厦门大学化学化工学院 仪器中心
厦门大学化学化工学院仪器中心
电感耦合等离子体质谱仪ICP-MS送样申请表
送样日期：
I
C
P
-
M
S
C
H
N、O元素，而且不能直接测定有机物，有机相比例不能超过5%。
2.样品必须是溶液。
样品要澄清，不能有显著的杂质，样品粘度不能过大。
通常使用5%的硝酸和盐酸，
尽可能少用硫酸、高氯酸、氢氟酸、磷酸，基体不要太大，样品中盐分不能太高。
3.如果样品有毒性或腐蚀性，请事先声明。
4.如果样品或其类似物曾在同类型号的质谱做过或有文献报道，请提供有关信息。
5.收费标准与付费方式：院内用户需填写课题帐号；院外用户一般先交测试费的50%。
6.测试完成时间：一般为1周内；对于疑难样品，与用户协商后分析；遇仪器发生故障，时间推后。
7.如果没有认真阅读以上条款，并且没有预先处理好样品，引起仪器故障，除停止测试机时一个月之
外，需要承担相应责任。
厦大化学到底有多牛!
厦大化学到底有多牛？！4.6谨以此文祝厦大和厦大化院95岁生日快乐！世人知厦大，多因垂涎其美色。
殊不知，其学术能力，亦非寻常！且不论众所周知、令人望而生畏的会计之类，须知厦大在化学和纳米领域，也是名副其实的“南方之强”！2011年，Nature网站对厦门大学做出了如下评价：厦门大学已经成为中国化学的领跑者！推荐阅读：专访厦大23位杰青！那么，厦门大学的化学到底有多强？来看看下面这组数据：根据厦门大学化学化工学院官网的介绍，厦门大学化学化工学院现有全职院士9人，千人5人，长江6人，杰青19人，青千7人，2人入选国际电化学会会士，4人入选英国皇家化学会会士。
国家自然科学基金委创新研究群体4个，教育部创新团队4个。
下辖能源材料化学协同创新中心（2011计划）、固体表面物理化学国家重点实验室、醇醚酯化工清洁生产国家工程实验室、新能源汽车动力电源技术国家地方联合工程实验室、谱学分析与仪器教育部重点实验室、电化学技术教育部工程研究中心（数据截至2016年2月29日）。
这个阵容到底有多强大，大家不妨去自己认为最顶级的几个研究单位比对一下。
厦大化院九位中科院院士自2007年以来，厦门大学化学化工学院在“Science”、“Nature”及其子刊发表了多篇学术论文，包括2007年、2014年在“science”发表论文2篇，2010年在“Nature”上发表论文1篇，在“Nature Chemistry”、“Nature Communication”、“Nature Nanotechnology”、“Nature Materials” 和“Nature Protocols”上分别发表论文4篇、8篇、1篇、1篇和1篇。
发表化学论文数排名在国际前20-50名（截至2012年）化学学科Science/Nature及其子刊论文数（以第一署名单位为准，2007-2012年）排序大学ScienceNatureNature 子刊总篇数1厦门大学11682北京大学553复旦大学334中国科大224清华大学224南开大学227中山大学117浙江大学11。
2014年厦门大学化学化工学院招生拟录取名单
103844101860667 103844211020095 103844211020170 103844211020083 103844211020153 103844211020136 103844211020097 103844211020166 103844211020180 103844211020005 103844211020101 103844211020115 103844211020096 103844211020040 103844211020127 103844211020140 103844211020123 103844211020116 103844211020145 103844211020015 103844211020158 103844211020152 103844211020021
待定 推免
待定 推免 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定 待定
103844211020172 胡端 358 72.97 72.15 非定向 103844211020130 冯广京 360 71.07 71.63 非定向 103844211020120 李新玲 357 71.83 71.57 非定向 103844211020161 苏曦瑶 349 74.13 71.53 非定向 103844211020085 李家鹏 348 74.33 71.49 非定向 103844211020147 熊仕琼 343 74.33 70.89 非定向 103844211020001 石欢欢 333 76.97 70.75 非定向 103844211020128 向长丽 367 66.67 70.71 非定向 103844211020189 闵军呈 339 75.03 70.69 非定向 103844211020121 李真真 348 71.37 70.31 非定向 103844211020150 明芳望 338 73.93 70.13 非定向 103844211020135 吕瑞雪 344 71.03 69.69 非定向 103844211020056 刘群鸿 339 72.47 69.67 非定向 103844211020177 岳凯丽 324 75.70 69.16 非定向 103844211020079 张行 358 65.30 69.08 非定向 103844211020058 罗扬淅 325 75.00 69.00 非定向 103844211020192 李华 339 70.00 68.68 非定向 103844211020174 何旭岩 333 71.53 68.57 非定向 103844211020167 许朝珍 341 68.40 68.28 非定向 103844211020137 岳乾 335 70.20 68.28 非定向 103844211020132 高润升 336 68.90 67.88 非定向
偶极矩的测定ppt课件
厦门大学化学化工学院
1
分子
偶极矩
极性分子
非极性分子
正负电荷中心不重合 正负电荷中心重合
2ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
一、实验目的
1．用溶液法测定乙醇的偶极矩。 2．了解分子偶极矩和分子电性质的关系 3．掌握折射法测偶极矩的实验技术。
3
二、实验仪器和试剂
容量瓶(50mL)4只 数字小电容测试仪 电容池一只 电吹风一只 环己烷(AR)预先干燥处理 乙醇(AR)预先干燥处理
6
转向极化：分子沿外电场的方向作定向的转动而产生极化；
变形极化（电子极化和原子极化）：分子中的电子云对分
子骨架的相对移动和分子骨架的变形而产生极化。 极化的程度可用摩尔极化度衡量：
P P转向+P变形＝P转向+(P电子＋P原子）
uur
P转向＝
4 9
LA
2
kT
(1)
7
如何求 P转向 ？ 转向
摩尔极化度（P）
4
三、实验原理与方法 分子极性大小用偶极矩来度量，其定义：
q r
偶极矩是矢量，规定： 方向是从正电荷中心指向负电荷中心
5
极性分子具有永久偶极矩，在没有外电场 存在时，由于分子热运动，偶极矩指向各方向 机会均等，故其偶极矩统计值为零。
若将极性分子置于均匀的外电场中，分子 将会沿电场方向作定向转动，同时分子中的电 子云对分子骨架发生相对移动，分子骨架也会 变形，称为分子极化。极化的程度可用摩尔极 化度P来度量。
标 1
代入12即可求得Cd
14
选择溶剂应考虑以下因素： （a）必须是非极性的 （b）与溶剂的性质（如密度等）相
差越大越好，这样不同浓度溶液测量数据 的差别，测定相对误差小。
仪器预约单
实验机时பைடு நூலகம்请表
以下由实验申请人填写：申请日期：年月日
申请人：负责人（或导师）：所在单位：
联系方式：（请写明系别、专业、房间号）：
电话：E-mail：
样品名称：样品个数：样品其它信息：
实验目的及预期结果：(请详细填写)
注意事项：
*用户应遵守本实验室的规章制度；
声明：
1.因隐瞒样品属性导致设备污染、损坏而引起的经济损失，由我科研项目经费赔偿；
2.因使用不当导致制样设备或其他附件损坏，将从我科研项目经费中赔偿。
我已经认真阅读并同意以上注意事项和各项声明。
负责人、导师签字：年月日
实
验
原
始
记
录
环境℃
条件：%
仪器
条件：
检测人：年月日
实用机时数：应收费用：用机人签名:年月日
深圳金玛维基科贸有限公司_企业报告(供应商版)
清华大学
3
材料科学与工程学院小型热电转换 效率测量系统竞价结果公示
材料科学与工程学院
4
材料科学与工程学院小型热电转换 效率测试系统竞价结果公示
材料科学与工程学院
5 双温区管式炉（含四路混气装置）
*按近 1 年项目金额排序，最多展示前 10 记录。
（3）未知（5）
序号
项目名称
招标单位
1 溶剂净化系统等设备采购成交公告
分地区主要项目
（1）广东（19）
序号
项目名称
招标单位
教育部华南理工大学单一来源采购 1 智能柔性注塑成型单元征求意见公 华南理工大学
示 （中大招（货）[2022]958 号）中 2 山大学化学学院催化及反应动力学 中山大学化学学院 测试系统采购项目结果公告
3
华南理工大学激光共聚焦-原子力 显微镜联用等项目中标公告
华南理工大学
华南理工大学化学学科平台在线检 4 测池及电化学原位系统采购项目中 华南理工大学
标公告
中标金额 （万元）
299.0
239.0
202.5
176.0
5 原子层沉积系统
中山大学
99.0
6
广东省科学院生态环境与土壤研究 所锂电池回收再生电极材料性能测 试系统采购项目结果公告
广东省科学院生态环境与 土壤研究所
2 静电纺丝机等设备采购成交公告
3 化学系旋转蒸发仪采购成交公告
4
采购国产电化学工作站一台成交公 告
南方科技大学
5 旋蒸蒸发仪
*按近 1 年项目金额排序，最多展示前 10 记录。
47.0
2022-12-18
44.9
2022-12-29
高校普通仪器网络化管理系统的开发与实践
就 是 引进 了 窗 体 和 控 件 的 概 念 和 机 制 ，具 有 智 能 化 的
开 发 环 境 。 数 据 库 是 Ｍ Ｂ 文 件 格 式 ，与 Ｏｆ ｅＡ — Ｄ ｆｃ ｃ ｉ ｃｓ ００相 容 。Ｖ ｅｓ ０ ２ Ｂ应 用 程 序 与 数 据 库 的 连 接 使 用 先 进 的 Ａ Ｏ方 法 ，连 接 引 擎 ： “ Ｒ Ｖ Ｄ Ｒ＝ ＭＩＲ Ｓ Ｆ ． Ｄ Ｐ Ｏ ＩＥ Ｃ Ｏ ＯＴ ＪＴ Ｏ Ｅ Ｂ ４ ０ 。 该管 理 软件 适 合 在 Ｗｉｄｗ ９／００ Ｅ ． Ｌ Ｄ ．．” ｎｏ ｓ８ ２０／
５ ４
高 校 实 验 室 工 作 研 究
总第 １７期 ０
当 实验 室 仪 器 被 移 到 不 同 的科 室 时 ，应 及 时 、准 确 化 管 理 系 统 实 现 了信 息 的 汇 总 、统 计 、打 印 等 功 能 ，提 地 将 信 息 反 馈 到 电脑 数 据 库 里 。仪 器 的 部 分 配 件 有 一 定 高 了工 作 速 度 。 通 过 该 系 统 ，可 以及 时 、方 便 的 查 询 数
学仪器设备 管理办 法》 的相关 规定 ，同时结合实验室管 理人员管理 过程 中遇到的实际问题 ，开发适合 于中小型
实 验 室 使 用 的管 理 系统 。
验室统计小于 ８０元低值仪 器及大于 ８ ０元仪器 的台数 ０ ０ 及金额 ，只需在 ［ 购置 单价 ］菜 单 中将查 询要求 输入 ，
器浏 览 和 查询 系统 数 据 ，管 理 人 员 可 以更 好 、更 快 的 做 了一 个 活 的 档 案 ，使 用 者 可 以 随 时 查 询 。仪 器 经 过 归 好 仪器 设 备信 息 的更 新 。极 大地 减 轻 了实 验 管 理 人 员 的 类 、合 理 安 排 后 ，实 验 室 由原来 的杂 乱 无章 变 得 有 条 不
仪器网信息
2011年国家重大科学仪器设备开发专项获批项目汇总（更新中）仪器信息网 2012-2-4 10:27:50 点击3522次为贯彻落实《国家中长期科学和技术发展规划纲要(2006- 2020年)》和《国家“十二五”科学和技术发展规划》，提高我国科学仪器设备的自主创新能力和自我装备水平，支撑科技创新，服务经济和社会发展，科技部、财政部2011年首次启动“国家重大科学仪器设备开发专项”。
该专项强调面向市场、面向应用、面向产业化，重点支持具有市场推广前景的重大科学仪器设备开发。
面向科学研究本身的单台(几台)套仪器研发不在此次支持范围，由基金委组织的重大科研仪器设备研制专项负责。
申报项目要突出重大的特点，集成度高，投入较大，经费原则上不低于2000万。
重大科技基础设施、生产性设备、重大研究和中试平台的升级改造、大型仪器共享平台等不在支持范围。
该专项以项目方式、分年度实施，项目周期一般不超过五年。
“国家重大科学仪器设备开发专项”获批项目为了方便广大网友更清楚直观的了解各立项项目的基本情况，即日起仪器信息网将对已发布的专项信息进行汇总，并持续更新，敬请关注。
欲了解下表中各立项项目的详细信息，可查看“聚焦2011年度国家重大仪器设备专项”新闻专题。
2011年度国家重大科学仪器设备开发专项获批项目汇总(更新中)“国家重大科学仪器设备开发专项”支持范围(一)基于新原理、新方法和新技术的重大科学仪器设备的开发。
主要支持已突破新原理、新方法和新技术，通过集成研究和应用开发，形成能够在世界上有特色、有影响的科学仪器设备。
(二)基于已有重大科学仪器设备(装置)创新成果的工程化开发。
主要支持国家科技计划(专项)或其他渠道已形成的，对相关科学研究、经济发展和民生改善具有明显带动和支撑作用的重大科学仪器设备(装置)的工程技术和产业化技术开发和应用开发。
(三)重要通用科学仪器设备(含核心基础器件)的开发。
主要支持市场上虽已有成熟产品，但能提升我国科学仪器设备产业技术等级和核心竞争力的通用科学仪器设备的开发和应用;支持科学仪器设备共性、核心关键部件的开发和应用。
射频识别技术结合人脸识别技术用于试剂“细化”“动态”管理
摘要：厦门大学化学国家级实验教学示范中心率先应用射频识别技术和人脸识别技术，开发出一套试剂“细化”“动 态”管理系统，该系统能对试剂从购入、日常使用到空瓶处理全过程进行“动态”跟踪记录管理，操作简便，数据 精准。记录的详细数据可作为后期追溯的依据，也可通过对数据的统计分析来指导试剂订购。将该系统扩展应用， 有望实现试剂从生产、贮存、运输、利用到化学废物处置全生命周期的安全管理。
每个试剂仓库配备一台带摄像头和触摸显示屏的电脑作为管理终端，试剂管理过程中的很多操 作可以直接在触摸屏上完成。人脸识别通过摄像头实现，贯穿于试剂管理全过程，完成包括应用软 件登录、管理系统使用过程中使用人身份确认、软件空闲锁定后的激活以及进出试剂仓库人员的身 份确认等各项功能。
3 射频识别技术结合人脸识别技术用于试剂“细化”“动态”管理系统使用流程
2.2 人脸识别技术 人脸识别是基于人的脸部特征信息进行身份识别的一种生物识别技术，是人工智能技术的应用
之一。人脸与生俱来，其唯一性和不易被复制的良好特性为身份鉴别提供了必要的前提。人脸识别 技术具有非强制性、非接触性、操作简单、结果直观、隐蔽性好等特点，在金融、公安、司法、通 行、安保、考勤及自助服务等多个领域得到应用[13–15]。 2.3 射频识别技术结合人脸识别技术用于试剂“细化”“动态”管理系统的构成
相比于大家熟悉的条形码和二维码，RFID电子标签价格虽然较高，但是RFID技术的自动化识别 和数据采集能力远高于条形码和二维码技术，RFID技术被认为是物联网最有前景的信息技术之一， 已广泛用于食品、服装、医疗、零售、物流、图书馆等多个行业[10–12]。
大 学 化 学 Univ. Chem. 2021, 36 (4), 2004091 (3 of 5)
抗霉素A直接刺激线粒体所引起的超氧阴离子含量和膜电位变化的单线粒体水平研究
抗霉素A直接刺激线粒体所引起的超氧阴离子含量和膜电位变化的单线粒体水平研究陈莎;张翔;张舒越;陈超翔;颜晓梅【摘要】This research has established a sensitive method to measure superoxide anion production and mitochondrial membrane potential (MMP) of isolated mitochondria upon antimycin A stimulation.By combining Dounce homogenization and differentialcentrifugation,mitochondria were isolated from HeLa cells and treated with antimycin A.Then specific fluorescent probes were used to label mitochondria,and a laboratory-built high sensitivity flow cytometer (HSFCM) was used to detect superoxide anion and MMP at the single-mitochondrion level.For a comparison,conventional flow cytometry (FCM) was utilized to measure superoxide anion level and MMP of HeLa cells upon antimycin A treatment at the single-cell level.The results showed that upon drug stimulation,the superoxide anion level in the isolated mitochondria was increased by 36 ％ and the MMP was decreased by16 ％.The superoxide anion level in HeLa cells was increased about three times and the MMP was doubled upon antimycin A treatment.This experiment demonstrated that we have built a sensitive method that can sensitively detect the production of superoxide anions and the change of MMP at the single-mitochondrion level.%建立了抗霉素A直接刺激提纯线粒体所引起的超氧阴离子(O2-·)含量和膜电位变化的单线粒体水平快速测定方法.利用杜恩斯(Dounce)匀浆装置,结合差速离心法,从HeLa细胞中提纯线粒体,经抗霉素A刺激和特异性荧光探针染色后,采用实验室自行研制的超高灵敏流式检测装置对线粒体进行快速、灵敏地逐一检测.与此同时,利用传统流式细胞仪在细胞水平对抗霉素A刺激所引起的O2-·含量和线粒体膜电位的变化进行了测定.实验结果表明,抗霉素A直接刺激线粒体能引起O2-·含量增加36 ％,膜电位下降16％;而抗霉素A 在细胞水平能使得细胞中O2-·含量增加约3倍,膜电位的荧光信号增加1倍.研究结果表明,抗霉素A能直接诱导线粒体产生O2-·并引起膜电位的小幅度下降,所建立的线粒体活性参数微弱信号检测的新方法将有助于更深入地了解线粒体的功能以及药物的作用机理.【期刊名称】《厦门大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2013(052)004【总页数】6页(P525-530)【关键词】线粒体;超氧阴离子;线粒体膜电位;超高灵敏流式检测;抗霉素A【作者】陈莎;张翔;张舒越;陈超翔;颜晓梅【作者单位】厦门大学化学化工学院,分析科学重点实验室,化学生物学福建省重点实验室,福建厦门361005;厦门大学化学化工学院,分析科学重点实验室,化学生物学福建省重点实验室,福建厦门361005;厦门大学化学化工学院,分析科学重点实验室,化学生物学福建省重点实验室,福建厦门361005;厦门大学化学化工学院,分析科学重点实验室,化学生物学福建省重点实验室,福建厦门361005;厦门大学化学化工学院,分析科学重点实验室,化学生物学福建省重点实验室,福建厦门361005【正文语种】中文【中图分类】O657.3线粒体是细胞内产能和控制细胞凋亡的重要细胞器，被认为是细胞生存与死亡的调控中心［1］.线粒体的膜电位及活性氧（reactive oxygen species）水平是衡量线粒体乃至细胞健康和损伤的关键活性参数之一.线粒体膜电位的崩溃或下降会导致腺苷三磷酸（ATP）的合成受阻，ATP酶功能逆转，使得细胞内ATP供应不足、离子稳态失衡等，最终可导致细胞损伤甚至死亡［2］.活性氧是指分子氧被单电子还原后生成的化学反应性质活泼的氧代谢产物及其衍生物，主要包括超氧阴离子（O－2·）、羟自由基（·OH）、过氧化氢（H2O2），单线态氧（1 O2）和脂质过氧化自由基（ROO－）等.正常代谢中，2%左右的氧气经电子漏产生活性氧，线粒体是活性氧产生的重要来源［3］.适量浓度的活性氧参与正常细胞的代谢活动、信号转导，影响细胞的增殖、分化、自噬和凋亡［4－5］.但过多的活性氧则会导致代谢紊乱、细胞坏死或细胞正常凋亡受阻而引发肿瘤.研究表明：活性氧特别是O－2·和·OH与机体细胞的许多功能活动以及各种疾病，如癌症、动脉硬化、糖尿病、心脑血栓及衰老等相关［6］.活性氧化学性质活泼，半衰期短，在线粒体中的浓度低，且机体有维持其正常含量的各种清除机制.由于一个细胞内的线粒体数目可高达几千，且线粒体形态及功能存在高度异质性，相对于单细胞检测而言，线粒体的逐个分析可揭示因集权平均而被掩盖的个体差异，获得线粒体性状分布图，确定个体对于整体的贡献，区分正常与异常.此外，直接对提取的线粒体进行分析，可以避免细胞中其他细胞器和组分带来的干扰，从而获得更加明确的检测结果［7］.流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一种对细胞或细胞大小的颗粒进行高通量分析的经典手段，它的特点是快速、多参数、数据可靠、统计精确性高、实用性强.然而传统流式细胞仪难以检测到粒径小于200 nm或荧光强度小于500个荧光素分子的颗粒.尽管文献报道的线粒体尺寸介于0.5～1μm之间，但是单个线粒体的散射光强度仅与100～200nm聚苯乙烯微球相当［8］.因此，传统流式细胞仪仅能检测高亮荧光染色的线粒体，应用受到很大的限制.实验室结合流体动力学聚焦、瑞利散射和单分子荧光检测技术，自行研制成功具有超高灵敏度的流式检测装置，能实现单线粒体水平的多参数同时检测［8］.抗霉素A是由链霉菌产生的大环内脂类天然抗生素，是一种能提高线粒体活性氧水平的线粒体抑制剂.本文以抗霉素A为模式药物，采用超高灵敏流式检测装置（high sensitivity flow cytometer，HSFCM）考察抗霉素A直接刺激线粒体后O－2·含量及线粒体膜电位的变化，并与细胞水平的实验结果进行对照，力图建立单线粒体水平活性参数检测的新方法.1 材料与方法1.1 材料人宫颈癌HeLa细胞（源于ATCC）由厦门大学生命科学学院张四清教授课题组友情惠赠；杜恩斯（Dounce）匀浆器（型号为357538，规格：1mL）购自Wheaton公司；细胞培养皿购自Corning公司；DMEM高糖培养基、南美胎牛血清均购于Hyclone公司；链霉素和青霉素购自Gibco公司；线粒体提取试剂盒购于Pierce公司；蛋白酶抑制剂购自Roche公司；抗霉素A购自Seebio公司；MitoSOX购自Invitrogen公司；罗丹明123（Rhodamine 123，Rh123）和碳酰氰基－对－氯苯腙（CCCP）、琥珀酸钠、二甲基亚砜（DMSO）购自Sigma公司；常规生物化学试剂均为分析纯，实验室用水为Millipore装置制备的超纯水，药物或探针的储存液溶于DMSO中，细胞水平染色时染料用磷酸盐缓冲液（PBS）稀释，药物用DMEM高糖培养基稀释，线粒体水平上使用的探针和药物用线粒体呼吸缓冲液（250 mmol／L蔗糖，10mmol／L HEPES－KOH，4.2mmol／L琥珀酸钠，1mmol／L磷酸二氢钾；pH 为7.0）稀释.1.2 仪器设备课题组自行研制的HSFCM；BD FACSAria流式细胞仪；细胞培养箱（Thermo公司）；5417R台式冷冻离心机（Eppendorf公司）；AllegraTM X－15R台式冷冻离心机（Beckman Coulter公司）；HB－100型恒温金属浴等.HSFCM开创性地将鞘流单分子荧光检测技术和瑞利光散射技术相结合，可对纳米颗粒的散射和荧光信号进行同时检测，散射灵敏度比传统流式细胞仪提高3～4个数量级，可在单颗粒水平实现颗粒粒径和生化性状的快速统计分析［9－13］.本课题组已使用该仪器对单个线粒体的完整性及线粒体的特异蛋白进行了深入研究，充分证明了该仪器在单线粒体分析方面的优越性［8］.图1为三通道HSFCM的光路图.激光器发出的488nm的单色激光，经半波片、偏振分光器、反射镜和消色差胶合透镜后聚焦成直径约10μm的光斑，该光斑在石英流通池中心与经流体聚焦后的样品流正交，样品颗粒发射的侧向散射光信号由PMT－1检测，荧光信号由PMT－2（绿色荧光通道）及PMT－3（橙色荧光通道）检测.图1 实验室自行研制的三通道HSFCM光路图Fig.1 Schematic diagram of the optical path for the laboratory－built three－channel HSFCM1.3 实验方法1.3.1 细胞培养HeLa细胞在含100U／mL青霉素、100μg／mL链霉素和10%（体积分数）胎牛血清的DMEM高糖培养基中培养，收集大约2×107个处于对数生长期的HeLa细胞，进行后续线粒体提取实验.同时进行细胞水平上的药物刺激实验：当铺板后十二孔板中细胞密度为70%左右时，分别设置对照组（不加抗霉素A）和实验组（抗霉素A终浓度为50μmol／L），采用台盼蓝排除法鉴定细胞的存活率. 1.3.2 线粒体提取使用Dounce匀浆和低温差速离心的方法，利用线粒体提取试剂盒提纯线粒体.图2为具体的提取步骤（图中A液和C液为试剂盒中的成分，离心温度均为4℃），最终得到的白色沉淀即为线粒体，将线粒体立即重悬于线粒体呼吸缓冲液（经孔径为0.22μm的Millipore滤膜过滤），进行后续实验.1.3.3 单线粒体水平MitoSOX染色浓度优化将从HeLa细胞中提纯的线粒体等分为若干份，离心后分别重悬于不同浓度（1，2，5，10和20μmol／L）的MitoSOX探针溶液中，染色体积为100μL，每个浓度设置对照组（Control）和抗霉素A刺激的实验组.探针孵育5min后，向实验组中加入1μL浓度为200 μmol／L的抗霉素A，使其终浓度为2μmol／L，对照组中加入1μL线粒体呼吸缓冲液，37℃避光孵育1.5h之后离心、洗涤1次，线粒体呼吸缓冲液重悬，置于冰上，待后续HSFCM检测.图2 线粒体的提取步骤Fig.2 Procedure outline of mitochondria isolation1.3.4 抗霉素A刺激线粒体后O－2·含量和膜电位的检测线粒体O－2·含量的检测：提取线粒体后，等分成若干份，4℃条件下12 000 g离心5min，弃去上清后，将线粒体重悬于100μL浓度为10μmol／L的MitoSOX探针溶液中，孵育5min后，对照组中加入1 μL线粒体呼吸缓冲液，实验组中加入1μL浓度为200μmol／L的抗霉素A，使其终浓度为2μmol／L，37℃刺激1.5h后离心，去除染料，洗涤1次，重悬于线粒体呼吸缓冲液中，置于冰上，待后续HSFCM检测.线粒体膜电位的检测：提取线粒体后，等分、离心，对照组样品重悬于呼吸缓冲液中，实验组重悬于2 μmol／L的抗霉素A中，37℃孵育1.5h.线粒体膜电位下降的阳性控制样本采用10μmol／L CCCP在37℃条件下刺激线粒体15min.待药物刺激结束后，离心、去上清，将线粒体重悬于1μg／mL的Rh123染料中，37℃避光孵育20min.离心，去除染料，洗涤2次，立即进行HSFCM检测.1.3.5 抗霉素A刺激细胞后线粒体O－2·含量及膜电位的细胞水平检测将正常培养的HeLa细胞和经50μmol／L抗霉素A刺激12h的实验组细胞去除培养基和药物，PBS洗涤2次，在37℃条件下分别用2μmol／L MitoSOX和1μg／mL的Rh123染色15min.去除染料后，PBS洗涤2次，胰酶消化，PBS收集细胞，采用传统流式细胞仪进行检测.2 结果与讨论2.1 HSFCM优化MitoSOX的染色浓度MitoSOX是线粒体O－2·的特异性染料，其染色机理与二氢乙锭类似，即不发荧光的MitoSOX被线粒体产生的O－2·氧化后，发出荧光，当MitoSOX与线粒体基质中的DNA嵌合后，荧光更加稳定且发光强度增加.从MitoSOX的结构可知，它与二氢乙锭结构上的差异是：前者含有6个碳原子的直链和三苯基磷正离子基团，使得MitoSOX脂溶性更好，更容易靶向结合到电负性的线粒体.我们采用不同浓度的MitoSOX探针对线粒体进行染色，HSFCM检测的结果如图3所示.图3（a）是线粒体的散射和橙色荧光信号的波形图，可以看出HSFCM能明确地检测到单个线粒体的散射光信号，当线粒体所产生的O－2·浓度较高时，仪器能够在与其散射光信号所对应的时间点检测到该线粒体的荧光信号.我们将线粒体的染色比率定义为能检测到MitoSOX荧光信号的线粒体数量与散射光检测到的线粒体数量的比值.图3（b）是经2μmol／L的抗霉素 A刺激，10μmol／L的MitoSOX染色后，线粒体散射光信号和O－2·荧光信号的二维散点图（HSFCM的检测时间为1min）.从图3（c）可知，随着染料浓度的增大，样品的染色比率先升高后降低，MitoSOX为10μmol／L时，染色比率最高.当染料浓度较低时，可能不足以捕获线粒体产生的O－2·，使得信号难以从背景中提取出来，而当染料浓度过高时，可能会影响线粒体的形态或生化性能，导致染色比率反而降低.由于线粒体的大小存在高度的异质性，部分线粒体产生的O－2·过少而无法被仪器检测到.此外，有文献报道存在一小部分的线粒体，其基质中没有DNA［14］，即使MitoSOX被氧化，由于无法与DNA嵌合而缺乏荧光增强效应，导致荧光信号很弱，所以染色比率仅为50%左右.从图3（d）可知，随着MitoSOX染料浓度的增大，线粒体的荧光信号逐渐增强，当MitoSOX的浓度为10 μmol／L时，实验组（抗霉素A刺激）和对照组（Control组）荧光变化较明显.因此，选择10μmol／L的染色浓度进行后续实验.2.2 HSFCM检测抗霉素A刺激线粒体后O－2·含量和线粒体膜电位的变化图3 线粒体水平MitoSOX染色浓度的优化Fig.3 Isolated mitochondria stained with different concentrations of MitoSOX提纯线粒体经抗霉素A刺激后，O－2·含量及线粒体膜电位的变化如图4所示.根据文献报道，正常的线粒体能产生一定的O－2·［15－16］.图4（a）和（b）分别表明2 μmol／L抗霉素A刺激线粒体1.5h后，O－2·的信号大约增加36%，而膜电位的信号下降16%.与此同时，阳性控制样本的实验结果显示10μmol／L的CCCP刺激线粒体15min就能引起线粒体膜电位下降50%.2.3 FCM检测抗霉素A刺激细胞后O－2·含量和线粒体膜电位的变化与此同时，我们也考察了抗霉素A在细胞水平刺激所引起的细胞内O－2·水平和线粒体膜电位的变化情况.用50μmol／L抗霉素A对HeLa细胞刺激12h，采用MitoSOX染色后对细胞中O－2·进行染色.与此同时，采用Rh123染色对线粒体膜电位的变化进行考察，FCM检测结果如图5所示.从图中可以明显看出50μmol ／L抗霉素A刺激细胞12h后，细胞的O－2·信号增加约3倍，说明抗霉素A能诱导细胞产生O－2·.与其对比，线粒体水平的抗霉素A刺激仅能引起O－2·信号增加36%（图4（a））.分析其原因，相比于未经刺激的细胞中的线粒体，未经刺激的提纯线粒体因为在线粒体的提取过程中不可避免地受到一定的损伤，而且脱离细胞环境后可能导致呼吸不畅等原因而产生更多的O－2·，导致提纯线粒体中O－2·的基线水平偏高.而在细胞水平上，MitoSOX除了靶向线粒体之外还可能分布在胞浆中，可以氧化抗霉素A在细胞水平刺激后从线粒体逃逸的部分O－2·，从而导致细胞荧光信号的大幅增强.因此，抗霉素A刺激前后在细胞水平观察到的O－2·荧光强度的变化比线粒体水平更加明显.图4 抗霉素A刺激线粒体后O－2·含量（a）和线粒体膜电位（b）的变化Fig.4 Superoxide anion（O－2·）content（a）and mitochondrial membrane potential（b）for mitochondrion treated with and without antimycin A stimulation图5 抗霉素A刺激前后HeLa细胞线粒体O－2·（a）和膜电位（b）的信号变化及二者柱状图信号变化（c）Fig.5 Superoxide anion（O－2·）content（a），mitochondrial membrane potential（MMP）（b），and their changes of bar graphs（c）measured on the FCM for HeLa cells treated with and without antimycin A对于膜电位而言，当采用50μmol／L抗霉素A刺激细胞12h后，Rh123的荧光信号增加约1倍（图5（b）），相比于线粒体水平16%的膜电位信号下降呈现截然不同的变化趋势.分析其原因可能是：Rh123是一种可透过细胞膜的阳离子荧光染料，是线粒体跨膜电位的指示剂.在细胞水平的检测中，正常细胞的线粒体膜电位高，Rh123能依赖线粒体跨膜电位进入线粒体，使得细胞的荧光信号增强.但是，由于Rh123高浓度地聚集在线粒体，染料分子间发生猝灭效应和内滤效应，导致荧光强度减弱［17－18］.根据文献报道，50μmol／L抗霉素 A 刺激HeLa细胞需72h才能引起细胞凋亡［19］.在本实验条件下50μmol／L抗霉素A刺激HeLa细胞12h还不足以使HeLa细胞起动凋亡程序，细胞膜保持完整，但此时线粒体膜电位可能已发生轻微的变化，当用Rh123染色时，染料分子进入线粒体的数量有所下降，因此不会引起正常细胞线粒体中可能发生的猝灭效应和内滤效应，线粒体的荧光反而增加.所以，在细胞水平用抗霉素A刺激12h后，较未经刺激的细胞荧光信号增强，也就是说抗霉素A刺激细胞后Rh123荧光信号的增强能间接反映线粒体膜电位的下降.而对于提纯的线粒体，由于其已脱离胞浆环境，HSFCM 检测到的荧光信号能直接反映抗霉素A刺激前后线粒体膜电位的变化.3 结论本文用抗霉素A直接刺激提纯的线粒体，采用实验室自行研制的HSFCM对线粒体的O－2·水平和线粒体膜电位的变化在单线粒体水平进行快速检测.实验结果表明，抗霉素A刺激线粒体后，O－2·增加36%，膜电位下降16%.同时，我们采用传统流式细胞仪在细胞水平对抗霉素A的刺激结果进行了考察，实验表明抗霉素A刺激细胞后，O－2·增加约3倍，而膜电位Rh123荧光信号的增强间接反映线粒体膜电位的下降.综上，本研究证明抗霉素A能直接诱导线粒体产生O－2·并引起线粒体膜电位的略微下降，所建立的实验方法能够对线粒体活性参数的微弱信号进行检测，将为线粒体相关研究提供先进的分析手段.【相关文献】［1］Newmeyer D D，Ferguson－Miller S.Mitochondria：releasing power for life and unleashing the machineries of death［J］.Cell，2003，112（4）：481－490.［2］Nicholls D G.Mitochondrial membrane potential and aging［J］.Aging Cell，2004，3（1）：35－40.［3］Chance B，Sies H，Boveris A.Hydroperoxide metabolism in mammalian organs ［J］.Physiological Reviews，1979，59（3）：527－605.［4］Chen Y，Azad M B，Gibson S B.Superoxide is the major 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厦门大学化学系1986级1990届校友
厦门大学化学系1986级/1990届校友倡议书饮水思源，回报母校亲爱的厦门大学化学系、化学化工学院校友：也许您毕业于久负盛名的化学系，也许你曾就读于化工系（1991年建系）、材料系(1996年建系，2007年独立建院为材料学院)或化学生物系（2006年建系）。
但我们共同拥有一个称号――厦门大学化学化工学院校友。
曾记否，芙蓉园里那一次次的凤凰花开点缀着我们的青春岁月；曾记否，南普陀的暮鼓晨钟伴随着我们琅琅的读书声；曾记否，恩师的教诲和同窗的情谊陪伴着我们事业前进的征途。
厦大化院是我们事业发展的摇篮，我们就像蒲公英的种子，无论飞到哪里，都不会忘记这片永远的精神家园。
化院“和而不同，卓尔不群”的优良学风一直是激励我们“自强不息、止于至善”的巨大精神力量。
明年，母校化学学科将迎来创办90周年华诞。
经过近九十年的风雨历程，在校主陈嘉庚先生伟大精神和崇高人格感召下，在刘树杞、卢嘉锡等一代又一代科学家和教育家的辛勤耕耘下，学院已成为学术研究氛围浓厚、学科办学基础扎实、教学科研成果突出、师资人才梯队健全的化学化工教育科研机构，在国内外享有盛誉。
欣闻学院为缅怀厦门大学化学学科第一位教授和化学系第一任系主任刘树杞教授创办化学学科、培养化学化工人才的历史功绩，为促进母校化学化工学科的人才培养和学科建设，拟发起设立“刘树杞教育发展基金”(Shoo-Tze Leo Chemistry Fund of XMU)，我们1986级/1990届全体同学借毕业20周年返校聚会之机，谨向海内外历届学长、校友发出为“刘树杞教育发展基金”捐款的倡议。
“刘树杞教育发展基金”的设立与发展壮大，将为各位学长、校友提供一个回馈化院和母系培养的平台，也是继承嘉庚精神的具体体现。
饮水思源，回报母校。
无论形式，不论数额，每一份捐赠都饱含着您对母院和恩师的回报和感恩。
我们作为倡议人，将厉行节约，从简办会，把毕业20周年聚会的结余经费悉数捐献给“刘树杞教育发展基金”，作为我们年级全体同学向“刘树杞教育发展基金”的首批捐款，同时也向母校化学学科创办90周年庆典献礼。