分光光度计的原理与应用解析
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计使用原理及操作方法一、引言分光光度计是一种用于测定物质在不同波长下吸收或透射光的仪器。
它广泛应用于化学、生物、环境科学等领域的实验室研究和工业生产过程中。
本文将介绍分光光度计的使用原理和操作方法。
二、使用原理1.分光光度计基本构成分光光度计由光源、样品室、检测器和信号处理系统等组成。
光源通常使用可见光波段的白炽灯、氘灯或钨灯等。
样品室包含了样品槽和光路，用于将光从光源引导到样品上，并将样品吸收或透射的光引导到检测器上。
检测器一般是光电二极管或光电倍增管，用于将光信号转换为电信号。
信号处理系统对电信号进行放大、滤波和数值计算等处理，最终给出光吸收或透射的数值结果。
2.工作原理分光光度计的工作原理基于比耦光度计定律，即光强与样品中物质浓度成正比。
当光通过样品时，样品中的物质会吸收特定波长的光，导致光强减弱。
通过测量光源发出的光经样品后的光强，可以推导出样品中物质的浓度。
三、操作方法1.准备工作（1）将分光光度计放置在平稳的台面上，并接通电源。
（2）设置所需的工作波长和光强范围，确保仪器处于所需工作状态。
（3）清洁样品室和样品槽，确保无灰尘或杂质影响测量结果。
2.插入样品（1）打开样品室，将待测样品精确地放置在样品槽中，并确保样品紧密地与光路接触。
（2）关闭样品室，确保样品室的密封性。
3.零点校正（1）选择空白试样，即不含待测物质的样品，放置在样品槽中。
（2）按下零点校正按钮，使分光光度计记录下此时的光强值作为参考值。
4.测量样品（1）选择待测样品，放置在样品槽中。
（2）按下测量按钮，分光光度计会记录下此时样品吸收或透射的光强值。
（3）重复进行多次测量，以提高结果的准确性。
5.数据处理利用分光光度计提供的信号处理系统，对测量到的光强值进行相应的操作，如放大、滤波和数值计算等。
四、附件本文档无附加内容。
五、法律名词及注释（1）分光光度计：一种用于测定物质在不同波长下吸收或透射光的仪器。
紫外可见分光光度计的工作原理与应用 光度计工作原理
紫外可见分光光度计的工作原理与应用光度计工作原理产品原理分子的紫外可见吸取光谱是由于分子中的某些基团吸取了紫外可见辐射光后，发生了电子能级跃迁而产生的吸取光谱。
由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构，其吸取光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其特有的、固定的吸取光谱曲线，可依据吸取光谱上的某些特征波优点的吸光度的高处与低处判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。
分光光度分析就是依据物质的吸取光谱讨论物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
它是带状光谱，反映了分子中某些基团的信息。
可以用标准光图谱再结合其它手段进行定性分析。
依据Lambert—Beer定律说明光的吸取与吸取层厚度成正比，比耳定律说明光的吸取与溶液浓度成正比；假相像时考虑吸取层厚度和溶液浓度对光吸取率的影响，即得朗伯—比耳定律。
即A=bc，（A为吸光度，为摩尔吸光系数，b为液池厚度，c为溶液浓度）就可以对溶液进行定量分析。
将分析样品和标准样品以相同浓度配制在同一溶剂中，在同一条件下分别测定紫外可见吸取光谱。
若两者是同一物质，则两者的光谱图应完全一致。
假如没有标样，也可以和现成的标准谱图对比进行比较。
这种方法要求仪器精准，精密度高，且测定条件要相同。
试验证明，不同的极性溶剂产生氢键的强度也不同，这可以利用紫外光谱来判定化合物在不同溶剂中氢键强度，以确定选择哪一种溶剂。
产品应用在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。
在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。
由于水和废水的成分多而杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在实在分析时必需选择好分析方法。
在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等；在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
紫外可见分光光度计 普析
紫外可见分光光度计普析紫外可见分光光度计（UV-Vis spectrophotometer）是一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、生物、环境等领域的研究和实验中。
本文将从紫外可见分光光度计的原理、应用以及操作步骤等方面进行介绍。
一、紫外可见分光光度计的原理紫外可见分光光度计是利用物质对紫外可见光的吸收特性进行定量分析的仪器。
根据光的波长范围，可分为紫外光区和可见光区两部分。
紫外光区的波长范围为200-400 nm，可见光区的波长范围为400-800 nm。
紫外可见分光光度计的工作原理是通过光源产生的光经过样品后，被光电二极管或光电倍增管接收，形成光谱图，再通过计算机进行数据处理和分析。
在分析过程中，样品溶液的吸收特性会使光强发生变化，根据吸光度与物质浓度之间的线性关系，可以通过测量吸光度来确定物质的浓度。
二、紫外可见分光光度计的应用紫外可见分光光度计在科研和实验中有着广泛的应用。
以下是其中几个常见的应用领域：1. 生物化学分析：紫外可见分光光度计可用于蛋白质、核酸、酶等生物大分子的浓度测定和纯度分析，如蛋白质含量的测定、核酸的纯度检测等。
2. 药物分析：紫外可见分光光度计可用于药物的含量测定、质量控制和稳定性研究，如药物溶液的吸光度测定、药物的光解动力学研究等。
3. 环境监测：紫外可见分光光度计可用于水质、大气和土壤等环境样品的污染物分析和监测，如水中重金属离子的测定、大气中挥发性有机物的测定等。
4. 食品安全检测：紫外可见分光光度计可用于食品中添加剂、农药残留、重金属等有害物质的检测，如食品中硝酸盐含量的测定、食品中防腐剂的测定等。
三、紫外可见分光光度计的操作步骤使用紫外可见分光光度计进行实验时，需要按照以下步骤进行操作：1. 打开仪器电源，并预热一段时间，使光源和光电二极管稳定工作。
2. 根据实验需要选择合适的光源和检测器，设置光的波长范围。
3. 取一定量的样品溶液，注入样品池中，并调节样品池的位置，使光线通过样品溶液。
分光光度计实验原理与目的
分光光度计实验原理与目的分光光度计是一种常用的实验仪器，用于测量溶液中物质的吸光度。
它的原理是基于比尔-朗伯定律和光的衍射原理。
本文将介绍分光光度计的实验原理和目的。
一、实验原理分光光度计的原理是基于比尔-朗伯定律，该定律指出，溶液中物质的吸光度与物质的浓度成正比。
吸光度是指溶液对特定波长光线的吸收能力，它与光线通过溶液时被溶质吸收的量成正比。
分光光度计通过以下步骤测量溶液的吸光度：1. 发射光源：分光光度计的发射光源通常是可见光或紫外光，根据测量的目的选择不同波长的光源。
2. 光的分散：通过光栅或棱镜将发射光源分散成不同波长的光线。
3. 样品池：将待测溶液放置在样品池中，样品池是透明的，可以容纳溶液。
4. 光的传输：分光光度计通过光纤或反射镜将分散后的光线引导至样品池中，使其通过待测溶液。
5. 光的吸收：溶液中的溶质吸收特定波长的光线，吸收的光线强度与溶质的浓度成正比。
6. 光的检测：分光光度计使用光敏探测器（如光电二极管或光电倍增管）检测通过溶液后的光线强度。
7. 信号处理：分光光度计将检测到的光线强度转换为电信号，并进行放大和滤波处理。
8. 吸光度测量：根据比尔-朗伯定律，分光光度计计算并显示测得的溶液吸光度值。
二、实验目的分光光度计的实验目的有以下几个方面：1. 测量物质浓度：通过测量溶液的吸光度，可以根据比尔-朗伯定律计算出物质的浓度。
这对于定量分析和化学反应动力学研究非常重要。
2. 分析溶液成分：分光光度计可以用于分析溶液中特定物质的含量。
通过建立标准曲线，可以准确测量溶液中某种物质的浓度。
3. 比较不同溶液的吸光度：通过测量不同溶液的吸光度，可以比较它们的色度差异，进而了解溶液中不同物质的含量或反应程度。
4. 质量控制：分光光度计可以用于监测和控制生产过程中溶液中物质的浓度，确保产品的质量稳定和一致性。
5. 研究光学性质：分光光度计可以用于研究物质对不同波长光线的吸光度变化，从而了解物质的光学性质和分子结构。
分光光度计使用原理及操作方法
分光光度计使用原理及操作方法分光光度计是一种常用的光学仪器，用于测量溶液或气体中物质对特定波长的光的吸收或透射程度。
它的工作原理基于比尔-朗伯定律，即物质对光的吸收与物质的浓度成正比。
以下是关于分光光度计的使用原理及操作方法的详细介绍。
一、工作原理分光光度计的工作原理基于比尔-朗伯定律，它描述了物质溶液或气体对光的吸收或透射程度与物质的浓度之间的关系。
根据该定律，若吸光度为A，物质的浓度为c，吸光度与浓度之间存在一个线性关系，即A = εcl，其中ε为摩尔吸光系数，l为光程长度。
在分光光度计中，光源会通过一束光线产生可见光或紫外线，该光线通过一个狭缝，称为波长选择装置，以选择特定波长的光进行测量。
然后进入样品室，通过样品室中的溶液或气体，通过光电三极管（光敏元件）接收到另一端。
分光光度计会比较入射光和通过样品后的光的强度差异，通过转化为电信号进行测量和计算。
根据比尔-朗伯定律，通过对吸光度的测量，可以推算出溶液中物质的浓度。
二、分光光度计的操作方法1.打开分光光度计电源，待仪器启动完成，确保仪器工作正常。
2.校准仪器：选择所需波长，并将光路调整为100%T（透过率）或0%T（吸光度）。
根据操作手册的指示进行校准。
3.准备样品：使用准确的浓度称量所需样品，并使用溶剂稀释至合适的浓度范围。
4.装载样品：打开样品室并放置样品池，将样品注入样品池，并确保池中没有气泡。
5.设置参数：根据实验需要，在分光光度计上设置参数，如波长、采集速度等。
6.测量样品：选择所需波长，并将样品室对准该波长设置，调节入射光的强度。
7.记录数据：测量样品的吸光度，并将数据记录下来。
可以选择多次测量，以获得更准确的结果。
8.分析结果：根据吸光度值和已知浓度值之间的关系，计算出样品的浓度，或者在已知浓度下，确定样品的吸光度。
9.清洗仪器：在测量结束后，将样品室和样品池清洗干净，以防止可能的交叉污染。
关闭仪器电源。
10.维护仪器：定期进行仪器的维护和保养，包括清洁仪器的各个部件，并按照操作手册的要求更换或校准配件。
分光光度计的原理及应用
分光光度计的原理及应用1. 分光光度计的原理分光光度计是一种用于测量物质溶液中某种物质浓度的仪器。
其原理基于光的吸收和透射特性。
•光的吸收特性：物质在特定波长的光照射下，会吸收光束中的能量，导致光的强度减弱。
•光的透射特性：物质在特定波长的光照射下，会让光束透过并传播，导致光的强度没有明显的改变。
基于光的吸收和透射特性，分光光度计通过测量待检测物质的溶液对光的吸收程度来确定其浓度。
具体的原理如下：1.光源产生具有特定波长的光束。
2.光束通过一个称为样品池的透明容器中的溶液。
3.通过检测器测量光束透过溶液后的光强度。
4.根据光的吸收定律（比尔-朗伯定律），测量光的强度与物质浓度之间的关系。
分光光度计的原理基于比尔-朗伯定律，该定律表示光强度与物质浓度呈指数关系。
通过测量光的强度，可以计算出溶液中特定物质的浓度。
2. 分光光度计的应用分光光度计在化学、生物分析、环境监测等领域被广泛应用。
以下列举了一些分光光度计的主要应用场景：2.1 化学分析•分子吸收光谱分析：分光光度计可用于测量化学反应中产生的吸收或产物的特征峰值，以确定物质的浓度。
•金属离子分析：通过测量金属离子在特定波长下的吸收特性，可用于测量金属溶液中金属离子的浓度。
2.2 生物学•蛋白质和核酸分析：分光光度计可用于测量蛋白质和核酸的浓度，并用于分析蛋白质和核酸的纯度。
•酶动力学研究：通过测量酶在特定底物浓度下的反应速率，可以研究酶的催化机制和动力学参数。
2.3 环境监测•水质监测：分光光度计可用于测量水中各种污染物质的浓度，如氨氮、亚硝酸盐、硝酸盐等。
•大气监测：利用分光光度计测量大气中特定气体的浓度，如二氧化碳、一氧化碳等。
2.4 制药工业•药物浓度测量：分光光度计可用于药物中活性成分的测量，用于制药工艺控制和药物质量监控。
2.5 食品安全•残留农药检测：利用分光光度计测量食品中农药残留物的浓度，用于评估食品安全性。
总结：分光光度计作为一种常用的分析仪器，其原理基于光的吸收和透射特性。
分光光度法的原理及应用
分光光度法的原理及应用1. 原理介绍分光光度法是一种常见的分析化学技术，用于测量溶液中化合物的浓度和吸收光谱。
分光光度法基于分子在特定波长下对光的吸收现象，通过测量被溶液吸收的光强度来确定溶液中化合物的浓度。
1.1 光吸收现象分子在特定波长的光照射下，能够吸收光的能量，使得分子内部电子发生激发跃迁，从基态到激发态。
这种吸收是根据化合物的分子结构和电子能级之间的能量差异来决定的。
1.2 分光光度计分光光度计是用于测量溶液吸收光强度的仪器。
它包含一个光源、一个选择特定波长的单色仪、一个样品室和一个光电探测器。
分光光度计能够通过测量样品吸收光的强度来确定溶液中的化合物浓度。
2. 应用分光光度法在许多领域中得到广泛的应用，包括环境监测、食品安全、药物分析等。
以下是一些常见的应用：2.1 环境监测分光光度法常被用于环境中有害物质的检测和监测。
例如，通过测量水样中某种化学物质的吸光度，可以确定水体中的污染程度。
这种方法在水质监测和环境保护中起着重要的作用。
2.2 食品安全分光光度法可以用于检测食品中的添加剂、农药残留物和重金属等有害物质。
常见的应用包括测量食品中的某种营养成分的含量以及检测污染物的浓度。
2.3 药物分析在药物研究和制造过程中，分光光度法用于测量药物的浓度和纯度，以及监测反应的进程。
这种方法是药物研究和制造中常用的一种分析手段。
2.4 生物化学分光光度法在生物化学研究中也具有重要的应用。
例如，通过测量生物样品中特定化合物的吸光度，可以确定样品中的含量，进而研究生物反应的机制和动力学。
3. 测量步骤以下是使用分光光度法测量溶液中化合物浓度的一般步骤：1.设置分光光度计的工作波长和仪器条件，根据所测化合物的特性选择合适的波长。
2.校准仪器，使用标准样品测量光强度。
根据标准样品的光强度和浓度的线性关系，建立校正曲线。
3.取待测样品，使用适当的溶剂将其稀释至合适的浓度范围。
4.在分光光度计中将样品放入样品室，调节波长和仪器条件。
分光光度计的原理及其应用
分光光度计的原理及其应用分光光度计是一种用于测量光的强度或吸收程度的仪器。
它基于光的波长选择性吸收的特性，通过测量样品吸收或透射光的强度变化来确定样品中物质的浓度。
分光光度计的原理主要包括：光源、单色仪、样品室、检测器和信号处理系统。
首先，分光光度计通过光源产生一束连续的白光。
这种白光包含了各种不同波长的光。
接下来，单色仪将白光中的不同波长的光分离出来。
单色仪通常由光栅或光柱组成，通过选择合适的光栅或光柱可以选择特定波长的光通过。
然后，选定的波长的单色光会通过样品室，与待测样品相互作用。
样品中的物质会吸收或透射掉特定波长的光，这会导致通过样品室的光的强度发生变化。
接着，检测器接收通过样品室的光，并将其转换为电信号。
检测器可以是光电二极管、光电倍增管或光电探测器等。
最后，信号处理系统对检测器输出的电信号进行放大和滤波，并将结果显示在检测器上。
通过比较样品吸收或透射光的强度与参考物质（通常是纯溶剂）的光强度，可以计算出样品中物质的浓度。
在生物化学分析中，分光光度计常用于测量生物分子的浓度，如蛋白质、核酸、酶等。
通过测定样品对特定波长的光的吸收程度，可以得到生物分子的定量信息，进而进行物质的定性和定量分析。
在环境监测中，分光光度计可以用来测量水体、大气等环境中的污染物浓度。
例如，通过测量水中特定色素或金属的吸光度，可以评估水污染的程度，提供重要的环境保护数据和决策依据。
在食品安全领域，分光光度计可以用于检测食品中的有害物质，如重金属、农药残留等。
通过测量食品样品中特定物质吸光度的变化，可以判断食品是否符合安全标准，确保食品质量和消费者的健康。
在药物研发中，分光光度计常用于评估药物溶解度、稳定性和药物与其他物质之间的相互作用。
通过测量药物在不同条件下的吸光度，可以提供药物研发和质量控制的指导。
在质量控制中，分光光度计可以用于监测产品质量的稳定性和一致性。
通过测量产品中特定成分的吸光度，可以确定产品是否符合预定要求，并及时采取措施进行质量控制，确保产品品质。
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西安工程大学可见分光光度计的原理与应用院系：纺织与材料学院专业班级：轻化工程10（3）姓名：***学号：***********紫外可见分光光度计的原理与应用分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。
它是现代实验室检测用的常规仪器。
常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
在印染方面，我们可以用分光光度计测量染色时染料的上染百分率，以及整理在织物上助剂的浓度，还可以用于颜色的测量。
同时它还广泛地应用于食品检测、农药的检测及工业上石油的检测等。
紫外可见分光光度计在实验中的应用非常广泛，故我们要熟悉并掌握它的原理及应用。
一、分光光度计的组成各种型号的可见分光光度计，就其基本结构来说，都是由五个基本部分组成，即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。
1.光源在紫外可见分光光度计中，常用的光源有两类：热辐射光源和气体放电光源。
热辐射光源用于可见光区，如钨灯和卤钨灯；气体放电光源用于紫外光区，如氢灯和氘灯。
2．单色器单色器的主要组成：入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。
单色器质量的优劣，主要决定于色散元件的质量。
色散元件常用棱镜和光栅。
3.吸收池吸收池又称比色皿或比色杯，按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池，前者不能用于紫外区。
吸收池的种类很多，其光径可在0.1～10cm之间，其中以1cm 光径吸收池最为常用。
4、检测器检测器的作用是检测光信号，并将光信号转变为电信号。
现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。
5、信号显示系统常用的信号显示装置有直读检流计，电位调节指零装置，以及自动记录和数字显示装置等。
二、分光计的分类国际上一般按紫外可见分光光度计的仪器结构将其分为单光束、准双光束、双光束和双波长四类。
单光束可见分光光度计光度准确度差。
常见的721、751、753、754 等可见分光光度计都是单光束仪器，因为他们的分析误差较大，所以, 它们在使用上受到限制。
一般来讲, 对要求较高的制药行业、质量检验行业、科研等行业不适宜使用单光束紫外可见分光光度计。
准双光束紫外可见分光光度计有两种类型: 一种是两束单色光, 一只比色皿, 两只光电转换器; 另一种是一束单色光, 一束复合光, 一只比色皿, 两只光电转换器。
常见类型有TU-1800、TU-1800S、TU-1800PC、TU-1800SPC、UV-762、UV-1600 等。
双光束紫外可见分光光度计就是有两束单色光的紫外可见分光光度计。
它有两种类型: 一种是两束单色光, 两只比色皿, 两只光电转换器; 另一种是两束单色光, 两只比色皿, 一只光电转换器。
目前, 国内外的双光束紫外可见分光光度计中, 两只光电转换器的双光束紫外可见分光光度计仪器已很少见。
双波长紫外可见分光光度计都采用两个单色器。
光源发出的光被两个单色器分别分离出波长为λ1 和λ2, 通过斩波器将两束单色光λ1 和λ2 交替入射到同一试样中, 光电倍增管交替地接收到经过试样吸收后的这两束单色光, 并把它们变成电信号。
常见的类型有WFZ800-5，UV-265。
三、原理及测试方法原理：朗伯-比尔定律：当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时，溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比，即A= εLc式中比例常数ε与吸光物质的本性，入射光波长及温度等因素有关。
c为吸光物质浓度，L为透光液层厚度。
测试方法：（1）最大吸收波长λmax 的测定：配置任意浓度的染液，用1㎝厚的比色皿在分光光度计上测定不同波长时的吸光度值，要求读数范围在0.2～0.8。
然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，作出吸收光谱曲线图，从而得出该浓度下染料的最大吸收波长λmax 。
吸收光谱曲线图（2）标准工作曲线的测定：分别测定不同浓度染液在最大吸收波长λmax 时的吸光度值，然后以染液浓度为横坐标，以测定的吸光度值为纵坐标作图，得到该染料的标准工作曲线图。
（3）测未知液的浓度：在最大吸收波长下，测出未知液的吸光值，然后在标准工作曲线上找出相应的浓度。
四、紫外分光光度计的特点①应用广泛：紫外-可见分光光度计应用范围很广。
任何物质只要在紫外-可见波段中吸收光谱，均可用紫外-可见分光光度计来进行定性、定量分析； ②灵敏度高：由于新的显色剂的大量合成，并在应用研究方面取得了可喜的进展，使得对元素测定的灵敏度有所推进，特别是有关多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，使许多元素的摩尔吸光系数由原来的几万提高到数十万；③选择性好：目前已有些元素只要利用控制适当的显色条件就可直接进行光度法测定，如钴、铀、镍、铜、银、铁等元素的测定，已有比较满意的方法；④准确度高：对于一般的分光光度法，其浓度测定的相对误差在1～3%范围内，如采用示差分光光度法进行测定，则误差可减少到0.X%；④适用浓度范围广可从常量（1%～50%）到痕量（10-8～10-6%）；⑤分析成本低、操作简便、快速由于分光光度法具有以上优点，因此目前仍广泛地应用于化工、冶金、地质、医学、食品、制药等部门及环境检测系统。
单在水质分析中的应用就很广，目前能有直接法和间接法测定的金属和非金属元素就有70多种。
五、紫外分光光度计的操作1.准备工作（1）确认环境温度、相对湿度是否满足要求（要求温度为15℃～35℃、相对湿度不大于80%）；（2）开机前打开仪器样品室盖，观察确认样品室无挡光物后再打开电源。
2.启动（1）打开电源，仪器显示初始化工作界面，仪器将进行自检并初始化，若初始化正常结束，系统将进入仪器操作主界面；（2）仪器需进行预热使光源达到稳定后开始测量，预热时间一般为15～30分钟。
3.运行（1）选择数字键“3”→按“F1”→按“1”键选择工作模式为“标样法”→按“2”键用数字键将波长值输入，输入完成按“ENTER”键→按“3”键选择需要的浓度单位。
（2）继续按“F1”键进入标样法工作曲线参数设置界面→按“1”键输入标样数，输入完成按“ENTER”键→按“2”键，按照系统提示用数字键输入标样浓度，输入完成按“ENTER”键→再按“2”键，在一号池位置放置空白溶液，按“A/Z”键进行自动校零，校零结束将要测量的标样放入对应的比色池位置，接着再按“START/STOP”键对当前测试的标样进行测量→测量结束系统提示输入下一号标样的浓度值，重复以上操作，直至标准曲线测试完成。
（3）按“3”键可看到标准曲线、曲线方程及相关系数，将线性方程及相关系数记录在原始记录本上，按“RETURN”键返回定量测量参数设置界面。
（4）按“F3”键进入试样池设置→再按“1”键选择试样池为5联池→按“2”键可利用数字键对样品池数进行设置，输入完成后按“ENTER”键→继续按“3”键选择一号池空白校正为“否”→按“4”键对移动试样池数进行设置，按“RETURN”键返回到定量测量画面→在一号池位置放入空白溶液，按“A/Z”键对当前工作波长进行零吸光度校正，将测量的样品依次放入设定的使用样品池中，继续按“START/STOP”键测量样品的浓度值。
4.结束测量结束将比色皿用去离子水冲洗干净倒置晾干，清理台面，关闭电源开关，并及时填写相关记录。
六、紫外分光光度计使用时的注意事项1.比色皿使用时注意不要沾污或将比色皿的透光面磨损，应手持比色皿的毛面。
2.待测液制备好后应尽快测量，避免有色物质分解，影响测量结果。
3.测得的吸光度A最好控制在0.2～0.8之间，超过1.0时要做适当稀释。
4.开关试样室盖时动作要轻缓。
5.不要在仪器上方倾倒测试样品，以免样品污染仪器表面，损坏仪器。
6.比色皿在盛装样品前，应用所盛装样品冲洗两次，测量结束后比色皿应用蒸馏水清洗干净后倒置晾干。
若比色皿内有颜色挂壁，可用无水乙醇浸泡清洗。
7.向比色皿中加样时，若样品流到比色皿外壁时，应以滤纸點干，镜头纸擦净后测量，切忌用滤纸擦拭，以免比色皿出现划痕。
8.测定紫外波长时，需选用石英比色皿。
9.测量过程中不可打开测量室的窗门，否则会影响测量结果的准确性。
七、应用1.生物医药上的应用可利用分光光度计进行氨基酸含量的测定、测量未知蛋白溶液的浓度及含量、新生儿血清胆红的测定以及蛋白质与核酸的结构分析等。
2．印染上的应用可以测定纺织品上的甲醛含量、染料对织物的上染百分率、测定蛋白助剂在织物上的均匀程度、测定整理在织物上助剂的浓度、测吸附速率曲线、半吸附时间、吸附饱和值、平衡吸附量、测吸附量与K/S值的关系、吸附助剂量与其他性能的关系（如防毡缩）等。
3．药品分析中的应用.我国和世界上许多国家的药典都明确规定, 许多药品都要求用紫外可见分光光度计作质量控制。
因此, 紫外可见分光光度计已是制药行业和药检行业必备的分析仪器。
且规定, 用于药品质控的紫外可见分光光度计, 光谱带宽要求2nm 以下。
紫外可见分光光度计在药品检测中的应用已经非常广泛。
其中, 使用紫外可见分光光度计分析最多的药物有: 维生素、抗生素、解热药、去痛药、降血压药、安定药、镇咳药、滴眼药、磺胺类药、利尿药、某些妇科药、痢疾药、腹泻药、抗肿瘤药、抗结核药等。
4.石油油品分析在石油开采、加工过程中, 石油有可能造成污染。
在石油工业生产污水中,一般将排水中石油含量规定为10mg/ L。
而在地面水中, 最高允许石油含量为0.1～0.3mg/ L。
一般石油炼油厂中, 石油所含的芳烃组成是相对稳定的, 所测得标准油品的吸收峰, 都在221～225nm 和251～255nm 处。
石油的两个特征吸收峰(225nm 和254nm) 是测定炼油厂污水中的含油量时要选用的吸收波长。
另外, 轻油组分( 初馏约180℃) 几乎无明显紫外特征吸收, 而中油( 180～250℃) 和重油(250～280℃) , 以及蒽油( > 280℃) 等组分在225nm 处吸收较强。
它代表了石油成分的主峰, 在254nm 处吸收较弱, 有时显示出某种重质油品的特性。
这些分析工作, 都用紫外可见分光光度计来进行。
还有, 在炼油过程中, 石油在320nm 附近有一个芳烃杂质, 也是必须要用紫外可见分光光度计来检测的。
因此, 紫外可见分光光度计是石油工业中非常重要的质量控制仪器。
5.环境中有害物质检测环境( 包括空气、水、土壤) 中许多的对人有毒有害物质的检测, 都用到紫外可见分光光度计, 如检测自来水中的木素磺酸、木质素、单宁、表面活性剂、黄腐酸、酚类、苯胺类、硝基酚类化合物等对人体有毒害的物质。
有些自来水中, 含有氨氮、亚硝酸盐、总酚、总苯胺、硝基酚类等对人体有毒害的物质, 一般也是用紫外可见分光光度计来检测。
6.饲料工业中的应用饲料的原料、添加剂、混合饲料等中的维生素A、维生素C、维生素E、维生素K、山梨酸、苯甲酸、棉酸、甲酯、乙酸酯、胡萝卜素、烟酸、总氨基酸等微量元素钾、铁、硒、碘、铜、磷、锰等都经常用紫外可见分光光度计来检测，常用饲料添加剂中的皮蝇磷、磺胺类药物、灰黄霉素、二甲硝咪唑, 以及普鲁卡因等的测定, 基本上也都可用紫外可见分光光度计来进行检测。