临床微生物学与检验
3．生化特性
氧化酶阳性，触酶阳性（除延长奈瑟菌外） 氧化酶阳性，触酶阳性（除延长奈瑟菌外） 对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合 对糖分解能力、硝酸盐还原能力和DNA合 成酶不同， 成酶不同，常作为菌种间的鉴别依据 奈瑟菌属DNA中G+Cmol%为 奈瑟菌属DNA中G+Cmol%为46~54
4．抵抗力
（1）形态和生化学鉴定
可疑菌落பைடு நூலகம்
直径0.5~1mm，灰褐色、光滑、 直径0.5~1mm，灰褐色、光滑、半透明呈露滴 状凸起的菌落
确认
将菌落涂片， 将菌落涂片，革兰染色见革兰阴性双球菌 氧化酶和触酶试验阳性 葡萄糖发酵试验阳性， 葡萄糖发酵试验阳性，其它糖类阴性
培养需观察72h后无菌生长可报告为阴性。 培养需观察72h后无菌生长可报告为阴性。
一、分类
淋病奈瑟菌、 淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌对人致病 寄生在人体内鼻咽腔的腐生菌
解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黄奈瑟菌、 解乳糖奈瑟菌、干燥奈瑟菌、微黄奈瑟菌、粘 液奈瑟菌、浅黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、 液奈瑟菌、浅黄奈瑟菌、灰色奈瑟菌、延长奈 瑟菌、 瑟菌、去氮奈瑟菌和多糖奈瑟菌
二、脑膜炎奈瑟菌临床意义
寄居于人的鼻咽腔、口腔粘膜上，通过呼吸道分泌 寄居于人的鼻咽腔、口腔粘膜上， 物或空气微滴核而传播。 物或空气微滴核而传播。 流行性脑脊髓膜炎 冬末春初，多为学龄儿童、 冬末春初，多为学龄儿童、青少年 感染后多为隐性感染，少数可发展为菌血症或败 感染后多为隐性感染， 血症，进而累及脑、脊髓膜， 血症，进而累及脑、脊髓膜，形成化脓性脑膜炎 可出现严重的临床症状如发热、头痛、 可出现严重的临床症状如发热、头痛、脑膜刺激 症阳性、甚至休克和DIC等 症阳性、甚至休克和DIC等；菌血症和细菌的损 伤作用使约半数患者出现皮下瘀斑
淋病奈瑟菌临床意义
淋病的病原菌
主要通过性接触直接感染 在分娩时通过产道感染新生儿
临床表现为： 临床表现为：
单纯性淋病 盆腔炎口咽部和肛门直肠淋病 淋菌性结膜炎 播散性淋病
致病物质包括菌毛、外膜蛋白、蛋白水解酶、脂多 致病物质包括菌毛、外膜蛋白、蛋白水解酶、 糖和铁调节蛋白
三、生物学特性
1．形态
革兰阴性双球菌 直径0.6~1.5µm 直径0.6~1.5µm 形似双肾或咖啡豆样， 形似双肾或咖啡豆样， 凹面相对 无动力，无芽胞， 无动力，无芽胞， 某些菌种形成荚膜
标本直接检查
直接涂片检查
脑脊液直接或经离心后取沉淀涂片 皮肤瘀点渗出液涂片 革兰染色后显微镜下见白细胞内外的革兰阴性双球 可报告“检出革兰阴性双球菌， 菌，可报告“检出革兰阴性双球菌，疑似脑膜炎奈 瑟菌” 瑟菌”。有助于流行性脑脊髓膜炎早期诊断
抗原检查
通常用胶乳凝集试验和其他凝集试验
包括A 包括A、C、Y、W125血清型的多价抗体和血清型B抗体 W125血清型的多价抗体和血清型 血清型的多价抗体和血清型B
卡他莫拉菌培养及鉴定
在血液琼脂或巧克力琼脂平板上生长良好
35℃ 24h孵育后菌落直径1~3mm，灰白色、光滑，用接 35℃ 24h孵育后菌落直径1~3mm，灰白色、光滑， 种环推菌落可将整个菌落在平板表面移动
氧化酶和触酶阳性 不发酵葡萄糖和其它糖类产酸 大多数菌株还原硝酸盐和产生DNase。 大多数菌株还原硝酸盐和产生DNase。 三丁酸甘油酯水解（丁酸酯酶） 三丁酸甘油酯水解（丁酸酯酶）试验阳性可与奈 瑟菌属鉴别 可产生诱导型β 可产生诱导型β内酰胺酶
奈瑟菌属中的淋病奈瑟菌（ ）、脑 奈瑟菌属中的淋病奈瑟菌（N.gonorrhoeae）、脑 膜炎奈瑟菌（ 膜炎奈瑟菌（N.meningitidis）以及莫拉菌属中的 卡他莫拉菌（M.catarrhalis）是主要的致病菌。 卡他莫拉菌（ 是主要的致病菌。 目前对卡他莫拉菌是归属尚未定论
第一节 奈瑟菌属
（2）免疫学鉴定
直接荧光染色 凝集试验或免疫渗滤技术
（3）分子生物学鉴定
检测靶片段的基因
隐蔽性质粒、染色体基因探针、 隐蔽性质粒、染色体基因探针、抗淋病奈瑟菌 胞嘧啶DNA 甲基转移酶基因、透明蛋白(opa)基 胞嘧啶DNA 甲基转移酶基因、透明蛋白(opa)基 菌毛DNA 探针、 因、菌毛DNA 探针、rRNA 基因探针和porA 假 基因。 基因。
临床分离
从中耳炎或鼻窦炎患者穿刺抽取标本 呼吸道感染患者应采取合格痰标本或支气管灌洗液
口咽部位存在卡他莫拉菌可污染痰液标本
痰液标本直接涂片革兰染色
如出现多个中性粒细胞、柱状上皮细胞以及大量的直径 如出现多个中性粒细胞、 0.5~1.5µm革兰阴性双球菌可怀疑卡他莫拉菌感染 为0.5~1.5µm革兰阴性双球菌可怀疑卡他莫拉菌感染
2．培养特性
需在培养基中添加羊血、兔血或血清， 需在培养基中添加羊血、兔血或血清，对脂肪酸敏 在培养基中需加入可溶性淀粉。 感，在培养基中需加入可溶性淀粉。 需氧生长，初次分离需5%~7%CO 需氧生长，初次分离需5%~7%CO2和高湿度 最适生长温度为35~37℃ 低于30℃ 最适生长温度为35~37℃，低于30℃不生长 血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、 血琼脂平板或巧克力琼脂平板上呈光滑、湿润、 透明或半透明、直径1~2mm的不溶血 圆形、 的不溶血、 透明或半透明、直径1~2mm的不溶血、圆形、灰 兰色菌落 卵黄琼脂平板上为无色、光滑、 卵黄琼脂平板上为无色、光滑、湿润奶油状菌落 在液体培养基中呈轻度或中度混浊生长， 在液体培养基中呈轻度或中度混浊生长，无菌膜 脑膜炎奈瑟菌于孵育24h 脑膜炎奈瑟菌于孵育24h后在培养基上发生自溶
检测结果应结合涂片和培养结果， 检测结果应结合涂片和培养结果，抗原检测阳性结 果可作出快速、 果可作出快速、推测性诊断
分离培养鉴定
脑脊液标本
接种在巧克力琼脂或羊血琼脂平板
咽拭子或鼻咽拭子
接种在选择性培养基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、 接种在选择性培养基上如改良的Thayer-Martin(MTM)、 GC-Lect、New York City(NCY)等培养基 GC-Lect、 City(NCY)等培养基
脑膜炎奈瑟菌临床意义
尽管可以在鼻咽部形成带菌状态，但侵袭性 尽管可以在鼻咽部形成带菌状态， 的脑膜炎奈瑟菌感染多为新近感染， 的脑膜炎奈瑟菌感染多为新近感染，急性发 发病时机体内缺乏杀菌抗体。 病，发病时机体内缺乏杀菌抗体。 主要致病物质是脂多糖 依据荚膜多糖的抗原成分可分为： 依据荚膜多糖的抗原成分可分为：A、B、 C、……等13个血清群，我国A群占95.8%， ……等13个血清群 我国A群占95.8%， 个血清群， 其余为B 其余为B、C等群。 等群。
新生儿结膜分泌物可见胞内、 新生儿结膜分泌物可见胞内、胞外大量革兰阴性双 球菌可初步诊断为淋球菌性结膜炎
4．分离培养与鉴定
选择培养基如MTM，Martin-Lewis（ML）， 选择培养基如MTM，Martin-Lewis（ML）， 或NYC 置于5%CO 气体条件下35~37℃ 置于5%CO2气体条件下35~37℃孵育 每隔24h 每隔24h观察平板
奈瑟菌属和卡他布兰汉菌的鉴定
基因探针杂交、 基因探针杂交、核酸扩增
第二节 卡他莫拉菌
卡他莫拉菌（ 卡他莫拉菌（M.catarrhalis）又称为卡他 布兰汉菌（ 布兰汉菌（Branhamaceae catarrhalis） 可存在于健康人群的上呼吸道 近十年来报道
导致中耳炎、鼻窦炎、 导致中耳炎、鼻窦炎、慢性阻塞性肺炎 在免疫抑制和ICU的患者可导致菌血症 在免疫抑制和ICU的患者可导致菌血症 是社区呼吸道感染的主要病原体之一。 是社区呼吸道感染的主要病原体之一。
对寒冷、干燥和热的抵抗力弱， 对寒冷、干燥和热的抵抗力弱，对化学消 毒剂敏感 对青霉素敏感
但近年来由质粒介导的β 但近年来由质粒介导的β内酰胺酶所致的耐 药在淋病奈瑟菌中产生较多
四、微生物检验
脑膜炎奈瑟菌
标本采集
无菌方法抽取脑脊液、关节液、血液、 无菌方法抽取脑脊液、关节液、血液、瘀点穿 刺液等标本 采集后立即送往实验室 用血平板进行床边接种后置35℃ 用血平板进行床边接种后置35℃孵育 血液标本接种在血液培养瓶中置35℃ 血液标本接种在血液培养瓶中置35℃孵育 标本运送时需要35℃ 标本运送时需要35℃保温
进一步进行葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、其他糖 进一步进行葡萄糖和麦芽糖发酵试验阳性、 类发酵阴性可确定为脑膜炎奈瑟菌 用分型血清确定血清型别 平板上没有发现菌落需继续观察72h 平板上没有发现菌落需继续观察72h后无菌生长可报 告为阴性
（二）淋病奈瑟菌
1．检验程序
2．标本采集
阴道和宫颈分泌物
用无菌塑料棒涤纶拭子，伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处 用无菌塑料棒涤纶拭子，伸入阴道后穹隆或宫颈内1cm处 停留10~15秒时间 秒时间， 停留10~15秒时间，蘸取
第七章
革兰阴性球菌
李向阳
奈瑟菌属（Neisseria） 奈瑟菌属（Neisseria） 布兰汉菌属（Branhamella） 布兰汉菌属（Branhamella）
概述
“伯杰鉴定细菌学手册”第9版 伯杰鉴定细菌学手册”
将奈瑟菌属和布兰汉菌属归于群4 将奈瑟菌属、 将奈瑟菌属和布兰汉菌属归于群4，将奈瑟菌属、莫拉菌 属、金氏菌属和不动杆菌属都归于奈瑟菌科
血液标本
经增菌培养基增菌培养后，移种至巧克力琼脂或羊血琼 经增菌培养基增菌培养后， 脂平板上
置5%~7%CO2 35℃孵育，每隔24h观察平板 5%~7%CO 35℃孵育，每隔24h
鉴定
初步确定为奈瑟菌属
直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、 直径1~2mm，灰褐色、光滑、半透明、稍扁的菌落 涂片革兰染色见阴性双球菌 氧化酶试验阳性
采集尿道分泌物
弃去前段脓性分泌物，留取后段作为标本 弃去前段脓性分泌物，
尿液 直肠肛拭标本
临床微生物学检验试题与答案
临床微生物学检验试题与答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.患者男,36岁。
突发商热,休温达39℃,患者发病前管到过牧区,抽取血培养明确原菌,血培养提示;革兰阴性小杆菌生长,在5%~10%CO2环境培养24小时后,在血平板可形成细小菌落,该菌尿素酶阳性,根盐还原试验阳性,动力阴性,四环素治疗后病情稳定,该致病菌可能是(2016年中级师)》A、军团菌B、鲍特菌C、布鲁菌D、嗜血杆菌E、弗郎西斯菌正确答案：C2.对铜绿假单胞菌生化特征的描述,错误的是(2016年初级师)A、氧化分解葡萄糖B、氧化酶阳性C、不利用枸橼酸盐D、还原硝酸盐E、不产生吲哚正确答案：C3.革兰阳性菌和革兰阴性菌的细胞壁都含有(2015/2017年初级师)(2012年初级士)A、脂多糖B、肽聚糖C、膜磷壁酸D、类脂AE、壁磷壁酸正确答案：B4.细菌的耐药性有关的变异(2018年初级士)A、形态变异B、抗原变异C、结构变异D、耐药性变异E、菌落变异正确答案：D5.结核分枝杆菌下列成分中,与其致病性无关的是(2011年中级师)A、蜡质B、硫酸脑苷脂C、索状因子D、内毒素E、磷脂正确答案：D6.0/129敏感试验用于哪种细菌的鉴别(2015年初级士)A、A群链球菌B、肺炎链球菌C、粪肠球菌D、表皮葡萄球菌E、霍乱弧菌正确答案：E7.生物学分类系统中最小的分类单位是(2013年初级师)(2014/2017年初级士)A、目B、种C、群D、科E、属正确答案：B8.患者男,25岁。
发热、腹痛、里急后重,大便次数明显增加,脓血便。
便培养SS琼脂上分离出透明菌落。
生化鉴定初筛结果:KIA培养基K/A,产酸不产气,H2S(-),MIU试验结果为(3-)。
该病原菌可能是(2016年初级师)(2020初级士)A、伤寒沙门菌B、痢疾志贺菌C、普通变形杆菌D、大肠埃希菌E、奇异变形杆菌正确答案：B9.关于外毒素的叙述,正确的是(2017年初级师)A、主要由革兰阳性菌产生B、其基本成分为脂多糖C、耐热D、毒性作用较弱E、不能用甲醛脱毒成类毒素正确答案：A10.患者男,1个月前感到疲劳、食欲减少、发热咳嗽、咳痰带血丝。
临床微生物学检验技术(85页)
应用：常用于肠杆菌科内某些种属的鉴别，如大肠埃希菌和产气肠杆菌，前者为阳性，后者为阴性。肠杆菌属和哈夫尼亚菌属为阴性，而沙门菌属、志贺菌属、枸橼酸杆菌属和变形杆菌属等为阳性。
4．β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验） 原理：乳糖发酵过程中需要乳糖通透酶和β－半乳糖苷酶才能快速分解。有些细菌只有半乳糖苷酶，因而只能迟缓发酵乳糖，所有乳糖快速发酵和迟缓发酵的细菌均可快速水解邻硝基酚-β-D-半乳糖苷（O-nitrophenyl-β-D-galactopyranoside,ONPG）而生成黄色的邻硝基酚。用于枸橼酸菌属、亚利桑那菌属与沙门菌属的鉴别。 方法：将待试菌接种于ONPG肉汤中，35℃水浴或孵箱孵育18~24h，观察结果。
3．甲基红（MR）试验 原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖产生丙酮酸，丙酮酸进一步被分解为甲酸、乙酸和琥珀酸等，使培养基pH下降至4.5以下时，加入甲基红指示剂呈红色。如细菌分解葡萄糖产酸量少，或产生的酸进一步转化为其他物质（如醇、醛、酮、气体和水），培养基pH在 5.4以上，加入甲基红指示剂呈桔黄色。 方法：将待试菌接种于葡萄糖磷酸盐蛋白胨水中，35℃孵育48~96h后，于5ml培养基中滴加5~6滴甲基红指示剂，立即观察结果。
二、染色标本
细菌标本经染色后，除能清楚看到细菌的形态、大小、排列方式外，还可根据染色反应将细菌进行分类，因此染色标本的检查在细菌的初步鉴定中应用最广，起着非常重要的作用。 （一）常用染料：酸性染料、碱性染料、复合染料。 （二）常用的染色方法：革兰染色、抗酸染色、 荧光染色。
革兰染色
二、培养接种
（一）划线接种 1.方法 斜线法 、曲线法 、方格法 、放射法 、四格法。
斜线法
临床微生物学检验的目的和要求
（一）临床微生物学检验的目的 1.为临床感染性疾病的诊断提供病原学依据。
2.为临床感染性疾病的治疗提供参考用药的信息。
3.为医院感染提供病原微生物及其耐药性动态信息。
4.改进或更新临床微生物学检验的方法。
（二）临床微生物学检验的要求 1.快速、准确地提出检验报告。
2.检验人员必须有较丰富的微生物学基础知识和熟练、正确的操作技能，必须养成有菌观点和无菌操作的习惯。
3.临床微生物学检验必须进行全面质量控制，并参加和接受质量控制考核。
4.重视实验室消毒灭菌工作。
（三）诊断试验的选择原则 1.选择有鉴定价值的试验：要对两种细菌进行鉴定，须选择一项两种菌呈现绝然不同结果的试验，即一种菌呈现阳性（阳性反应的菌株阳性率须大于90％），另一种菌为阴性（阴性反应的菌株阳性率应小于10％），这项试验才有鉴定价值。
否则，就没有鉴定价值。
2.选择简易、快速、方便的试验：①鉴定一种细菌可能有多种特异的方法，没有必要逐一进行试验，只选择其中一或两种达到目的即可，多选无意义。
如金黄色葡萄球菌凝固酶试验、耐热DNA酶试验、甘露醇分解试验均阳性，只选较简单的凝固酶试验就足够了。
②选择操作简便、快速的方法。
③选用复合培养基，一次操作可同时看几个生化反应，如克氏双糖铁（KIA），动力靛基质脲酶（MIU）等。
3.综合考虑试验的敏感性和特异性：敏感性=所有阳性结果数／所有感染病人数，试验敏感性越高，假阴性结果就越少。
特异性=阴性结果总数／未感染病人数，特异性越高，假阳性结果越少。
试验的敏感性和特异性是相互联系的，试验的敏感性增加，会使特异性下降，反之亦然。
临床微生物学检验
临床微生物学检验引言临床微生物学检验是一种通过检测和分析患者体内微生物的存在和活动水平来帮助诊断和治疗感染性疾病的方法。
微生物学检验可以确定感染的原因和类型，并确定适当的抗生素治疗方案。
本文将介绍临床微生物学检验的概念、常见的检验方法和其在临床实践中的应用。
临床微生物学检验的概念临床微生物学检验是通过收集患者样本（如血液、尿液、血液培养物等）并对其中的微生物进行培养、分离和鉴定来确定感染病原体的方法。
它涉及一系列实验室操作和技术，包括细菌培养、抗生素敏感性测试、鉴定和分子生物学方法等。
这些方法可以帮助确认感染病原体的存在、确定其感染类型（细菌、真菌、病毒等）以及选择适宜的治疗药物。
临床微生物学检验的常见方法细菌培养细菌培养是一种常见的微生物学检验方法，它涉及将患者样本置于培养基中以促进微生物的生长。
不同类型的培养基可以支持不同类型的微生物生长，如常见的血液琼脂培养基可用于细菌培养。
细菌培养的时间可以从几小时到几天不等，具体取决于患者样本中微生物的增殖速度和种类。
抗生素敏感性测试抗生素敏感性测试是一种用于确定感染病原体对不同抗生素的敏感性和抵抗性的方法。
常见的抗生素敏感性测试方法包括纸片扩散法和微量稀释法。
这些测试可以帮助医生选择最适合的抗生素治疗方案，以避免抗生素的滥用和抵抗性的产生。
分子生物学方法分子生物学方法在临床微生物学检验中也扮演着重要的角色。
这些方法可以通过检测微生物的核酸（如DNA或RNA）来快速鉴定微生物的存在和类型。
其中常用的方法包括PCR （聚合酶链反应）和实时荧光定量PCR。
分子生物学方法具有高度的特异性和敏感性，可以快速准确地检测微生物。
临床微生物学检验的应用临床微生物学检验在临床实践中具有广泛的应用。
它可以帮助确定感染的病原体，指导治疗方案的制定和调整，并监测治疗的疗效。
以下是临床微生物学检验在不同感染疾病中的应用示例：细菌感染在细菌感染的诊断和治疗中，临床微生物学检验可以帮助确定感染的菌种、菌株的数量和敏感性，从而选择适当的抗生素治疗方案。
临床微生物学及检验
一 碳水化合物的代谢试验 二 二 蛋白质和氨基酸的代谢试验
ห้องสมุดไป่ตู้三 碳源和氮源利用试验 四 酶类试验
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一、碳水化合物的代谢试验
类别 生化试验
原理
培养基/试剂 阳性结果
应用
碳 糖(醇)发酵试 各种细菌含有发酵不同糖（醇、苷）类 含糖、醇、 溴甲酚紫变黄 肠杆菌科细菌的鉴
水
验
的酶，分解糖类的能力不同，产酸、产
实验1 细菌形态学检查
【实验目的】
1.掌握普通光学显微镜的原理和使用方法。 2.掌握悬滴法、压滴法及结果判读 。 3.熟悉细菌染色基本原理；掌握革兰染色法、
抗酸染色法。
2
【实验器材】 1.菌种 金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、
变形杆菌、耻垢分枝杆菌。 2.培养基 普通琼脂平板、肉汤培养基、罗
氏培养基。 3.试剂 无菌生理盐水、凡士林、结晶紫、
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4. 半固体穿刺接种法：由培养基中央刺到距管底约半厘米处，然后
沿穿刺线退出接种针。
用途：检验细菌的运动性或观察细菌的生化反应。
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四、细菌的培养方法
1. 需氧培养法：将已接种的表皮葡萄 球菌的琼脂平板、斜面或液体培养 基置35℃培养箱培养18-24h，观察细 菌生长情况。
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2. 二氧化碳培养法（烛缸法）：取有磨口 标本缸或玻璃干燥器，在盖及磨口处涂 以凡士林，将接种细菌的培养基放入缸 中，点燃缸内蜡烛，加盖密封，当蜡烛 燃烧时会消耗缸内氧气并产生CO2，浓度 约为5%左右，将烛缸置35℃培养箱。
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三、细菌的接种与分离技术
细菌接种的基本程序： ➢ 灭菌接种环（杀灭接种环沾染的细菌，以免污染标本） ➢ 沾取标本 ➢ 接种 ➢ 灭菌接种环（杀灭接种环沾染的细菌，以免污染环境）
临床微生物学检验题库与参考答案
临床微生物学检验题库与参考答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.深部感染的分泌物有很强的恶臭,应首先考虑引起感染的病原体是(2014/2016 年初级士)A、真菌B、支原体C、病毒D、厌氧菌E、需氧菌正确答案：B2.患者女，36 岁。
术后感染，取感染部位渗出液做细菌培养，培养示：血平板菌落小、不溶血、有黄色素，革兰阴性细杆菌，有动力，无芽孢、无荚膜，氧化酶阴性，葡萄糖氧化，可水解七叶苷，液化明胶，DNA 酶阳性。
该患者感染的病原菌是（2016 年初级师）A、铜绿假单胞菌B、嗜麦芽窄食单胞菌C、大肠埃希菌D、芳香黄杆菌E、产碱假单胞菌正确答案：B3.革兰染色所用染料顺序是(2017/2020 年初级士)A、结晶紫-乙醇-碘液-稀释复红B、稀释复红-乙醇-结晶紫-碘液C、结晶紫-碘液-乙醇-稀释复红D、稀释复红-结晶紫-碘液-乙醇E、稀释复红-碘液-乙醇-结晶紫正确答案：C4.患者男,37 岁。
下呼吸道标本做细菌培养,在普通培养基及血平板上3℃培养24 小时,生长出光滑、不透明、灰白色、易从培养基上推动的菌落。
该菌为革兰阴性双球菌,无芽孢、无鞭毛,氧化酶阳性,触酶阳性,产 DNA 酶,还原硝酸盐和亚硝盐酸该菌为(2013 年初级师)A、脑膜炎奈瑟菌B、卡他布兰汉菌C、淋病奈瑟菌D、肺炎链球菌E、葡萄球菌正确答案：B5.下列细菌中硫化氢阳性的一组为(2015 年中级师)A、黏质沙雷菌、奇异变形杆菌、肺炎克雷伯菌B、弗劳地枸橼酸菌、肺炎克雷伯菌、痢疾志贺菌C、伤寒沙门菌、大肠埃希菌、阴沟肠杆菌D、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、痢疾志贺菌E、弗劳地枸橼酸菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌正确答案：E6.关于性菌毛的特点,下列叙述错误的是(2014 年初级师)(2014 年中级师)A、数量少 0~4 根B、比普通菌毛长C、仅见于少量阳性菌D、带有性菌毛的细菌称为雄性菌E、具有致育性正确答案：C7.下列细菌中属条件致病菌的是(2014/2018 年中级师)A、结核分枝杆菌B、铜绿假单胞菌C、霍乱弧菌D、金黄色葡萄球菌E、伤寒沙门菌正确答案：B8.不属于志贺菌血清群的是(2013 年初级士)A、宋内B、福氏C、鲍氏D、彦岛E、痢疾正确答案：D9.细菌的 ONPG 试验阳性呈现的颜色是(2015 年初级师)A、红色B、蓝色C、黄色D、紫色E、绿色正确答案：C10.白喉棒状杆菌致病主要靠(2019 年中级师)A、黏附素B、内毒素C、侵袭性物质D、外毒素E、英膜正确答案：D11.在半固体培养基中,沿接种线生长,接种线清晰,培养基澄清的细菌是(2013年中级师)A、大肠埃希菌B、铜绿假单胞菌C、阴沟肠杆菌D、肺炎克雷伯菌E、伤寒沙门菌正确答案：D12.患者女,22 岁。
临床微生物学和检验试题及答案
一、单选题（题数：40，共80.0 分）1副溶血弧菌的致病因子为（2.0分）0.0 分A、TSST-lB、CTC、LTD、STE、TDH我的答案：C2一开放性骨折患者并有大面积组织撕裂伤，伤口局部剧烈肿胀，触摸有捻发感，并有恶臭，病变发展迅速，伤口深部细菌涂片可见革兰阳性粗大杆菌和革兰阴性杆菌，可能感染（2.0分）2.0 分A、破伤风梭菌B、炭疽杆菌C、肉毒梭菌D、产气荚膜梭菌E、艰难梭菌我的答案：D3芽管形成试验阳性的是（2.0分）2.0 分A、光滑假丝酵母菌B、白假丝酵母菌C、光滑球拟酵母菌D、近平滑假丝酵母菌E、热带假丝酵母菌我的答案：B4导致婴儿先天畸形的病毒有（2.0分）2.0 分A、风疹病毒、巨细胞病毒、单纯疱疹病毒B、巨细胞病毒、腺病毒、乙型脑炎病毒C、风疹病毒、乙脑病毒、麻疹病毒D、巨细胞病毒、流感病毒、乙型脑炎病毒E、风疹病毒、流感病毒、腮腺炎病毒我的答案：A538、引起PCP的病原菌是（）（2.0分）2.0 分A、卡氏肺胞菌B、普氏立克次体C、曲霉菌D、组织胞浆菌E、汉坦病毒我的答案：A6一患者皮肤出现中央发黑呈痈样化脓灶，取分泌物涂片革兰染色镜检发现革兰阳性竹节状排列大杆菌，且有荚膜，初步判断是下列哪种细菌引起的（2.0分）2.0 分A、类白喉棒状杆菌B、产单核细胞李斯特菌C、炭疽芽胞杆菌D、破伤风梭菌E、蜡样芽胞杆菌我的答案：C7关于厌氧芽胞梭菌，下列选项错误的是（2.0分）2.0 分A、均能形成芽胞B、都是厌氧菌C、多见于自然环境中D、均通过伤口感染E、均为革兰阳性杆菌我的答案：D8解脲脲原体的特点是（2.0分）2.0 分A、分解精氨酸B、吸附CD4+ T细胞C、吸附红细胞D、分解葡萄糖E、分解尿素我的答案：E9属于氧化还原指示剂的是（2.0分）2.0 分A、溴甲酚紫B、甲基红C、酚酞D、亚甲蓝E、酚红我的答案：D10血平板上形成双层溶血环的细菌是（2.0分）2.0 分A、白喉棒状杆菌B、肺炎链球菌C、产气荚膜梭菌D、金黄色葡萄球菌E、破伤风梭菌我的答案：C11关于皮肤癣菌的描述，错误的是（2.0分）2.0 分A、在沙保弱培养基上形成丝状菌落B、通过直接和间接接触感染C、一种皮肤癣菌仅能引起一种癣病D、主要侵犯皮肤、毛发和指（趾）甲E、可以根据菌丝、孢子及菌落形态作出初步诊断我的答案：C12倾注MH平板时，培养基厚度为（2.0分）2.0 分A、6mmB、2mmC、5mmD、4mmE、3mm我的答案：D13通常定量接种的尿液量是（2.0分）2.0 分A、2μlB、7μlC、5μlD、3μ1E、1μl我的答案：E14手工法的血培养瓶，需每天观察有无细菌生长，下例情况中与细菌生长无关的是（2.0分）2.0 分A、溶血B、产生絮状沉淀C、肉汤培养基表面出现薄膜D、红细胞沉淀于瓶底E、肉汤培养基变浑浊我的答案：D1514、在液体培养基中形成菌膜生长的细菌是（）（2.0分）2.0 分A、产气荚膜杆菌变形杆菌C、布鲁菌D、结核分枝杆菌E、肉毒芽孢梭菌我的答案：D16不可在血平板上生长的细菌是（2.0分）0.0 分A、淋病奈瑟菌B、无乳链球菌C、肺炎链球菌D、卡他莫拉菌E、念珠菌我的答案：C17埃希菌属在KIA培养基上的常见反应模式是（2.0分）2.0 分A、A/A，产气，硫化氢-B、K/A，产气，硫化氢+C、A/A，不产气，硫化氧-D、K/A，不产气，硫化氢-E、K/A，不产气，硫化氢+我的答案：A1815、结核分枝杆菌常用的培养基是（）（2.0分）2.0 分A、沙保培养基庖肉培养基C、巧克力培养基D、罗氏培养基E、亚碲酸钾培养基我的答案：D19下列哪组试验是志贺菌属与类志贺邻单胞菌的鉴别试验（2.0分）2.0 分A、动力试验和氧化酶试验B、KIA和MIUC、MIU和IMViCD、糖发酵试验和脲酶试验E、动力试验和硝酸盐还原试验我的答案：A20缺陷病毒本质是指（2.0分）0.0 分A、复制周期不完全B、包膜刺突缺损C、衣壳缺损D、基因组缺损E、病毒酶缺损我的答案：C21下列病原体中，能引起软下疳的是（2.0分）2.0 分A、埃及嗜血杆菌B、杜克嗜血杆菌C、嗜沫嗜血杆菌D、流感嗜血杆菌E、溶血嗜血杆菌我的答案：B22关于嗜肺军团菌的描述，不正确的是（2.0分）2.0 分A、革兰阳性B、有鞭毛和菌毛，无荚膜和芽胞C、主要致病物质包括菌毛、侵袭性酶类和内毒素D、生长缓慢E、生存能力强我的答案：A23临床实验室检查细菌形态最常用的显微镜是（2.0分）2.0 分A、普通光学显微镜B、电子显徽镜C、相差显微镜D、荧光显微镜E、暗视野显微镜我的答案：A24由SARS冠状病毒引起的疾病是（2.0分）2.0 分A、大叶性肺炎B、普通感冒C、流感D、严重急性呼吸道综合征E、溃疡性结肠炎我的答案：D25真菌都能产生的孢子是（2.0分）2.0 分A、厚膜孢子B、大分生孢子C、小分生孢子D、芽生孢子E、关节孢子我的答案：C2631、下列细菌产生的毒素中，毒性最强的是（）（2.0分）2.0 分A、肉毒毒素B、破伤风毒素C、炭疽毒素D、霍乱毒素E、鼠毒素我的答案：A2727、放线菌在机体组织中形成的菌落是（）（2.0分）2.0 分A、硫磺样颗粒B、荷包蛋样菌落C、细菌L型D、绒毛样菌落E、黑色菌落我的答案：A28培养皮肤癣菌时为防止细菌生长可在沙保弱培养基中加入（2.0分）2.0 分A、普拉米星B、氯霉素C、放线菌酮D、两性霉素BE、益康唑我的答案：B29沙门菌属在KIA培养基上的常见反应模式是（2.0分）2.0 分A、K/A，不产气，硫化氢-B、A/A，不产气，硫化氧-C、A/A，产气，硫化氢+D、K/A，不产气，硫化氢+E、K/A，产气，硫化氢-我的答案：D30双糖铁培养基属于（2.0分）2.0 分A、营养培养基B、鉴别培养基C、特殊培养基D、基础培养基E、选择培养基我的答案：B3129、血平板上形成双层溶血环的细菌是（）（2.0分）2.0 分A、肺炎球菌B、葡萄球菌C、产气荚膜杆菌D、破伤风杆菌E、白喉杆菌我的答案：C3227、放线菌在机体组织中形成的菌落是（）（2.0分）2.0 分A、硫磺样颗粒B、细菌L型C、绒毛样菌落D、荷包蛋样菌落E、黑色菌落我的答案：A33以人虱为传播媒介的微生物为（2.0分）2.0 分A、布鲁菌B、鹦鹉热立克次体C、鼠疫杆菌D、钩端螺旋体E、普氏立克次体我的答案：E34不属于蛋白质和氨基酸代谢试验的是（2.0分）2.0 分A、明胶液化试验B、硫化氢试验C、CAMP 试验D、尿素分解试验E、吲哚试验我的答案：C35区分须癣毛癣菌与红色癣菌选用（2.0分）2.0 分A、厚膜孢子形成试验B、毛发穿孔试验C、明胶液化试验D、脲酶试验E、触酶试验我的答案：B36白喉棒状杆菌的异染颗粒，通过哪种染色可观察到（2.0分）2.0 分A、镀银染色B、革兰染色C、Giemsa染色D、Albert染色E、抗酸染色我的答案：D37鹅口疮的病原体是（2.0分）2.0 分A、新型隐球菌B、表皮癣菌C、白假丝酵母菌D、黄曲霉菌E、小孢子癣菌我的答案：C38下列疾病中，主要经粪—口途径传播的是（2.0分）2.0 分A、脊髓灰质炎B、流行性乙型脑炎C、黄热病D、森林脑炎E、登革热我的答案：A39长期应用氨基糖苷类、头孢菌素类或四环素类无效的患者，均可因机体的微生态平衡被破坏而诱发下列哪类感染（2.0分）2.0 分A、梅毒螺旋体感染B、病毒感染C、缺陷病毒感染D、厌氧菌感染E、需氧菌感染我的答案：D40可用于治疗支原体肺炎的是（2.0分）2.0 分A、舒巴坦B、氨苄西林C、红霉素D、青霉素GE、头孢哌酮我的答案：C二、多选题（题数：10，共20.0 分）146、下列何种细菌不能引起社区性肺炎（）（2.0分）0.0 分A、支原体B、军团菌C、大肠杆菌D、铜绿假单胞菌E、流感嗜血杆菌我的答案：BE244、细菌染色性与细菌何种物理性状无关（）（2.0分）0.0 分A、半渗透性B、表面积C、光化学D、带电性E、渗透性我的答案：ABCDE342、有关荚膜描述正确的是（）（2.0分）0.0 分化学成分可是多糖B、具有抗吞噬作用C、具有免疫原性D、一般在机体内形成E、增强细菌的热的抵抗我的答案：ACDE443、不是真核型微生物特点的是（）（2.0分）1.0 分A、有核膜、无核仁B、有核仁、无核膜C、无染色体D、有核仁、核膜E、无核仁、核膜我的答案：AE5CAMP试验出现“矢状”溶血是什么细菌共培养的结果( ):（2.0分）2.0 分A、A群链球菌B、肺炎链球菌C、无乳链球菌D、流感嗜血杆菌E、金黄色葡萄球菌我的答案：CE645、不是溶菌酶作用部位为（）（2.0分）1.0 分A、细胞壁肽聚糖B、核糖体C、细菌外膜层D、细胞壁外膜细胞壁磷壁酸我的答案：CE7鸟氨酸脱羧酶试验阳性的细菌有( ):（2.0分）2.0 分A、痢疾志贺菌B、宋内志贺菌C、伤寒沙门菌D、甲型副伤寒沙门菌E、福氏志贺菌我的答案：BD8氧化酶试验阳性的细菌有( ):（2.0分）0.0 分A、铜绿假单胞菌B、宋内志贺菌C、大肠埃希菌D、鲍曼不动杆菌E、淋病奈瑟菌我的答案：AC9硝酸盐还原试验试剂的成分有( ):（2.0分）2.0 分A、α-萘胺B、对氨基苯磺酸C、α-萘酚D、醋酸E、对氨基苯甲醛我的答案：ABD10鲍曼不动杆菌鉴定试验阴性有( ):（2.0分）1.0 分A、硝酸盐还原试验B、动力试验革兰染色阴性D、氧化酶试验E、触酶试验我的答案：BCD。
临床微生物学检验
临床微生物学检验一、痰培养1．英文或缩写：Bacterial Culture of Sputum2．标本采集及注意事项：患者清晨起床，用清水反复漱口后，用力咳深部第一口浓痰置无菌容器中尽快送检。
痰量极少者可用45℃ 10％氯化钠雾化吸入导痰。
对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔抵达气管腔内吸引痰液。
或用纤维支气管刷直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群污染。
双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管者，可用吸痰管经人工气道估插至肺支气管水平吸引痰液。
对重症、难治、或伴免疫抑制、或疑似厌氧菌引起的医院内肺部感染可采用环甲膜穿刺经气管吸引(TTA)、经胸壁穿刺肺吸引(LA)、经纤维支气管镜或人工气道作防污染双套管毛刷(PSB)或防污染支气管肺泡灌洗(PBAL)采集无口咽部菌群污染的痰液，进行精确的感染病原学诊断。
小儿取痰可用弯压舌板向后压舌，用棉拭子深入咽部，小儿经压舌刺激咳嗽时岢喷出肺部和气管分泌物，粘在棉拭子上，取出检查。
厌氧菌培养通过气管穿刺取痰液，采集后立即排出空气，插入无菌的橡皮塞送检。
痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。
室温下延搁数小时，定植于口咽部的非致病菌呈过度生长，而肺炎球菌、葡萄球菌和流感杆菌检出率则明显下降。
3．检测及报告时间：每天检测，3 天报告结果。
4．正常参考值：正常人只有正常菌群生长，且正常情况下不致病。
5．临床意义：大叶性肺炎、小叶性肺炎、中毒性肺炎等多为肺炎链球菌引起。
近年来，由于抗生素的大量应用，耐药性金葡菌引起的肺炎有所增加，肺炎克雷伯菌、化脓性链球菌、流感嗜血杆菌引起的肺炎则有所减少，少数肺炎也可由大肠埃希菌等革兰阴性杆菌引起。
新儿肺炎产前或产时感染者以病毒、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌最为常见，而产后感染者则以金黄色葡萄菌、链球菌、肺炎链球菌为多见。
慢性支气管炎的病因是多方面的，目前一般认为，病毒感染削弱呼吸道的防御功能，因而招致“条件致病菌”，主要是流感嗜血杆菌和肺炎链球菌的继发感染。
临床微生物学与检验教学大纲
《临床微生物学与检验》教学大纲程编号：05280020课程名称：临床微生物学与检验(Clinical microbiology & laboratory)学分：6.5总学时：120学时理论学时：56学时实验学时：64学时先修课程要求：人体解剖学、生物化学、医学免疫学适应专业：医学检验专业参考教材：1、临床微生物学与检验，倪语星、尚红主编，第四版，人民卫生出版社2、临床微生物学检验，洪秀华主编，第一版，中国医药科技出版社3、Murray PR. Manual of Clinical Microbiology.8th ed.Washington:American Society for Microbiology一、课程在培养方案中的地位、目的和任务临床微生物学与检验是医学微生物学、临床微生物学以及微生物学技术密切结合的一门新兴学科，是医学检验专业的一门专业主干课程，它综合了临床医学、免疫学、临床抗生素学和医院流行病学等几方面的知识和技能，研究感染性疾病的病原体特征，提供快速、准确的病原学诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，对医院内感染进行动态监控。
二、课程基本要求临床微生物学与检验是一门实践性、应用性很强的课程，该课程包括医学微生物学和临床微生物学两部分，前者主要研究与医学有关的病原微生物的生物学特性、致病性、免疫性、以及防治措施的学科。
后者侧重于研究感染性疾病，快速、准确的诊断病原体的策略与方法，为临床诊断提供依据。
通过本课程的学习，学生应该掌握微生物的基本特性，病原微生物对人体的致病性以及人体的抗感染免疫，微生物学检验的基本技术。
各类临床标本的采集方法、检验程序及常规检验方法。
三、学时安排四、考核考核方式：理论考试笔试，实验课采用考核及评估方式评定成绩。
成绩构成：理论考试70%，实验和平时成绩30%。
五、课程基础内容（理论教学）绪论[目的要求]1、掌握有关微生物及微生物学的概念；2、了解微生物学的发展简史。
医学检验科-临床微生物学专业内容
医学检验科-临床微生物学专业内容一、专业介绍1.1 临床微生物学的定义临床微生物学是研究临床医学中与微生物相关的疾病的学科，主要包括细菌、病毒、真菌和寄生虫等微生物在人类疾病中的作用、诊断和治疗。
1.2 专业背景随着医疗技术的不断发展，微生物学在医学领域中的地位日益重要。
临床微生物学的专业内容涉及病原微生物的检测、分离和鉴定，以及对微生物相关疾病的诊断和治疗。
1.3 就业前景临床微生物学专业毕业生可以在医疗机构、检验检测中心、疾控中心、药品生产企业、科研院所等单位从事临床微生物学领域的工作，有很好的就业前景。
二、专业内容2.1 微生物的检测与分离临床微生物学的专业人员需要掌握微生物的检测与分离技术，包括采集临床样本、培养和鉴定微生物等操作，以确诊微生物相关疾病。
2.2 微生物的鉴定与鉴定鉴定微生物的特征对于制定治疗方案至关重要。
临床微生物学专业人员需要掌握各种微生物的鉴定方法，包括形态学、生理生化特性、分子生物学方法等。
2.3 微生物相关疾病的诊断临床微生物学专业人员需要学习各种常见微生物相关疾病的临床表现、诊断方法和治疗原则，以提高对这些疾病的诊断和治疗水平。
2.4 抗微生物药物的敏感性检测临床微生物学专业人员需要学习和掌握抗微生物药物的敏感性检测方法，以指导临床用药和抗微生物药物的合理使用。
2.5 微生物学实验室管理临床微生物学学科需要规范的微生物学实验室管理，包括实验室环境和设施管理、实验室安全管理、微生物样本管理等内容。
三、专业要求3.1 知识基础学习临床微生物学需要有扎实的生物学、微生物学和临床医学知识，了解细菌、病毒、真菌、寄生虫等微生物的基本特征和生物学特性。
3.2 技术能力临床微生物学专业人员需要具备熟练的微生物检测和分离技术、微生物鉴定和鉴定技术、微生物敏感性检测技术等实践技能。
3.3 全面素质临床微生物学专业人员需要具备严谨的科学态度、扎实的专业知识、良好的交流能力和团队合作能力，以满足临床微生物学领域工作的要求。