马血清在脂肪干细胞成肌诱导中的作用
不同培养条件下脂肪干细胞与成骨细胞的共培养
不同培养条件下脂肪干细胞与成骨细胞的共培养张扬;刘大诚;杨效宁【摘要】BACKGROUND:After co-culture with osteoblasts, bone marrow stem cells can be induced to differentiate into osteoblasts. Whether adipose-derived stem cells co-cultured with osteoblasts can differentiate into osteoblasts or not? OBJECTIVE:To observe whether adipose-derived stem cells co-cultured with osteoblasts can differentiate into osteoblasts. METHODS:Adipose-derived stem cells and osteoblasts were isolated from New Zealand white rabbits. Then, passage 3 adipose-derived stem cells were co-cultured with passage 2 osteoblasts in 10%or 5%fetal bovine serum for 14 days. RESULTS AND CONCLUSION:After 7 days of co-culture, some adipose-derived stem cells became round in the two groups. After 14 days of co-culture, adipose-derived stem cells highly differentiated and differentiated cells were similar to mature osteoblasts that were positive for alkaline phosphatase staining and alizarin red staining. The mRNA expression of type I col agen and osteocalcin increased in both two group, especial y in the 10%fetal bovine serum group. These findings indicate that adipose-derived stem cells co-cultured with osteoblasts can differentiate into osteoblasts induced by high-concentration serum culture.%背景：成骨细胞与骨髓干细胞共培养后可以诱导骨髓干细胞向成骨细胞分化，成骨细胞与脂肪干细胞共培养是否也能诱导向成骨细胞分化呢？目的：观察脂肪干细胞与成骨细胞共培养后能否向成骨细胞分化。
C2C12成肌细胞体外诱导分化为肌管的实验
Ａｂｓｔｒ ａｃｔ ： 【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｏ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｌｏｗ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ ｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎｄｕｃｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｃ２Ｃ１２ ｍｙｏｂｌａｓｔｓ ｉｎｔｏ ｍａｔｕｒｅ ｍｙｏｃｙｔｅｓ ａｎｄ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｔ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｙｏｔｕｂｅｓ， ｅｘｐｌｏｒｉｎｇ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｃｏｍｍｉｔｔｅｄ ｍｙｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ， ａｎｄ ｉｔｓ ｒｅｌａｔｅｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ．【Ｍｅｔｈｏｄｓ】Ｔｈｅ Ｃ２Ｃ１２ ｍｙｏｂｌａｓｔｓ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｉｎ ｈｉｇｈ ｇｌｕｃｏｓｅ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ＤＭＥＭ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｅｄ ｗｉｔｈ ｖａｒｉｏｕｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ， ｔｈｅｎ ｈａｒｖｅｓｔｅｄ ａｎｄ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｔｒａｓｔ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｉｒ ａｐｐｅａｒａｎｃｅ， ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｍｕｓｃｌｅ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｇｅｎｅｓ ｂｙ ｉｍｍｕｎｏｃｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ ＲＴ－ＰＣＲ ａｓｓａｙｓ ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．【Ｒｅｓｕｌｔｓ】（ １） Ｂｏｔｈ ２０ ｍＬ ／Ｌ ａｎｄ ５０ ｍＬ ／Ｌ ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｍｙｏｔｕｂｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃ２Ｃ１２ ｍｙｏｂｌａｓｔｓ， ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ２０ ｍＬ ／Ｌ ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ ｈａｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ （ ｏｎ ｄａｙ ７， ｔｈｅ ｒａｔｉｏｓ ｏｆ ｍｙｏｔｕｂｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｉｎ ｂｏｔｈ ｇｒｏｕｐｓ ａｒｅ ３１．４％ ±２．１％ ａｎｄ １９．０％ ±１．６％， ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ， Ｐ ＜ ０．０００１） ． （ ２） Ｉｎｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ２０ ｍＬ ／Ｌ ｈｏｒｓｅ ｓｅｒｕｍ ｆｏｒ ３－ ４ ｄａｙｓ， ｍｙｏｔｕｂｅｓ ｓｔａｒｔｅｄ ｔｏ ｆｏｒｍ． Ｌａｔｅｒ ｏｎ， ｍｏｒｅ ａｎｄ ｍｏｒｅ ｍｙｏｔｕｂｅｓ ａｐｐｅａｒ， ａｎｄ ａｔ ｔｈｅ ｐｅａｋ ｏｎ ８－ ９ ｄａｙｓ （ ｄａｙ９， ｔｈｅ ｍｙｏｔｕｂｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｒａｔｉｏ ｗａｓ ４０．２％ ±１．３％ ） ． Ａｆｔｅｒ ｔｈａｔ， ｔｈｅ ｃｅｌｌｓ ｇｒａｄｕａｌｌｙ ｇｏｔ ｓｅｎｉｌｅ ａｎｄ ｅｎｄ ｉｎ
《动物繁殖学》简答题题库
《动物繁殖学》简答题题库第一单元绪论1、简述动物繁殖学研究内容答：1、繁殖生理2、繁殖技术3、繁殖障碍及防治4、繁殖管理2、动物繁殖学的研究意义答：1、动物繁殖学是研究动物生殖活动及其调控规律和调控技术的一门学科，是加速畜禽品质改良、种畜扩繁、保证畜牧业快速发展的重要手段。
动物繁殖学在动物生产中占有重要地位，育种措施的落实、遗传规律的揭示、饲养对象的产出均离不繁殖学。
2、动物繁殖是种族延续的基础，是动物生产的关键性环节，是动物品种改良、生命科学研究、医疗与组织修复等的重要手段。
3、动物繁殖学在畜牧生产中的广泛应用可以有效的提高生产效率、提高畜种质量并减少生产资料的占有量第二单元生殖激素1、生殖激素的作用特点有哪些？答：1、作用的特异性：生殖激素释放后,在运输途中虽与各处的组织细胞有广泛接触，但只作用于特定的靶组织，与其特异性受体结合后产生生物学效应。
2、激素在机体内的活性丧失一般较快：由于受到分解酶的作用，生殖激素在体内的活性一般很快丧失，具有相对较短的半衰期。
3、作用的高效性：动物体内生殖激素的含量极低，但激素与其受体结后，在细胞内发生一系列酶促放大作用，导致明显的生理作用。
4、作用依赖与激素分泌的模式和持续时间：第一种是周期性分泌，激素在神经系统的控制下与受体紧密联系。
当下丘脑的神经去极化，神经肽瞬间释放，垂体前叶激素也因此以间断的方式释放。
间断释放形成的可预测的类型被称作脉冲分泌。
第二种是基础分泌，此种方式的激素浓度低，且脉冲幅度小。
第三种类型是持续分泌，以相对稳定的形式持续较长一段时间,类固醇激素如发情间期或妊娠期间的孕激素会持续性释放，以控制发情或妊娠。
5、激素之间有协同和拮抗的作用。
6、生物学活性取决于分子结构。
2、GnRH的生理作用是什么？答：1、对垂体作用：促进垂体FSH和LH的合成和释放。
2、对性腺的作用：直接作用于性腺，对于性腺的作用是抑制性的。
3、催产素的主要生理作用是什么？答：一、对雌性动物的作用1、刺激平滑肌收缩：发情交配期-输卵管和子宫平滑肌收缩，有利于精子和卵子运行；妊娠后期-刺激子宫平滑肌的收缩，促进胎儿和胎衣排出。
细胞名词解释
细胞名词解释1.愈伤组织：原意是指植物体的局部受创伤刺激后，在其伤口表面新生的一团薄壁细胞。
在组织培养中是指在人工培养基上由已经分化的外植体的细胞重新分裂生长而形成的一团无特定形状、无序生长的薄壁细胞。
在一定条件下离体状态的植物组织中已经分化并停止生长的细胞重新分裂生长所形成的无组织结构的细胞团。
2.外植体：指植物组织培养中作为培养材料的离体组织块离体器官或离体细胞。
3.胚状体：由外植体或愈伤组织产生的与正常受精卵发育成的胚相类似的胚胎状结构。
据来源分为体细胞胚与生殖细胞胚。
4.极性：高等植物均具一主轴，各器官沿此主轴有顺序的进行生长分化。
主轴的首尾两端在生理形态上都有着明显差异，通常首段生芽尾端长根（形态学上端下端）这种现象叫极性。
5.植株再生：指通过组织培养技术将植物的细胞、组织、器官等培养成完整植株的过程。
6.形态发生（形态建成）：指生物个体发育或再生过程中生物体及其器官的形态结构的形成过程。
7.试管苗：指在无菌离体条件下的人工培养基上对植物细胞、组织或器官进行培养所获得的再生植株。
8.玻璃苗：指外表呈玻璃状，幼茎、叶片呈现半透明水渍状态的畸形试管植物。
9.体细胞无性系：指由同一个外植体反复进行继代培养后得到的一系列后代。
在细胞培养中，由单细胞形成的后代叫但细胞无性系。
10.培养基：用于满足植物正常发育所需各种营养物质的总和。
11.初代培养：指从植物体上分离外植体进行的第一次培养。
12.继代培养：将初代培养的培养物（愈伤组织、芽等）重新切割转移到新的培养基上继续扩大培养的过程。
13.固体培养：指加入琼脂等固化剂使培养基呈固体状态所进行的培养。
14.液体培养：指不加Agar等固化剂使培养基呈液体状态所进行的培养。
U11、细胞工程：按照一定的设计方案，通过在细胞、亚细胞或组织水平上进行实验操作，获得重构的细胞、组织、器官以及个体，创造优良品种和产品的综合性生物工程。
2、摇床：常用来进行细胞悬浮培养，可根据震荡方式分为水平往复式和回旋式两种，震荡速度因培养材料和培养目的的不同而不同，常用的震荡速度为100r/min.3、培养瓶：一般的植物组织和细胞培养常用玻璃三角瓶、试管、各种大小的广口玻璃瓶时，有时甚至牛奶瓶和罐头瓶也都可以利用，特别是在进行快速繁殖时更常用造价较低的培养器皿。
脂肪组织干细胞的研究进展
脂肪组织干细胞的研究进展杨立业;黄天华【摘要】脂肪组织中存在多能的干细胞,在体外可以长期增殖,在一定的条件下能够分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、成肌细胞、内皮细胞、神经细胞、心肌细胞和平滑肌细胞,是一种新的组织工程和细胞移植的干细胞来源.本文综述了脂肪组织干细胞的培养、向多种方向分化和动物实验的研究进展.【期刊名称】《癌变·畸变·突变》【年(卷),期】2007(019)002【总页数】3页(P162-164)【关键词】干细胞;脂肪;分化【作者】杨立业;黄天华【作者单位】汕头大学医学院生物学教研室,广东,汕头,515041;汕头大学医学院生物学教研室,广东,汕头,515041【正文语种】中文【中图分类】R338.1组织工程的一个研究重点是种子细胞的来源问题，自体的多能干细胞应用到临床能够治疗疾病，造血干细胞是最早应用到临床的干细胞。
组织工程的一种细胞来源是骨髓基质，骨髓腔中含有几种细胞成分，包括间充质干细胞（mesenchyml stem cells，MSCs），它能分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞和成肌细胞，是目前骨和软骨组织工程的主要细胞来源[1]。
然而它的自体获得也受到一些条件的限制，并且一次骨穿获得的细胞数量有限。
另外一种潜在的自体干细胞来源是脂肪组织，它的获取可在局麻下进行，对病人的损伤较小。
脂肪来源的干细胞目前可称为脂肪来源的基质细胞（adipose tissue-derived stromal cells，ADSCs），能分化为脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、成肌细胞、内皮细胞、神经细胞和平滑肌细胞[2-6]。
人类、大鼠和小鼠的ADSCs细胞培养方法相同[1，4，6]。
首先，获取的脂肪组织用缓冲液反复冲洗，剪刀剪碎，0.075%的胶原酶37℃消化30～50 min，800 g离心10 min，沉淀成分为基质血管层（stromal vascular fraction，SVF），DMEM培养基重悬细胞，筛网过滤离心，弃上清。
黑羽番鸭成肌细胞的分离培养与鉴定
王 丽，王锋超，张 玲，等．黑羽番鸭成肌细胞的分离培养与鉴定［Ｊ］．江苏农业科学，２０２３，５１（２４）：１５５－１６０．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２３．２４．０２１黑羽番鸭成肌细胞的分离培养与鉴定王 丽１，王锋超２，张 玲１，王 洁１，董 飚１，王 军１，３，陈嘉皓４，王 健１，３［１．江苏农牧科技职业学院，江苏泰州２２５３００；２．江苏省南京市六合区竹镇镇畜牧兽医站，江苏南京２１１５０１；３．国家水禽基因库（江苏），江苏泰州２２５３００；４．泰州第二中学，江苏泰州２２５３００］ 摘要：为建立番鸭成肌细胞体外分离培养和鉴定体系，选取不同胚龄黑羽番鸭为材料，利用Ⅱ型胶原酶和胰酶消化鸭胚腿肌获得成肌细胞，再经过３次差速贴壁进一步纯化，最后采用含２％马血清的培养基对分离纯化的成肌细胞进行分化诱导，结合细胞形态的观察、成肌细胞增殖期及分化期的标志基因的表达情况的检测鉴定分离的成肌细胞。
结果显示，分离纯化得到的成肌细胞在贴壁后呈现纺锤形，进行分化处理后出现细胞融合。
从Ｅ１７鸭胚腿肌中获得的成肌细胞较Ｅ１５、Ｅ１６和Ｅ１８中分离培养的效果更好，且经差速贴壁法纯化后大部分细胞中均检测到标志基因Ｄｅｓｍｉｎ的表达，表明纯化后成肌细胞纯度较好。
成肌细胞诱导分化处理４８ｈ后，成肌调控因子ＭｙｏＤ的表达显著上调；成肌细胞增殖期特异性表达的Ｍｙｆ５显著性降低；分化期特异性表达的基因ＭｙＨＣ、ＭｙｏＧ以及ＭＲＦ４均显著性增加。
综上所述，本试验成功分离和鉴定了黑羽番鸭成肌细胞，可为研究番鸭肌肉发育和分子调控机制提供参考。
关键词：黑羽番鸭；成肌细胞；细胞分离培养；细胞分化；细胞鉴定 中图分类号：Ｓ８３４．１ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２３）２４－０１５５－０６收稿日期：２０２３－０７－２１基金项目：农业农村部项目（编号：０００００２２１０１１）；江苏省农业重大新品种创制项目（编号：ＰＺＣ２０１７３７）；江苏省种业振兴揭榜挂帅项目（编号：ＪＢＧＳ〔２０２１〕０３０）；江苏农牧科技职业学院科研课题（编号：ＮＳＦ２０２１ＣＢ０１）。
2023年检验类之临床医学检验技术(师)考前冲刺试卷B卷含答案
2023年检验类之临床医学检验技术（师）考前冲刺试卷B卷含答案单选题（共100题）1、铜绿假单胞菌感染所致的胸腔积液呈A.红色B.黄色C.绿色D.草黄色E.白色【答案】 C2、紫外线杀菌的主要机制是A.损伤细胞壁B.破坏酶系统C.干扰DNA的复制D.干扰蛋白质的合成E.损伤细胞膜【答案】 C3、反映肝脏合成蛋白质功能的灵敏指标是（）。
A.血清前白蛋白B.血清白蛋白C.血清转铁蛋白D.血清铜蓝蛋白E.血清清蛋白【答案】 A4、具有干扰病毒复制的细胞因子是A.IFN-α/βB.IFN-γC.EPOD.GFE.G- CSF【答案】 A5、患者，女性，38岁，主诉外阴瘙痒，外阴及阴道灼痛，白带增多呈豆腐渣样，有时伴有尿频、尿痛。
阴道分泌物检查其杆菌(-)，上皮细胞(-)，查见大量脓细胞和球菌。
A.Ⅰ度B.Ⅱ度C.Ⅲ度D.Ⅳ度E.Ⅴ度【答案】 D6、按照CLSI规定，常规检测超广谱β-内酰胺酶的细菌中不包括A.肺炎克雷伯菌B.普通变形杆菌C.奇异变形杆菌D.大肠埃希菌E.产酸克雷伯菌【答案】 B7、反映细胞或颗粒内部结构复杂程度的指标是A.前向散射光B.侧向散射光C.荧光D.激光E.单色光【答案】 B8、检查冷抗体，下列哪项是错误的A.冷溶血试验B.自身溶血试验C.酸溶血试验D.冷凝集试验E.阵发性寒冷性血红蛋白尿症患者冷抗体阳性【答案】 C9、抗心磷脂抗体与上述有关的自身免疫病是A.毒性弥漫性甲状腺肿(Gravesdisease)B.慢性活动性肝炎C.抗磷脂综合征D.重症肌无力E.原发性小血管炎【答案】 C10、军团菌的传播途径是（）。
A.接触传播B.呼吸道传播C.输血传播D.性接触传播E.粪口传播【答案】 B11、对酸、碱都有一定耐受力的是A.结核分枝杆菌B.炭疽芽孢杆菌C.白喉棒状杆菌D.霍乱弧菌E.金黄色葡萄球菌【答案】 A12、由造血干细胞和微循环障碍所致的贫血是A.再生障碍性贫血B.巨幼细胞性贫血C.缺铁性贫血D.单纯红细胞再生障碍性贫血E.遗传性球形细胞增多症【答案】 A13、CSF采集后检验完成的时间应在（）。
GDF11_通过AKT_通路抑制骨骼肌细胞分化
2023 ，43（2） : 092J.SHANXI AGRIC, UNIV . （ N atural Science Edition ）学报（自然科学版）04185GDF11通过AKT 通路抑制骨骼肌细胞分化张鹏翔，吴佳豪，冀云燕，薛霖莉，董亚洁，宫泽恩，郝晓静，曹校瑞，赫晓燕*（山西农业大学 动物医学学院，山西 晋中 030801）摘要：［目的］探究骨骼肌GDF11（生长分化因子11，Growth and differentiation factor 11）在生长发育过程中的表达情况及其作用，明确GDF11在骨骼肌细胞中激活的非SMAD 调控通路，为抵抗骨骼肌衰老、促进骨骼肌损伤修复，探究肌肉发育调控的相关机制提供理论参考。
［方法］以不同发育阶段小鼠和C2C12细胞为材料，取不同发育阶段小鼠腓肠肌、使用分化培养基诱导细胞分化、使用D⁃半乳糖诱导C2C12细胞衰老，分别探究GDF11在个体层面和细胞层面骨骼肌生长发育和衰老中的表现和作用；通过构建GDF11的过表达载体和siRNA 载体，观察GDF11对C2C12细胞成肌分化的影响，并检测了在这一过程中细胞内相关基因的变化，探究GDF11在骨骼肌细胞发育中影响；通过对AKT 信号通路的抑制，明确GDF11在骨骼肌细胞分化过程中激活的非SMAD 调控通路。
［结果］（1）在小鼠腓肠肌中，GDF11蛋白表达量随着年龄的增长呈现出先下降后上升的趋势。
（2）在细胞分化前期GDF11表达量逐渐升高，并在3 d 时细胞开始分化时达到最高，随后逐渐降低，7 d 时恢复到与初始相似的水平。
（3）随着D⁃半乳糖浓度的增加，细胞衰老程度逐渐增加，同时细胞GDF11表达量逐渐增加。
（4）过表达GDF11使细胞分化进程推迟，但抑制GDF11的表达对细胞分化进程并没有影响。
过表达GDF11上调了AKT 的磷酸化水平。
（5）过表达GDF11的C2C12细胞中阻断AKT 通路能够逆转GDF11造成的分化抑制。