大鼠总胆固醇(TC)ELISA试剂盒说明书
总胆固醇测定试剂盒说明书
总胆固醇（total cholesterol，TC）含量测定试剂盒说明书分光光度法50管/48样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：TC包括游离胆固醇和胆固醇酯。
TC是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。
测定原理：利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；最后利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在500nm有特征吸收峰，其颜色深浅与TC含量成正比。
自备仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。
试剂组成和配制：试剂一：异丙醇50mL（自备）。
试剂二：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂四：液体100μL×1瓶，4℃保存TC标准品：液体1mL×1支，0.5μmol/mL，4℃保存。
TC的提取：1、组织中TC的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，即TC待测液。
2、细胞、细菌中TC的提取：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），即TC待测液。
3、血清（浆）等样品：直接测定。
测定操作：1. 分光光度计预热30 min，调节波长到500 nm，蒸馏水调零。
2. TC工作液的配制：临用前，吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，TC工作液置于37℃水浴10min。
用不完的工作液4℃保存一周。
3. 标准管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC标准液和900μL TC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A标准管。
总胆固醇检测试剂盒(COD-PAP 双试剂比色法)说明书
主波长/次波长 反应类型 反应方向
500/600nm 终点法
升反应(+)
计算公式：
血清、血浆等液体样本(空白调零)： FC(mmol/L)=A 测定/A 标准×5
血清、血浆等液体样本(全自动生化分析仪)：
FC(mmol/L)=(A 测定-A 空白)/(A 标准-A 空白)×5 组织样本(空白调零)：
V1=细胞样本取样量（ml）
V2=样本匀浆液总体积（ml）
参考区间： 健康成年人理想范围：<5.2mmol/L(<200mg/dl)
边缘升高：<5.23~5.69mmol/L(201~219mg/dl)
升高：≥5.72mmol/L(≥220mg/dl)
备注：TC 标准(5mmol/L)=442.48mg/dl
产品组成：
名称
规格
保存条件
总胆固醇(TC)检测试剂盒(COD-PAP 双试剂比色法)
100T
4℃
试剂(A):
Good'sBuffer
Good's 溶液
显色剂
2×25ml
4℃
活性剂、稳定剂
试剂(B):
胆固醇氧化酶
COD-POD 溶液 4-氨基安替比林
2×25ml
-20℃避光
CEH、POD
临用前，按 A：B=1：1 混合，即为 COD-PAP 工作液，4℃保存。
FC(mmol/g)=A 测定/A 标准×5×V2/(m×1000) 组织样本(全自动生化分析仪)：
FC(mmol/g)=(A 测定-A 空白)/(A 标准-A 空白)×5×V/(m×1000) 细胞样本(空白调零)：
FC(mmol/L)=A 测定/A 标准×5×V2/V1
血胆固醇实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的本次实验旨在通过血液检测，了解受试者的血胆固醇水平，分析其胆固醇组成，并探讨血胆固醇水平与个体健康状况之间的关系。
二、实验原理胆固醇是人体内一种重要的脂质，分为高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）两种。
HDL-C被称作“好胆固醇”，对心血管有保护作用；而LDL-C被称作“坏胆固醇”，长期偏高会增加心血管疾病的风险。
本次实验采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定受试者的血胆固醇水平。
三、实验材料1. 试剂：胆固醇测定试剂盒（ELISA法）、标准品、酶联反应板、洗涤液、底物、终止液、显色剂等。
2. 仪器：酶标仪、移液器、微量加样器、振荡器等。
3. 样品：受试者空腹静脉血。
四、实验方法1. 样品处理：将受试者空腹静脉血采集后，按照试剂盒说明书要求，分离血清。
2. 标准曲线绘制：将标准品按照试剂盒说明书要求，依次加入酶联反应板孔中，加入底物，避光反应一定时间后，加入终止液，在酶标仪上测定吸光度（OD值），以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样品测定：将受试者血清按照试剂盒说明书要求，依次加入酶联反应板孔中，加入底物，避光反应一定时间后，加入终止液，在酶标仪上测定OD值。
4. 结果计算：根据标准曲线，计算受试者的血胆固醇水平。
五、实验结果1. 标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线，线性回归方程为：Y=0.065X-0.013，相关系数R²=0.998。
2. 受试者血胆固醇水平：受试者A的血胆固醇水平为5.2mmol/L，其中HDL-C为1.5mmol/L，LDL-C为3.7mmol/L；受试者B的血胆固醇水平为6.8mmol/L，其中HDL-C为1.8mmol/L，LDL-C为5.0mmol/L。
六、分析与讨论1. 实验结果显示，受试者A的血胆固醇水平为5.2mmol/L，属于正常范围；受试者B的血胆固醇水平为6.8mmol/L，属于偏高范围。
红曲对高脂大鼠降脂作用的实验研究
1 材料与方法 1.1 样品 红曲粉由杭州双马科技股份有限公司提供，洛伐 他汀含量：0.6%。用无菌水配制成相应浓度，混匀供试。 1.2 仪器与试剂 BECKMANAU480生化分析仪、离心机、 T1000电子天平BS2202S电子天平；甘油三脂（TG）、总胆固 醇（TC）试剂盒（中生北控生物科技有限公司）。 1.3 方法 选取健康繁殖的SPF级雄性SD大鼠，参照“国食
明显（χ2=4.007, P=0.042）。
3 讨论 膝 髋 关节置 换 手术进 行前，需 要进 行 适 当的麻 醉 处
理，其中麻醉的浓度非常重要，不仅会直接影响到最终的治 疗效果，还会对术后不良反应的发生率起到重要影响[6]。
本文选取我院收治的膝髋关节置换术104例老年患者 作为本次的研究对象，按照罗哌卡因麻醉浓度的不同均分 为两组，对照 组 老 年患者 实 行 0. 5 0%罗哌卡因，观 察 组 患 者 实 行 0. 2 5%罗哌卡因。结果 表明：观 察 组 老 年患者不论 是运动阻滞起效用时和运动阻滞恢复用时均少于对照组 患者，两组比较均差异明显（P<0.05）；观察组老年患者不 良反应发生率为1.92%，远低于对照组的11.54%，组间比较 χ2=4.007，P=0.042，差异显著。
[4] 贾长新, 王青, 潘黎晓, 等. 右美托咪啶联合罗哌卡因硬膜外注射在 膝关节置换手术中的应用[J]. 青岛大学医学院学报, 2017(1): 94-97.
[5] 杨同文, 廖春英, 王强. 罗哌卡因复合舒芬太尼蛛网膜下腔麻醉 在高龄患者髋关节置换术中的应用[J]. 临床和实验医学杂志, 2018, 17(8): 887-890.
4.886 0.003
（min） 106.53±10.42 74.84±6.18
211061048_丹参饮对高脂血症模型大鼠血小板生理特性和功能的影响机制
省博士后基金资助项目（No.LBH-Z20195）；黑龙江省中医药科研项目
（No. ZHY2020-084）；国 家 中 医 药 考 试 2022 年 度 科 研 课 题（No.
TC2022021）
＊第一作者 高级实验师。研究方向：方剂药理学与药学研究。Email：
中图分类号
DOI
摘
R965
文献标志码
A
文章编号 1001-0408（2023）07-0790-06
10.6039/j.issn.1001-0408.2023.07.05
要 目的 基于血小板膜糖蛋白 4（CD36）/磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）/蛋白激酶 B（Akt）信号通路探讨丹参饮对高脂血症模型
physiological characteristics and function-related factors [von
Willebrand factor（vWF），fibronectin（Fn），phospholipase A2
中国药房
China Pharmacy 2023 Vol. 34 No. 7
（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）]含量，全血黏度、血浆黏度和血浆中纤维蛋白原（FIB）含量，血小板相关参数[血小板计
数（PLT）、血小板分布宽度（PDW）和血小板平均体积（MPV）]，血小板生理特性和功能相关因子[血管性血友病因子（vWF）、纤维
连接蛋白（Fn）、磷脂酶 A2（PLA2）、血栓素 B2（TXB2）、6-酮-前列腺素 F1α（6-keto-PGF1α）、血栓素 A2（TXA2）、前列腺素（PGI2）、
蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）；HDL-C 含量和 6-keto-PGF1α、PGI2、t-PA 水平均显著降低（P＜0.05）。经丹参饮干预后，上述
卵磷脂软胶囊对大鼠血脂功能的影响
卵磷脂软胶囊对大鼠血脂功能的影响摘要：目的：探讨卵磷脂软胶囊对大鼠血脂功能的影响。
方法：经口给予模型大鼠每日0.20g/kgBW、0.40g/kgBW、1.20g/kgBW不同剂量的卵磷脂软胶囊30d 后，测定各组大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。
结果：与模型组比较，该受试物在0.40g/kgBW组能降低高血脂模型大鼠血清中总胆固醇含量（P＜0.05）；在1.20g/kgBW组能降低高血脂模型大鼠血清中总胆固醇含量（P＜0.05）、能降低血清甘油三酯含量（P＜0.01）、能降低血清低密度脂蛋白胆固醇的含量（P＜0.01），受试物对各剂量大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇无影响，对大鼠体重增长无不良影响。
结论：卵磷脂软胶囊具有辅助降血脂功能。
卵磷脂是1844年法国人高布利第一次从蛋黄中分离出含有氯及磷的脂肪混合物，并以希腊文命名为Lecithoes即卵磷脂。
20世纪30年代又在大豆油脂加工后的副产物中发现了大豆卵磷脂。
卵磷脂具有乳化性、分散性，是一种纯天然的表面活性剂，在食品、化工、医药等行业具有广泛的用途【1】。
随着我国居民膳食结构的改变，动物性食物摄入比例增加，植物性食物的摄入量相对减少，导致高血脂症患病人数不断上升，高脂血症是诱发动脉粥样硬化及多种心脑血管疾病的重要危险因素，因此，合理有效的预防、控制高脂血症有重要意义。
本研究通过大豆卵磷脂对大鼠血脂指标的影响，为有效预防高血脂症提供科学依据，并对大豆卵磷脂的开发利用提供理论依据。
1.材料与方法1.1样品卵磷脂软胶囊：主要原料大豆卵磷脂、大豆油（其中大豆卵磷脂占比25%），规格1.2g/粒。
人体推荐量每日4.8g/60kgBW。
1.2实验动物选用中国食品药品检定研究院[许可证号：SCXK-(京）2009-0017]繁殖的健康SPF级雄性大鼠共60只。
高脂饲料和维持饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供。
1.3剂量实验设人体推荐量的2.5倍、5倍、15倍，即每日0.20g/kgBW、0.40g/kgBW、1.20g/kgBW为低、中、高剂量组。
大豆卵磷脂软胶囊辅助降血脂动物实验研究
大豆卵磷脂软胶囊辅助降血脂动物实验研究摘要：目的探讨大豆卵磷脂软胶囊对高血脂大鼠的降血脂作用。
方法：健康SPF雄性SD大鼠共60只，分为5组，空白对照组给予基础饲料，其余各组给予高脂饲料喂养，13天后按照总胆固醇水平分组为模型对照组和低、中、高三个剂量组。
各剂量组给予不同剂量的大豆卵磷脂软胶囊内容物，模型对照组和空白组给予等体积的玉米油，31天后观察大鼠体重及血脂水平的变化。
结果：模型对照组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、体重显著高于空白对照组，差异均有统计学差异（P＜0.05），模型成立。
与模型对照组比较，高剂量给药组血清总胆固醇、血清甘油三酯含量和血清低密度脂蛋白含量显著降低（P＜0.05），各剂量血清高密度脂蛋白含量无显著性差异（P＞0.05）。
结论：大豆卵磷脂软胶囊通过降低血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）达到辅助降血脂的作用。
1引言高血脂症是一种常见的疾病，系人体脂代谢失常所致。
主要指血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平过高或高密度脂蛋白水平过低。
高血脂症早期没有明显的临床症状。
它对身体的损害是隐匿性、渐行性的，而且是全身性的。
高血脂可以加速动脉粥样硬化。
一旦动脉堵塞，就会引起很多疾病。
如心脑血管疾病、肾脏疾病、肝脏疾病等。
心脑血管疾病是中老年人致死的主要原因，是威胁人类健康的头号杀手。
据世界卫生组织统计每年大约有1700万人死于这种慢性疾病，占全球总死亡人数的30%左右。
影响人体血脂水平的因素主要有遗传因素和环境因素。
遗传因素的影响是有限的，主要是环境因素的影响。
影响人体血脂水平的环境因素主要有：（1）高胆固醇、高饱和脂肪酸饮食。
当人体进食大量的饱和脂肪酸及高胆固醇，会使血液中胆固醇和甘油三酯的含量过高，形成高血脂症。
（2）高糖饮食。
进食糖量的比例过高，会引起血糖升高，刺激胰岛素分泌增加，出现高胰岛素血症。
总胆固醇试剂盒使用说明书
波长：500nm (480~520nm)
反映温度：37℃
比色杯光径：1cm 取一定量 R2(参看 R1 瓶签)复溶 1 瓶 R1，溶解后即为工作液。
空白管
校准管
样品管
工作液
1.0ml
1.0ml
1.0ml
ห้องสมุดไป่ตู้
蒸馏水
10ul
——
——
校准
——
10ul
——
样品
——
——
10ul
分别混合均匀，在 37℃保温 6 分钟，以试剂空白管校零，度 A校准 及 A样品 。
计算：
总胆固醇浓度= A样品 ×校准浓度（mmol/L 或 mg/dl） A校准
参考值：
中老年人合适水平＜5.17mmol/L(200mg/dl) 临界值 3.17mmol/L~6。47mmol/L(200mg/dl~250mg/dl) 高胆固醇血症＞6.47mmol/L(250mg/dl) 各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考值。 线性上限：` 总胆固醇浓度可达 12.93mmol/L(500mg/dl) 主要性能指标： 1. 试剂空白吸光度：在 500nm(480~520nm)处，A≤0.1。 2. 准确性：相对偏差不超过±5%。 3. 瓶间差：变异系数（CV%）≤3% 4. 批间差：随机抽取三批试剂盒的批间差≤4%。 5. 线性误差：在 1.13mmol/L~11.29mmol/L 范围内不超过±10%。 注意事项： 1. 若样品胆固醇含量过高，可用生理盐水稀释样品，重新测定。结果乘以稀释倍数。 2. 本产品仅用于体外诊断，内含叠氨钠，应避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。 3. 本产品应在 2~8℃条件下贮存。 4. 若试剂在全自动生化分析仪上使用，可参照本公司提供的相应型号仪器的参数，并在本
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大鼠总胆固醇（TC）酶联免疫分析（ELISA）
试剂盒使用说明书
厦门慧嘉生物科技有限公司
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中总胆固醇（TC）的含量。
实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠总胆固醇（TC）水平。
用纯化的大鼠总胆固醇（TC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入总胆固醇（TC），再与HRP标记的总胆固醇（TC）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的总胆固醇（TC）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠总胆固醇（TC）浓度。
样本处理及要求：
1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上
清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心
20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程
中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/
分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备
用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上
进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标
准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为6nmol/L ，4nmol/L，2nmol/L，1nmol/L，0.5nmol/L）。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此
重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色
15分钟.
10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
注意事项：
1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高（样本OD值
大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．底物请避光保存。
7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9．本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：
以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，
在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释
倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值
代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释
倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒性能：
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围：
0.2 nmol/L –8nmol/L
保存条件及有效期：
1.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月。