胸腹水脱落细胞学检验
脱落细胞学检查、DNA 倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测诊断恶性胸腹水的价值
脱落细胞学检查、DNA 倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测诊断恶性胸腹水的价值杨倩【摘要】Objective:To compare the clinical value of the detection of exfoliative cytology,serum tumor markers and DNA heteroploid analysis in the diagnosis of malignant pleural effusion and ascite. Methods:The exfoliative cytology, serum tumor markers, DNA heteroploid analysis in 128 patients with peural effusion and ascite were investigated, the sensibilities between three tests were compared. Results:The positive rate of exfoliative cytology testing was 43. 75%. The positive rate of exfoliative cytology joint DNA heteroploid analysis was 83. 33%,with individual exfoliative cytology,the positive rate was statistically significant(P<0. 01). The positive rate of serum tumor markers joint testing was 81. 25%, the difference had statistically significant compared with CA125 and AFP single detection(P<0. 01). Conclusions:The jiont detection of exfoliative cytology,serum tumor markers and DNA heteroploid analysis can improve the detection rate of malignant pleural effusion and ascite.%目的：：比较脱落细胞学检查、DNA倍体分析与血清肿瘤标志物联合检测对恶性胸腹水的诊断价值。
胸腹水脱落细胞学
干固定
湿固定
5X 未经处理的胸水
5X 处理后的胸水
细胞团块切片外貌
细胞团块切片
二、良性的细胞
1、红细胞、白细胞、单核细胞、嗜酸性细 胞、嗜碱性粒细胞、组织细胞等。 2、间皮细胞： 多角形的扁平细胞，核居中，圆形或椭 圆形，核染色质细颗粒状，分布均匀；大 小10-15微米左右；细胞散在或成片，成堆。
5、固定：也是制片的关键。当细胞涂片 完成后，应立即放入95%酒精液体内固定， 至于固定液：如甲醇、酒精乙醚液等效 果无明显差异。细胞的褪变主要原因不 是固定液的种类，而是在制片过程中空 气的氧化过程---干燥。 固定时间：5分钟即可。 剩下的送检液体不要立即倒去，等阅片 完成后，看看需不需要再制片做免疫组 化或制成组织块。（可放在冰箱内，也 可放在室温状态下24小时以上）
小细胞未分化癌
小细胞未分化癌
小细胞未分化癌
小细胞未分化癌
可疑癌
可疑癌 10X
可疑癌 40X
可疑癌 40X
免疫组化和特殊染色的应用：
Cal
Mes 间 皮 + +
膜
腺 癌 +
浆
鳞 癌 -
CK5/6
CKL、7、8、18、19 CKH、10、13-17 CEA EMA 粘卡 PAS AB
+ + -
பைடு நூலகம்
10X 病例一
病例一： Calretinin
病例一：CK18
病例一：EMA
病例一：AB
病例一：PAS
病例一：细胞切片
病例一：Cal
病例一：CK5/6 间皮与鳞癌阳性
病例一：CK7
病例一：CK18
胸腹水癌细胞形态学检验诊断的实践与体会
实践探索与体会作一介绍 。 材 料和方 法
一
、
（ 或） 套叠状 ， 以及上皮样结构（ 如腺管状和较规则 状细胞聚集一起） 形态特征者 ， 作为进一步评判基
本 符合或提示 腺 癌 细胞 的依 据 ； 将 间皮 细胞样 、 大 或巨大而散在性 分布 的癌细胞 ， 常有 多变形胞 质和
圈曲样细胞 团或角化珠样 结构者 ， 作为 进一步评 判
临床和 病理 为基 础 ， 故普遍 性 重视 不够 。临床上 ， 恶 性胸 腹水 中 ， 最 常 见 的是 癌 细胞侵 犯 ， 包括 儿 童 患者¨ ｊ ， 但 对 胸 腹 水 标 本 送 检 的要 求 、 处 理 的 方 法、 镜检 的要 求 和形 态学 的把握 等 ， 文献 上报 道 的 体会 均有 所 不 同 。现 将 我 们 １ ３年 来 的一 些
例， 胰腺癌 ８ ５ 例， 肝癌 ２ ５例， 乳腺癌 １ ８ 例， 大肠癌 １ ６ 例， 其他癌症转移 ３ ０ 例； 胸腹水细胞学检查找到 癌细胞 ４ ０ ９例 ， 阳性率 为 ４ ３ ． ６ ％。
２ ．标本 处 理 抽 取 的胸 腹 水 由乙 二 胺 四 乙 酸二 钾 （ Ｅ Ｄ Ｔ Ａ— Ｋ ） 抗 凝 剂 塑料 带 盖 标 识 专 用 试 管抗凝 （ 容积 １ １ ｍ Ｌ ） ， 常规标本 在 ０ ． ５～１ ｈ内 ２ ８ ０× ｇ离心 ５ ｍ ｉ ｎ ， 离心 后倾 去 上 清 液 ， 推 片或 涂
检验 医学 ２ ０ １ ３年 ６月第 ２ ８卷第 ６期
Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ｉ ｎ ｅ ， Ｊ ｕ ｎ ｅ ２ ０ ，
垫．
文章 编 号 ： １ ６ ７ ３ — ８ ６ ４ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ６ － ０ ５ ５ ７ － ０ ４
胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进
胸腹水脱落细胞学检查涂片方法的改进【摘要】临床对于胸腹水脱落细胞学的常规检测主要以涂片检查为主，此方法可以准确快速的得出是否存在恶性肿瘤细胞情况，此检测法便捷且不易对患者造成明显的痛苦，是当前临床疾病诊断的重要措施。
然而在具体的实施过程中，通常由于涂片过厚、细胞退变或是细胞重叠等相关因素造成涂片检测细胞数量不够以及结构不清的情况，此类现象若发生于恶性肿瘤的血性胸腹水标本时，因一些红细胞对涂片质量造成干扰，从而使诊断结果受到影响，如若疑难病患者在进行细胞免疫组织化学染色，同样也会影响判断阳性结果。
基于此，在实施检验工作时应当避免涂片质量的各类影响因素，可使用改进方法来处理疑似病例的胸腹水沉淀物，以此获得了准确的检验结果，下面我们具体对胸腹水脱落细胞学检查涂片的改进方法进行总结。
【关键词】胸腹水；脱落细胞学检查；涂片方法；改进方法一．血性胸腹水涂片红细胞破坏法血性胸腹水涂片的制作方法的重要作用不仅仅可以对红细胞进行破坏，而且还能维持其它细胞的完整度。
而常规的制作方式沉淀物内易见较多红细胞，因此，也会对肿瘤细胞的检测结果产生影响，使用低渗氯化钾溶液能使红细胞被破坏，加入甲醇能起到一定的固定效果，而加入冰醋酸则可起到凝固蛋白的作用。
当百分之五十的乙醇与胸腹水混合之后，低渗的酒精可以破坏绝大多数的红细胞，并且还能固定癌细胞，如此一下，肿瘤细胞的阳性检出率也会因此而提升，具体的操作方法如下：低渗氯化钾液与甲醇共有两类操作方法，其一：乙醇（50%）红细胞破坏法。
将乙醇（50%）与血性胸水同等量混合均匀，使用离心机以每分钟2000转的速度离心处理10分钟，将上层灰白色沉淀物取出，并将其涂在胶片上(APES)；其二：冰醋酸液红细胞破坏法，取氯化钾溶（4.8g）与蒸馏水（1000ml）混合形成低渗氯化钾液(0.66mol/L)。
首先，取15ML血性胸腹水，并将其倒至离心管中，同样以每分钟2000转的速度进行10分钟的离心处理，留沉淀物。
腹水脱落细胞学检查的操作流程
腹水脱落细胞学检查的操作流程英文回答：Procedure for Cytological Examination of Ascitic Fluid.Cytological examination of ascitic fluid, also known as peritoneal fluid, is an important diagnostic tool used to detect various diseases and conditions. The procedure involves collecting a sample of ascitic fluid and examining it under a microscope to identify any abnormal cells orother abnormalities. Here is a step-by-step guide to the operation flow for cytological examination of ascitic fluid:1. Patient preparation: Before the procedure, thepatient should be informed about the process and any potential risks or discomfort. Informed consent should be obtained. The patient may be asked to fast for a certain period of time prior to the procedure.2. Collection of ascitic fluid: Ascitic fluid istypically obtained through a procedure called paracentesis. The patient is positioned in a reclining or sitting position, and the abdomen is cleaned with an antiseptic solution. A local anesthetic may be used to numb the area where the needle will be inserted. A sterile needle is then inserted into the peritoneal cavity, and the ascitic fluid is collected into a syringe or a vacuum container.3. Preparation of the sample: Once the ascitic fluid is collected, it is transferred into a sterile container. The sample should be handled with care to avoid contamination. The container should be properly labeled with the patient's identification details.4. Centrifugation: To concentrate the cells present in the ascitic fluid, the sample is subjected to centrifugation. Centrifugation separates the cells from the fluid portion of the sample, allowing for a more accurate examination of the cellular components.5. Slide preparation: After centrifugation, a small amount of the concentrated cell pellet is placed onto aglass slide. The sample is spread evenly across the slide using a spreader or a pipette. Multiple slides may be prepared to ensure an adequate representation of thecellular material.6. Fixation: The prepared slides are then fixed using a fixative solution, such as alcohol or formalin. Fixation helps preserve the cellular structures and prevents degradation during subsequent staining and examination.7. Staining: Different staining techniques can be usedto enhance the visibility of the cellular components. The most commonly used stain for cytological examination of ascitic fluid is the Papanicolaou stain, which highlights the nuclear details of the cells.8. Microscopic examination: Once the slides are stained, they are examined under a microscope by a cytotechnologistor a pathologist. The cells are evaluated for their morphology, presence of abnormal features, and any signs of malignancy.9. Reporting: The findings of the cytological examination are documented in a report. The report includes a description of the cellular components observed, any abnormalities detected, and a final interpretation or diagnosis.10. Follow-up: The results of the cytological examination are communicated to the referring physician, who will discuss the findings with the patient and determine the appropriate course of action.中文回答：腹水脱落细胞学检查操作流程。
胸腹水脱落细胞学检验质量管理的初步体会
胸腹水脱落细胞学检验质量管理的初步体会胸腹水脱落细胞学检验是体液检验学的一个重要组成部分，其质量管理滞后。
本文简要介绍本科的操作规范及管理方面的初步体会。
1 标本管理1.1提供标识抗凝管由实验室提供含EDTA—K2抗凝剂塑料软塞10ml标识试管。
1.2接收查对制度严格执行标本查对制度。
认真查对标识试管上的病人姓名、床号和联号，查看送检单检查项目、送检标本是否符合要求，并按序登记、编号，记录接收时间。
1.3准备载玻片推荐载玻片厚度为1-1.2mm，长宽25.4-76.2mm，一端有磨砂区。
准备载玻片6张，分别在磨砂区写上患者姓名和编号。
1.4离心和倾液规定即刻离心，2500r/min离心5min。
离心后试管的细胞沉渣端向里，一手持离心管缓慢弃去上清液,至80度左右保持30s,另一手持棉球吸去残液，沉渣量应少于0.1ml。
离心后红细胞显著过多时，应吸取白细胞层涂片。
也可加入低渗氯化钾溶液10ml破坏红细胞，离心后沉淀物制片[1]。
1.5推片要求将管底沉淀细胞摇散，使其沿管壁缓慢滴于载玻片上，制成5-6张涂片。
也可用移液器吸取进行涂片。
涂片与一般涂片制备不同，规定推制的涂片膜面宜厚但必须有良好的尾部，涂片长宽以（2-2.5）cm×（3.5-4）cm左右为宜。
若管底残留灰白色微细胞团（块）须用小棒或移液器取之压碎拉片或展片。
1.6涂片处理原则取3-4张涂片Wright-Giemsa染色。
1~2张作细胞免疫化学染色，按要求固定。
1.7未用和未染色涂片的处理涂片干燥后叠放，其最上一张涂片面必须朝下。
2 标本运送和保存临床医师采集胸腹水标本并按要求盛于含EDTA—K2抗凝剂的塑料软塞10ml标识试管后，应于0.5-1h内送到实验室。
对于特殊情况不能及时送达者可将标本置于4℃冰箱保存。
3 普通染色及其质量保证3.1染色盒染色需在染色盒中进行。
染色盒常用病理湿盒，有多种规格，常用25cm-30cm，内有2排染色架，每排可放置8张涂片进行染色，端边有一流水孔。
胸腹水的检测
胸腹水的检测
第41页
积液中出现白血病细胞
我们在工作中发觉白血病细胞侵犯浆膜腔概率远 没有淋巴瘤细胞侵犯浆膜腔多，而且以浆膜腔积 液为首发个例更为罕见，这与白血病极少引发浆 膜腔积液相关，也说明浆膜对白血病细胞有屏障 作用。
胸腹水的检测
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常见肿瘤细胞与肿瘤标志物相关性分 析
积液肿瘤细胞汇报与血清肿瘤标志物阳性相关 性分析发觉： ⑴CA125阳性率最高是胃癌、卵巢癌、结肠癌； ⑵CEA增高主要出现在结肠癌和胃癌，但在肺 癌中百分比也较高。 ⑶CA199增高主要存在于胰腺癌，其次是肝癌。 ⑷AFP增高仅出现在肝癌。
胸腹水的检测
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恶性淋巴瘤
涂片有核细胞较多， 以幼稚淋巴细胞增生为主 该类细胞胞体较大，外形不规则，胞浆 丰富，着灰蓝色，浆内可含有大量空泡， 浆界尚清，胞核大而畸形，染色质疏松， 核仁易见。
胸腹水的检测
第37页
说明：
胸腹水中恶性淋巴瘤大多是从胸腔或腹 腔内淋巴结恶性肿瘤扩散而来，
原发性少见，病人常有纵膈，颈部，腋 窝等处淋巴结肿大。
腹水穿刺
临床抽取前要让长久卧 床病人翻动一下身体, 或在穿刺部位拍动几下, 使沉降或黏附细胞尽可 能脱落,增加阳性检测 率,普通第一次检出率 最高.
胸腹水的检测
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离心后沉渣
离心和浓缩 速度不宜太快,普通 应控制在100-1500转/分,速度太 小,影响离心结果,速度太大可造 成巨噬细胞\肿瘤细胞等有黏性 细胞聚集,不易分散,增加分析和 识别难度,弃上清要将沉渣以外 水分尽可能吸干,试管低部剩下 物只能推2-3张涂片,个别积液若 沉渣太浓(或细胞太多)可酌情增 加残留上清液
胸腹水沉渣切片在脱落细胞学中的作用
（ ｐ ｒｍｅ ｔ ｆＰ ｔ ｏｏ ｙ， ｅ ｉｓ Ｐ ｏ ｌ Ｈｏ ｐ ｔｌ ｆＳ ｉｉ ｇ， ｕ ｎｎ ２ ０ ０ Ｓ ｃ ｕ ｎ ｈｎ ） Ｄｅ ａ ｔ ｎ ｏ ａ ｈ ｌｇ Ｔｈ Ｆ ｒｔ ｅ ｐ ｅ ｓｉ ａ ｏ ｕｎ ｎ Ｓ ｉ ｉｇ ６ ９ ０ ， ｉ ａ ，Ｃ ｉａ ｈ
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