土壤中酵母菌的分离与纯化实验报告结果
酵母菌的分离与纯化

酵母菌的分离与纯化酵母菌的分离与纯化⼩组组员: ⼀、实验⽬的1.学习分离纯化酵母菌的技术与⽅法2.了解培养基的配置与灭菌技术3.增强⽆菌操作技术的意识⼆、基本原理从混杂的微⽣物群体获得只含某⼀种某⼀株微⽣物的过程叫做微⽣物分离与纯化,酵母菌常见于含糖份⽐较⾼的环境中,如果园⼟、菜园⼟及果⽪等的表⾯。
多数酵母菌喜欢偏酸条件,最适pH为4.5-6.0.酵母菌⽣长迅速,容易分离培养。
马丁⽒培养基是⼀种⽤来分离真菌的选择性培养基。
此培养基是由葡萄糖、蛋⽩胨、KH2PO4、MgSO4·7H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成。
其中葡萄糖主要作为碳源,蛋⽩胨主要作为氮源,KH2PO4和MgSO4·7H2O作为⽆机盐,为微⽣物提供钾、磷和镁离⼦。
⽽孟加拉红和链霉素主要是细菌和放线菌的抑制剂,对真菌⽆抑制作⽤,因⽽真菌在这种培养基上可以得到优势⽣长,从⽽达到分离真菌的⽬的。
三、实验材料及⽤具1.⽤品:苹果、葡萄糖、琼脂、⽔、1%孟加拉红⽔溶液、马铃薯2.设备与器材:1ml的⽆菌吸管、⽆菌培养⽫等.四、实验步骤1、马铃薯培养基的配置培养基成分:马铃薯 40克、蔗糖(葡萄糖) 4克、琼脂 4克、⽔ 200毫升、 pH ⾃然。
配置⽅法:(1)配制20%马铃薯浸汁:取去⽪马钓薯40g,切成⼩块,加⽔200ml.加热煮游30 min ,⽤纱布过滤,然后补⾜失⽔互所需体积。
121Pa灭菌30min.即成20%马铃馨漫汁,贮存备⽤。
(2)配制时,按每100ml 马铃薯浸汁加⼊2g蔗糖,加热煮沸后加⼊4克琼脂,继续加热融化并补⾜失⽔。
(3)分装、加塞,包扎。
(4)⾼压蒸汽灭菌:121Pa灭菌30min(5)将灭菌培养基放⼊37C°的温室中培养24-48⼩时,观察是否有菌落⽣成,以检查灭菌是否彻底。
2、倒平板:将马铃薯培养基加热融化,冷却⾄55--50C°时,倒平板,倒三⽫3、制备苹果悬液(1)⾸先将1g苹果在研钵中磨细,放⼊装有10ml⽣理盐⽔和玻璃珠的100ml三⾓瓶中去。
细菌 、放线菌 、酵母菌及霉菌的分离与纯化

土壤中细菌、放线菌、酵母菌及霉菌的分离与纯化一、实验目的1. 学习、掌握从土壤稀释分离、划线分离各类微生物的技术。
2. 学习从样品中分离、纯化出所需菌株。
3. 学习并掌握平板倾注法和斜面接种技术,了解培养细菌、放线菌、酵母菌及霉菌四大类微生物的培养条件和培养时间。
4. 学习平板菌落计数法。
二、实验原理将待分离的样品进行一定的稀释,使微生物的细胞(或孢子)尽量呈分散状态,选用有针对性的培养基,在不同温度、通风等条件下培养,让其长成一个纯种单个菌落。
要想获得某种微生物的纯培养,还需提供有利于该微生物生长繁殖的最适培养基及培养条件。
微生物四大类菌的分离培养基、培养温度、培养时间见表2-1所示。
表2-1 微生物四大类菌的分离和培养要求样品来源分离对象分离方法稀释度培养基名称培养温度/℃培养时间/d土样细菌稀释分离10-5,10-6,10-7牛肉膏蛋白胨30~37 1~2土样放线菌稀释分离10-3,10-4,10-5高氏1号28 5~7土样霉菌稀释分离10-2,10-3,10-4马丁氏琼脂28~30 3~5面肥或土样酵母菌稀释分离10-4,10-5,10-6马铃薯葡萄糖28~30 2~3细菌分离平板细菌单菌落划线分离10-2 牛肉膏蛋白胨30~37 1~2三、实验材料1. 菌源土样2. 培养基牛肉膏蛋白胨培养基,马丁氏培养基,高氏合成1号培养基,马铃薯葡萄糖培养基(制平板和斜面),见附录Ⅲ。
3. 无菌水 250 mL锥形瓶,每瓶装99 mL无菌水(或95mL为分离霉菌用),内装10粒玻璃珠。
4.5 mL无菌水试管(每人5~7支)。
4. 其他物品无菌培养皿,无菌移液管,无菌玻璃涂棒(刮刀),称量纸,药勺,橡皮头,10%酚溶液。
(一)系列稀释平板法1. 取土样选定取样点,按对角交叉(五点法)取样。
先除去表层约2cm的土壤,将铲子插入土中数次,然后取2~10cm处的土壤。
盛土的容器应是无菌的。
将5点样品约1kg充分混匀,除去碎石、植物残根等杂物,装入已灭过菌的牛皮纸袋内,封好袋口,并记录取样地点、环境及日期。
土壤中微生物的分离纯化(电子版实验报告)

微生物实验报告土壤中微生物的分离与纯化指导教师:海花周四晚第四组实验成员: 杜玉琪 9董天涵 8怡菲 8逄颖 5【摘要】利用分离纯化微生物的基本操作技术对土壤中的微生物进行分离和纯化,通过观察微生物的菌落形态特征判断菌的类型并通过平板划线进行分离纯化【关键词】土壤、微生物、菌落观察、分离纯化1.实验目的(1)通过对几种培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤。
(2)掌握倒平板的方法、接种和无菌操作技术。
(3)初步观察来自土壤中的几类微生物的菌落形态特征,并能判断菌的类型。
(4)学习平板菌落计数的基本原理和方法,并掌握其基本技能。
2.实验原理(1)培养基的配制与灭菌培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代产物的营养基质,用以培养、分离、鉴别、保存各种微生物或积累代产物。
一般的培养基应包含适合微生物生长的6大营养素即水分、碳源、氮源、能源、无机盐和生长因子。
不同微生物对pH要求不一样,霉菌和酵母菌的培养基的pH一般是偏酸的,而细菌和放线菌培养基的pH一般为中性或微碱性。
所以配制培养基时还要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的围。
已配制好的培养基必须立即灭菌,如来不及灭菌,应暂存冰箱,以防止其中微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养基酸碱度所带来不利影响。
(2)微生物的培养及鉴定接种:将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称之为接种。
接种是微生物实验及科学研究中的一项最基本的操作技术。
接种的关键是要严格的进行无菌操作。
鉴定:常见与常用的微生物中,根据它们的主要形态可分为细菌、放线菌、酵母菌和霉菌四大类。
细菌菌落光滑,易于基质脱离;放线菌菌落质地致密,菌落较小,广泛延伸;酵母菌菌落较细菌菌落大而厚;霉菌形成的菌落较稀松,多成绒毛状,絮状。
(3)平板分离与活菌计数倒平板:按稀释涂布平板法倒平板,并用记号笔标明培养基名称、土样编号和实验日期等。
划线:在近火焰处,左手拿皿底,右手拿接种环,菌种在平板上划线。
酵母菌的分离纯化

酵母菌的分离纯化、固定化和酒精发酵第一部分酵母菌的分离纯化一、实验目的应用酵母菌的生理生化和生态学的特点,从自然环境中分离酵母菌,并掌握微生物分离纯化的基本方法。
二、实验原理酵母菌常见于含糖份比较高的环境中,如果园土、菜园土及果皮等的表面。
多数酵母菌喜欢偏酸条件,最适pH为4。
5—6.0。
酵母菌生长迅速,容易分离培养。
在液体培养基中,酵母菌比霉菌生长快,利用酸性条件则可以抑制细菌的生长。
因此常用酸性液体培养基获得酵母菌的加富培养,然后在固体培养基上划线分离纯化.三、器材和用品1、甘蔗、苹果皮、葡萄皮、果园土、菜园土等。
2、马铃薯葡萄糖琼脂培养基:马铃薯200g(煮开10min后过滤取汁),葡萄糖20g,琼脂20g,水1000ml,pH自然。
分装三角瓶;试管斜面1支/组3、乳酸马铃薯葡萄糖培养液:配方同上,不加琼脂加乳酸,按1000ml培养基加入5ml乳酸,pH为5。
5左右,再分装试管9ml2支/组.4、无菌吸管3支/组、无菌培养皿、100ml无菌水1瓶/组、涂棒、美兰染液、显微镜、接种环等.四、实验方法1、接种:取果皮(不需冲洗)或土壤5克,加入到100ml无菌水中,充分搅拌后,用无菌吸管取1ml接入到9ml乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,在28—30℃培养箱中培养24h,可见培养液变浑浊.2、加富培养:用无菌吸管取上述培养液1m l,注入另1管乳酸马铃薯葡萄糖培养液中,在28-30℃培养箱中培养24h.3、镜检:用无菌操作法用接种环取少量菌液置于载玻片上,中央滴一滴美兰染液,混合均匀后制成水浸片,在高倍镜下观察酵母菌的形态及出芽方式,并可根据菌体是否染色来区分酵母菌的死活细胞,因活细胞使美兰染液还原,故菌体不着色。
4、涂皿:用马铃薯葡萄糖琼脂培养基溶化后制成平板,用无菌吸管取0.1ml 加富培养液到平板中,用涂棒涂匀后培养24h。
5、分离纯化:用接种环挑取单个酵母菌菌落,在平板上四区划线,培养后分离得到单个菌落。
土壤菌株筛选实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 掌握土壤中微生物的分离与纯化方法。
2. 了解不同微生物的形态特征和生理特性。
3. 筛选具有特定生理功能的菌株。
二、实验原理土壤中存在着大量的微生物,包括细菌、真菌、放线菌等。
通过选择合适的培养基和分离方法,可以从土壤中分离出具有特定生理功能的菌株。
本实验采用平板划线法、涂布分离法等方法,对土壤样品进行分离纯化,并对筛选出的菌株进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料:土壤样品、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖、无菌水、无菌平板、无菌试管、接种环、显微镜等。
2. 仪器:恒温培养箱、高压蒸汽灭菌锅、电子天平、显微镜等。
四、实验步骤1. 样品处理:取一定量的土壤样品,用无菌水进行稀释,制成10^-3、10^-5、10^-7等不同浓度的土壤悬液。
2. 分离纯化:(1)平板划线法:将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,用接种环进行划线分离,培养24小时后观察菌落形态。
(2)涂布分离法:将不同浓度的土壤悬液涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,用无菌玻璃棒轻轻涂布,培养24小时后观察菌落形态。
3. 菌落鉴定:(1)形态特征观察:观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等特征,记录下来。
(2)生理生化试验:对筛选出的疑似菌株进行生理生化试验,如革兰氏染色、氧化酶试验、过氧化氢酶试验等,以确定菌株的属种。
4. 结果分析:根据形态特征和生理生化试验结果,对筛选出的菌株进行鉴定,并统计不同生理功能菌株的筛选数量。
五、实验结果与分析1. 菌落形态特征观察:在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上,观察到不同形态的菌落,如圆形、卵圆形、长条形等,颜色有白色、黄色、红色等。
2. 生理生化试验结果:(1)革兰氏染色:部分菌株为革兰氏阳性菌,部分菌株为革兰氏阴性菌。
(2)氧化酶试验:部分菌株产生氧化酶,部分菌株不产生氧化酶。
(3)过氧化氢酶试验:部分菌株产生过氧化氢酶,部分菌株不产生过氧化氢酶。
3. 结果分析:根据形态特征和生理生化试验结果,筛选出以下具有特定生理功能的菌株:(1)革兰氏阳性菌:可能为葡萄球菌、链球菌等。
从土壤中分离提纯高效的酵母菌

从土壤中分离提纯高效的酵母菌主要内容:利用各种微生物实验技术,从土壤中分离并提纯酵母菌,再通过检测酵母菌发酵速率,从而筛选出高效的酵母菌。
关键词:分离提纯高效酵母菌在土壤中分离酵母菌,因此土壤的采样地点在果树下较好。
采集好土壤,将土壤配制成10^-2悬液,主要方法是称取1g土壤,放入三角瓶,迅速倒入99ml无菌水,震荡5-10min即成所需的土壤悬液。
1.由于土壤中酵母菌含量较低,因此在分离前要先进行富集培养24h。
2.接下来是配制培养基,由于要分离的是酵母菌,配制马丁氏培养基。
3.对培养基进行灭菌放入高压蒸汽灭菌锅115℃/30min4.取出后待50℃以下是加入链霉素,每一百克三毫升5.队超净台消毒,点燃酒精灯6.在酒精灯旁倒平板。
7.接种,画线。
8.放入26℃保温箱3-4d。
9.取生长较好的六个菌落分别接入0.05mol/L4ml的六个试管中,编号1-6。
10.3d后检测葡萄糖含量。
11.配置新制的氢氧化铜0.5mol/L50ml12.将强氧化铜分别放入六个试管中每个4ml。
摇匀加热。
13. 5min后比较六个试管的颜色深浅。
编号颜色1褐色'++褐色+2褐色'--3褐色-4褐色+5褐色6结论:三号试管的颜色最浅,所含葡萄糖最少,所以三号试管的酵母菌效率最高。
结果讨论:实验比较成功,但是培养基的菌株较少,这可能和富集培养的时间太短有关系,忘了设置对照试验。
选取高校教务军,可以重复做这个实验,选出比较高效的酵母菌。
注意:1.注意培养基的灭菌2.注意紫外线只能在无人的时候开启3.注意接种环要灼烧彻底4.注意在培养箱中放培养技师要倒置5.注意统一变量。
土壤酵母菌培养实验报告
土壤酵母菌培养实验报告一、实验目的本次实验旨在了解土壤酵母菌的生长特性,掌握土壤酵母菌的培养方法,以及对土壤酵母菌进行形态观察和计数。
二、实验原理1.土壤酵母菌的生长特性:土壤酵母菌是一种广泛存在于自然界中的真菌,其生长适宜温度为20-30℃,pH值为5.5-7.0,能够在各种营养培养基上生长繁殖。
2.土壤酵母菌的培养方法:采用液体和固体培养基进行培养。
液体培养基可以用液体琼脂糖、液体马铃薯葡萄糖等;固体培养基可以用琼脂糖平板、马铃薯葡萄糖平板等。
在加入试样之前要进行无菌操作。
3.对土壤酵母菌进行形态观察和计数:通过显微镜观察土壤酵母菌的形态特征,并通过平板计数法或显微镜计数法进行计数。
三、实验步骤1.制备液体培养基:取10g葡萄糖、5g酵母粉、0.5g硫酸镁七水合物和1000ml蒸馏水,混合均匀,加热至沸腾,搅拌溶解后冷却至室温。
2.制备固体培养基:取10g琼脂糖和1000ml蒸馏水,混合均匀,加热至沸腾,搅拌溶解后冷却至50℃左右时加入试样并混合均匀,倒入培养皿中并待其凝固。
3.进行无菌操作:将实验器材消毒处理后进行操作。
如玻璃棒、移液管等用70%乙醇消毒灭菌;平板培养基用紫外线灯消毒等。
4.土壤样品处理:取适量的土壤样品,在无菌条件下加入到液体或固体培养基中。
液体培养基可在37℃下摇床震荡培养;固体培养基将其倾斜放置,在25℃下静置培养。
5.形态观察和计数:取适量的培养基样品,用显微镜观察其形态特征,并通过平板计数法或显微镜计数法进行计数。
四、实验结果1.土壤酵母菌的生长特性:土壤酵母菌在液体和固体培养基上均能够生长繁殖,其生长适宜温度为20-30℃,pH值为5.5-7.0。
2.土壤酵母菌的形态特征:土壤酵母菌呈现出球状、梭形、椭圆形等不同形态,表面有明显的凸起和凹陷。
在显微镜下观察到其细胞壁呈现出深染色的环带。
3.计数结果:通过平板计数法或显微镜计数法得出土壤酵母菌数量为XXX CFU/g。
微生物的分离与纯化实验报告
微生物的分离与纯化实验报告微生物的分离与纯化实验报告引言:微生物是一类非常微小的生物体,包括细菌、真菌、病毒等。
它们广泛存在于自然界中的土壤、水体、空气中,同时也存在于人体内。
微生物对人类的生活和健康具有重要影响,有些微生物可以引起疾病,而另一些微生物则可以用于食品发酵、环境修复等方面。
为了更好地研究微生物的特性和功能,需要对其进行分离与纯化实验。
材料与方法:1. 样品采集:我们选择了土壤样品作为研究对象,从自然环境中采集了多个不同地点的土壤样品。
2. 稀释与接种:将采集到的土壤样品进行适当稀释,然后在琼脂平板上接种。
3. 培养与分离:将接种好的琼脂平板置于恒温箱中,以适当的温度和湿度进行培养。
经过一段时间后,我们观察到在琼脂平板上形成了不同形状和颜色的菌落。
4. 单菌分离:选择单个菌落,用无菌的铂丝将其转移到新的琼脂平板上,进行二次培养。
重复此过程,直到获得纯净的单菌培养物。
5. 形态观察:观察纯菌培养物的形态特征,包括菌落形状、颜色、透明度等,以及菌体形态特征,如细胞形状、大小等。
6. 生理生化特性检测:对纯菌培养物进行一系列生理生化特性检测,包括氧需求性、温度适应性、酸碱耐受性、产酶能力等。
7. 16S rRNA测序:对纯菌培养物进行16S rRNA基因测序,以确定其系统发育地位和亲缘关系。
结果与讨论:经过分离与纯化实验,我们成功地获得了多个不同的微生物菌株。
通过形态观察,我们发现这些菌株在菌落形状、颜色和透明度等方面存在显著差异。
进一步的菌体形态观察发现,它们的细胞形状和大小也各不相同。
在生理生化特性检测中,我们发现不同菌株对氧的需求性、温度适应性和酸碱耐受性存在差异。
有些菌株需要氧气才能生长,而另一些则可以在无氧条件下生长。
对于温度适应性,有些菌株在低温下能够生长,而另一些则喜欢高温环境。
此外,我们还发现一些菌株对酸性环境更耐受,而另一些则对碱性环境更适应。
通过产酶能力的检测,我们发现一些菌株具有蛋白酶、淀粉酶等多种酶的产生能力,这对于它们在环境修复和食品工业中的应用具有重要意义。
酵母分离纯化实验报告
一、实验目的1. 掌握酵母菌分离纯化的基本原理和方法。
2. 学习使用显微镜观察酵母菌的形态特征。
3. 熟悉微生物实验室的基本操作技能。
二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌,广泛分布于自然界。
本实验采用稀释涂布平板法从混合样品中分离纯化酵母菌。
该方法基于菌落形成的原理,通过稀释样品,使聚集在一起的微生物分散成单个细胞,从而在培养基表面形成单个菌落。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:- 酵母菌混合样品- 营养琼脂培养基- 无菌水- 灭菌器械(接种环、酒精灯等)- 显微镜2. 实验仪器:- 研钵- 玻璃棒- 离心机- 培养箱四、实验步骤1. 制备平板:- 将营养琼脂培养基加热融化,冷却至约50℃。
- 将融化后的培养基倒入培养皿中,待凝固后备用。
2. 样品稀释:- 将酵母菌混合样品用无菌水进行10倍稀释,制成不同浓度的稀释液。
3. 涂布平板:- 用无菌吸管吸取适量稀释液,滴加到平板中央。
- 用无菌玻璃棒轻轻涂抹,使样品均匀分布在平板表面。
4. 培养:- 将平板倒置,放入培养箱中培养。
5. 挑取菌落:- 在适宜的温度下培养,观察菌落生长情况。
- 根据菌落特征(如大小、形状、颜色等)挑取单菌落。
6. 纯化:- 将挑取的单菌落接种到新的平板上,重复培养和挑取过程,直至获得纯化后的酵母菌。
7. 观察与鉴定:- 将纯化后的酵母菌制片,用显微镜观察其形态特征。
- 根据酵母菌的形态特征(如细胞大小、形态、芽殖方式等)进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 菌落观察:- 经过培养,平板上形成了不同形状、大小的菌落。
- 通过挑取和纯化,获得了纯化后的酵母菌。
2. 显微镜观察:- 在显微镜下观察,纯化后的酵母菌呈现为球形或椭圆形的单细胞结构,直径约为5-10微米。
3. 鉴定:- 根据酵母菌的形态特征,初步鉴定为酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。
六、实验讨论1. 本实验采用稀释涂布平板法成功分离纯化了酵母菌,该方法简单易行,适用于实验室常规操作。
土壤微生物的分离和纯化实验报告
土壤微生物的分离和纯化实验报告
土壤微生物的分离和纯化实验报告
实验目的
本次实验的目的是利用物理、化学和生物性等技术,从原始土壤样品中分离、筛选和纯化微生物株,并对分离出的微生物株进行形态学特征观察和分类鉴定。
实验材料
1. 原始土壤样品
2. 饱和淡盐水
3. 10% (v/v) 的平衡磷酸盐溶液
4. 0.85% (w/v) 的千顷盐溶液
5. 2% (w/v) 的体糖酸钠溶液
6. 氯仿
7. 板藻素
8. 无菌玻璃管
实验步骤
1. 将原始土壤样哮放入摇瓶内,加入淡盐水攪拌均匀,进行粗筛提取。
2. 将1ml混合液放入无菌玻璃管,8次补充磷酸盐溶液悬浮液进行细筛提取。
3. 将细筛提取的悬浮液转移到新的无菌容器中,加入盐溶液攪拌均匀。
4. 加入盐溶液之后,用氯仿消毒,然后加入体糖酸钠溶液留取微生物株悬浮液。
5. 使用板藻素进行单菌株筛选,筛选出单菌株。
6. 将筛选出的单菌株进行形态学特征观察和分类鉴定。
结果
本次实验中,经过物理、化学和生物性等技术操作,成功分离出一株微生物株,并对其进行形态学特征观察和分类鉴定,得出结果:该株微生物属于假单胞菌科,耐盐性,呈菌封形态。
结论
本次实验成功分离纯化出一株微生物株,该株微生物属于假单胞菌科,耐盐性,呈菌封形态。
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土壤中酵母菌的分离与纯化实验报告结果实验步骤:
1.实验前准备:准备好所需的培养基、试剂和实验器材。
2.取一定量的土壤样品,加入无菌水中制备土壤悬浮液。
3.对土壤悬浮液进行预处理:将悬浮液通过过滤器过滤,以去除大颗粒杂质。
4.制备培养基:根据酵母菌的生长要求,配制适宜的培养基。
5.接种培养基:将过滤后的土壤悬浮液均匀地接种在培养基表面,避免接种过多的菌落。
6.培养条件:将接种好的培养基培养于适宜的温度和湿度条件下。
7.观察培养结果:在培养一定时间后,观察培养皿上是否出现酵母菌菌落。
8.分离纯化:选择单个菌落,用无菌技术将其移至新的培养基上,重复培养步骤,直到获得纯种的酵母菌培养物。
实验结果:
经过培养和分离纯化的酵母菌培养物显示出单一的菌落形态,颜色为白色或乳白色。
观察下显微镜下,酵母菌呈现为球形或椭圆形的单细胞结构,直径约为5-10微米。
酵母菌菌落在培养基上呈现出光滑、湿润的表面,并具有边缘清晰的特点。
实验结论:
通过土壤中酵母菌的分离与纯化实验,成功地从土壤样品中分离出纯种的酵母菌培养物。
这些酵母菌菌落形态规整、单一,符合酵母菌的特征。
该实验结果为进一步深入研究酵母菌的生理特性和应用提供了基础。