分析性能评估资料

5’-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）

分析性能评估资料-TBA120FR

一．概述

5’-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）（以下简称5’-NT试剂）分析性能内容包括空白吸光度、分析灵敏度、线性范围、精密度、准确度等项目的测试，本文参照《5’-核糖核苷酸水解酶测定试剂盒（酶速率法）》注册产品标准的要求以及试验方法在全自动生化分析仪上对5’-NT试剂相关技术性能指标进行相应的研究评估。

二.测试仪器及参数设置

2.1. 测试仪器：TBA-120FR

2.2. 参数设置：

东芝TBA-120FR参数

Assay Name 5’-NT

L-Reference-H 0-10

L-Linear Range-H 0-80

Reaction Mode RATE UP

Wavelength-Prim/sec 548

Read time-Main 25-32

Read time-Flex 0-0

Linearity -

Blank Read 14-16

Abs Limits 0.5-2.5

Standard S.V ol 6

Reagent 1 R.V ol 200

Reagent 2 R.V ol 100

Decimal Places 2

Units U/L

Calib Mode Linear

K 2766

Blank/Calib Replicates 3-3

BLK Abs Range -2.5-2.5

BLK Water 0.00

BLA Sample S.VOL. 6

C1 #.##

C1 Sample S.VOL. 6

C2-C5

C2-C5 Sample S.VOL.

三.性能测试结果

3.1空白吸光度

用指定空白样品（去离子水）测试试剂（盒），在测试主波长下，测试三次吸光度，取平均值即为试剂空白吸光度测定值。其结果应符合37℃环境下，波长546nm处、光径为1cm 时，A空白≤0.300。

3.2空白吸光度变化率

以蒸馏水调整分光光度计的零点，用指定空白样品（蒸馏水）测试试剂工作液，在波长546nm、37℃条件下稳定5min后测定一次试剂工作液吸光度A1，5min时再测定一次试剂工作液吸光度A2，计算试剂空白吸光度率，空白吸光度变化率△A/min≤0.015（温度37℃、波长546nm、光径1cm）

3.3分析灵敏度

用已知浓度的样本测试试剂盒，记录样本的吸光度值A1与样本经过T（min）后的吸光度值A2，换算为25.00U/L的吸光度变化率△A/min。计算公式为：

吸光度变化率△A/min =〔A2- A1〕/T×C0/C样本 (1)

其中：

A2 =（A2主波-B2副波）

A1 =（A1主波-B1副波）

A2主波——在规定参数下，主波长下反应T时间后的吸光度值；

B2副波——在规定参数下，副波长下反应T时间后的吸光度值；

A1主波——在规定参数下，主波长下的起始吸光度值；

B1副波——在规定参数下，副波长下的起始吸光度值；

T ——反应起始至终点的反应时间（min）；

C0——要求规定的浓度；

C（样本）——实际检测样本的浓度值。

3.4 线性范围

用去离子水（零值样本）稀释接近线性范围上限的高浓度样本，混合成至少5个不同梯度的样品（x i ），分别测试试剂（盒）。每个稀释浓度的样本测试3次，分别求出测定结果的均值（y i ）。以稀释浓度（x i ）为自变量，以测定结果均值（y i ）为因变量求出线性回归方程。按公式（2）计算线性回归的相关系数（r ）。

∑∑∑-=

2

i

2

i

i i

)

y -(y )x -(x )]y )(y x -[(x r (2)

相对偏差= 100%×

估计值

估计值Yi Yi Y -i (3)

|绝对偏差|=| Y i-- Y i 估计值| (4)

式中：

X i ──测定管溶液的理论浓度；

Y i ──与测定管溶液浓度相对应的实际测量值； i──1，2，3，……，n ；

将稀释浓度（x i ）代入线性回归方程，计算出Y i 的估计值，按公式（3）或（4）计算Y i 与估计值的相对偏差或绝对偏差。

3.5 测量精密度 3.5.1 重复性

在重复性条件下，用控制物质测试试剂（盒），重复10次，按公式（5），公式（6）计算其变异系数（CV ）。

S =

(5)

%100(%)?=

S

CV ………………….（6） 式中：

X――系列测定值；

X ――测定均值；

n――测定次数； S――标准差。

3.5.2 批间差

用控制物质分别测试3个不同批号的试剂（盒），每个批号测试3次，分别计算每批3次检测的均值i x （i=1，2，3），按公式（7），公式（8）计算其相对偏差（R ）。计算公式为：

3

321x x x x T ++=

(7)

%100min

max ?-=

T

x x x R (8)

式中：

max x ――i x 中的最大值； min x ――i x 中的最小值； T x ――3批试剂检测均值。

3.6 准确度

取参考物质测试试剂（盒），重复3次，取平均值，按照公式（9）并计算相对偏差。

相对偏差（%）＝

%100?-参考物质靶值

参考物质靶值

测得的均值 (9)

四． 总结：

从TBA120FR 全自动生化分析仪检测结果可以得出，生产地址变更后，本公司生产的试剂在该全自动生化分析仪上的检测各项指标符合注册产品标准的要求，因此生产地址的变更对本试剂性能无影响。