《医学遗传学实验》-小鼠睾丸染色体制备(论文资料)
小鼠染色体实验报告
小鼠染色体实验报告实验目的：本实验旨在通过染色体观察和分析小鼠基因组的结构和功能，以进一步了解小鼠的遗传特征。
实验材料：1. 小鼠样本（小鼠尸体或小鼠细胞）2. 血细胞裂解液3. 显微镜4. 醋酸酒精定影液实验步骤：1. 取得小鼠样本并进行准备。
尸体样本直接取用，细胞样本需要分离提取。
2. 将小鼠样本悬浮于血细胞裂解液中，进行细胞裂解。
3. 用匀浆棒轻轻研磨，使细胞完全裂解。
4. 将细胞溶液滴于清洁平凹玻片上，并用平玻片将其铺平。
5. 将玻片加热至70℃，使细胞DNA捕获在玻片上。
6. 用醋酸酒精定影液浸泡玻片，使细胞核卷曲收缩。
7. 用显微镜观察染色体的形态和数量。
8. 根据染色体的形态、长度和着色特点进行鉴定和分析。
实验结果与讨论：通过对小鼠样本的染色体观察，我们发现小鼠染色体具有一定的结构和着色特征。
根据染色体的长度和形状，我们可以初步判断出小鼠的染色体是否正常。
特定的染色体畸变或缺失可能表明小鼠有某些遗传疾病或突变。
在本实验中，我们可以观察到小鼠的染色体数量一般为40个。
这与小鼠常见的染色体数目相符，进一步证实了样本的正常性。
我们还可以观察到染色体的长度不一致，这是由于染色体上的基因片段的数量和排列不同所致。
通过进一步的染色体分析，我们可以了解小鼠的遗传特征，如基因突变、遗传疾病等。
这对于进一步研究小鼠的遗传学、发育生物学以及相关疾病模型的建立具有重要意义。
结论：通过对小鼠染色体的观察和分析，我们可以初步了解小鼠的遗传特征。
染色体的形态和数量可以为我们提供重要的基因信息，有助于后续的研究和分析。
本实验为进一步研究小鼠的遗传学提供了基础数据。
小鼠骨髓染色体标本的制备.
8、制片：用滴管吸细胞悬液，从20－30cm高度滴在冰水预浸泡 的洁净载玻片上，立即用口吹散，在酒精灯上过几次或吹风 机吹干。
9、染色：Giemsa染液染色7 min、细水冲洗、晾干。
10、镜检：低倍镜下找到分散良好的分裂相后，换高倍镜、油 镜、认真观察。
四、作业 1 为什么要低渗处理？ 2 观察2-3个小鼠骨髓细胞染色体的分裂
小鼠骨髓染色体标本的制备
实验五、小鼠骨髓染色体标本的制备
一、实验目的： 掌握小鼠骨髓染色体标本的制备方法。
观察小鼠染色体的形态和数目。 二、实验原/L-1KCI进行低渗后，经 固定、染色，可见到分散的染色体。
三、实验步骤：
1、取材：以颈椎脱臼法处死小鼠，取两腿股骨，剔净肌肉，擦 去附着在上面的血污，剪取两端股骨头，暴露骨髓腔，用注 射器吸取KCL(0.075mol/L)溶液，将针头插入骨髓腔上段冲洗， 用离心管接收冲洗液。
相，数一数有几条。
2、低渗处理：加KCL至2/3管，用吸管打匀使细胞悬浮于低渗液 中，放入37℃恒温水浴锅中，静置25min。（吹打不宜过猛）
3．预固定：加入固定液5滴吹打混匀。
4．离心：2000转/分，离心5min，弃上清液，留下沉淀物。
5、固定：沿离心管壁加入固定液5ml打匀，室温下固定10min。
6、再离心：2000转/分，离心5min，弃上清液，留下沉淀物。
小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察
Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者：xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray，beaker，centrifuge tube，microscope，glass slide，pipette，scissors，forceps，copper mesh.解剖盘，烧杯，离心管，显微镜，载玻片，吸管，剪刀，镊子，铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程，在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。
小鼠染色体实用资料ppt
骨注髓射细 后胞3v-2具41有小%高时柠度，檬的可分以酸裂取三增骨殖髓钠能。：力。取5g柠檬酸三钠溶解到500ml蒸馏水中，充分溶解；
即用以上配制的秋水仙溶液按每10g体重注射0.
8学）习配并成掌v的握染P小B液鼠S中骨（染髓色p细2H胞06m染.in色8，体)用:的磷制酸A备缓液方冲法：液。（取pHN6.a2HPO4 12g溶于500ml蒸水中，充分溶解；
小鼠染色体
一、实验原理
• 骨髓细胞具有高度的分裂增殖能力。因此 可以直接得到中期细胞而不必象血淋巴细 胞或组织那样要经过体外培养。经秋水仙 素处理后，分裂增殖中的骨髓细胞由于纺 缍体的形成受到抑制，染色体不能正常趋 向两极而使之停留于中期，同时染色体缩 短，轮廓清晰，把收获的细胞进行低渗， 固定处理，使细胞处于膨胀状态，再将细 胞悬液滴在载片上，使细胞破裂，染色体 散开，染色后即可观察到染色体。
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二、实验目的
• 学习并掌握小鼠骨髓细胞染色 体的制备方法。
• 观察小鼠染色体的形态特征,统 计细胞的染色体数目。
三、实验材料
• 小白鼠（2n=40）
四、实验器具和药品
• 1.器具：注射器（1ml，5ml各一支）、 托盘、解剖剪、镊子、吸管、离心管、 离心机、载片、滤纸、白纱布小块等。
• 2.药品： 0.15mg/ml 秋水仙素， 1% 柠檬酸三钠，固定液（3份甲醇，1份 冰乙酸，临用时现配），Giemsa染液， 2.2%柠檬酸钠，0.01M磷酸缓冲液 （PBS）pH6.8。
实验小鼠骨髓染色体制备和观察
8.小鼠染色体观察： 低倍镜、高倍镜下寻找染色体分散的中
期分裂相.
资料仅供参考,不当之处，请联系改正。
小鼠骨髓染色体 10 ×10
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小鼠骨髓染色体 10 ×40
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➢ 数目观察：小鼠2倍体细胞染色
体，数目2n=40条。其中19对为常染 色体，一对为性染色体，染色体的核 型分为4组。雄性 XY, 雌性XX,Y染 色体最小。
➢形态特征观察：端着丝粒染色体
“U”“V”。
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五、注意事项
1．掌握好秋水仙素的浓度和处理时间； 2．离心前需要配平； 3. 小鼠骨髓要冲洗干净，以收集足够的骨髓细胞； 3．低渗处理是实验成败的关键，注意低渗时间； 4．固定液要现配现用，固定要充分； 5．载玻片要洁净并预冷，滴片要有一定的高度； 6. 细胞悬液不能太稀，要呈乳白色； 7. 烤片时温度不能太高。 8. 冲洗染液时水流要缓慢，以免细胞流失过多。
放出来。
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秋水仙素处理：秋水仙素溶液可抑制纺锤体的形 成，使正在分裂的骨髓细胞停止在细胞分裂中期， 积累大量中期分裂相细胞。
低渗作用: 使细胞充分膨胀，减少染色体间的相互 缠绕和重叠。
预固定：终止低渗作用，使细胞离心时不易破裂 ，固定维持细胞形态结构。
高距离滴片：使细胞膜易于破裂，获得中期染色 体标本，在显微镜下观察染色体的结构和数量。
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三、实验器材和试剂
• 1.器材 蜡盘、手术剪、小镊子、平皿、注射
小鼠染色体的制备、观察、染色
生命科学学院Life Science College细胞生物学实验报告姓名：柳伟雄班级：2013级生科一班学号：************ 同组者：曾玮璠山东大学实验报告2015年6月1日姓名：柳伟雄系年级：生科一班2013级同组者：曾玮璠科目：细胞生物学实验题目：小鼠染色体的制备、染色、观察一、目的和要求1.初步掌握小鼠睾丸细胞染色体标本的基本制作过程和Giemsa染色法，了解各操作步骤的原理。
2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。
3.认识不同生物染色体的特征，学会做染色体组形图。
二、原理凡处于活跃增殖状态的细胞，或者经过各种处理后，任何动物组织的细胞就可进入分裂，均可用于染色体分析。
在正常动物体内，精巢和骨髓均为是活跃分裂的组织。
给动物注射一定剂量的秋水仙素，即可使许多处于分裂的细胞停滞于中期，然后采用常规空气干燥法制备染色体，即可得到大量可分析的染色体标本。
本方法简便、可靠，不需要经体外培养和无菌操作，易于推广。
骨髓细胞是用于动物细胞遗传学研究很好的材料。
但在取材方面，精巢又比骨髓要简易一些，故本实验选用小鼠的精巢为实验材料。
对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处; 2. 用低渗法使细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞被胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上; 3. 空气干燥法可使细胞的染色体在载片上展平,经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。
Giemsa染色是最常用的染色方法之一，适用于多种细胞和染色体染色。
主要用Giemsa染液可以将细胞核染成紫红色或蓝紫色，胞浆染成粉红色，在光镜下呈现出清晰的细胞及染色体图像。
三、试剂和器材1.试剂：秋水仙素、生理盐水（0.9%的NaCl溶液）、0.3%KCl低渗溶液、固定液（甲醇：冰醋酸=3：1）、Giemsa染液Giemsa染液的配制：吉姆萨粉(Giemsa stain)甘油(AR)甲醇(AR)将Giemsa粉放入研钵中，先加入少量甘油，研磨至无颗粒为止，然后再分批加入甘油，放56℃温箱中2h后，分批加入甲醇，将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。
《医学遗传学实验》——小鼠睾丸染色体制备
三、实验内容与步骤
腹腔注射秋水仙素 处死小鼠
（损伤脊髓法）
取睾丸，剥离白膜， 剪碎曲细精管 弃上清
第一次低渗：0.4%KCL,37℃,5ml→10 ml,吹打2 min 37℃ 静置2min 第二次低渗： 0.4%KCL, 吹打2min, 37℃,10ml， 37℃静置5min
弃上清
固定：8ml新鲜固定液，10 min 弃上清
实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备
医学遗传学系
一、实验ห้องสมุดไป่ตู้的
1、掌握快速制备动物染色体的方法； 2、观察小鼠染色体的数目及形态特征。
二、实验原理
活体内注射秋水仙素使细胞停止在 分裂中期；低渗处理，使细胞膜胀破、染 色体分散，从而得到染色体的中期分裂相 静置5min ;固定剂处理使染色体结构保持完整，防 止染色体收缩。
离心：1000rpm，8min 滴片，烘干 镜检观察
软化：60%冰醋酸，3ml，3min 细流冲洗，晾干
染色：室温下10min
本文观看结束！！！
谢
欣
谢
赏！
动物遗传学教学实验“小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作”方法
动物遗传学教学实验“小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作”方法改进的研究作者：张燕军赖双英苏蕊张文广来源：《科教导刊》2014年第10期摘要“减数分裂期染色体制备实验”是动物遗传学实验课程重要内容。
本文介绍了小鼠睾丸细胞减数分裂染色体标本制作的改进方法，通过本方法可制备和观察到大量分散良好、背景清晰、染色体结构紧凑的睾丸细胞减数分裂各期分裂相，得到较好的实验效果。
关键词动物遗传学睾丸细胞减数分裂染色体改进中图分类号：G424 文献标识码：AAnimal Genetics Teaching Experiment "Mouse Testis MeioticChromosome Specimen" Methods ImprovementZHANG Yanjun， LAI Shuangying， SU Rui， ZHANG Wenguang（College of Animal Science， Inner Mongolia Agricultural University， Hohhot， Inner Mongolia 010018）Abstract "Preparation of meiotic chromosomes experiment" is an important part of animal genetics experiment course. This article describes the mouse testis meiotic chromosome specimen of the improved method， can be prepared by this method and observed a large number of well-dispersed， clear background， compact testicular meiotic chromosome structure of each phase of the division， get better experimental results.Key words animal genetics； testicular cells； meiosis； chromosome； improvement遗传学既是一门历史悠久的学科，又是一门发展迅速、实践性很强的学科，研究范围正在不断拓宽和深化，新技术、新方法不断涌现。
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三、实验内容与步骤
腹腔注射秋水仙素
处死小鼠
（损伤脊髓法）
取睾丸，剥离白膜， 剪碎曲细精管
第一次低渗：0.4%KCL,37℃,5ml→10 ml,吹打2 min 37℃ 静置2min
弃上清
第二次低渗： 0.4%KCL, 吹打2min,
37℃,10ml， 37℃静置5min
弃上清
固定：8ml新鲜固定液，10 min
实验一、小鼠睾丸细胞染色体标本的制备 医学遗传学系
一、实验目的
1、掌握快速制备动物染色体的方法； 2、观察小鼠染色体的数目及形态特征。
二、实验原理
活体内注射秋水仙素使细胞停止在 分裂中期；低渗处理，使细胞膜胀破、染 色体分散，从而得静置到5染mi色n 体的中期分裂相 ;固定剂处理使染色体结构保持完整，防 止染色体收缩。
离心：1000rpm，8min
弃上清
软化：60%冰醋酸，3ml，3min 滴片，烘干
染色：室温下10min 细流冲洗