猪伪狂犬病

2 流行病学
PRV 是动物感染种类较多和致病性较强的病毒之一，目前已发现的易感动物多 达 35 种，包括猪、牛、羊、犬、猫、兔、鼠、水貂、狐等。实验动物中家兔、豚鼠、 小鼠均易感，并以家兔最敏感。人有时也可感染该病。因此，该病属于典型且很难防
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治的自然疾病之一。 猪是 PRV 的主要储存宿主和传染源，也是伪狂犬病的重点防治对象。各种年龄
gE 基因是 PRV 的主要毒力基因之一。gE 蛋白是迄今已知所有 PRV 野毒毒株都 表达的一种蛋白，可影响病毒在细胞间扩散，并帮助 PRV 通过突触相连的神经元进 入中枢神经系，并在其中转运扩散[1]。
gI 蛋白不仅在病毒侵染过程中促进病毒在神经系统中复制，而且还能促进或协同 其他糖蛋白在毒力、神经嗜性等方面发挥作用[2]，并对病毒体外培养存在一定影响[4]。 gI 蛋白虽对中和抗体和细胞毒性 T 细胞不是靶抗原，但对完全免疫保护的诱导却是 必需的[2]。
4 临床症状
本病冬春多发。潜伏期 3～6 d，有时 10 d。发病常以 15 日龄内小猪为主，发病 率最高可达 100%，死亡率超过 85%。断奶仔猪发病率有时可达 40％，死亡率超过 20％。育成猪发病一般比较轻微，死亡率不超过 2%。成年猪多呈一过性或亚临床感 染，很少死亡。
15 日龄以内仔猪发病，多呈最急性型经过。病程一般不超过 72h，发病后第 3～ 7d 为死亡高峰期。最早可见小出生后第 2d 即开始发病，病猪体温升高（41℃左右）， 稽留热。唾液分泌增多。呕吐或腹泻。眼球震颤，眼睑水肿，眼眶发红，闭目昏睡。 股部有时可见粟粒大小紫色斑点。静卧时咬肌、臀肌间歇性痉挛。共济失调，后肢震 颤，角弓反张，并常伴有骚痒症状（如图 2）。发作时四肢泳动，如老鼠叫声般“叽 叽”尖叫。最后全身麻痹，衰竭死亡。极少小猪耐过，耐过者多成为僵猪。
猪伪狂犬病
1 病原学 2 流行病学 3 致病机理 4 临床症状 5 病理变化 6 流行现状 7 诊断和检测 8 综合防治 9 综合防治重点难点解析 参考文献
伪狂犬病（Pseudorabies, PR），是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus, PRV）感染 所致的一种急性接触性传染病。
病毒经呼吸道或消化道侵入猪体后，首先在口腔、鼻腔黏膜完成第一轮复制（也 可直接进入鼻咽部感觉神经末梢并在其中复制），构成原发感染灶[9]。第一轮复制完 成后，病毒数量急剧增加，经嗅神经、三叉神经和吞咽神经的神经鞘淋巴快速到达（最 快于 24 小时之内）中枢神经脊髓和脑，并通过血液循环到达身体各个部位。但在血 液中呈间歇性出现，滴度较低[10]。
病毒对外界环境的抵抗力较强，但对各种化学消毒剂均敏感。在污染的猪舍中可 以存活一个月以上，在肉中可存活 5 周以上。55℃时，病毒能够存活 50min；80℃时， 病毒能够存活 3min，100℃才能将病毒瞬间杀灭。在低温潮湿环境，pH 6～8 时病毒
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能稳定存活；在干燥条件下，特别是有阳光直射，病毒很快失活。
PRV 可突破胎盘屏障，通过带毒母猪垂直传播给胎儿，引起流产和死胎。且通 过胎盘传递给胎儿时，由于母猪免疫球蛋白不能通过胎盘屏障，所以病毒对胎儿的感 染，多是致命的。PRV 还可通过乳汁传播，泌乳母猪感染后 1 周左右乳中即有病毒 出现，哺乳小猪可因食入母猪乳汁而感染。
3 致病机理
极少量的病毒感染，即可引起猪血清阳转，甚至成为隐性带毒猪，但不引起猪群 出现任何临床症状[8]。
猪均易感，幼龄猪可以自然排毒、散毒，耐过后呈隐性感染的成年猪及种猪，是该病 的主要传染源。猪场中的猫和鼠类，也是 PRV 的自然宿主，容易成为该病的传染源。
主要感染途径为消化道和呼吸道，亦可通过皮肤粘膜和伤口感染。病毒可通过直 接接触传播，也可通过间接媒介传播。传播媒介包括被病毒污染过的工作人员，饲料， 器材器具，病猪分泌物、公猪精液等，吸血昆虫也是可能的传播媒介之一。带有病毒 的空气飞沫，随风传到 9 km 或更远的地方，仍可使健康猪群受到感染。
gL 蛋白是 PRV 的一种微量糖蛋白，其对病毒粒子侵入细胞和在细胞间的传递是 必需的[2]。
gC, gE, gI, gL, gH 这五种蛋白之间，存在相互依存或协同作用关系。gC 功能的发 挥，受 gI 的影响[2]。gE 与 gI 以非共价键结合成 gE/gI 复合物的形式存在，这种复合 物是病毒的功能成分，并与 gL 相互作用介导病毒的释放[3]。gL 与 gH 须彼此互相依 赖存在[2]。gC, gD, gI 对病毒的毒力存在协同作用。gC 或 gI 基因单独缺失时，病毒毒 力有所下降，但 gC, gI 双基因缺失的病毒毒力几乎完全丧失；gI 基因单独缺失时，病 毒仍可侵染一、二级神经元，但当 gD, gI 基因同时缺失时，病毒在初级神经元的复制 受到制约[4]。
TK 基因是 PRV 最主要的毒力基因[5]，也是决定病毒持续感染的重要因素[6]，其 主要功能为催化脱氧胸苷的磷酸化，并在神经细胞等非裂解细胞中维持着病毒复制 [2]。一旦 TK 基因缺失，PRV 对宿主的毒力将完全丧失，或明显降低[4]。
PK 蛋白也与病毒毒力有关，但它是通过增强病毒复制来提高毒力的。它不是中 和抗体和细胞毒性 T 细胞的靶蛋白，但对完全免疫保护的诱导也是必需的[7]。此外， PK 蛋白有利于组织培养中病毒的有效生长，它能在体外对一个主要的病毒磷酸蛋白 进行磷酸化[4]。
实验证实：病毒在皮下注射后 20h 左右已经扩散到各个组织器官，其中扁桃体最 先达到峰值。随着时间推移，在体内逐渐呈广泛分布，尤以淋巴结、心脏、肾脏、肝 脏和脾脏为最明显，这种病毒高含量状态一直持续到 70h[11]。
病毒侵入细胞的过程，包括吸附宿主细胞，与宿主细胞胞浆膜融合，核衣壳直接 进入胞浆等几个步骤。首先，依靠 gC, gD, gE 等蛋白的帮助，病毒吸附在目的细胞上 [10]。这一过程中，病毒侵入中央神经系统的二、三级神经元，必须依靠 gE 蛋白的协 助。缺失 gE 的 PRV 虽可通过嗅神经和三叉神经的传递引起周围组织和一级神经元感 染，但不能引起中央神经系统的二、三级神经元感染[12]。之后，在 gB, gD, gH, 可能 还有 gL 的参与下，病毒与细胞胞浆膜融合。在此阶段，缺少 gB, gD, gH, gL 中的任 何一种蛋白的病毒粒子，都无法有效侵入宿主细胞[12]。病毒囊膜与细胞胞浆膜融合之 后，核衣壳开始释放，并快速（5 分钟内）沿微管转移至细胞核膜上临近核孔的位置， 核衣壳的一个顶点正对核孔，将病毒 DNA 注入细胞核内[10]。
由于神经节有包膜，抗体不能达到神经节内中和病毒，PRV 的带毒（血清检测 出现野毒抗体阳性）可以长期存在[8]。正常情况下，感染过 PRV 的病猪，基本都终 生带毒。但当这类猪受外界应激免疫力减弱时，神经节内的病毒又会不断复制，潜伏 状态的病毒可转化为具有感染力的病毒，引起新的感染。如果不淘汰潜伏感染猪，猪 群的隐形感染很难根除。
图 1在猪肾细胞、兔肾细胞、牛睾丸细胞、鸡胚成纤维等原代细 胞以及 PK-15, Vero, BHK-21 等传代细胞中都能很好地增殖，并产生明显的细胞病变 和核内嗜酸性包涵体，但以兔肾和猪肾细胞最为敏感。
PRV 只有一种血清型，但不同毒株在毒力和生物学特性等方面存在差异。基因 组为双链线状 DNA，分子质量约 9000ku，其中，gG, gC 两种基因的含量高达 74%。 核苷酸长度 180 kb，由长独特区（Unique long region, UL）、短独特区（Unique short region, US）、内部倒转重复序列（Internal repeat, IR）以及位于 US 两侧的末端重复序 列（Terminal repeat, TR）组成。UL 分子量约 65×103 kD，US 分子量约 6×103 kD。UL 区段的倒转排列总会引起原右端序列的部分缺失，缺失片段 0.8 kb 到 2.3 kb 不等[1]。
1 病原学
PRV 属于疱疹病毒科甲型疱疹病毒亚科，猪疱疹病毒Ⅰ型。完整病毒粒子为圆 形，直径 150～180nm，核衣壳直径为 105～110nm。病毒有囊膜，囊膜表面有长约 8～ 10 nm 呈放射状排列的纤突（如图 1）。病毒囊膜与感染的发生有密切关系，没有囊膜 的裸露衣壳虽同样具有感染性，但其感染力较带囊膜的病毒低近 80%。
PRV 编码的基因，可分为三类：第一类编码与病毒复制有关的蛋白质；第二类 编码结构蛋白；第三类为一组自选基因。超过一半的基因编码蛋白不是病毒在细胞中 增殖（复制）中所必需[1]。共含有 72 个阅读框（ORF），编码 70 种蛋白。目前已被 发现的编码蛋白，包括：gB, gC, gD, gE, gG, gH, gI, gK, gL, gM, gN 等 11 种糖蛋白（除 ｇG 是外分泌蛋白之外，其他 10 种为结构蛋白，均位于病毒囊膜上）以及一些其它 蛋白和酶类，如蛋白激酶（PK）、11KD 蛋白、28KD 蛋白、立即早期蛋白（IE）、Rsp40 蛋白、胸腺嘧啶脱氧核苷激酶（TK）、核苷酸还原酶（RR）和早期蛋白 O（EPO）等。 病毒复制必需蛋白为 gB, gD, gH, gK, gL 五种糖蛋白和 11KD, IE180g 两种非糖蛋白[2]， 其他蛋白非病毒复制所必需，但对病毒在自然宿主中生长和传播有重要作用[1]。
近十多年来，随着免疫效果确切的伪狂犬病 gE 基因缺失苗在国内免疫的逐渐普 及，伪狂犬病对国内养猪产业的威胁，正在逐步被消除。典型的伪狂犬病症状和病变， 临床解剖已经非常鲜见。在很多长期坚持选用进口伪狂犬病 gE 基因缺失苗免疫的猪 场，都已经成功地实现了伪狂犬病野毒的净化。
然而，最近几年却不断有研究宣称：伪狂犬病在我国有扩散之势，一些猪场伪狂 犬病野毒抗体阳性率反转上升，一些猪场因伪狂犬病感染而发病，并给生产造成重大 损失。在免疫效果确切的伪狂犬病 gE 基因缺失苗免疫越来越普及的今天，这种情况 的出现，有违常理！实际情况究竟如何，值得深究！
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gD 蛋白是成熟病毒粒子囊膜表面的主要糖蛋白之一[3]，是 PRV 的另一种重要中 和抗原，其诱导产生的中和抗体是保护性抗体的主要成分之一，与病毒进入靶细胞有 关[4]，参与病毒的穿透过程[3]，但非病毒细胞间传播所必需[4]。