发酵种子罐接种标准操作规程
种子罐接种和培育的流程
种子罐接种和培育的流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copy excerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!种子罐接种和培育流程。
1. 准备好种子罐和接种材料。
清洁并消毒种子罐和其他接种材料，如滤纸、培养基和移液器。
发酵罐操作
10L-在位灭菌发酵罐操作规程一、灭菌（在位灭菌）1、水箱中装入足够的蒸馏水；2、检查罐线连接是否完好；3、打开蒸汽发生器、至排气口有蒸汽冒出时关闭排汽口；4、在蒸汽工作时，把培养基加入到发酵罐中，关紧各阀门；5、用钟罩罩上发酵罐，并用螺母固定结实；6、蒸汽发生器达到设定的压力时，打开通气阀门使蒸汽通入发酵罐的下部；7、然后打开发酵罐上下的连接阀门，使蒸汽通入上部至钟罩顶有蒸汽冒出；8、关闭钟罩顶的阀门，使温度上升；9、调整蒸汽通入的速度，使温度以比较快的速度升至95℃；10、用比较慢的速度升至120℃，并维持15min；11、关闭通气阀，停止通入蒸汽，待钟罩内温度降至室温时，打开钟罩顶的阀门排汽；12、汽排净后，拿下钟罩，把各罐线连接好。
二、发酵培养1、在控制器上设定好发酵的温度pH、搅拌转速等参数；2、连接好pH电极、温度电极，打开相应控制软件；3、调整无菌空气的流量；4、在酒精火焰的保护下，将菌种加入到发酵罐中；5、打开冷却水，在控制器上按键开始发酵，控制系统自动记录数据。
三、发酵完毕1、停止发酵，记录数据保存；2、把发酵液排出进行后续处理，用水洗净发酵罐；3、在计算机上记录的数据存盘，关闭控制器；4、在计算机上处理记录的数据。
5L-玻璃发酵罐操作规程一、发酵准备1、检查各罐电路及罐体供水；2、注入培养基，安装好pH电极、DO电极；3、设定发酵条件；4、pH电极零点和斜率进行标定，DO电极零点标定；5、连接好公用罐线，并保证安全可靠；6、过滤器胶管用弹簧夹夹紧，防止在消毒过程中培养基倒流进入空气过滤器；7、用闷冒盖紧pH电极上端口，防止因电缆插口受潮导致电极故障；8、溶氧电极上端口用吕铂纸包裹，防止因电缆插口受潮导致电极故障；9、盖紧其它罐盖接口，移去排汽冷凝器冷却水进出口的水管；10、离位实罐灭菌：玻璃罐体及各补料瓶盖好牛皮纸放入灭菌锅，灭菌过程温度升降要缓慢；11、灭菌结束，尽快将罐体放回原位，并尽快通入空气。
发酵过程各环节操作规程
酵母培养物产品发酵过程各环节操作规程菌种室操作规程1、菌种室和无菌室应保持整洁，严禁在其内饮食，无菌室应定期进行消毒灭菌，并进行无菌检查。
2、所用培养基及操作工具必须灭菌后才可带入无菌室。
3、进入无菌室工作人员应换上无菌衣，无菌鞋及无菌口罩。
4、操作前先用75％酒精擦手，待酒精挥发后点燃酒精灯，之后进行操作。
5、操作完毕，整理好工作台，然后离开。
6、对菌种室的菌中和资料应保密，不得外流。
7、所用药品不得品尝8、显微镜及其它贵重仪器，要细心操作，轻拿轻放，保护好，并做好使用记录。
9、所做实验，认真做好记录，以便总结分析。
10、实验时切勿将酒精等易燃物品接近火源，如遇险情，应及时采用适当的灭火措施。
11、工作完毕，所用仪器，药品放回原处，保持工作台洁净。
12、离开工作室前，应检察门窗，电源灯，火源，然后离开。
13、报废菌种，应灭菌处理后倒入下水道，实验后不用的药品，倒入所指定的地方。
发酵罐灭菌操作规程一、空消1、打开夹套底阀，把夹套中的水排尽。
2、打开排气阀门。
3、分别打开空气蒸汽阀门、物料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门，三路蒸汽同时进气。
4、当罐内温度上升到95℃调节三路蒸汽阀门，使温度平衡升至125℃时，再调节进排气阀门，使温度控制在125℃左右保温40分钟。
5、灭菌结束后，关闭所有进气阀门，打开排气阀门，排气待发酵罐冷却后，方可打开罐盖，然后进行配料。
二、实消1、开启电机搅拌，打开排气阀门。
2、分别打开空气蒸汽阀门、料管蒸汽阀门、取样管蒸汽阀门、三路管道同时进蒸汽。
3、当温度升至100℃时，调节四路蒸汽阀门，使温度平缓的上升至116℃，再调节进排气阀门，使温度控制在114℃-116℃之间，保温20分钟。
4、灭菌结束后，关闭四路蒸汽阀门，使罐内压力低于空气压力后，再打开空气进气阀门，进气保压，然后打开冷却水阀门，进气冷却，等待接种。
高效空气过滤器消毒操作规程1、关闭空气阀门后，一定要彻底排尽过滤器内的空气，是压力表指针显示为零。
种子罐火焰封口接种法
主 讲： 韩文清
生物制药专业《青霉素发酵技术》
知识回顾：
Байду номын сангаас
青霉素生产的种子制备
冷冻干燥孢子
斜面孢子
摇瓶液体培养种子
一级种子罐
制备过程示意图
安瓿管冷冻孢子→斜面孢子→大米孢子→ 一级种子→ 二级种子
完成四个转化，实现目标： 1、菌体数量：少→多(迅速) 2、细胞形态：孢子→菌丝体 3、培养基：固→液 4、容器：小 →大 （管→瓶→ 罐 ）
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
操作口诀
一、关进气，降罐压； 二、拧螺帽，点酒精； 三、倒菌种； 四、加螺帽，保罐压，调通风。
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
别离开吆，看看我们的操作吧
The End
种子罐液体培养基的加入及实消灭
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
接种材料准备
1、酒精火把、酒精棉、镊子、浸水棉线手 套 （？）。
2、培养好的液体摇瓶种（产黄青霉） （27°C，孢子培 养 40h，75-100r/min） 。
包头轻工职业技术学院/生物工程学院 教师 韩文清
操作要领
一、关闭进气阀（无菌空气），降低罐压，约0.02MPa； 二、拧松接种口螺帽（留1-2扣），酒精火把置于接口， 点燃，拧掉螺帽，将菌种瓶口在火焰拔塞、过火； 此时应向罐内通气，使接种口有空气排出（表压接 近于零，但不能为零）。 三、将菌种尽快倒入罐内（接种量10%）； 四、将接种口盖在火焰上灭菌后拧紧。罐压保持在 0.03MPa~0.07MPa，调节通风量。
新课题： 瓶→罐，如何接种？
→
→
种子罐接种操作？
赤藓糖醇发酵
淄博xx有限公司发酵车间操作规程二零xx年x月x日修订本规程涵盖本工段安全操作要求、技术操作要求、卫生要求、环保要求、物流要求五个方面，涉及设备安全、人身安全、工艺技术实施安全、物流安全、环境安全。
本工段所有操作必须按照本规程进行，任何与本规程不一致的操作，均视为违章。
一、一级种子罐操作规程1、空罐灭菌先缓慢开启所有的直接蒸汽阀门。
直接蒸汽阀们包括三路：一是与风管相联的直接蒸汽阀门，二是取样口蒸汽阀门，三是移种整齐阀门。
然后缓慢开启所有排汽阀门。
排汽阀门包括四路：一是接种口，二是排风口，三是葡萄糖入口，四是柠檬酸铵入口。
观察温度和罐压的变化情况。
当温度升到100℃时，保持罐压0.05到0.1Mpa，开大排汽阀门和进汽阀门。
当温度升到120℃时，罐压保持0.1Mpa，关小所有进汽和排汽阀门，保温保压10分钟。
然后关闭所有进汽和排汽阀门，缓慢开启进风阀门，打开排污阀，排放罐内蒸汽冷凝水。
开启排污阀门前必须先观察一楼排水管附近是否有人，避免热水涨管伤人。
冷凝水放完以后，关闭进风阀门，打开排风阀门，排空罐内压力。
排空压力表指示为“0”、转子流量计显示无风排出时，视为排空。
然后打开接种口阀门，观察无明显排风现象时，方可打开罐盖，准备上罐。
2、上罐罐内加水至下风头上边缘，开启进风阀门，把配好的葡萄糖在通风情况下投入罐内，然后加水至距离罐口87厘米处，关闭进风阀门，投入其他营养盐。
营养盐投放前应严格核实组成及配比，并确认无误。
然后开启进风阀门，取样检测固形物。
如固形物高于20，继续加水至离罐口58厘米；如固形物低于20，保持通风15分钟后再次取样检测。
如仍然低于20，应取样检测还原糖含量，并根据检测结论相应添加一定数量的葡萄糖，然后关闭进风阀门，加水至58厘米处。
之后，取样检测固形物、还原糖、PH值。
还原糖20±1，固形物20±1视为合格；还原糖超出15-25范围时，判断物料不合格，不得进入下步操作。
发酵罐的操作规程
发酵操作规程（空气系统，种子罐，发酵罐）：一,使用前的技术准备 1 . 上岗前的技术培训：发酵罐是机电一体化的高科技设备,因此; 操作人员上岗前必须进行技术培训,使他们熟悉整个系统的工作原理,管路, 阀门的操作程序,并对空压机,能正确操作使用.未经培训的人员,不得单独上岗操作. 2. 设备使用之前, 应先检查电源是否正常, 空压机, 循环水系统是否能正常工作. 3. 检查系统上的阀门, 接头及紧固螺钉是否拧紧. 4. 开动空压机, 用0.15Mpa 压力, 检查发酵罐, 过滤器, 管路, 阀门的密封性能是否良好,有无泄漏. 5. 溶氧仪, pH 仪, PLC 系统应根据使用说明书进行检查, 校正. 6. 上岗人员对上述各项必须能熟练操作.二,空消在投料前,气路,料路,发酵罐必须用蒸汽进行灭菌,消除所有死角的杂菌,保证系统处于无菌状态. 1. 空气管路的空消( 1 ) 空气管路上有除水减压阀,和除菌过滤器.除水减压阀不能用蒸汽灭菌,因此在空气管路通蒸汽前,必须将通向除水减压阀的阀门KQF1 关死,使蒸汽通过蒸汽过滤器然后进入除菌过滤器. (2) 空消过程中, 除菌过滤器下端的排气阀应微微开启, 排除冷凝水. (3) 空消时间应持续40 分钟左右,压力０.1Mpa, 设备初次使用或长期不用后启动时, 当最好采用间歇空消, 即第一次空消后, 暂定2～3小时再空消一次, 以便消除芽孢. (4) 经空消后的过滤器, 应通气吹干, 约30 分钟, 然后将气路阀门关闭. 2. 发酵罐空消(1)发酵罐是将蒸汽直接通入罐内进行空消. (2) 空消时, 应将罐上的接种口, 排气阀, 及料路阀门微微打开, 使蒸汽通过这些阀门排出, 同时保持罐压为0.13～0.15Mpa. (3) 空消时间为30 分钟, 特殊情况下, 可采用间歇空消. ( 4) 空消结束后, 应将罐内冷凝水排掉. 注意: 1.发酵罐空消时, 应将夹套内的水放掉, 空消时最好将夹套排水阀打开, 以防夹套水排不净. 2.空消时, 溶氧, pH 电极应取出, 可以延长其使用寿命.三,实消:实消是当罐内加入培养基后,用蒸汽对培养基进行灭菌的过程. 1. 空消结束后, 首先需将pH, Do 电极校正好后装入罐体中的接头中, 然后将配好的培养基从加料口加入罐内,此时夹套内应无冷却水. 2. 一般培养基的配方量以罐体全容积７０—７５%左右，根据培养基的泡沫而定。
发酵罐的操作流程
此课件下载可自行编辑修改，此课件供参考！ 部分内容来源于网络，如有侵权请与我联系删除！
安全与环保等注意事项
我们的发酵属于纯培养，是由单一菌种接种
以
后进行的培养，其中不可以有任何杂菌，否则会 影
响产品的使用效果，所以为了确保每一批发酵的 成
功，在上罐之前，发酵人员必须具备以下两种意 识：
1. 无菌意识
2. 安全意识
无菌意识
由于微生物个体小、分布广泛等特性，发酵染 菌
2. 大开F16进行泄压，到微正压0.02~0.03MPa， 再关F16.
第四步 投料
投料口
第五步、实消
1.开F2，F37，F16，手动搅拌，当发酵罐内温度 达到80—90度时，关F2，F37，手动搅拌。
2.开F4，F22，排冷凝水，当有均匀蒸汽出现时 ，关F22，开F21。当F16有均匀蒸汽出现时，关 F16，当压力升到0.1MPa时，微开F16，调节F21 使压力保持在0.1MPa，30min。关F16，F21， F4。
3. 然后大开F16泄压到微正压。再关F16.
F4 F21
F22
第六步、参数设定
第七步、冷却
1.在控制面板上冷却打到手动，开F33，F32，手 动搅拌，微开F15，调节F11，空气管道压力回 升到0.1MPa时，关F15。罐内压力保持在微正压 ，当温度降到90度时，关手动搅拌，大开F15， 同时调节F11，使空气管道压力保持在0.1MPa。
开F11，F14，保持压力在0.1MPa，当有干燥冷 空气排出时，微开F14，调节F11，保持压力在 0.1MPa
第三步、空消
F4
F21
F16
F22
火焰接种操规
火焰接种规程1 目的建立火焰接种操作规程，规范其操作。
2 范围适用于发酵接种的操作。
3 责任车间组织制定并实施，生产部和质管部监督实施。
4 生产前准备4.1 检查岗位卫生是否符合要求。
4.2 检查有关SOP现行版本和记录是否齐备。
4.3 检查所用设备、仪器是否有完好的状态标识。
4.4 检查仪器、计量器具、衡器具是否已清洁并校验在有效期内。
4.5 检查人员着装是否符合规定，是否做好了必要的防护措施。
5 生产操作过程5.1 接种时间由霉菌人员根据生产情况决定，并提前通知消毒和看罐岗位，以便做好准备工作。
接种时优先使用最早送来的菌液。
若送来的菌液超过24小时则不能进罐应退还种子室。
5.2 接种现场不得超过5人，看罐一个，霉菌两个，消毒两个，消毒工提前半小时将门窗关好，将接种屏风准备好，保证接种现场无通风，然后再用0.2％新洁尔灭喷洒现场。
5.3 待罐温降到31±2℃时,进行接种准备工作。
5.4 霉菌人员用0.2％新洁尔灭浸泡手套，用肥皂彻底洗手，用0.2％新洁尔灭纱布擦手，取出接种手套拧干，整理好着装，把准备好的菌液用0.2％新洁尔灭擦试瓶壁，到种子罐接种现场。
5.5 消毒人员做好卸压工作，并用0.2％新洁尔灭再对接种周围环境进行喷雾。
将罐压降至0.05-0.06Mpa时，戴好保护手套，点火焰圈把接种口下小球阀关闭.拧开上球阀。
把皮管接入接种口缓慢打开下球阀，将火焰圈取下扑灭。
缓慢开打排气泄压到0.02-0.03Mpa.再升压到0.06-0.0.08 Mpa。
重复3-4次.直至接种瓶内的菌液压完。
消毒人员在火焰保护下将接种帽拧紧之后立即打开空气进气阀，调节排气阀，控制流量使种子罐压达到0.045-0.055MPa，然后与看罐人员进行交接。
(接种安全风险:火焰烫伤。
风险水平:一般风险。
伤害程度:二级。
可能性:二级。
防范措施:正确操作穿戴好焊工手套，准备烫伤药膏)，整个接种过程不得超过10分钟。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1.0 目的：建立种子罐接种标准操作规程，对操作员工进行培训教育。
2.0 范围：适用于发酵工程部种子罐的接种操作。
3.0 定义：无
4.0 职责：接种操作者、车间主管对本规程负责，QA监督。
5.0 程序：
5.1 接种前准备工作：
5.1.1 在接种前半小时工艺通知值班人员关闭种子罐区窗户，后用1%新洁尔灭
喷洒种子罐区。
5.1.2 准备好1%新洁尔、75%酒精及无菌纱布；确认待接种罐运转正常，罐压在
0.03- 0.05MPa，罐温、pH在工艺要求范围内；接种口硅胶管的末端保
护完好并有活空气微排。
5.1.3 准备好接种用超净台，开启紫外灯，开启风机为高档，紫外灯照射30分
钟。
后关闭紫外灯，开日光灯待接种。
5.1.4 工艺员在接到菌种送来的接种瓶后，检查接种瓶气密性（硅胶塞、夹子
及硅胶管）完好。
5.2 接种：接种操作由工艺员执行，值班人员协助。
所有与接种有关人员在接种前
应洗净双手。
5.2.1 工艺员先用75%酒精消毒双手后，戴上无菌手套，再用75%酒精消毒。
5.2.2 将种子罐接种口末端与接种瓶口末端互相靠近，去除接种口末端纱布，
去除接种瓶口硅胶管末端纱布，将硅胶管口与接种口迅速对接，对接好
后用75％洒精无菌纱布捏紧硅胶管与接种口连接处，防止在按种过程中
管子脱落。
5.2.3 对接完毕，开启蠕动泵将摇瓶种子打入种子罐。
5.3.4 当摇瓶种子瓶里没有种子液进入胶管时，说明摇瓶种子已接完。
5.3.5 摇瓶种子接完后，罐压调至0.03Mpa及以上关闭接种口阀门（防止接种
瓶接种完毕后出现真空现象，导致外面空气进入超净工作台，造成超净
工作台污染），拔下种子罐接种口硅胶管，用沾75%洒精的无菌纱布绑好
接种口，同时将接种瓶硅胶管末端折起用纱布绑好（或用夹子夹好）。
种
子罐接种口硅胶管待清洁后留下批种子进罐用。
接种用硅胶管一个月更
换一次。
5.3.6 超净工作台清洁：按顺序从里到外、从上到下，用1%新洁尔灭纱布擦拭
超净工作台。
吹干后，关闭超净工作台风机。
5.3.7 接种完毕，摇瓶种子瓶由菌种带回清洗。
5.4 同值班人员进行交接，值班人员接收后马上调整相关参数至工艺要求范围，开
车运行。
5.5 各接种相关人员应填好接种记录。
6.0 相关文件:
6.1 硅胶管更换记录
7.0 修订简历:
记录编码：硅胶管更换记录共1页第1页
备注：一个月更换一次。