溶菌酶的研究进展
溶菌酶的实验报告
溶菌酶的实验报告实验报告：溶菌酶的活性和特性1. 引言溶菌酶是一种酶类蛋白质，广泛存在于细菌、真菌和某些病毒中。
它们能够降解细菌细胞壁的组分，导致细菌破裂和死亡。
溶菌酶在医疗、食品工业以及科学研究领域广泛应用。
本实验旨在测定溶菌酶的活性，并研究其特性。
2. 材料与方法2.1 实验材料- 大肠杆菌（或其他细菌菌株）- 溶菌酶溶液- 反应液：含有溶菌酶的缓冲液- 应答物：含有细菌菌株的琼脂平板2.2 实验步骤1. 在琼脂平板上涂布一层薄膜状的细菌液体（大肠杆菌）。
2. 在涂布的细菌表面滴加一定量的溶菌酶溶液。
3. 将琼脂平板在恒温孵化箱中孵育一段时间（通常为24小时）。
4. 检查平板上是否有清晰的细菌溶解区域（透明区域），观察细菌溶解的程度。
3. 结果与讨论在实验过程中，我们发现在涂布完细菌后，经过一段时间的孵育后，在加入溶菌酶的区域产生了明显的细菌溶解区域（透明区域）。
这表明溶菌酶对细菌产生了溶解作用。
溶菌酶的活性可以通过以下几个方面进行评估：3.1 溶菌酶单位（U）溶菌酶单位（U）的定义是在标准条件下，使得溶菌酶在30分钟内使细菌的可溶菌酶量增加1倍所需要的溶菌酶量。
通过测定单位时间内细菌总数量的变化，可以计算出溶菌酶的活性。
活性（U/ml）=单位时间内可溶菌酶总量/单位时间内总分析体积3.2 温度和pH值的影响我们可以通过在不同温度条件下进行实验，或者在不同pH值的溶液中测量溶菌酶活性，来研究温度和pH的影响。
溶菌酶活性在不同温度下可能表现出不同的变化趋势。
通常情况下，随着温度的升高，溶菌酶活性增加，但过高的温度可能导致其变性。
我们可以通过测量不同温度下的溶菌酶活性来确定最适温度。
溶菌酶活性也受pH值的影响。
溶菌酶通常在中性或弱碱性条件下表现出最佳活性。
在酸性环境下，酸性基团可能与酶分子中的氨基酸残基相互作用，从而降低酶的活性。
我们可以通过在不同pH值的缓冲液中测量溶菌酶活性，找到最适宜的pH值。
溶菌酶的研究进展
’
间 的 差 异 与 联 系 ， 了 解 生 物 间 的 遗 传 与 进 化 。 菌 酶 也 有 抑 来 溶 制 恶 性 组 织 生 长 的作 用 。 此 ， 菌 酶 对 机 体 免 疫 系统 作 用 及 因 溶
破 坏 。 和 动 物 细 胞 无 细 胞 壁 结 构 亦 无 肽 聚 糖 ， 溶 菌 酶 对 人 人 故
１ 溶 菌 酶 的分 型 及 理 化 特 性
１１ ． 溶 茵 酶 的 分 型
体 细 胞 无 毒 性 作 用 。 菌 酶 存 在 于 自 然 界 动 物 、 物 和 微 生 物 溶 植
溶 菌 酶 是 由 弗 莱 明 在 １２ ９ ２年 发 现 的『 它 是 一 种 有 效 的 ｌ １ 。 抗 菌 剂 ， 称 为 １ …３ Ｎ 溶 菌 酶 ， 称 粘 肽 Ｎ 乙 酰 基 胞 壁 酰 全 ， １ ４ 又 一 水 解 酶 。 它 能 切 断 肽 聚 糖 中 Ｎ一 酰 葡 萄 糖 胺 和 Ｎ 乙 酰 胞 壁 乙 一
在 的 使 用 价 值 。 由 于 来 源 有 限 ， 用 基 因 工 程 技 术 从 细 菌 或 酵 母 中 生 产 人 溶 菌 酶 实 现 产 业 化 ， 解 决 其 供 需 矛 盾 的 有 利 是
效 途径 。有 关溶 菌酶抗 菌功 能 以外 的其 它未知 生物 学作用 ， 是 当前研 究的 热点 。 也
ｍａ ｒ ｐ ａ ｅ ｃ ｌ ｎ ｏ ｐ ｃ ｌ ｒ ｔ ａ ｅ ｅ ｄ ｔ ｅ ｍｅ ｈ ｎ ｓ ｃ ｏ ｈ ｇ ｅｌ ａ ｄ ｎ ｎ－ ｅ ｕ ｉ ａ ｈ ｔ ｄ ｆ ｎ ｓ ｈ ｃ ａ ｉ ｍ． Ｈｕ ｎ ｌ ｓ ｚ ｍｅ ａ ｐ ｔ ｎ ｉ ｕ ｅ ａ ｕ ｏ ｃ ｉ ｉ ． ｍａ ｙ ｏ ｙ ｈ ｓ ｏ ｅ ｔ ｌ ａ ｓ ｖ ｅ ｎ ｌ ｃ ｌ ｎ Ｂｅ ａ ｓ ｓ ｕ ｃ ｌ ｔ ｄ ｃ ｕ ｅ ｏ ｒ ｅ ｉ ｅ ， ｕ ｉ ｚ ｅ ｅ ｎ ｉ ｅ ｒ ｇ ｐ ｏ ｕ ｅ ｆｏ ｍｉ ｔ ｉｅ ｇ ｎ ｅ ｇｎ ｅ ｎ ｒ ｄ ｃ ｒ ｍ ｂ ｃ ｅ ｕ ｌ ｉ ａ ｔ ｒ ｍ ｏ ｙ ａ ｔ ｆ ｒ ｅ ｉｅ ｎ ｕ ｔ ａｉ ａｉ ｎ ｉ ｒ ｅ ｓ ｏ ｒ ａ ｚ ｉ ｄ ｓｒｌ ｚ ｔ ， ｌ ｉ ｏ Ｉ ｓ ｔ ｉ
溶菌酶对仔猪腹泻预防作用的研究进展
ｖ ｉ ｄ ｅ ａ ｂ ａ ｓ ｉ ｃ ｔ ｈ ｅ ｏ ｒ ｙ ｏｒ ｆ ｔ ｈ ｅ ｕ ｎ ｄ ｅ ｒ ｓ ｔ ａ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ ｕ ｓ ｅ ｏ ｆ ｌ ｙ ｓ ｏ ｚ ｙ ｍｅ ｉ ｎ ｐ ｉ ｇ ｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ．
限制 使 用 饲 用抗 生 素 ， 因此 开 发新 的 、 安 全 高 效 的饲 用抗 生 素替 代 品 已迫 在 眉 睫 。例 如 早 已应
用 于食 品及 医疗 行 业 中 的溶菌 酶 是 无 毒 、 无害 、
等优 点 。作为 畜禽 饲料 添加 剂酶 类 ， 应 在 饲料加 工及 通过 胃内酸 性 环 境 时仍 能 保 持 较 高 的 酶 活 力， 溶 菌酶 所 具 有 的耐 热 、 耐 酸 特性 为其 用 作 饲
溶菌酶 （ １ ｙ ｓ ｏ ｚ ｙ ｍ ｅ ） 又称 细胞壁 质酶或 Ｎ一 乙酰 胞 壁质 聚糖 水 解 酶 ， 因其 具 有 溶 菌 作用 ， 故 命 名 为溶 菌酶 。溶 菌酶 具有 较强 的热 稳定 性 、 耐 酸ｌ 生， 便 于储 藏和运 输 。饲用 溶 菌酶 可使 用粗制 品， 生 产成 本低 ， 同时还具 有 添加 量小 、 容 易保存
着养 猪 业 的健 康 发 展 ， 导 致 饲 料报 酬 率 较 低 、 仔 猪 成 活率 下降 、 生 长缓慢 、 生 长发 育停 滞 、 甚 至 死 亡 。哺乳 仔猪 消 化 系 统 和免 疫 系统 发 育 不 够 完
善， 尤其 仔 猪 断奶 后 易发 生 断 奶应 激 综 合 征 ， 肠
选 择性 地溶 解微 生 物细胞 壁 ， 是动 物体 液 和血液 中 的重 要 非特 异性 免疫 因子 ， 参 与机体 多种 免疫 反应 ， 显 著 提 高 动物 免 疫 器 官指 数 ， 提 高 机 体免 疫 力 的功 效 （ 张世 卿等 ， ２ ０ ０ ８ ） Ｊ ， 是 动物 免 疫 防
溶菌酶的研究现状及应用进展综述
溶菌酶的研究现状及应用进展综述
溶菌酶是一种具有溶菌作用的酶类，能够分解细菌细胞壁，从而导致细菌溶解和死亡。
由于其独特的作用机制和广泛的应用前景，溶菌酶的研究受到了广泛关注。
本文将对溶菌酶的研究现状及应用进展进行综述。
其次，溶菌酶的应用进展主要涉及医药、食品、环境等领域。
在医药领域，溶菌酶具有潜在的抗菌活性，可作为替代抗生素的候选物。
研究人员已经通过体外实验和动物实验，证明了溶菌酶对多种细菌感染的治疗效果。
此外，将溶菌酶与其他抗菌药物联合应用，能够提高抗菌效果，显示出协同作用。
在食品领域，由于溶菌酶对致病菌的特异性作用，可作为一种天然的食品防腐剂。
在环境领域，溶菌酶可以用于废水处理，去除细菌和其他微生物，减少对环境和人体的危害。
此外，溶菌酶还在生物技术领域具有潜在应用价值。
溶菌酶可以用于细胞壁的降解，从而释放出目标物质，如蛋白质、核酸等，用于后续的分析和鉴定。
此外，溶菌酶还可以应用于基因工程和基因治疗中，用于特定基因的表达和传递，具有广阔的发展前景。
溶菌酶的提取实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习溶菌酶的提取方法。
2. 掌握溶菌酶的分离纯化技术。
3. 了解溶菌酶的性质及其应用。
二、实验原理溶菌酶是一种广泛存在于生物体内的胞壁质酶，具有水解细菌细胞壁肽聚糖的活性。
本实验通过利用溶菌酶在特定条件下的溶解度差异，对其进行提取、分离和纯化，并对其性质进行初步研究。
三、实验材料1. 鸡蛋2. 醋酸3. 硫酸铵4. 氯化钠5. 磷酸盐缓冲液（pH 7.0）6. 透析袋7. 旋转蒸发仪8. 超速离心机9. 分光光度计10. 紫外-可见光分光光度计四、实验方法1. 溶菌酶粗提取（1）将鸡蛋打破，取蛋清，加入适量的醋酸，搅拌均匀，室温下静置30分钟。
（2）用滤纸过滤混合液，收集滤液。
（3）向滤液中加入硫酸铵，使蛋白质盐析，室温下静置30分钟。
（4）用滤纸过滤沉淀，收集滤液。
2. 溶菌酶分离纯化（1）向滤液中加入适量的氯化钠，使蛋白质复溶，室温下搅拌30分钟。
（2）用透析袋将溶液进行透析，去除小分子物质。
（3）将透析后的溶液进行超速离心，收集沉淀。
（4）向沉淀中加入适量的磷酸盐缓冲液（pH 7.0），使蛋白质复溶。
（5）用旋转蒸发仪将溶液浓缩至一定体积。
3. 溶菌酶性质研究（1）测定溶菌酶的蛋白浓度。
（2）测定溶菌酶的酶活性。
（3）测定溶菌酶的分子量。
五、实验结果与分析1. 溶菌酶粗提取通过实验，成功从鸡蛋清中提取出溶菌酶，得到淡黄色的粗提液。
2. 溶菌酶分离纯化通过盐析、透析和超速离心等步骤，成功将溶菌酶从粗提液中分离纯化，得到淡黄色的纯化液。
3. 溶菌酶性质研究（1）蛋白浓度：根据比色法测定，溶菌酶的蛋白浓度为1.5 mg/mL。
（2）酶活性：根据溶菌酶对革兰氏阳性菌的溶解作用，测定酶活性为100 U/mL。
（3）分子量：根据SDS-PAGE电泳结果，溶菌酶的分子量为14.3 kDa。
六、实验讨论1. 本实验采用鸡蛋清作为溶菌酶的来源，具有良好的可行性和经济性。
2. 在溶菌酶的提取过程中，醋酸和硫酸铵的加入有助于提高溶菌酶的提取率。
溶菌酶研究进展及在畜牧业中的应用
溶菌酶研究进展及在畜牧业中的应用作者：张莹雪来源：《科学与财富》2018年第28期摘要：溶菌酶是一种性质稳定、耐酸耐高温、来源于动植物及微生物的球蛋白，具有抑菌、抗病毒等功能。
通过对溶菌酶进行物理、化学及配伍改进，能够提高溶菌酶的生物学功能，作为一种对人和动物安全的抗菌剂，溶菌酶能够提高饲料利用率，用作饲料防腐剂和杀菌剂，用于饲料中可替代抗生素，治疗畜禽疾病等，应用前景相当广阔。
关键词：溶菌酶；功能；改进；饲料；畜牧业1、溶菌酶的结构及性质溶菌酶是由多种氨基酸残基构成的碱性球蛋白，属于葡萄糖苷酶，其纯品为白色或微黄色结晶体或无定型粉末，无臭、微甜、易溶于水和盐溶液，不溶于丙酮、乙醚，化学性质稳定，干燥室温条件下可长期保存。
目前研究比较透彻的是鸡蛋清溶菌酶和牛胃溶菌酶。
2、溶菌酶的分类（1）动物源溶菌酶：分为C型、G型和I型三种类型。
（2）植物源溶菌酶：目前发现含溶菌酶的植物有近170 种，在木瓜、无花果、胡萝卜、大麦等植物中均能分离出溶菌酶。
（3）微生物源溶菌酶：根据其作用对象主要分为细菌细胞壁溶菌酶和真菌细胞壁溶菌酶。
（4）噬菌体溶菌酶：噬菌体产生的溶菌酶具有特异性，由噬菌体感染、诱导宿主细胞产生，未被感染细胞中不存在。
（5）利用基因工程手段制备的溶菌酶：利用基因重组技术将人溶菌酶基因克隆到原核或者真核生物中进行表达。
3、影响溶菌酶活性的因素溶菌酶的活性受到温度、pH、化学环境等因素影响较大。
溶菌酶遇热很稳定，pH值4～7、100℃处理1min仍保持原酶活性；pH值5.5、50℃加热4h后，酶活性不受影响；在碱性条件下，溶菌酶的热稳定性较差，易变性。
糖和聚烯烃类能增加溶菌酶的热稳定牲。
但是，曾发现具有-COOH和-SH、OH基的多糖对溶菌酶活性有抑制作用。
NaCl对溶菌酶也有抗热变性作用，溶菌酶的活性在低盐浓度时和离子强度密切相关的，在高盐浓度时溶菌酶的活性受到抑制。
除此之外，溶菌酶可和许多物质形成络合物导致其活性丧失。
浅谈溶菌酶的研究进展
期引言英国细菌学家弗莱明最早在人体的唾液、眼泪等分泌物中发现了溶菌酶，因为它能溶解细菌，故称为溶菌酶，它的作用机制是破坏细菌细胞壁肽聚糖层的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1，4糖苷键，使细胞壁破裂，使细菌溶解。
溶菌酶作为安全的抑菌剂已被应用于食品加工、疾病治疗等方面，需求量大，所以利用生物技术大量生产迫在眉睫。
此外，关于“淀粉样纤维”形成基于溶菌酶的研究较为热门，因此本文将从这两方面进行叙述。
1溶菌酶的结构及其与病理学相关的研究溶菌酶是蛋白质，具有高级结构，依靠疏水作用、氢键等次级键折叠形成一定的构象，发挥特殊功能。
目前，人类最了解的溶菌酶是鸡蛋清溶菌酶(HEWL)，它包含一条肽链，129个氨基酸。
4对半胱氨酸残基间形成4个二硫键，具有大量的α螺旋结构。
HEWL在体外一定条件的诱导下可以形成“淀粉样纤维”，研究人员发现PH值较低时，蛋白质逐渐去折叠，随着去折叠蛋白质浓度的增大，蛋白质之间的疏水作用加大，逐渐出现“淀粉样纤维”，具有成核效应。
另外在蛋白质变性剂的存在下，溶菌酶的二级结构发生变化，可能出现“淀粉样纤维”，但是不同浓度的变性剂对“淀粉样纤维”的作用也不同，研究还有待深入。
陕西理工大学白瑜博士利用溶菌酶与朊蛋白结构上的相似性来研究淀粉样纤维的形成机制，为神经退行性疾病的研究带来福音[1]。
溶菌酶是一种小分子碱性蛋白，材料易取，一直被作为一种模型体系，用于研究蛋白质的空间构象、酶动力学及其与分子进化、分子免疫间的关系。
为优化食品加工过程、提高食品质量提供理论指导，并为神经系统等疾病建立了相关蛋白质模型。
目前有研究人员利用溶菌酶为模型研究盐浓度对蛋白质聚集的影响，对人类疾病的研究具有重要意义。
2基因工程载体表达溶菌酶的新进展溶菌酶的用处广泛，但直接从生物体内提纯效率低，所以其基因的重组和表达也成为研究热点。
鸡溶菌酶的外显子及内含子序列已经确定，人的溶菌酶基因也逐渐被解析清楚，为重组表达载体的构建和优化提供契机。
溶菌酶
二、白色链霉菌(S.albus). 最早是1936年Welsch首次分 离到的白色链霉菌(S.albus) G菌株.该菌株能产生十余种
作用于细胞壁的溶解酶。其中研究较多的有32酶和F1 酶，二者均属于N-O-二乙酰胞壁质酶。其他的还有MA 酰胺酶及SA、ML、MR内肽酶。
三、灰色链霉菌（S. griseus) 研究较多的有S-35菌株、
酶，用于制造和提取菌体内活性物质如核酸、酶及活性多肽等。 M1 、M2 ( EC 3. 2. 1. 17) 、N-乙酰胞壁酰-L-丙氨酸酰胺酶 (种主EC要3.溶5菌.酶1.,并18且)都和已AM被3-纯内化肽至酶电是泳从纯变。溶M菌1 素可中用分来离作得为到细的菌四细 胞壁结构研究和从细菌细胞壁制备特殊种类的抗原、质粒DNA、天 然微生物蛋白和原生质体的有力工具。细菌细胞壁含有很多种生
Welcome!
灰色链霉菌RX-17溶菌酶的研究
1
第一部分：溶菌酶简介
一、溶菌酶的发现
溶细菌酶（Bacteriolytic enzyme），又称细菌
细胞壁水解酶，专门作用于细菌细胞壁的骨架
物质—肽聚糖（peptidoglycan）。按对肽聚糖
作用位点的差异，溶菌酶可分为作用于聚糖链
的N-乙酰胞壁质酶（N-acetyl- muramidase）， 作用于肽桥的内肽酶（Endopeptidase）以及作 用于连接聚糖链与肽桥间酰胺键的N-乙酰-L-丙 氨酸酰胺酶（N-acetylmuramoyl-L-alanine amidase
1.c型(chicken-type):鸡卵清溶菌酶 2.g型(goose-type):鹅卵清溶菌酶 3.t型(T4-type):T4噬菌体溶菌酶 4.Ch型(Chalarosis-type):
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
溶菌酶 (Lysozyme)是水解酶的一种 ,又称为胞壁质 酶 (muram idase)或 N 2乙酰 胞 壁质 肽 聚 糖水 解 酶 (N acetylmuram ideglycanohydrlase) 。溶 菌 酶 是 一 种 碱 性 蛋 白质 ,在酸性环境下 ,溶菌酶对热的稳定性很强 , pH 值 310时 96℃加热处理 15m in 仍能保持 87%的酶活性 。 在自然条件下 ,大多数溶菌酶化学性质稳定 ,即使当 pH 值在 112 ～1113 范围内剧烈变化 , 其酶结构仍维持不 变 ,活性也不受影响 。但碱很容易使酶活性遭到破坏 , 当处于碱性 pH 值范围时 ,溶菌酶的热稳定性就很差 [2 ] 。 溶菌酶在干燥条件下 ,室温可长期保存 ,其纯品为白色 或微黄色结晶体或无定型粉末 ,无嗅 ,味甜 ,易溶于水 , 不溶于丙酮 、乙醚 。 112 空间结构
在过去很长一段时间中 ,溶菌酶一直被当作一种研 究蛋白质空间构象 、酶动力学及分子进化的理想模型 。
其中有许多蛋白晶体研究及蛋白质结构与功能关系研 究进展都是利用溶菌酶获得的 [3 ] 。
目前 ,鸡蛋清溶菌酶 HEWL 的酶学性质 、分子结构 、 催化机理乃至酶蛋白基因结构已研究清楚 ,并成为研究 蛋白质结构与功能的一个重要模式蛋白 。已知 HEWL 是由 129个氨基酸残基组成的一条多肽链 ,含有 4 对二 硫键 ,三维结构为一较紧密的椭球形 ; Glu35、A sp52 及 Trp62 残 基 是 酶 活 性 必 需 基 团 ; 同 时 A sp101、A rg114、 Trp108等残基对“底物 2酶复合物 ”的形成也起着重要作 用 ,该酶活性受组氨酸和 N 2乙酰葡糖胺的抑制 。对植物 溶菌酶活性中心的研究较少 ,木瓜溶菌酶中 Trp 残基不 参与底物的结合 , 活性中心除包括 —COOH (A sp / Glu) 外 ,还必需一个 Cys。而且 ,该酶受组胺抑制基本上不受 N 2乙酰葡糖胺抑制 ,这些与 HEWL 有所不同 。赖晓芳 [4 ] 等采用化学修饰等方法 ,对萝卜溶菌酶活性中心进行了 初步研究 ,他们采用脱氨再生几丁质凝胶亲和层析从萝 卜叶中获得了 PAGE均一的溶菌酶 ,并通过微量蒸发扩 散法获得其结晶 。用 pH 动力学研究方法和化学修饰法 对酶的活性中心进行了初步研究 。实验结果表明 : — COOH ( Glu /A sp )基团 、Trp 及 H is残基可能为酶活性所 必需 。对 Tyr、Cys、Ser/ Thr残基修饰后 , 酶活性基本上 不受影响 。同时 ,酶活性受到组胺和 N 2乙酰葡糖胺抑 制 。并且对萝卜溶菌酶与鸡蛋清溶菌酶和木瓜溶菌酶 的活性中心的相互差异进行了讨论 。现有情况表明萝 卜溶菌酶活性中心与 HEWL 可能不同 , HEWL 的活性中 心只包括 —COOH (A sp / Glu)和 Trp 残基 ;亦与木瓜溶菌
( 1)以细胞壁作为底物 ,用作用前后浊度的变化表 示酶活力的大小 。
( 2)以溶壁小球菌培养液作为底物 ,用作用前后浊 度的变化表示酶活力的大小 。由于这两种方法都是用 固液两相反应 ,难以准确测定反应速度 ,故有人将水溶 性多糖 已 二 醇 甲 壳 质 制 备 均 匀 态 底 物 , 用 来 测 定 酶 活力 。
收稿日期 : 2008 - 06 - 20 作者简介 :陈 艳 (1983 - ) ,女 ,满族 ,黑龙江 ,硕士研究生 ,专业方向 :分子生物学 , E - mail: cyaita831227@1631com; 通讯作者 :江明锋 (1971 - ) ,男 ,羌族 ,副教授 ,博士 , E - mail: m ingfengjiang@ vip1 sina1com。
64
第 26卷第 2期 2009年 4月
生物学杂志
Vo l126 No12
JOURNAL OF B IOLOGY
Ap r, 2009
酶的不同 ,其活性中心除含 —COOH ( Glu /A sp )基团外 , 还含有 - SH 基团 。用 IAA 和 DTNB 对萝卜溶菌酶进行 化学修饰 ,酶活性基本不变 ,用 E IIman试剂法也测不出 酶分子含有游离 —SH 基团 ,只测得酶分子中含有 2111 mol SH 蛋白质的二硫键存在 ,所以萝卜溶菌酶活性中心 可能不含游离巯基 。另外 , HEWL 受组胺和 N 2乙酰葡糖 胺显著抑制 ;而萝卜溶菌酶也受组胺显著抑制 ,但基本 上不受 N 2乙酰葡糖胺抑制 ;木瓜溶菌酶不仅受组胺显著 抑制 ,而且受 N 2乙酰葡糖胺抑制也较强 。这些差异可能 反应了萝卜溶菌酶与鸡蛋清溶菌酶和木瓜溶菌酶在功 能上的分化 。 2 溶菌酶的分类
由于溶菌酶本身是一种天然蛋白质 ,无毒性 ,是一 种安全性高的饲料酶 ,它能专一性的作用于目的微生物 的细胞壁 ,而不能作用于其它物质 。该酶对革兰氏阳性 菌 、枯草杆菌 、耐辐射微球菌有很强分解作用 ;对大肠杆 菌 、普通变形菌和副溶血弧菌等革兰氏阴性菌等也有一
65
第 26卷第 2期 2009年 4月
随着生物科学的发展 ,溶菌酶已成为基因工程及酶 工程中必不可少的工具酶 ,用以制造和提取菌体内的活 性物质如核酸 、酶及活性多肽等 ,利用其专一性水解细 胞壁的特点 ,有助于人们对细胞壁细微结构的认识 ,为 我们深入研究细胞壁的构造打下了坚实的基础 ,同时作 为是一种重要的破壁酶 ,在原生质体的制备方面提供了 新的方法 ,因此溶菌酶被广泛应用于生物技术 、生物工 程中 。 413 在医疗中的应用 41311 溶菌酶在抗菌消炎 、增强免疫力方面的应用
用公式计算出酶活力 。不同酶活的标准酶液对应不同 的 ΔE,而据此 ΔE 又可算出所用标准酶的酶活 ,从而可 验证检测的准确性 [6 ] 。 4 溶菌酶的应用 411 在食品工业中的应用
溶菌酶是一种无毒 、无副作用的蛋白质 ,又具有溶 菌作用 ,因此可用作食品防腐剂 。目前已广泛应用于水 产品 、肉食品 、蛋糕 、清酒 、料酒及饮料中的防腐 ,溶菌酶 属于冷杀菌 ,在杀菌防腐过程中不需加热 ,因而避免了 高温杀菌对食品风味的破坏作用 ,尤其对热敏感的物质 更具有重要意义 [7 ] 。还可以添加到乳粉中 ,使牛乳人乳 化 ,以抑制肠道中腐败微生物的生存 ,同时直接或间接 地促进肠道中双歧杆菌的增殖 。此外 ,还能利用溶菌酶 生产酵母浸膏和核酸类调味品 。 412 在生物工程研究中的应用
第 26卷第 2期 2009年 4月
生物学杂志
JOURNAL OF B IOLOGY
doi∶1013969 / j1 issn11008 - 9632120091021064
溶菌酶的研究进展
Vo l126 No12 Ap r, 2009
陈 艳 ,江明锋 ,叶煜辉 ,刘勇涛 ,李生伟
(西南民族大学生命科学与技术学院 ,成都 610041)
溶菌酶对 G+ 、枯草杆菌等有很好的杀灭作用 ,对大 肠杆菌 、普通变球菌等 G- 也具有一定程度溶解 。此外 , 溶菌酶与抗菌素合用效果更佳 ,因而 ,溶菌酶广泛应用 于医药行业 ,如利用溶菌酶治疗各种五官科炎症 ,尤其 对急性炎症如急性咽炎 、急性喉炎 、急性中耳炎等效果 明显 [ 8 ] 。 41312 溶菌酶在多种疾病诊断方面的应用
( 3)分光光度计测定法 ,在 450nm 处 ,把一定量的菌 体冻干粉或冰浴解冻的溶壁微球菌液溶解于一定量的 磷酸盐缓冲液中 ,使吸光度值在 113 左右 ,此底物溶液 以及标准酶液在温度 25 ℃水浴中保温 。用 1cm 比色皿 装 215mL 底物于水浴中 ,加入 015mL 酶液开始计时 ,记 下反应 1m in时的读数 E1 以及反应 2m in时的读数 E2,
戴清源等 [9 ]报道 ,正常情况下 ,人体尿液中一般只 存在少量溶菌酶 ,因此测量尿中溶菌酶含量 ,有助于检 测肾小管功能障碍性疾病 。同时 ,烧伤病人分泌的溶菌 酶比常人多出几倍 ,也可在尿液中检出 ,有助于对手术 移植排斥 、烧伤严重程度的判断 。此外 ,血清中溶菌酶 含量高低对白血病的诊断起辅助作用 。 414 溶菌酶在畜禽饲料中的应用 41411 用作饲料防腐剂和杀菌剂
主要问题 ,并对其应用前景进行了展望 。
关键词 :溶菌酶 ;抗菌机理
中图分类号 : Q556
文献标识码 : B
文章编号 : 1008 - 9632 (2009) 02 - 0064 - 03
对溶菌酶的研究始于 20 世纪初 ,人们发现人的唾 液 、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶 ,因其具有溶菌 作用 ,故命名为溶菌酶 [1 ] 。1937 年 Abraham 和 Robinson 从卵蛋白中分离出溶菌酶晶体 ,揭开了研究溶菌酶的历 史篇章 。它广泛存在于鸟类 、家禽的蛋清中和哺乳动物 的泪液 、唾液 、血浆 、乳汁 、胎盘以及体液 、组织细胞内 , 其中在蛋清中含量最丰富 (约 013% ) 。在一些植物体 如卷心菜 、萝卜 、无花果和微生物体内也存在溶菌酶 ,只 是含量差异较大 。 1 溶菌酶的理化性质及空间结构 111 理化性质