胸腹水脱落细胞学检验质量管理的初步体会
改良快速胸水及腹水脱落细胞块制备的体会
改良快速胸水及腹水脱落细胞块制备的体会陈晶;江炜;李雷【期刊名称】《临床与实验病理学杂志》【年(卷),期】2014(000)009【总页数】2页(P1057-1057,1058)【关键词】胸腹水;细胞块;染色【作者】陈晶;江炜;李雷【作者单位】四川大学华西第二医院病理科，成都 610041;四川大学华西第二医院病理科，成都 610041;四川大学华西第二医院病理科，成都 610041【正文语种】中文【中图分类】R-33细胞病理诊断中胸、腹腔积液占多数，诊断具有挑战性，标本经常规离心后，细胞常堆积成团，传统涂片镜下显示细胞重叠、分布不均，染色效果欠佳，易误诊。
为避免该类情况的发生，通常可将体液细胞标本制成细胞块再制片染色[1]，琼脂块包埋成本较高，且制作流程繁琐。
作者在传统方法的基础上进行一定改良，改良方法大大节省制作时间、人力及成本，现介绍如下。
1 材料与方法1.1 材料收集2010～2013年间四川大学华西第二医院病理科存档的胸、腹腔积液样本85例。
1.2 方法 (1)将送检标本4 ℃冰箱静置10 min，弃上清液，取沉淀物40 ml于离心管中，2 500 r/min离心5 min，弃上清液；若标本为血性胸腹水，可加20 ml 红细胞裂解液(新柏氏公司)继续离心5 min。
(2)将所得细胞沉淀与10%中性福尔马林按照1︰1比例混匀，室温下静置20 min后以2 500 r/min离心5 min，弃上清液后取离心管底部细胞沉淀团块待用。
(3)在珊顿1950冷冻切片机冷冻室内制作胶水托：取市场所售普通胶水约0.5 ml均匀平铺于冷冻切片机样品托上冷冻1 min，制作成直径约1.5 cm，厚3～4 mm的胶水托。
(4)用吸管将离心管底部的细胞团转移至已制作好的胶水托中心，放入-20 ℃冷冻切片机冷冻仓样品台上冷冻1 min左右，在其表面滴加0.5 ml胶水覆盖细胞团，待胶水凝固后迅速将其取出，此时细胞团已和胶水凝固成冰块，将冰块与样品托分离，以伊红染液点染并用显微镜拭镜纸封包，然后在全自动组织处理仪中进行常规脱水处理；(5)脱水处理后细胞团块按常规步骤进行石蜡包埋、切片及HE染色或免疫组化染色。
胸腹水脱落细胞学
注意事项
无菌操作
多次检查
采集和处理过程中应严格遵守无菌操 作原则，避免感染。
对于可疑的细胞，应进行多次检查， 以提高诊断的准确性。
细胞鉴别
对于形态类似的细胞，应仔细鉴别其 良恶性，避免误诊。
03
胸腹水脱落细胞的形态学 观察
正常胸腹水脱落细胞的形态
正常胸腹水脱落细胞形态学特征
细胞核呈圆形或卵圆形，核膜清晰，核仁小而清晰，胞质丰富，染色均匀。
特点
胸腹水脱落细胞学具有无创、简 便、快速等优点，对于某些疾病 的诊断具有较高的敏感性和特异 性。
胸腹水脱落细胞学的重要性
诊断肿瘤
胸腹水脱落细胞学检测可以发现 肿瘤细胞，对于肺癌、肝癌、胃 癌等恶性肿瘤的诊断具有重要意
义。
评估病情
通过胸腹水脱落细胞学检测，可以 了解肿瘤的恶性程度、转移情况以 及治疗效果，有助于医生制定合理 的治疗方案。
细胞收集
将抽取的胸腹水通过离心、 过滤等方法收集脱落细胞。
细胞涂片
将收集的细胞涂片，以便 后续观察和诊断。
处理方法
染色处理
将涂片进行染色处理，以 便更好地观察细胞形态和 结构。
显微镜检查
通过显微镜检查涂片，观 察细胞形态、大小、染色 深浅等特征，判断细胞的 良恶性。
免疫组织化学染色
对于难以判断的细胞，可 以进行免疫组织化学染色， 进一步辅助诊断。
胸腹水脱落细胞学
目录
• 胸腹水脱落细胞学概述 • 胸腹水脱落细胞的采集与处理 • 胸腹水脱落细胞的形态学观察 • 胸腹水脱落细胞学的临床应用
目录
• 胸腹水脱落细胞学的局限性及未来发展方向 • 胸腹水脱落细胞学病例分享与讨论
01
胸腹水脱落细胞学概述
临床胸腹水常规检查的质量控制
临床胸腹水常规检查的质量控制临床上产生胸腹水的疾病很多，为鉴别诊断，胸腹水常规检查作为临床传统首选项目，检验质量非常重要。
但是在基层医院，由于工作人员对标本的处理上质量意识不强，操作不规范，细胞形态学不熟悉，往往疏漏了许多有临床意义的诊断信息。
现将本地区20家基层医院检验科在胸腹水常规检查上存在的问题与如何提高检验质量上作如下分析。
1 现状分析1.1 标本未能及时检验：由于胸腹水极易出现凝块、细胞变性、细菌自溶等，但因缺少和临床医护沟通，标本未能及时送检，大大降低了阳性检出率。
1.2 细胞计数、分类不规范：（1）只计有核细胞数量，未做红细胞计数，而在创伤、穿刺损伤、恶性肿瘤等情况下，红细胞计数有很重要的临床意义。
（2）有核细胞分类不规范，直接在计数池下作单核、多核细胞分类。
临床医生往往就此模糊地理解为是淋巴和中性粒细胞，而疏漏了可能由于淤血、恶性肿瘤等使浆膜受损或受刺激产生的间皮细胞和变性细胞等。
1.3 浆膜黏蛋白定性试验不规范。
黏蛋白是一种酸性蛋白，其等电点为3~5，在稀乙酸溶液中产生白色雾状沉淀。
部分检验人员在配制稀乙酸溶液时，不严格量化标准，盲目地认为只要是酸性环境就可以。
标本未离心就直接做试验，并且很少有实验室做对照。
1.4 细胞形态学技术欠缺。
细胞学是在组织病理学基础上发展起来的一门新兴学科。
基层医院在脱落细胞形态的识别上不甚熟悉，沉淀物制片和染色也欠佳。
在制片上，质量的好坏对于诊断有很大影响，哪种标本用推片法，哪种标本用涂抹法，不少涂片由于质量较差而不能确诊，所以必须根据不同的标本认真做好制片工作。
在细胞学报告格式上，调查发现分级诊断的较少，只作简单的形态描述。
分级诊断法能客观、真实地反映细胞学所见，对临床诊断及治疗有较大的价值。
2 控制措施2.1 加强医护沟通，做好分析前的质量控制。
以书面的形式将留取标本注意事项告知临床，便于及时送检。
不能及时送检的标本可加适量的乙醇以固定细胞成分，病理学检查和细胞学检查应用EDTA-Na2抗凝。
胸腹水癌细胞形态学检验诊断的实践与体会
实践探索与体会作一介绍 。 材 料和方 法
一
、
（ 或） 套叠状 ， 以及上皮样结构（ 如腺管状和较规则 状细胞聚集一起） 形态特征者 ， 作为进一步评判基
本 符合或提示 腺 癌 细胞 的依 据 ； 将 间皮 细胞样 、 大 或巨大而散在性 分布 的癌细胞 ， 常有 多变形胞 质和
圈曲样细胞 团或角化珠样 结构者 ， 作为 进一步评 判
临床和 病理 为基 础 ， 故普遍 性 重视 不够 。临床上 ， 恶 性胸 腹水 中 ， 最 常 见 的是 癌 细胞侵 犯 ， 包括 儿 童 患者¨ ｊ ， 但 对 胸 腹 水 标 本 送 检 的要 求 、 处 理 的 方 法、 镜检 的要 求 和形 态学 的把握 等 ， 文献 上报 道 的 体会 均有 所 不 同 。现 将 我 们 １ ３年 来 的一 些
例， 胰腺癌 ８ ５ 例， 肝癌 ２ ５例， 乳腺癌 １ ８ 例， 大肠癌 １ ６ 例， 其他癌症转移 ３ ０ 例； 胸腹水细胞学检查找到 癌细胞 ４ ０ ９例 ， 阳性率 为 ４ ３ ． ６ ％。
２ ．标本 处 理 抽 取 的胸 腹 水 由乙 二 胺 四 乙 酸二 钾 （ Ｅ Ｄ Ｔ Ａ— Ｋ ） 抗 凝 剂 塑料 带 盖 标 识 专 用 试 管抗凝 （ 容积 １ １ ｍ Ｌ ） ， 常规标本 在 ０ ． ５～１ ｈ内 ２ ８ ０× ｇ离心 ５ ｍ ｉ ｎ ， 离心 后倾 去 上 清 液 ， 推 片或 涂
检验 医学 ２ ０ １ ３年 ６月第 ２ ８卷第 ６期
Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｊ ｕ ｎ ｅ ２ ０ ，
垫．
文章 编 号 ： １ ６ ７ ３ — ８ ６ ４ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ － ０ ５ ５ ７ － ０ ４
_脱落细胞学检验_教学的点滴体会
5脱落细胞学检验6教学的点滴体会X李新岳,彭乔,毛豪初,陈宇,刘志军(湖南师范大学医学院医学检验系,长沙410006)[摘要]脱落细胞学检验是一门临床依赖的、实用的诊断技术,临床迫切需要专业素质人才。
改革脱落细胞学检验课程教学体系,加强形态教学,培养具有高素质的临床细胞病理诊断医师,已是迫在眉睫,也为检验专业学生就业提供广阔的前景。
本文主要从教学内容、教学方法与手段、本课程的教学特点等几方面,总结了我室多年来在脱落细胞学检验教学中所做的教学改革尝试,以期和同道们共同商榷,以求共同为临床输送专业基础知识扎实、能服务于基层的防癌普查骨干力量打下良好的基础。
[关键词]脱落细胞学;教学改革;拓宽学生就业途径[中图分类号]R446.1;G642.0[文献标识码]A[文章编号]1673-016x(2005)03-0029-03脱落细胞学也称细胞病理学,是检验专业的必修课,包括脱落细胞和细针吸取细胞二大方面检查,其对肿瘤的诊断具有初筛、确诊及普查的意义,特别是细针吸取细胞学,对某些肿瘤的诊断有取代组织病理诊断的意义,他的临床应用价值及范围更广,倍受临床欢迎。
由于该课程的自身特点,需要综合运用解剖学、组织学、病理学及临床医学等相关知识来研究它诊断的规律与方法。
因此,本课程的教学目的在于培养学生的动手能力、培养学生综合的临床细胞病理诊断思维和创新能力,为临床输送具有专业基础知识扎实、能服务于基层的防癌普查骨干力量。
我系从80年代初就开设了脱落细胞学检验的教学,在传统教学中,概念、知识的传授主要基于文字描述,教学手段较落后,虽有图像,但图像不多或为手工绘图,使学生有概念无形象,甚至有的概念模糊不清;教学内容结构单调,与上述相关学科知识联系较少,使学生对临床细胞病理诊断缺乏综合的思维能力,加上实验课时少,实验教学方法陈旧,学生动手机会不多,以致授课效果不理想。
多年来,几代教师一直都在探讨着教学改革,为此倾注了不少的心血,也取得了一些成绩。
胸腹水细胞学检查对恶性肿瘤的诊断价值
胸腹水细胞学检查对恶性肿瘤的诊断价值【摘要】目的探讨胸腹水细胞学检查对恶性肿瘤的诊断效果及影响阳性率的因素。
方式回顾287例胸腹水脱落细胞的诊断，结合病理组织学检查，分析其诊断价值。
结果287例胸腹水中，发觉恶性肿瘤细胞72例，可疑3例，经病理组织学证明为恶性肿瘤者79例，细胞学检查总正确率为%（75/79），假阴性率为%（4/79），无假阳性。
结论胸腹水脱落细胞学检查简便易行、准确靠得住，可作为恶性肿瘤初期筛查手腕。
【关键词】肿瘤；癌；胸水；腹水；细胞学；诊断胸腹水脱落细胞学检查因具有快速、准确、简便、易行和患者痛苦少等长处，在临床上得以普遍应用，目前已成为癌症初期诊断的重要手腕之一。
现搜集我院2004年6月～2006年5月拟诊癌症患者的胸腹水脱落细胞学检查标本287例，将检查结果报告如下：1 材料和方式材料搜集临床拟诊癌症患者胸腹水脱落细胞标本287例，其中胸水169例，腹水118例，发觉恶性肿瘤细胞的72例，可疑3例，其中发觉恶性肿瘤细胞的胸水42例，腹水30例；可疑胸水2例，腹水1例。
临床追踪经病理组织学检查证明为恶性肿瘤的79例，其中胸水47例，腹水32例。
年龄最小18岁，最大92岁，平均41岁。
男173例，女114例。
方式标本以3000r/min离心10min，弃去上清液，取沉渣涂片2～4张，湿固定于95%乙醇10min，HE染色，光镜下检查。
细胞学诊断分三级：阴性、可疑和癌。
2 结果确诊疾病名称47例恶性胸水中，肺癌41例，占%；乳腺癌4例，占%；恶性淋巴瘤2例，占%。
32例恶性腹水中，胃癌10例，占%；卵巢癌7例，占%；肝癌8例，占%；肠癌4例，占%；恶性淋巴瘤1例，占%；宫颈癌2例，占%。
胸腹水恶性肿瘤细胞的类型79例恶性肿瘤细胞中，腺癌比例最大，而鳞癌、未分化癌、恶性淋巴瘤、恶性间皮瘤等类型少见，见表1。
表1 79例胸腹水中恶性肿瘤细胞的类型（略）细胞学诊断与组织病理诊断的比较见表2。
胸腹水脱落细胞学检验质量管理的初步分析
胸腹水脱落细胞学检验质量管理的初步分析形态学观察是检验胸腹水脱落细胞学中最为经典的一种检验手段，但是就管理而言，目前胸腹水脱落细胞学检验的质量管理较差，本文将初步对胸腹水脱落细胞学检验质量管理进行分析体会。
1标本质量管理1.1提供标识抗凝管：实验室需要提供10ml的标识试管，这些试管需要有含EDTA-K2的抗凝剂软塞。
1.2接收查对制度：管理人员需要根据查对制度严格按照制度执行。
首先需要管理人员在每一支标识试管上写明受检查的病患的姓名、性别、年龄、病床号等相关信息，之后对照送检的单子进行对照检查，查看送检的样本是否已按照送检单上的要求做好相应准备，同时在送检单上填好送检的时间和编号等相关信息。
1.3准备载玻片：对于胸腹水脱落细胞学检验最好使用长宽规格为25.4mm*76.2mm厚度规格在1到1.2mm的载玻片，同时该载玻片的一端需要有磨砂的区域，在此区域上写好病患的编号以及姓名等基本信息。
此外还需要准备好6张载玻纸。
1.4离心和倾液规定：将溶液进行离心处理，离心速度为1/ 52500r/min，离心之后取上层的清液，将试管中的细胞沉淀物用棉球吸走。
取离心之后的白细胞作成涂片。
1.5推片要求：对于试管底部沉淀的细胞，需要进行摇散处理，将这些物质顺着试管的管壁缓慢地滴在载玻片上，之后进行制片处理，将这些物质制作成5到6张涂片。
这类涂片的制作需要注意膜面的厚度，需要尽可能的厚一些。
1.6涂片处理原则：使用Wright—G iem sa 对一部分涂片进行染色处理，对另外一部分涂片进行细胞免疫化学染色的方法进行相关染色处理。
1.7未用和未染色涂片的处理：待涂片放置干燥之后，将涂片叠放在一起，最上面的一张涂片需要将其表面朝下，防止出现潮湿或是被虫子啃食以及被污染等现象。
2标本运送和保存医师根据实验室需要提供10ml的标识试管，这些试管需要有含EDTA-K2的抗凝剂软塞。
在医师完成采样后需要在0.5到1h之内及时送到实验室。
脱落细胞学检查联合胸腹水乳酸脱氢酶在恶性胸腹水中的诊断价值
脱落细胞学检查联合胸腹水乳酸脱氢酶在恶性胸腹水中的诊断价值沈宇【摘要】目的探究脱落细胞学检查联合胸腹水乳酸脱氢酶(LDH)在恶性胸腹水中的诊断价值.方法方便选取2015年7月-2017年7月在该院接受治疗的85例胸腹水患者作为研究对象,根据良恶性不同,将患者分为良性组(n=36例)与恶性组(n=49例),均采取脱落细胞学+LDH检查,比较两组患者胸、腹水中LDH及其相对应血清LDH比值与敏感性、特异性.结果恶性胸腹水患者LDH水平及相对应血清中的LDH比值分别为(421.42±62.13)、(1.83±0.62),均显著高于良性胸腹水患者,两组比较差异有统计学意义(t=12.477、5.367,P＜0.05).恶性组患者断特异性(95.12％)、敏感性(91.84％)均高于良性组患者断特异性(77.78％)、敏感性(72.22％),差异有统计学意义(x2=6.579、5.803,P＜0.05).结论对恶性胸腹水患者给予脱落细胞学检查联合胸腹水乳酸脱氢酶诊断,能够有效鉴别良、恶性胸腹水,诊断特异性、敏感性高,能够提升诊断正确性,可广泛应用于临床,具有较高临床诊断价值.【期刊名称】《中外医疗》【年(卷),期】2018(037)032【总页数】3页(P184-186)【关键词】脱落细胞学;胸腹水乳酸脱氢酶;恶性胸腹水;诊断价值【作者】沈宇【作者单位】江苏省徐州市睢宁县中医院检验科,江苏徐州221200【正文语种】中文【中图分类】R5作为临床上一种极为常见的病症，胸腹水诱发因素复杂多样，患者多伴随不同程度的呼吸困难、恶心、呕吐等，严重时甚至会发展成为恶性胸腹水，严重威胁着患者的生命健康[1]，影响着患者的生活质量，因此，对胸腹水的诊断及鉴别尤为重要，其直接影响到患者的治疗效果及预后[2]。
诊断恶性胸腹水的手段有化学检查、细菌学检查、脱落细胞检查等，传统临床上对恶性胸腹水的诊断主要以脱落细胞学为主，具有创伤小、操作简单的优势，其尽管能够实现对恶性胸腹水的诊断，具有较高特异性，然而敏感性低，再加上传统图片方法极易受到人为因素及环境因素的影响，导致其阳性检出率仅为40%～60%，漏诊率高[3]。
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胸腹水脱落细胞学检验质量管理的初步体会
发表时间：2011-09-13T11:15:44.590Z 来源：《心理医生》2010年第12期供稿作者：于昌伟程云朱海燕[导读] 脱落细胞学检验是临床检验的薄弱部门，它既需临床检验技术，又需要一定的病理学基础知识。
于昌伟程云朱海燕（江苏省淮安市第三人民医院检验科江苏淮安 223001）【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2010）12-003-01 【关键词】胸腹水脱落细胞质量管理
胸腹水脱落细胞学检验是体液检验学的一个重要组成部分，其质量管理滞后。
本文简要介绍本科的操作规范及管理方面的初步体会。
1 标本管理
1.1提供标识抗凝管由实验室提供含EDTA—K2抗凝剂塑料软塞10ml标识试管。
1.2接收查对制度严格执行标本查对制度。
认真查对标识试管上的病人姓名、床号和联号，查看送检单检查项目、送检标本是否符合要求，并按序登记、编号，记录接收时间。
1.3准备载玻片推荐载玻片厚度为1-1.2mm，长宽25.4-76.2mm，一端有磨砂区。
准备载玻片6张，分别在磨砂区写上患者姓名和编号。
1.4离心和倾液规定即刻离心，2500r/min离心5min。
离心后试管的细胞沉渣端向里，一手持离心管缓慢弃去上清液,至80度左右保持30s,另一手持棉球吸去残液，沉渣量应少于0.1ml。
离心后红细胞显著过多时，应吸取白细胞层涂片。
也可加入低渗氯化钾溶液10ml破坏红细胞，离心后沉淀物制片[1]。
1.5推片要求将管底沉淀细胞摇散，使其沿管壁缓慢滴于载玻片上，制成5-6张涂片。
也可用移液器吸取进行涂片。
涂片与一般涂片制备不同，规定推制的涂片膜面宜厚但必须有良好的尾部，涂片长宽以（2-
2.5）cm×（
3.5-4）cm左右为宜。
若管底残留灰白色微细胞团（块）须用小棒或移液器取之压碎拉片或展片。
1.6涂片处理原则取3-4张涂片Wright-Giemsa染色。
1~2张作细胞免疫化学染色，按要求固定。
1.7未用和未染色涂片的处理涂片干燥后叠放，其最上一张涂片面必须朝下。
2 标本运送和保存
临床医师采集胸腹水标本并按要求盛于含EDTA—K2抗凝剂的塑料软塞10ml标识试管后，应于0.5-1h内送到实验室。
对于特殊情况不能及时送达者可将标本置于4℃冰箱保存。
3 普通染色及其质量保证
3.1染色盒染色需在染色盒中进行。
染色盒常用病理湿盒，有多种规格，常用25cm-30cm，内有2排染色架，每排可放置8张涂片进行染色，端边有一流水孔。
3.2 Wright染色液质量 Wright染色液自配时，因甲醇质量有批间差异，故每批染液使用前需作对照试验。
常见问题是染色偏酸，用氢氧化钠溶液调节缓冲液pH，直至染色满意，即基本达到ICSH推荐的染色效果[2]。
4 镜检和报告质量管理
4.1镜检前质量管理对显微镜质量应予以高度重视。
执行镜检前查对制度。
了解临床和相关实验室资料，以便与镜检结果综合分析。
4.2镜检质量管理首先用低倍镜巡视全片，对发现的异常细胞用油镜予以确认，对应补充的本实验室项目即时进行。
4.3诊断报告质量管理执行检验和复检二级镜检制度和二级报告审查。
后者是检查报告单有无内容遗漏和错误。
诊断意见以证据为基础，客观、全面、慎重地评价所见异常的诊断价值。
不管竖式和横式报告单，规定一般报告配2幅细胞图像，找到癌细胞等有诊断价值的细胞配多幅图像，常用一大二小组合，其中1-2个小幅为细胞免疫化学染色。
规定在收标本后48h内发出报告，急需时以口头初步报告。
诊断报告发出后，主动及时接受临床的反馈信息，并加强交流和合作。
5 细胞免疫化学染色质量管理
细胞免疫化学每批染色对照都应有良好的结果。
抗原阳性表达必须在细胞特定的抗原部位才能视为阳性。
不论阳性表达的强弱、阳性细胞的多少，只要定位准确，着色清晰，应视为阳性表达。
阴性结果不能视为抗原不表达，还要排除可能存在的假阴性。
当细胞免疫化学染色判断结果与形态学检查不一致时，应以细胞形态学为主并结合临床和其他实验室资料加以综合分析。
6 标本保存、室内读片、会诊和外借制度
6.1标本保存所有染色标本全部存档，至少保存5年，同时保存图文报告和细胞图像。
6.2实验室读片讨论制度每日除执行报告前的二级检查和讨论外，还实施报告发出后的读片讨论制度。
6.3会诊和借片制度会诊和借片一般应予支持，但须办理手续，同时要求借片单位有反馈的会诊意见，以利于交流和借鉴。
7 建立区域性读片制度，加强室间质量评价活动
建议建立健全的胸腹水脱落细胞学标本读片制度，如有可能，开展附有临床和一般实验室资料的脱落细胞学涂片室间质量评价活动。
通过这些活动，使从业人员提高形态学鉴识能力。
8 技术培训和考核制度
脱落细胞学检验是临床检验的薄弱部门，它既需临床检验技术，又需要一定的病理学基础知识。
当前的临床检验脱落细胞形态学水平已远远不能适应学科发展的需要。
除了必须高度重视和加强对专业人才的培养外，建立脱落细胞学检查技术培训和考核制度也十分重要。
参考文献
[1]支喜兰.血性胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的比较[J].诊断病理学杂志，2003，10（1）：49-50.
[2]丛玉隆.血液学体液学检验与临床释疑[M].北京：人民军医出版社，2004，42.。