：
阳性样品 检测方法 α点突变 β点突变 478 现代高达试剂盒 260 260 478 测序 738 共计
阴性样品
573 573 573
阳性符合率（临床灵敏度）=711/（711+0）=100%； 阴性符合率（临床特异性）=709/（0+709）=100%； 总符合率 =（711+709）/（711+0+0+709）=100%；
27
品质优
缺失突变与Gap-PCR结果符合率高达100%
检测方法
现代高达试剂盒 Gap-PCR
阳性样品
428 428
阴性样品
217 217
阳性符合率（临床灵敏度）=428/（428+0）=100%； 阴性符合率（临床特异性）=217/（0+217）=100%； 总符合率 =（428+217）/（428+0+0+217）=100%；
高危人群-已经生育地中海贫血儿的夫妻双方
新生儿筛查-尽早诊断、尽早治疗
21
正常人群也需要进行地贫基因检测！
正常人群中地贫基因携带者约占2%； 人口流动性大，地贫患者分散性高；
全民注重优生优育；
22
病因探究找到方法
地中海贫血
α 地中海贫血基因 α 点突变/缺失
β 地中海贫血基因 β 点突变
轻度～中度 中度～重度
HbH带或伴 HbBart’s HbConstantSpring 正常或轻度减少 强阳性 0.3～0.6 缺失3个或突变 α-/--，ααT/--
重度 重度
大量HbBart’s 伴HbPortland 少量HbH 无 阳性
缺失4个 --/--
α -地贫血红蛋白比较
表型
正常人 静止型携带者
地中海贫血基因检测的临床应用
一、地中海贫血
2
地中海贫血的地域分布
α-地贫分布
β-地贫分布
全球有3.5亿人为地中海贫血基因携带者（占总人口的2%）
中国南方高发地区人群携带率最高可达到24%
3
中国南方地贫基因携带率
在我国，地中海贫血主要在南方广东、广西、海南、四川、 重庆等省市发病率较高，以广西、广东最为严重。 地区
地中海贫血检测试剂盒
α-地中海贫血
亚能生物技术(深圳)有 限公司 中山大学达安基因股份 有限公司 珠海经济特区海泰生物 制药有限公司 深圳益生堂生物企业有 限公司 厦门致善生物科技有限 公司 潮州凯普生物化学有限 公司 北京现代高达生物技术 有限责任公司
α-地中海贫血基因检测试剂盒(gap-PCR 法) (国食药监械(准)字2012第3401088 号 α-地中海贫血基因检测试剂盒(gap-PCR 法) (国食药监械(准)字2011第3401628 号 东南亚型α-地中海贫血Zeta链蛋白检测 试剂盒(酶联免疫法) (国食药监械(准) 字2011第3400228号 β地中海贫血基因检测试剂盒 (PCR探针法) (国食药监械(准)字 2012第3400354号 β-地中海贫血基因检测试剂盒 (荧光PCR熔解曲线法) (国食药监 械(准)字2013第3401294号 α-和β-地中海贫血基因检测试剂盒(PCR+膜杂交法) (国食药监械(准)字 2012第3400399号 α-和β-型地中海贫血基因检测试剂盒(PCR-杂交法) (国食药监械(准)字 2013第3401572号
时间短
检测流程
样本核酸提取 20 min
多重PCR扩增 2.5hr
液相杂交 15 min
结果检测与判读 1 min/test
29
分型强
全新液相芯片技术简介
二维数字编码磁珠
藻
30
分型强
全新液相芯片技术简介
国内现有地中海贫血基因检测技术及现状
目前，国内地贫分子诊断方法主要有Gap-PCR、反向斑 点杂交、导流杂交、测序等。其中Gap-PCR只能检测出α 地 贫中的缺失型，反向斑点杂交需要两次检测才能完整的检出α 、 β-地贫；导流杂交技术不能做到基因位点的准确分型；而测 序方法需要昂贵的仪器，复杂序列分析，人工经验要求高， 不利于大规模筛查。
广东 携带率(%)
地贫
8.53
β地贫
2.54
合计
11.07
广西
四川 台湾 香港
14.95
1.92 4.20 5.02
6.78
2.18 1.10 3.41
21.73
4.1 5.3 8.43
Xu, et al. J Clin Pathol 2004, 57:517-22. Cai, et al. Chi J Epidemiol 2002,23:281-5.
静止型、 标准型、
轻型β－地中海贫血、 中间型β－地中海贫血、
HbH病、
Bart’s胎儿水肿综合征
重型－β海贫血
遗传性胎儿血红蛋白持续症
23
地贫产品介绍
通量高—每次检测可分析96个样本 品质优—阴、阳性符合率均为100% 时间短—报告时间最短可至5小时 分型强—每个突变位点准确分型 覆盖广—可覆盖中国人95%以上突变 种类多—外周血、羊水、绒毛、脐带血、足血片
4
遗传性血红蛋白病三大类
♪地中海贫血 (地贫)（Thalassemias ）
常见为-地贫 和 -地贫
♪异常血红蛋白病
珠蛋白结构异常，绝大部分没有或有轻度临床诊断
♪遗传性持续性胎儿血红蛋白
珠蛋白的合成不随着胎血定义及分类
地中海贫血（Thalassemia）简称地贫（Thal），是由于 血红蛋白的珠蛋白肽链基因突变或缺失，使某种珠蛋白肽 链合成障碍而致的一种遗传性慢性溶血性贫血。 血红蛋白分子是由珠蛋白+血红素组成，珠蛋白由两对（4 条）肽链构成。
胎儿期
HbF- α2γ2 HbA- α2β2
成人
HbA- α2β2 HbA2- α2δ2 HbF- α2γ2
地贫血红蛋白的组成
正常成人血红蛋白（Hb）有三种：HbA(α2β2)( 2.5—3.5%)、 HbA2(α2δ2)(96.5-97.5%)、HbF(α2γ2)(0-1.0%)。
α 地中海贫血及基因型
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覆盖广
本试剂盒适用于人DNA样本的地中海贫血基因型（包含3种α 突变、 3种α 缺失及17种β突变）中国常见的突变基因型的检测，可用于人地 中海贫血的辅助诊断及适用于大样本量的携带者筛查和产前基因诊断。
序号 1 2 3 基因 HBA HBA HBA 缩写 WS122 QS125 CS142 突变位点描述 Codon 122(C->G) Codon 125(T->C) Codon 142(T->C) 序号 13 14 15 基因 HBB HBB HBB 缩写 CD43 -29 Int 突变位点描述 CD43 G>T -29A>G 起始密码子 ATG>AGG
造血干细胞：根治重型地贫患儿的唯一方法移植造血干细胞。费
用超过 40万，且有90%的患者配对不成功。
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地贫预防手段
地贫的病因决定了它难治却可防
孕前 婚育指导 防遗传病
出生前 产前筛查 防先天病
婴幼年期 婴儿筛查 提早干预
成年期 婚育指导 杜绝患儿
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社会关注-世界地贫日
2013年5月8日 第20个“世界地贫日” 中国宣传主题：地贫防控从婚前孕前开始
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地贫遗传模式
若夫妇二人确诊一方为 地贫基因的携带者，而 另一方完全正常，则每 次怀孕，孩子有1/2几 率是地贫基因携带者 1/2完全正常。
若夫妇二人是同一种地 贫基因的携带者，那么 他们每次怀孕都有1/4 的概率怀有重度地贫患 儿的可能。
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筛查对象
地中海贫血患者-病因诊断
孕前夫妻双方-明确生育地中海贫血儿风险 孕期夫妻双方-防止生育地中海贫血儿
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