三罐组动态逆流提取当归中阿魏酸的工艺研究
当归不同提取液中阿魏酸、咖啡酸含量及抗氧化作用的比较研究
当归不同提取液中阿魏酸、咖啡酸含量及抗氧化作用的比较研究管西芹;毛近隆;闫滨;王丹丹;张欣欣;周洪雷【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2018(030)012【摘要】为考察不同提取条件对当归提取液中阿魏酸和咖啡酸的含量及抗氧化作用的影响,本研究通过HPLC外标一点法检测当归提取液中阿魏酸和咖啡酸的含量,通过DPPH法和ABTS法检测当归提取液的抗氧化作用.研究结果表明,不同提取条件下当归提取液中阿魏酸的含量为0.574～0.707 mg/g,咖啡酸为0.012～0.082 mg/g;碱水溶液提取时阿魏酸与咖啡酸的含量最高,其抗氧化活性也最强,而95％乙醇提取时的含量最低,抗氧化活性最弱;提取溶剂随醇浓度的增加,咖啡酸的含量逐渐减少,阿魏酸的含量呈现先增加后减少的趋势,30％～50％乙醇提取时各组分有良好的协同抗氧化作用.【总页数】6页(P2033-2038)【作者】管西芹;毛近隆;闫滨;王丹丹;张欣欣;周洪雷【作者单位】山东中医药大学药学院,济南250355;山东中医药大学药学院,济南250355;山东中医药大学中医学院,济南250355;山东中医药大学药学院,济南250355;山东中医药大学药学院,济南250355;山东中医药大学药学院,济南250355【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.当归补血汤不同配伍比例时阿魏酸含量的比较研究 [J], 王文萍;王华伟;曹琦琛;高晶晶;吕玉萍2.当归川芎红花不同组合方式对复方方剂中阿魏酸含量的影响 [J], 宋金春;刘红;刘薇芝;代军3.不同提取方法测定当归芍药散中芍药苷和阿魏酸含量的比较研究 [J], 刘俊;宋欣;王满媛;许钒4.不同产地当归身与当归尾阿魏酸含量比较研究 [J], 巢蕾;曹雨诞;严辉;陈佩东5.不同产地当归药材中阿魏酸含量比较研究 [J], 晋玲;金尧;张弦飞;王振恒;吴迪;崔治家;马毅;李应东因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同提取工艺对当归中阿魏酸含量的影响
不同提取工艺对当归中阿魏酸含量的影响目的：比较不同提取工艺对于当归提取成分种类的影响。
方法：以从当归中提取阿魏酸为例，比较二氧化碳超临界提取、乙醇回流提取、水蒸气蒸馏提取、乙醇渗漉提取工艺这四种不同工艺对该成分的提取量。
结果：经计算，二氧化碳超临界提取、乙醇回流提取、水蒸气蒸馏提取、乙醇渗漉提取工艺这四种不同工艺所提取100g当归的阿魏酸量分别为43.23mg、27.32mg、0mg、23.23mg，二氧化碳超临界提取阿魏酸的量最高。
结论：使用二氧化碳超临界法对当归中的有效成分进行提取可以显著提高提取量，并且在挥发性成分提取上具有显著优势，值得推广。
标签：当归；提取成分；提取工艺当归为伞形科植物当归的干燥根，性温味甘、苦、辛，具有补血活血、调经止痛、润燥滑肠的功效[1]，是临床常用的一味中药。
为最大程度提高当归的提取量，提升使用利用度，本文特对二氧化碳超临界提取、乙醇回流提取、水蒸气蒸馏提取、乙醇渗漉提取提取工艺对于当归提取成分种类的影响进行分析，现将研究情况报告如下：1 材料和方法1.1材料：阿魏酸对照品（中国药品生物制品检验所），高效液相色谱仪，容量瓶，二氧化碳超临界萃取仪，95%乙醇，甲醇，70%乙醇，乙腈，蒸馏水。
1.2 方法：以从当归中提取阿魏酸为例，比较二氧化碳超临界提取、乙醇回流提取、水蒸气蒸馏提取、乙醇渗漉提取工艺这四种不同工艺对该成分的提取量。
1.2.1 提取工艺1）二氧化碳超临界提取。
取100克当归原生药材，以20毫升95%的乙醇作为夹带剂，在40摄氏度—50摄氏度的温度，25MPa-30PMa的萃取压力[2]，8MPa-10PMa的解析压力，10L/h-12L/h二氧化碳流量下进行三个小时的二氧化碳超临界提取，提取结束后定容至50ml提取物，取其上清液用0.45μm微孔滤膜过滤。
2）乙醇回流提取。
取100克当归原生药材，用70%的乙醇进行两次回流提取，每次加入5倍于原生药材量的乙醇溶液，每次回流1.5h，每次提取后收集500ml提取液，混合后精密提取提取液2ml，将提取液放置在10毫升的容量瓶中，加入甲醇定容后摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤。
当归中阿魏酸的提取与分离
当归中阿魏酸的提取与分离
当归中阿魏酸的提取与分离
一、引言
当归是一种有益的中草药，可以用于治疗多种疾病，也是一种重要的
中药原料，含有丰富的有益成分，其中一种就是阿魏酸。
最近，研究
显示，阿魏酸在药物及其他生物活性中有重要作用，因此，有必要探
索从当归中提取和分离阿魏酸。
二、原料介绍
当归是一种最常用的中草药，主要是指Scutellira baicalensis Geoerger。
它具有抗氧化，抗炎，止血，镇静，抗肿瘤等作用。
同时它还含有多
种化学成分，其中包括多环萜类，类黄酮，芳香酚，甾醇类，苯甲酸类，维生素和植物阿魏酸等物质。
阿魏酸具有抗氧化，抗细菌，降血脂，抗肿瘤等作用，因此在药品和精细化工中具有重要意义。
三、提取分离方法
为了从当归中提取和分离阿魏酸，可以采用几种不同的提取分离方法。
1、离子交换法：在该方法中，利用离子交换树脂，吸附当归中的阿魏酸，并与另一种相应的离子进行交换，使阿魏酸脱除，最终获得纯化
的阿魏酸。
2、乙醇提取法：乙醇提取法是利用乙醇可以溶解高粘度物质的特点，
使阿魏酸从当归中析出，并且同时溶解其他有机物，有助于分离。
3、溶剂萃取法：在溶剂萃取法中，利用不同溶剂吸附当归中的阿魏酸，然后可以被萃取出来。
4、膜分离法：膜分离法是利用膜分离阿魏酸，使阿魏酸在膜中扩散，
并分离出来。
四、结论
从当归中提取和分离阿魏酸是十分重要的，它的研究可以为后续的相
关研究提供一定的基础。
目前提取分离阿魏酸的方法主要有离子交换法，乙醇提取法，溶剂萃取法和膜分离法，根据实际需要可以选择合
适的方法来提取和分离。
《正交实验法优选当归补血汤提取工艺的研究》
正交实验法优选当归补血汤提取工艺的研究【摘要】目的优选当归补血汤的最佳提取工艺条件。
方法以当归补血汤中阿魏酸含量为指标，对影响提取的重要因素A提取时间，B加水量，C提取次数进彳f L9(34)正交实验设计。
结果最佳提取工艺为药材加12倍量水，提取两次，提取2 h/次。
结论优选得到的提取工艺稳定可行。
【关键词】当归补血汤阿魏酸正交实验Abstract : ObjectiveTo study the best extraction process of Tangkuei Blood-supplementing decoction. MethodsUsing the orthogonal design which contained 3 factors (amount of water， extracted times， extracted hour) and 3 levels to determine the content of ferulic acid as the index of evaluation. ResultsThe optimum conditions for the extraction of ferulic acid were 12 times of water， extracted twice and each time lasted 2 hours.ConclusionThe extraction process for ferulic acid from Tangkuei Blood-supplementing decoction was stable and usable.Key words : Tangkuei blood-supplementing decoction; Ferulic acid; Orthogonal design当归补血汤出自李东垣《内外伤辨惑论》。
当归的提取工艺研究_李建英
备的方法，制成阴性对照溶液，用以上选定的测定条件进行吸收曲 量[J].中国冶金工业医学杂志，2004，21(2):96.
线绘制，观察在与阿魏酸相同的保留时间处是否存在吸收峰，结果 [5]唐力英，王祝举，赫炎等.高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含
表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与阿魏酸相同保留时 量[J].中国实验方剂学杂志,2006,12(2):14.
5~80μg/ml 范围内线性关系良好。
[3]陈超超，王艳，梁超. 高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含量
3.5 阴性干扰试验
[J].成都大学学报(自然科学版)，2008，27(4):284.
依照处方取除去当归，按提取工艺提取醇膏，用供试品溶液制 [4]于淼，于治国，李昕昊等.高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含
梅特勒 - 托利多分析天平、722s 分光光度计（上海精科有限公司）、 值，对照品峰面积积分值的 RSD 为 0.59%。
KQ- 250DB 型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）、旋转
3.7 重现性试验
薄 膜 蒸 发 仪 (上 海 申 生 科 技 有 限 公 司 )、TGL- 16G 高 速 离 心 机 、 分别称取同批当归提取膏 6 份，按质量标准含量测定项下方法
pHS- 2C 型精密酸度计 (上海精科雷磁厂)、CD- 100L 华迪超导热风 测定含量，并计算样品的 RSD 值为 0.63%，此含量测定方法的重现
干燥箱(浙江新昌暖通设备厂)、阿魏酸对照品(中国药品生物制品检 性良好。
定所提供)。甲醇、乙腈为色谱纯，水为注射用水，其它试剂试药均为
3.8 回收率试验
关键词：提取；工艺；研究
当归为伞形科植物当归 Angelia Sinensis (oliv．)Diels 的干燥
当归中阿魏酸提取工艺的研究进展
当归中阿魏酸提取工艺的研究进展摘要：阿魏酸是当归重要的酚酸之一，具有多种生理功能。
因此在新药开发和功能性食品上具有广泛的前景。
述了近年来国内外有关当归中阿魏酸提取工艺的研究进展，以期推动当归阿魏酸的深入研究。
关键词：阿魏酸；微波法；超声法；超临界提取；闪式提取引言当归Angelica sinensis(Oliv.)Diels是伞形科当归属的一种多年生草本植物。
其干燥的贮藏根是我国一味常用的中药材，药用历史悠久, 历代本草均有记载, 始记于《神农本草经》谓之“当归味温, 主呃逆上气”被列为中品[1]。
其入肝、心、脾经，药性甘、辛、温，有补血、和血、调经止血、润肠滑肠之功效[2]，为医家常用，素有“十方九归”之称。
用于血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，肠燥便秘，风湿痹痛，跌仆损伤，痈疽疮疡[3]，因此对其研究具有重大意义。
当归其主要活性成分阿魏酸是中国药典规定的当归药材中的主要药用指标。
是公认的天然抗氧化剂,也是近年来国际认知的防癌物质,引起世人瞩目。
阿魏酸( ferulic acid) ,化学名为4-羟基-3-甲氧基苯肉桂酸，是来自于多种植物的一种酚酸，在细胞壁中与多糖和蛋白质结合成为细胞壁的骨架，有顺式和反式两种[4]。
阿魏酸分子结构见图1：图1 阿魏酸的分子结构顺式阿魏酸为黄色油状物，反式阿魏酸为白色至微黄色结晶物，其苯环上的羟基是抗氧化活性基团，可消除自由基，抑制氧化反应和自由基反应[5]。
阿魏酸具有抗氧化、抗血栓形成、降血脂、调节人体免疫功能等特性[6~7]，阿魏酸及其衍生物被广泛应用于降血脂、防治冠心病和癌症、抗菌消炎、抗突变、活血通络、消除黄褐斑，以及失眠、腰酸腿沉等的医学治疗、保健品生产和食品添加剂领域[8~9]。
因此，改善当归阿魏酸的提取方法、提高其提取率对于充分利用当归资源有重要实际意义。
1 溶剂提取法当归的化学成分的提取、分离。
可利用其有机化合物在不同溶剂中的溶解度的不同，进行提取。
当归补血益气胶囊中阿魏酸测定方法的研究
７ ０・ ７
安 徽 医 药
Ａ ｈ ｉ ｄｃｌ ｎ ｈ ｒ ａｅｔ ａ Ｊｕｎｌ ２ １ ｕ； （ ） ｎｕ Ｍｅｉ ｄＰ ａｍ ｃｕｉ ｌ ｏ ｒ ００Ｊｌ１ ７ ａａ ｃ ａ ４
当 归补 血 益 气胶 囊 中 阿 魏 酸测 定 方法 的 研 究
张爱玲
（ 安徽 医科 大学第一 附属 医院药剂科 ， 国家 中医药管理局 中药化学三级实验 室， 安徽 合肥 摘要 ： 目的 建立 当归补血益气胶囊 中阿魏酸含量的测定方法 。方法 ２０ ２ ） ３０ ２
一
测器 ； ｔ ｓＭ Ｗａ ｒ频率 ：３ ５ Ｋ ｚ功率 ：５ ； Ｈ， １０ Ｗ） 硅胶 Ｇ 薄层 板 （ 岛海 洋化 工 集 团 ） 青 ； Ｓ Ｒ Ｏ ＩＳＢ ２ １电子天平。阿魏酸对照品（ Ａ Ｔ ＲＵ Ｐ １ 中国药品生物
ＡｂｔａｔＡ ｍ Ｔ ｓ ｂｉ ｅｈｄｆｒ ｅ ｒ ｉａｏ ｆｅｕｉ ａｉ ｉ ｄｎｇｉ ｕｕ ｉｉ ａｓｌｓＭｅ ｏ Ａ Ｋｏ ｓ ｌ（ ５ ｓｒｃ： ｉ ｏｅｔ ｌ ｈａｍ ｔｏ ｔ ｍｎ ｔｎｏ ｆ ｌ ｃ ａｇｕ ｂｘｅｙｑ ｃｐｕｅ． ｔ ｄ ａ ｓ ｏｄｅ ｉ ｒ ｃ ｄ ｎ ｈ ｒ ｍａｉＣ８２ ０ ｌ
～
４０ ０ｎ ０ ． ｇ范围内呈 良好的线性关 系， ＝ ．９ ， ｒ ０ ９ ９８ 平均回收率 ９ ．８ ， Ｓ ９ １％ Ｒ Ｄ＝１ ６ ％。结论 ．１
血益气胶囊 中阿魏酸的含量测定。 关键词 ： 当归补血益气胶囊 ； 阿魏酸 ； 含量测定 ； Ｐ Ｃ Ｈ Ｌ
Ｄｅｅｍｉａｉｎｏ ｒ ｌ ｃ ａ ｇ ｕ ｕ ｕ ｉｉ ａ ｓｌｓ ｔｒ ｎ ｔ ｆｆ ｕｉ ａｉ ｉ ｄ ｎ ｇ ｉ ｘ ｅｙｑ ｐｕｅ ｏ ｅ ｃ ｄｎ ｂ ｃ
，
具有抗氧化 、 降血脂等作用 。 。为 了更 有效的控制制 剂
多指标正交试验优选当归提取工艺
・ ６ １・
多指标正交试 验选 当归提 取工艺
秦晓宇 李 丹
（ 哈 药 集 团制 药 总厂 ， 黑龙 江 哈 尔滨 １ ５ ０ ０ ０ ０ ）
摘 要： 本 实验 以阿魏酸和 当归多糖 为指标 ， 采用正交试验 法对 当归的提取工艺进行研 究。 方法 ： 采用 高效液相法测定 阿魏酸 ， 甲醇 一 乙腈 一水 一磷 酸 一三 乙胺（ １ ５ ： ５ ： ８ ０ ： ０ ． ０ １ ： ０ ． １ ） ， 检 测波长为 ３ ２ ４ ｎ ｍ， 流速 为 １ ． Ｏ ｍｌ ／ ｍｉ ｎ ， 柱温为 ３ ０ ￣ Ｃ。阿魏 酸在 ０ ． ２ ～２ ． ０ ｇ ・ ｍＬ 范围 内呈良 好 的线性关 系％ ； 采用苯酚一硫 酸法测定 当归多糖 ， 葡萄糖在 ２—１ ６ ａｇ ｒ ・ ｍＬ 范围 内呈 良好 的线性 关 系％。结论 ： 测定方 法简便 、 准确 ， 可 用于 当归 中阿魏 酸和 当归多糖 的含量测定。该提 取工艺效 率高、 重现性好 ， 适合 当归的提取 。
关键词 ： 当归 ； 提取 ； 测 定
当归最常用的中药之一。当归具有补血和血 ， 调经止 表 １提 取 工 艺 因素 水 平 表 痛， 润燥滑肠的功效 。当归具有抗血栓形成 、 改善血液循 环、 改善冠脉循环 、 抗炎 、 镇痛等作用Ｐ ｑ ｔ ￣阿魏酸（ Ｆ ｅ ｒ ｕ ｌ ｉ ｃ Ａ ｃ ｉ ｄ ） 的化学名称为 ４ 羟基 ３甲氧基肉桂酸 ， 具有抗血小板 聚集 ， 抑制血小板血栓素 ａ ２ （ ｔ ｘ ａ ２ ） 的生成 ， 镇痛， 缓解血管 痉挛等作用 。当归多糖具有抗肿瘤、 抗氧化、 镇痛 、 抗肿 瘤等作用。本实验以阿魏酸和当归多糖为指标 ， 采用正交 最大吸收峰， 故选用 ４ ８ ６ ｎ ｍ为检测波长。 ４ ． ２ 苯酚—硫酸法。 精密移取 ２ 试隘法 对当归的提取工艺进行研究。 ｍＬ于 ２ ５ ｍ Ｌ量瓶中， 分别加入 ５ ％苯酚试液 １ ． ０ ｍＬ ， 浓硫酸 ７ ． ０ ｍＬ ， 混匀。 １ 仪器与试药 ０分钟 ， 取出后冰水浴 １ ５ 分 。 ４ ． ３ 对照品的线 考察 。 精密称 １ ． １ 仪器： 英国艾德姆 Ｐ ＷＣ分析天平 德姆衡器（ 武汉 ） 有限公司 沸水浴 ３ ０ ０ ｍｇ ， 置２ ５ ｍ ｌ 容量瓶中， 加入水液使溶解并稀释至刻 １ ７ ３ ０ Ｑ Ｆ Ｙ超声波菲 先 器（ 匕 海洽女 义 暑 币 ｛ ’ 技有限公司） ； Ｒ 一 １ ０ ０ １ 一 Ｖ Ｎ旋转 取葡萄糖对照品 ５ 摇匀， 分别精密吸取 １ … ２ ４ ６ 、 ８ ｍ Ｌ ， 置于 １ ０ ｍ Ｌ量瓶中， 加水释至刻度 ， 蒸发仪（ 郑州长城科工贸有限公司） ； Ｌ Ａ Ｕ Ｄ Ａ Ａ ｑ ｕ ￣ ｉ ｎ ｅ 普及型恒温锅防 度 ， 依照 ４ ． ２ ￣ ｊ ｈ － ． Ｖ 的条件测定 ， 记录吸收度。以吸收度为纵坐标 ， 对照品 达贸易（ 上 海洧 限公司 ） ； Ｓ Ｈ Ｂ — Ｉ Ｉ Ｉ 循环水真空泵晒安中诺仪器有限公司） ； 摇匀， 绘制标准曲线。结果表明， 葡萄糖在 ２ １ ６ ｍ ｇ ・ ｍ Ｌ － 范围 Ｔ Ｕ 一 １ ９ ０ １双光束紫外可见分光光度计 ｄ Ｅ 京普析通用仪器有限责任公 浓度为横坐标， 内呈 良好的线 系。 ４ ４准确度试验。 精密称取已知含量的样品 ６ 份， 分 司） ； Ｌ ｃ 一 １ ０ ０ 度澎哼讹 电脑智能控制高效液相色谱仪（ 上海伍丰科学仪 别加入一定量的葡萄糖对照品， 上述方法进行测定 ， 计算回收率， 平均 回 器 有 限公 司） ｏ １ ． ２色 谱 柱 ：奥 泰 公 司 Ｃ １ ８色 谱 柱 （ ２ ５ ０ ｍｍ× 收率分别为 ９ ９ ． ２ ％ ， Ｒ Ｓ Ｄ为 ０ ． ８ ９ ％。 ４ ． ６ ｍｍ 。 ５ ｍ） 。 １ ． ３ 对照品 ： 阿魏酸 购自中国药品生物制品检定所。 １ ４试
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三罐组动态逆流提取当归中阿魏酸的工艺研究目的采用三罐组动态逆流的方法对当归中阿魏酸的提取工艺进行优化。
方法采用高效液相色谱法测定当归中阿魏酸含量，以阿魏酸为指标成分，采用全面试验考察提取时间和加水倍量对提取效率的影响。
结果当归水溶性成分阿魏酸的优化提取工艺为：加10倍量水，单次提取时间为20 min。
结论三罐组动态逆流的方法提取当归中阿魏酸的工艺可靠，提取效率高，节省能源。
Abstract：Objective To optimize technology of three can group dynamic countercurrent extraction process of ferulic acid from Angelicae Sinensis Radix. Methods The content of ferulic acid was determined by HPLC. With content of ferulic acid as index，comprehensive test was used to investigate effect of extraction solvent and extraction time on extraction efficiency. Results The optimum process parameters were as follows：extraction solvent with 10 times of water；20 minutes for each extraction time. Conclusion The process which uses method of three can group of dynamic countercurrent extraction of ferulic acid from Angelicae Sinensis Radix is reliable，highly efficient and energy saving.Key words：Angelicae Sinensis Radix；technology of three can group dynamic countercurrent；ferulic acid当归为甘肃省道地药材，主产于岷县，为伞形科植物当归Angelica sinensis （Oliv.）Diels的干燥根，其性温，味甘、辛，归肝、心、脾经，具有补血活血、调经止痛、润肠通便的功能，用于血虚萎黄、眩晕心悸、月经不调等病症[1-2]。
当归的药效成分主要为挥发油和水溶性成分[3]，其水溶性成分主要为阿魏酸、烟酸、尿嘧啶及多糖等，有研究表明当归水溶性成分具有增强心肌血液供应、缓解心肌缺血的作用[4]。
中药传统提取方法中，药材与溶剂中的有效成分在接近平衡时的浓度差小，导致提取时间长、提取率低[5]。
罐组动态逆流提取技术主要利用药材与溶媒两相的浓度梯度差，逐级将药材中有效成分扩散至起始浓度相对较低的套提溶液中，从而达到最大限度转移物料中溶解成分的目的[6-9]。
本研究对已提取过挥发油的当归药渣采用三罐组动态逆流提取法进行再次提取，有利于增加提取推动力，加快提取速率，减少溶剂用量，减小浓缩能耗，降低生产成本。
同时，对当归药渣的再提取可提高资源利用率。
1 仪器与试药Waters高效液相色谱仪（600泵，2487双波长吸光度检测器，Empower色谱工作站），纯水制备仪（成都唐氏康科技发展有限公司），BP211电子天平（Sartorius塞多利斯科学仪器有限公司），101A-1型干燥箱（上海市实验仪器总厂），DZF-6051型真空干燥箱（上海益恒科技有限公司），B型玻璃仪器气流烘干器（英峪仪器厂），RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），KQ-250型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）。
阿魏酸对照品（中国食品药品检定研究院，批号11773-200613），乙腈和甲醇均为色谱纯，已提取挥发油的当归药材颗粒（粒度10～20目），其他试剂均为分析纯，水为纯水。
2 方法与结果2.1 阿魏酸含量测定2.1.1 对照品溶液的制备取经真空干燥12 h以上的阿魏酸对照品适量，精密称定，置50 mL棕色容量瓶中，用70%甲醇溶解并稀释至刻度，配成0.092 mg/mL的对照品溶液，置0～4 ℃冰箱中贮存，备用。
2.1.2 供试品溶液的制备取当归水提取浸膏粉（过20目筛）约0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇15 mL，超声（250 W，40 kHz）5 min 溶解后定容至25 mL容量瓶中。
用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液，置0～4 ℃冰箱中贮存，备用。
2.1.3 色谱条件色谱柱：Agilent TC-C18（4.6 mm×250 mm，0.45 μm）；预柱：ZORBAX SB-C18（4.6 mm×12.5 mm）；流动相：乙腈-0.085%磷酸（17∶83）；流速：1.0 mL/min；检测波长：316 nm；柱温：35 ℃；进样量：20 μL。
此色谱条件下，阿魏酸可与当归其他水溶性组分达到较好分离，且峰形较好。
以阿魏酸计理论塔板数N>1500[1]。
2.2 三罐组动态逆流提取工艺的优化采用三罐组的模式（见图1）：第1罐的3次提取为第1阶段——梯度形成阶段，即提取3次，每次均加入新溶媒（纯水），得到提取液A1、A2、A3，收集提取液A1；然后开始第2阶段——逆流提取阶段，提取液A2作为第2罐第1次提取的溶媒，得提取液B1并收集；提取液A3作为第2罐第2次提取的溶媒，得提取液B2；提取液B2作为第3罐第1次提取的溶媒，得提取液C1并收集；依次循环提取。
每罐的第3次提取均加入纯溶媒（纯水）。
采用纯水为溶剂，每罐称取当归药材500 g，按图1的动态逆流提取模式进行提取。
因素水平设置见表1。
采用全面试验，以阿魏酸含量为检测指标，安排及结果见表2。
经全面试验研究可知，提取时间和加水量对当归药材的提取效率均有明显影响。
从表2可直观看出，当单次提取时间为20 min、总加水量为10倍时，所提取出的药液中阿魏酸含量最高。
故最终确定提取工艺单次提取时间为20 min，总加水量为10倍。
2.3 验证试验按最优工艺条件提取3份当归提油药渣各500 g，考察工艺的稳定性，试验结果见表3。
可见，优化提取工艺所得阿魏酸含量高于工艺筛选中的任一组，且结果比较接近，表明工艺基本稳定。
2.4 水提取药渣中残留阿魏酸的测定取“2.3”项提取后的药渣3份，置热风循环烘箱中65 ℃干燥至含水量6%以下。
采用药典方法，取各干燥药渣，加70%甲醇回流30 min并定容至20 mL容量瓶中，用0.45 μm微孔滤膜过滤，取续滤液测定[1]，见表4。
3 讨论当归药材主要含挥发油和水溶性成分，由于这2类成分的极性相差较大，无法做到同时高效提取，使以当归为原料的新产品开发受到影响。
鉴于目前中药制药企业已实现了当归挥发油的超临界高效萃取，因此，本研究以已提取过挥发油的当归药渣为原料，进一步对其水提工艺进行研究。
在提取工艺条件的筛选中，评价指标的选择很重要。
阿魏酸作为当归水溶性部位的主要有效成分，与其他水溶性小分子成分烟酸、尿嘧啶、腺嘌呤等的溶解性相似，均可溶于热水中。
有文献表明，在经超临界萃取挥发油后的当归药渣中仍有大部分阿魏酸未被提取[10]。
故本研究选择阿魏酸作为工艺评价指标，不但可以考察阿魏酸的提取情况，在一定程度上还可反映当归其他水溶性小分子成分的提取情况。
可见，用阿魏酸作为评价指标所得水提取工艺条件比较可靠。
将本工艺水提后的当归药渣干燥后，再用药典方法测定剩余的阿魏酸发现，药渣中残留阿魏酸不足0.01%，表明阿魏酸已基本提取完全。
药材粒度的减小有利于缩短提取时间和提高提取率，有文献表明超临界萃取当归挥发油的时药材粒度应不大于10目[11]。
但药材粒度的进一步减小会导致水提取物中杂质增多、固液分离困难等问题。
本研究所用药材为工业提取挥发油后的当归药渣，其粒度为10～20目，因此，在工艺优化时不再考察药材粒度对提取效果的影响。
在逆流提取过程中，提取罐内维持微沸状态可使药材在溶媒中有一定幅度的翻滚，达到搅拌提取液的作用，有利于加快有效成分的溶出速率。
本研究采用罐内提取液微沸状态下的温度为最佳，因此，在工艺优化时不再考察提取温度对提取效果的影响。
本研究通过三罐组动态逆流提取技术对已提取挥发油的当归药材颗粒进行提取，所得工艺的总提取时间只有60 min，溶剂总用量仅为药材质量的10倍，与普通单罐水回流提取相比，不仅提取时间短，而且溶剂的循环套用使总用量减少。
该工艺在保证提取率的前提下，可有效提高生产效率、减少提取及浓缩环节的能量损耗，有利于工业化生产的实施。
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