春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
正交试验报告
赵立, 阚永军, 庞文生, & 胡娟. (2017). 市售铁皮石斛多糖及甘露糖含量比较研究. 海峡药学, 29(7), 29-31. 刘静平, 朱先红, & 贾景明. (2011). 正交试验优选铁皮石斛类原球茎多糖的提取纯化工艺. 中国药房, 22(15), 1378-1380. 尚喜雨. (2010). 水提法· 酶法提取铁皮石斛多糖的比较研究. 安徽农业科学, 38(18), 9787-9788. 李娇, 荣永海, & 荣龙. (2013). 闪式提取铁皮石斛多糖. 中药材, 36(9), 1524-1527. 何铁光, 杨丽涛, 李扬瑞, 苏江, 王灿琴, & 韦柱杨. (2006). 铁皮石斛原球茎多糖提取最佳工艺研究. 西北农业学报, 15(5),
• 多糖含量：
多糖含量 = 总糖 - 还原糖。
石斛多糖含量的测定方法：苯酚硫酸法
苯酚制取:取苯酚200g，加铝片O.2g和碳酸氢钠O.1g，蒸馏， 收集182摄氏度馏分，称取一定量重蒸苯酚，加入蒸馏水混匀， 溶解即得。置棕色瓶中，放冰箱内备用。
不同提取方法对石斛多糖含量测定的影响
方法：分别采用回流提取、改进回流提取、超声波提取与超声辅助热 回流提取法对石斛多糖进行提取，通过苯酚- 硫酸法检测其多糖含量。 结果：4种提取方法所测得的多糖含量分别为（13.473±0.634）％、 （15.692±0.743）％、（11.87±0.536）％、（16.29±0.407）％。
但根据计算，A因素2，3水平
间几乎在同一数量级，从省时 节能，降低成本的角度考虑，
选择A2B1C2D3，即石斛中石
斛多糖的最佳提取条件为将药 材粉碎至粗粉，加水20倍量, 提取3次,每次4h。
春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
李璐;赖钟雄;翁浩
【期刊名称】《福建农林大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2011(040)001
【摘要】以离体保存5 a的春石斛和铁皮石斛原球茎为材料,采用正交试验对其试管苗壮苗生根的条件进行优化,从鲜重、假鳞茎、颜色、株高和根系生长等方面对植株进行综合评定.结果表明:适宜春石斛壮苗生根的培养基为1/2MS+20 g.L-1白糖+50 g·L-1香蕉匀浆物;适宜铁皮石斛壮苗生根的培养基为1/2MS+10 g·L-1白糖.
【总页数】6页(P31-36)
【作者】李璐;赖钟雄;翁浩
【作者单位】福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建,福州,350002;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建,福州,350002;福建农林大学园艺植物生物工程研究所,福建,福州,350002
【正文语种】中文
【中图分类】S682.31
【相关文献】
1.铁皮石斛生根壮苗培养基优化及移栽基质选择 [J], 韩晓红;孙金龙;段春红
2.不同培养基对铁皮石斛壮苗生根的影响及移栽条件优化 [J], 许奕;宋顺;王安邦;李艳霞;李羽佳;林妃;黄东梅;李敬阳
3.铁皮石斛组培苗生根壮苗培养基的优化筛选研究 [J], 李海燕;林丽婷;谢燕婷;温嘉乐;罗国荣;莫文芳;刘瑞驹
4.小金钗春石斛原球茎增殖及试管苗移栽条件的优化 [J], 钟春水;徐小萍;林玉玲;赖钟雄
5.长期离体培养的春石斛兰类原球茎生长及生根条件的优化 [J], 侯大强;柴明良;庄晓英
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
铁皮石斛种子组织培养条件的优化
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｔ ｈ ｅ ｓ ｅ ｅ ｄ ｏ ｆ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ｕ ｍ ｗ ａ ｓ ｕ ｓ ｅ ｄ ａ ｓ ｔ ｅ ｓ ｔ ｍａ ｔ ｅ ｒ ｉ ａ ｌ ｓ ｔ ｏ ｃ ｏ ｍｐ ａ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｅ ｆ ｆ ｅ ｃ ｔ ｓ ｏ ｆ ｓ ｅ ｅ ｄ ｄ ｉ ｓ ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ，ａ ｇ ａ ｒ ，ｏ ｒ ｇ ａ ｎ ｉ ｃ ｃ ｏ ｍｐ ｏ ｕ ｎ ｄ ａ ｎ ｄ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ａ ｔ ｅ ｄ ｃ ａ ｒ ｂ ｏ ｎ ｏ ｎ ａ ｄ ｖ ｅ ｎ ｔ ｉ ｔ ｉ ｏ ｕ ｓ ｂ ｕ ｄ ｓ ｐ ｒ ｏ ｌ ｉ ｆ ｅ ｒ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｓ ｈ ｏ ｏ ｔ ｓ ｓ ｔ ｒ ｅ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｎ ｉ ｎ ｇ ａ ｎ ｄ ｒ ｏ ｏ ｔ ｓ ｉ ｎ ｄ ｕ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｉ ｎ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ， ｉ ｎ ｏ ｒ ｄ ｅ ｒ ｔ ｏ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ｅ ｔ ｈ ｅ ｐ ｒ ｅ ｌ ｉ ｍｉ ｎ ａ ｒ ｙ ｓ ｙ ｓ ｔ ｅ ｍ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｃ ｕ ｌ ｔ ｕ ｒ ｅ ｆ ｏ Ｄｅ ｎ ｄ ｒ ｏ ｂ ｉ ｕ ｍ
Ｏｐ ｔ ｉ ｍｉ ｚ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｔ ｉ ｓ ｓ ｕ ｅ ｃ ｕｌ ｔ ｕｒ ｅ ｃ ｏｎ ｄｉ ｔ ｉ ｏ ｎｓ ｆ ｏ ｒ Ｄｅ ｎ ｄｒ ｏ ｂ ｍ ｃ ａｎ ｄｉ ｄｕ ｍ ｓ ｅ ｅ ｄｓ
铁皮石斛组培苗生根条件优化研究
铁皮石斛组培苗生根条件优化研究作者：彭文书马莉赵苗苗张文杰严亮来源：《热带农业科学》2015年第02期摘要以铁皮石斛无菌幼苗为材料，在不同生根培养基中添加不同配比的生长调节物质、香蕉汁、马铃薯汁以及活性炭，研究其对铁皮石斛组培苗生根效果的影响。
研究结果表明，生根培养基为：1/2 MS+6-BA 0.2 mg/L+10.0%香蕉汁+10.0%马铃薯汁+NAA 0.4 mg/L+2.0%蔗糖+0.04%活性炭，生根条件为光照强度2 000 lx、琼脂用量7.0 g/L、培养基pH为5.8是最适宜条件。
关键词铁皮石斛；组培苗；生根条件；优化分类号 S567.23+9铁皮石斛（Dendrobium officinale）为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium sw.）植物，是一种十分珍贵的中药材植物，主要分布于我国云南、广西、广东、贵州等南方省区[1]。
铁皮石斛是《中华人民共和国药典》收录的5种石斛属植物之一[2]。
铁皮石斛具有较高的药用价值，《中国药学大词典》称其具有“滋养阴津”功效，清代《药性论》说石斛能补肾积精、养胃阴、益气力和增强体质。
石斛作为益胃生津药在《神农本草经》、《本草再新》中均有记载[3]。
现代医学对铁皮石斛的研究表明，多糖是一种有价值的中药类免疫增强剂。
药理学研究表明，铁皮石斛的多糖、氨基酸、生物碱等成分，具有提高免疫功能、抗氧化、抑制肿瘤和降低血糖等作用[4-9]。
但由于铁皮石斛生长条件十分苛刻，自然产量极少，加上生态破坏和药农的过度采挖，致使铁皮石斛野生资源的有些品种已面临灭绝的境地。
野生石斛在自然条件下的繁殖率很低，林下移栽种植铁皮石斛成活的关键因素却是组培苗的生根壮苗，因此在组织培养过程中提高组培苗生根率尤为重要。
本文选择生长一致的的铁皮石斛组培瓶幼苗，研究不同生长调节物质浓度、不同添加物及浓度对铁皮石斛生根和生长的影响，以确定适合铁皮石斛壮苗生根最适宜的培养基，提高林下移栽铁皮石斛组培苗的成活率。
不同培养基对铁皮石斛壮苗生根的影响及移栽条件优化
试管苗质量难以保证、 移栽成活率低等 问题 ， 极大地制约了铁
收稿 日期 ： ２ ０ １ ４— ０ ８—２ ９ 基金项 目： 海南省产学研一体化专项资金（ 编号： Ｃ Ｘ Ｙ２ ０ １ ３ ０ ３ ５ ） ； 海南
培苗 的生根数 、 根长 、 株 高等 。 １ ． ２ ． ２ 组培苗移栽基质 的筛选
组培苗的基质。结果表明 ： 最适合铁皮石斛壮苗生根的培养基为 Ｍ Ｓ＋ ０ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ Ｎ Ａ Ａ＋ ０ ． ５ ｍ ｇ ／ Ｌ ６一 Ｂ Ａ＋ ３ ０ ｇ ／ Ｌ蔗糖 ＋
８ ｇ ／ Ｌ琼脂 ＋１ ｇ ／ Ｌ活性 炭 ； 移栽基质 以泥炭土 ＋树皮 ＋ 碎砖 ＋活苔藓组合效 果最 佳。 关键词 ： 铁皮石斛 ； 壮苗生根 ； 移栽 ； 基质
石斛属多年生 草本植物 ， 铁皮石斛是石斛类药材的上品 ， 素有
“ 中华仙草… ‘ 药 中黄金” 之美称 ， 以茎 入药 ， 含有 多糖 、 石斛
碱、 生物碱等有效成分 ， 具有滋阴清热、 生津益 胃、 润喉 明 目等 功效 ， 在抗肿瘤 、 提 高人 体免疫力 、 治疗 胃肠 道疾病 、 抗衰 老、 抗氧化 、 抗 血小板聚集 、 降低血糖 、 治疗 白内障等方 面均有 良
不同培养基对铁皮石斛壮苗生根的影响及移栽条件优化
许 奕， 宋 顺， 王安邦 ， 李艳 霞， 李羽佳 ， 林 妃， 黄东梅 ， 李敬 阳
（ 中国热带农业科学院海 口实验站／ 海南 省香蕉遗传改 良重点实验室 ， 海南海 口 ５ ７ ０ １ ０ ２ ）
摘要 ： 以铁皮 石斛的无 菌组 培苗为材料 ， 探讨不 同培养基 、 激 素对组培苗壮苗生 根的影响 ， 同时筛选 出最适合移栽
江苏农业科学
许 奕， 宋
春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
１４ 数 据分 析 ．
在分别观察试管苗鲜重 、 假鳞茎 、 颜色 、 株高和根系生长状况 的基础上 ， 给每个指标赋值（ 满分为 ｌ ０ 分） 然后根据性状的重要性 ， ， 给每个指标赋予一定的权重（ 鲜重 ３ ％、 ５ 假鳞茎 ２ ％、 ０ 颜色 １ ％、 ５ 株高 １％ 、 ５ 根系 １％）最后将每个处理所得总分进行汇总 ， ５ ， 对不 同处理所得总分进行 比较． 数据运用 Ｄ Ｓ Ｉ 软件进行
基上 ， 每瓶接种 ５株， 一个处理组合共接种 １ ， Ｏ瓶 各 处理重复 ２次． 培养 ９ 后 观察统计试 管苗 的鲜 ０ｄ
重 、 势和根 系生 长状 况． 长 １３ 培 养条 件 ． 每升 培养基添加 琼脂， 调至 ４ ｇ ｐ Ｈ ・ ・
原球茎增殖 、 分化和壮苗生根的培养条件均为： 光照强度 １０ ， ５０Ｉ 光照时间 １ ｄ 培养温度 （５ ｘ ２ｈ・ ～， ２
ｄｏ／ ｃｎｉｕ Ｅ ａ ａｎ ｅｐａｔ ｆ ｍ ｆ ｓ ｅ ｈ，ｐｓｕｏ ｕ ，ｃｌ ｒ ｄ ｔ ｎ ｏ ，ｔｅｒｓ ｔ ｓｏ ｅ ａ ｅ ｒｂ ｍ ｄｄｍ． ｖｌ ｔ ｇｔ ｌ ｓ ｒ ｅｈｗ ｉ ｔ ｅｅｄｂ ｌ ｏ ｕ ，ｈ ｇ ，ａｄｒ ｔ ｈ ｅｕ ｓ ｈｗ ｄ ｔ ｔｈ ｕ ａ ｕ ｉ ｈ ｎ ｏ ｒ ｇ ｂ ｏ ｈ ｏｓ ｌ ｈ ｔ
Ａｂ ｔａ ｔ ｈ ｒｔｏ ｎ ｆＤ ｎ ｒｂａ ， ６ ａ ｄＤｅｄ ｏ ／ｍ 口 ｄ ｃ ｎ ｅｖ ｄｆｒ５ｙ ａｓｗ ｒ ｓｄ ａ ｅｍａｅｉｈ ｏ ｅ ｓｒ ｃ ：Ｔ ｅｐｏｏ ｍ ｏ ｅ ｄ ｏ ｂ ｎ ｌ 如 ｎ ｎ ｒｂｕ ｃ ｎ 矗 帆 ｏ ｓ ｒｅ ｏ ｏ ｅ ｒ ｅｅｕｅ ８ｔ ｔｔａ ｆｒｔ ｈ ｈ
第１ 期
李璐等 ： 春石斛 和铁皮 石斛试管苗壮苗生根条件 的优化
不同培养基对铁皮石斛种子萌发和壮苗生根的影响
不同培养基对铁皮石斛种子萌发和壮苗生根的影响作者：马盼赵萌王宝玲来源：《安徽农业科学》2021年第01期摘要以铁皮石斛种子为材料，通过组织培养技术，不添加植物生长调节剂直接得到丛生芽，并比较天然有机物、活性炭等添加物对铁皮石斛丛生芽壮苗生根的影响，优化铁皮石斛组培快繁技术体系。
结果显示，铁皮石斛种子分化最佳培养基为MS+6 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+80 g/L香蕉泥;芽苗的壯苗生根试验中，最佳培养基为1/2 MS+ 0.4 mg/L NAA+ 0.1 mg/L 6-BA+20g/L蔗糖+6 g/L琼脂+80 g/L香蕉泥+0.5 g/L活性炭，有利于芽苗的壮苗和生根。
该研究可以一次性直接得到优质铁皮石斛幼苗，减少了试验步骤，节省人工、降低成本，提高了试验效率，促进原球茎增殖、提高分化率，促进壮苗和生根，可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供技术支持。
关键词铁皮石斛;培养基;种子萌发;壮苗生根;影响中图分类号S567文献标识码A文章编号0517-6611（2021）01-0154-03doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2021.01.041AbstractThe Dendrobium candidum seeds were used as test materials to get the cluster buds directly without adding the plant growth regulator. The effect of natural organic matter and activated carbon was compared on the adventitious buds proliferation and shoots strengthening and roots induction. The results showed that the best medium for seed differentiation of Dendrobium candidum was MS+6 g/L agar +20 g/L sugar+ 80 g/L banana mud. In the rooting test of strong seedlings， the best medium was 1/2 MS+0.4 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+20 g/L sucrose +6 g/L agar +80 g/L banana mud +0.5 g/L activated carbon， which was beneficial to the strong seedling and rooting. The seedlings of high quality Dendrobium candidum can be obtained directly at one time， which reduce the experimental steps， save labor， reduce the cost， improve the efficiency of the experiment，promote the proliferation of the original bulbs， improve the rate of differentiation， and promote the strong seedling and rooting. It can provide technical support for the rapid and large-scale production of Dendrobium candidum.Key wordsDendrobium candidum;Medium;Seed germination;Strong seedling rooting;Effect铁皮石斛（Dendrobium candidum）又名铁皮兰、黑节草，为兰科（Orchidaceae）石斛属（Dendrobium）植物，全球约有1 500种，主要分布于亚洲的热带和太平洋岛屿，既是观赏植物，又是十分重要的药用植物，是我国传统名贵药材，被列为国家重点保护药用植物之一，我国有 76 种，其中可作药用的约有 40 种，主要分布于我国广西和南方沿海各省，具有强阴益精、补肾益力、润肺止咳、明目和延年益寿的功效[1-2]。
春石斛试管花芽分化与开花的影响因素
春石斛试管花芽分化与开花的影响因素董璐;李青【摘要】With aseptic plantlets of new cultivar nobile-types (Dendrobium nobile ‘Huoniao’), we studied the effects of plant growth regulators, mineral substances in media, culture condition, and shoot physiological status on in vitro flowering.The most suitable PGRs inv itro flowering were a combination of MS medium containing 2.0 mg· L-1 TDZ, 0.1 mg· L-1 NAA and 1.0 mg· L-1 PP333.With the increasing of P and K contents by two times, the frequency of floral bud induction in-creased significantly.The percentage of in vitro flowering was higher at 10℃and day/night temperature of 23/10℃than at 23℃, and flowering was advanced for 30 d with increased flower bud differentiation.Two, the number of the sections of shoot stem, was the critical condition of the transition from vegetative to reproductive growth for Dendrobium nobile‘Huo-niao’ .Shoot stem diameters had a significant influence on the number of in virt o flowering, and the number of floral bud increased with the increasing of shoot stem diameter.The experiment was with shoot stem section number of two, the diam-eter of 7 mm, the percentage of in vitro flowering shoots of 56.92%, on 1/2MS improved medium containing 2.0 mg· L-1 TDZ, 0.1 mg· L-1 NAA and 1.0 mg· L-1 PP333, at 10℃for 30 d, and then at 23℃for 60 d, the number of floral bud was the biggest.%以春石斛（ Dendrobium nobile‘Huoniao’）试管苗为试验材料，研究了植物生长调节剂种类、无机盐质量分数、培养条件及芽体营养生长状态对诱导试管内花芽分化的影响。
铁皮石斛壮苗生根与移栽条件优化综述
铁皮石斛的壮苗生根与移栽条件优化化学与生命科学学院10生物技术101005033 ***指导老师***【摘要】：本文总结前人研究结果和经验，重点讨论不同因素对铁皮石斛壮苗生根与移栽两个阶段的影响。
总结出铁皮石斛壮苗生根的最优处理组合，以及最适合铁皮石斛生长的移栽方式。
【关键词】：铁皮石斛；不同因素；壮苗生根；移栽；铁皮石斛为兰科石斛属多年生附生草本植物，又名黑节草、铁皮兰、铁皮枫斗等。
是一种药用价值及经济价值极高的珍稀药用植物和名贵的室内观赏植物，具有滋阴清热，益胃生津，明目安神，止咳润肺，延年益寿之功效。
近代医学研究表明，铁皮石斛含有生物碱、抗癌菲、香豆素、倍半萜类等，被认为有抗肿瘤、防癌、抗辐射、抗衰老、增强人体免疫力、有效减轻肝损伤等多种功能[1]。
由于铁皮石斛生长缓慢，自然繁殖率低，对生态环境要求十分严格，再加上人类不合理采挖，现已濒临灭绝，导致药源紧缺，利用组织培养技术快速繁殖种苗，对铁皮石斛的开发利用和野生资源保护具有很高的经济价值和现实意义[2,3]。
目前，铁皮石斛组织培养的研究大多集中在快速繁殖、扩大繁殖系数等方面，其中壮苗生根是快速繁殖的关键阶段，关系组培苗的整体质量与该快速繁殖技术可行性与否。
而铁皮石斛的移栽和栽培管理技术还不够成熟，今后急需加强研究。
本文就不同因素对铁皮石斛壮苗生根与移栽两阶段的影响的研究作以下综述。
1、不同因素对壮苗生根的影响壮苗生根可以分为壮苗和生根两个步骤来进行，也可以将两步合在一起。
两步分开培育出的组培苗效果会相对好些，但是如果考虑效益，两步合成一步则更为经济。
一般通过侧芽增殖而成的幼苗采用先壮苗后生根的方法，而经愈伤组织，原球茎，芽苗方式而成的幼苗则将壮苗与生根合为一步。
另外，陈继敏等人还提出“一步法”和“两步法”之说，将组培苗分为大苗和小苗，对具备根、茎、叶分化的大苗采用“一步法”，将上述筛选后剩余无根或较细弱的小苗，接入相应培养基中1个月后，再转接其他培养基1次，此为“两步法”。
正交试验报告ppt课件
试验材料和仪器
试验材料 悬浮培养于1/2MS液体培养基的铁皮石解原球茎，于60度烘干后，经粉碎、干 燥恒重处理后备用。
试剂
氯仿、苯酚、浓硫酸、正丁醇、乙醇、葡萄糖、冰醋酸、胃蛋白酶、考马斯亮 蓝G-250、牛血清蛋白均为分析纯。 仪器 UV-1700型分光光度计、索氏提取器、HH-S恒温水浴涡、ZFQ85A旋转蒸发仪、 SHZ-200型双配套循环水式多用真空泵、冷冻干燥机。
金钗石斛类原球茎诱导及增殖的正交试验 3种石斛兰以茎段为外植体的离体快繁技术 霍山石斛细胞悬浮培养及条件优化
不同因素对大苞鞘石斛原球茎分化的影响
金钗石斛原生质体的制备与融合 铁皮石斛组培苗生根条件优化研究
石斛ISSR-PCR体系的优化
春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
多糖提取条件的确立
采用L8(24)正交设计，试验重复2次，各处理内容见表1。
ห้องสมุดไป่ตู้
何铁光, 杨丽涛, 李扬瑞等. (2006). 铁皮石斛原球茎多糖提取最佳工艺研究. 西北农业学报, 15(5), 240-243.
石斛快繁技术
稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响 铁皮石斛原球茎液体悬浮培养的研究 霍山石斛原球茎液体培养条件的优化 不同激素浓度对铁皮石斛高效快繁体系的影响
正交试验优选环草石斛
不同氮磷钾营养水平对铁皮石斛组培苗生长的影响 大苞鞘石斛组织培养快繁研究
大苞鞘石斛胚组织培养及植株再生研究
• 多糖含量：
多糖含量 = 总糖 - 还原糖。
石斛多糖含量的测定方法：苯酚硫酸法
苯酚制取:取苯酚200g，加铝片O.2g和碳酸氢钠O.1g，蒸馏， 收集182摄氏度馏分，称取一定量重蒸苯酚，加入蒸馏水混匀， 溶解即得。置棕色瓶中，放冰箱内备用。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
L
-1
6 BA 培养基
6 BA 和 10 g L 香蕉匀浆物.
- 1
将半粒绿豆大小的原球茎接种到原球茎增殖培养基上 , 培养 2个月后转接到原球茎分化培养基上 .
收稿日期 : 2010- 03 - 18 修回日期 : 2010 - 05- 06 基金项目 : 国家科技支撑计划项目 ( 2007BAD 07B03) ; 福建省科技厅资助项目 ( 2008N 2001 ). 作者简介 : 李璐 ( 1984 - ), 女 , 硕士研究生 . 研究方向 : 园林植物生物技术 . 通讯作者赖钟 雄 ( 1966- ), 男, 研究员 , 博士生 导师 , 博士 . 研究方 向 : 园艺植物生物技术与遗传资源 . Em a i:l la izx01 @ 163. com.
石斛兰是一种具有较高观赏价值的热带兰中的名贵花卉 , 花色繁多艳丽 , 花多, 花型大, 花枝长 , 与蝴 蝶兰、 万代兰、 卡特兰并列为观赏价值最高的四大观赏兰类 , 是目前国际花卉市场主要的花卉品种之一 . 石斛兰离体快繁培养的研究已有许多报道, 但一般对快繁条件的优化只进行单因素处理
[ 1- 6]
表 2 不同处理下春石斛试管苗生长状况总体评 价方差分析
Tab le 2 V ariance analys is of the effects of d ifferen t treatm ents on the general evaluat ion of grow th cond it ion for D . nobile tissue cu lture seed ling 处理 B2 B1 B3 B9 B6 B5 B7 B8 B4 K1 K2 K3 R 6 BA m g L- 1 0 0 0 1. 0 0. 5 0. 5 1. 0 1. 0 0. 5 7. 2111 5. 5094 5. 5320 1. 7018 白糖 g L- 1 20 10 30 30 30 20 10 20 10 5 . 6931 6 . 3278 6 . 2316 0 . 6347 6 BA ∀ 白糖 2 1 3 2 1 3 3 1 2 5 . 9134 6 . 2537 6 . 0853 0 . 3403 香蕉匀浆物 g L- 1 50 0 100 0 50 0 50 100 100 5. 9739 6. 5088 5. 7698 0. 7390 显著水平 总分 0 . 05 8. 0489 7. 0454 6. 5391 5. 9106 5. 7388 5. 6440 5. 5667 5. 2905 4. 9735 a b bc cd cd cd cd d d 0 . 01 A AB BC BC BC BC BC C C
-1 [ 7]
的研究结果不太一致, 可能是由于试管苗长期保存 在有激素的培养基中, 植株体内积累的 6 BA 过多, 反而抑制了其生长. 因此在长期继代保存之后, 不添 加 6 BA 最有利于试管苗的生长. 春石斛试管苗各生长指标数据的方差分析结 果如表 3所示. 从表 3可以看出: 处理 B2 试管苗的
上, 培养 90 d 后, 在分别观察统计试管苗鲜重、 假鳞茎、 颜色、 株高和根系生长状况的基础上, 给每个指标 赋值 , 然后得出总分 , 结果如表 2所示. 综合各生长指标来看 , 处理 B 2 试管苗的长势显著地优于其他处理, 极显著地优于处理 B3、 B6、 B9、 B 5、 B7、 B8、 B4. 可见 , 1 / 2 M S+ 0 mg 香蕉匀浆物培养基最有利于春石斛试管苗的壮苗生根 ( 图 1).
Op ti m ization of the cond ition of rooting and shoot grow th in the tissue culture of D endrobium nobile and D endrob ium candidum
LILu , LA I Zhong x iong, WENG H ao
32
福建农林大学学报 ( 自然科学版 )
- 1
第 40 卷
1 .2 . 2 原球茎分化培养 以 1 /2 M S 培养基为基本培养基, 添加 0 . 5 m g L 6 BA. 以绿豆大小的原球茎为 [ 6] 材料, 接种到原球茎分化培养基上, 培养 90 d后将株高约 0 .8c m 的试管苗接种到壮苗生根培养基上 . 1 .2 . 3 壮苗生根培养 以 1 /2 M S 培养基为基本培
6 BA m g L- 1 0 0 .5 1 .0
白糖 g L- 1 10 20 30
香蕉匀浆物 g L- 1 0 50 100
1 . 3 培养条件 原球茎增殖、 分化和壮苗生根的培养条件均为: 光照强度 1500 lx , 光照时间 12 h 2) ! . 1 . 4 数据分析
每升培养基添加 5 g 琼脂 , pH 调至 5. 4.
福建农林大学学报 ( 自然科学版 ) Journa l of Fujian Ag ricu lture and F orestry U n iversity ( N a tura l Sc ience Ed ition)
第 40 卷 第 1 期 2011 年 1 月
春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
, 缺乏系
统深入的研究 , 而且一般都是对刚由外植体诱导出的材料进行研究. 随着对石斛兰需求的增加及其应用范 围的扩展 , 石斛兰资源越来越紧缺 , 对其组织培养的研究越来越深入 , 为此研究其组织培养的影响因素及 其保存利用十分必要. 迄今对多年离体保存的石斛兰材料进行壮苗生根的研究鲜有报道 . 离体保存不仅仅 是为了保存种质资源, 更重要的是能够将保存的材料复壮并加以利用 , 因此对多年离体保存的材料进行壮 苗生根的研究显得尤为重要 . 本试验采用正交设计的方法 , 对春石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根的条件进 行优化, 旨在建立高效的再生体系 .
1 材料与方法
1 . 1 材料 供试材料为本实验室 2005 年由叶片诱导的玫瑰红大花春石斛 (D endrobium nobile cv . Rose Red) 原球 茎和铁皮石斛 ( D endrobiu m candidum ) 原球茎, 2 种球茎均继代保存在 1 /2M S+ 0 . 5 mg 中, 每 60 d继代 1 次. 1 . 2 方法 1 .2 . 1 原球茎增殖培养 以 KC 培养基为基本培养基 , 添加 1 . 0mg L
图 1 B2 处理下春石斛试管苗的生长状况
L
-1
6 BA + 20 g
L 白糖 + 50 g L
-1
- 1
R ( 主 # 次 ) : 6 BA > 香蕉匀浆物 > 白糖 > 6 BA ∀ 白糖
第 1期
李璐等 : 春 石斛和铁皮石斛试管苗壮苗生根条件的优化
33
为了分析各因素对春石斛试管苗生长影响之 间的差异 , 对总分进行方差分析, 结果如表 2 所示. 从表 2可以看出, 4 个因素对春石斛试管苗壮苗生 根的影响程度大小为: 6 BA > 香蕉匀浆物 > 白糖 > 6 BA ∀白糖. 6 BA 对壮苗生根的影响最大, 当含量 为 0 mg L 时, 试管苗长势最好, 这与王玉英等
2 结果与分析
2 . 1 春石斛离体快速繁殖条件的优化 2 .1 . 1 原球茎的增殖与分化 将半粒绿豆大小的春石斛原球茎接种到原球茎增殖培养基上 , 60 d 后转接 到原球茎分化培养基上 , 在原球茎分化培养基上生长 90 d 后 , 原球茎分化成株高约 0 . 8 cm 的小苗 , 整齐度 较高 , 长势较好 . 2 .1 . 2 6 BA、 白糖和香蕉匀浆物对壮苗生根的影响 将整齐度一致的春石斛试管苗接种到不同培养基
( Institute o fH orticu ltura l B io techno logy , Fu jian A g ricu lture and F orestry U niversity , Fuzhou , F ujian 350002, Ch ina) Ab stract : T he protocor m s o f D endrobium nobile and D end rob ium candidum conserved for 5 years w ere used as the m ate rials for the the orthogona l tests o f opti m iza tion o f the condition o f roo ting and shoot g row th in the tissue culture of D endrobium nob ile and D en drob ium cand idum. Eva luating the plan ts fro m fresh w e ight , peseudobu lb, colour , height , and roots, the resu lts show ed that the best m ed ium fo r roo ting and shoot g row th of D. nob ile w as 1 /2M S m edium w ith 20 g L- 1 sugar and 50 g L- 1 banana homoge na tes , and the best m ed ium for roo ting and shoot g row th of D. cand idum tissue cu lture seed ling w as 1 /2M S w ith 10 g L - 1 sugar . K ey w ords : D endrobium nob ile; D endrobium cand idum; in v itro p lantle ts ; roo ting and shoo t grow th