生理学实验报告蛙心灌流
心脏的灌流实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习心脏灌流实验的操作方法。
2. 观察不同理化因素对心脏活动的影响,包括离子浓度、温度、pH值、激素及药物等。
3. 了解心脏生理学中离子、神经递质等对心脏活动调节的作用。
二、实验原理心脏灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
通过建立离体心脏灌流模型,可以模拟心脏在体内的生理环境,观察和分析不同因素对心脏活动的影响。
离体心脏在适宜的灌流液中,可以维持一定时间的节律性收缩和舒张,从而为实验提供基础。
三、实验对象与材料实验对象:蟾蜍实验材料:1. 任氏液2. 0.9%氯化钠溶液3. 2%氯化钙溶液4. 1%氯化钾溶液5. 0.1%肾上腺素溶液6. 0.1%乙酰胆碱溶液7. 3%乳酸溶液8. 1%碳酸氢钠溶液9. BL-420生物信号分析系统10. 张力换能器11. 铁支台12. 试管夹13. 蟾蜍手术器械14. 蟾心插管15. 滴管16. 大烧杯17. 棉线18. 双凹夹19. 滑轮四、实验步骤1. 暴露心脏:将蟾蜍处死,取出心脏,置于盛有任氏液的培养皿中。
2. 心脏插管:用蟾蜍手术器械将心脏动脉圆锥处结扎,并插入心脏插管。
3. 灌流液准备:根据实验需求,配置不同理化条件的灌流液。
4. 灌流实验:a. 将心脏插管与张力换能器连接,通过BL-420生物信号分析系统实时监测心脏活动。
b. 分别用不同灌流液进行灌流,观察心脏活动的变化。
c. 记录不同灌流液对心脏活动的影响,包括心率、收缩幅度等指标。
5. 数据分析:对实验数据进行分析,得出结论。
五、实验结果1. NaCl溶液灌流:心率减慢,收缩幅度降低。
2. KCl溶液灌流:心率减慢,收缩幅度降低。
3. CaCl2溶液灌流:心率加快,收缩幅度增强。
4. 肾上腺素溶液灌流:心率加快,收缩幅度增强。
5. 乙酰胆碱溶液灌流:心率减慢,收缩幅度降低。
6. 乳酸溶液灌流:心率减慢,收缩幅度降低。
7. 碳酸氢钠溶液灌流:心率加快,收缩幅度增强。
动物生理学-蛙心灌流实验报告

一、实验结果1、正常心搏曲线2、滴加0.65%NaCl溶液3、滴加2%CaCl2溶液2滴4、滴加1%KCl溶液5、滴加0.01%Adr溶液6、滴加0.01%Ach溶液7、加2滴0.01%阿托品和0.01%Ach二、分析与讨论1、正常心搏曲线从图中可以看出本组牛蛙心跳比较微弱,再结合本组牛蛙心脏外表上有不规则小黑斑这一点,可推断出这只牛蛙可能患有心脏疾病。
2、滴加0.65%NaCl溶液滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,灌注液中缺乏Ca2+,以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
3、滴加2%CaCl2溶液2滴加入CaCl2后,心跳略微增强。
细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。
Ca2+浓度增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。
Ca2+浓度增高使Ca2+内流增多,心肌收缩能力增强。
4、滴加1%KCl溶液滴加1%KCl后,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度也逐渐下降。
这是因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。
所以心搏曲线振幅减小。
5、滴加0.01%Adr溶液滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大。
其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强。
另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强。
6、滴加0.01%Ach溶液滴加乙酰胆碱后,蛙心收缩减弱,心率减慢。
牛蛙机能实验报告分析(3篇)

第1篇一、实验背景牛蛙作为生理学实验中常用的动物模型,其心脏、神经肌肉系统等生理机能的研究对于理解生物体的基本生命活动具有重要意义。
本实验通过对牛蛙进行离体心脏灌流实验、神经肌肉标本制备实验等,旨在分析牛蛙的心脏功能、神经肌肉兴奋传导等生理学特性。
二、实验目的1. 了解牛蛙心脏生理特性,分析不同离子及药物对离体蛙心脏的影响。
2. 掌握神经肌肉标本制备方法,研究神经肌肉兴奋传导规律。
3. 探讨牛蛙生理学实验在医学、生物学等领域的应用价值。
三、实验方法1. 离体心脏灌流实验- 实验对象:牛蛙- 实验材料:BL-420机能实验系统、蛙心夹、机械-电换能器、铁支架、试管夹、蛙心插管、蛙手术器械、滴管、烧杯、棉线、任氏液、0.65% NaCl、1% KCl、1:10000去甲肾上腺素、1:100000乙酰胆碱等溶液、3% 乳酸、2.5% NaHCO-3。
- 实验步骤:1. 制备蛙心插管,将插管插入牛蛙心脏,进行灌流。
2. 改变灌流液的组成成分,观察心脏活动变化。
3. 分别加入不同浓度的NaCl、KCl、去甲肾上腺素、乙酰胆碱等溶液,观察心脏活动变化。
2. 神经肌肉标本制备实验- 实验对象:牛蛙- 实验材料:RM6240生物机能实验系统、张力换能器、标本槽、哺乳动物手术器械、丝线、棉球、任氏液、乙酰胆碱液。
- 实验步骤:1. 制备蛙腹直肌标本,将其悬挂于盛有任氏液的标本槽中。
2. 配制不同浓度的乙酰胆碱溶液,观察标本收缩力变化。
3. 绘制量效曲线,求EC50、pD2。
四、实验结果与分析1. 离体心脏灌流实验- 实验结果显示,改变灌流液的组成成分对离体蛙心脏活动有显著影响。
当灌流液中Na+浓度增加时,心脏收缩力增强;K+浓度增加时,心脏收缩力减弱;去甲肾上腺素和乙酰胆碱均能增强心脏收缩力。
- 分析:Na+是维持心脏兴奋和收缩的重要离子,K+则对心脏兴奋和收缩具有抑制作用。
去甲肾上腺素和乙酰胆碱作为心脏兴奋剂,能增强心脏收缩力。
蛙心灌流实验报告分析

激活细胞膜上的一种K+通道, 心肌膜上Ca通道开放概率降低
促进胞内K+外流,最大复极
电位更负。窦房结自律性频率
降期低的,内向心电率流减也慢导。致并心且率抑减制慢4 。肌浆中Ca2+浓度降低
慢反应细胞0期动 作电位的上升幅
度减少,上升速
心肌收缩减弱
率减慢,房室传 导速率减慢
心肌膜上Ca通道开放概率增加
提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度
心肌舒张速度增快,舒张完全。
肌浆中Ca2+浓度升高 心肌收缩增强
慢动幅化导时作度加反间电增快应缩位大,细短的,房胞上室去0 期升传极
5. 乙酰胆碱使得蛙心收缩减弱,收缩曲线基线下移,心结合
[cAMP]
灌流液中加入肾上腺后,曲线幅度明显加 大,可见蛙心收缩增强,基线下降,说明 心脏舒张完全,从而提高心输出量。肾上 腺具有正性变力,正性变时,正性变传导 作用。
加强4期的内向电流,使自动去极化速率加 快,窦房结自律性频率变高,心率加快
肾上腺素
心肌细胞上的β受体相结合
ATP [cAMP]
促肌钙蛋白对Ca2+的释放
02
正常蛙心收缩曲线
01
曲线幅度:代表心 脏收缩的强弱。
曲线密度:代表心 跳频率。
曲线的规律性:代 表心跳的节律性。
曲线的基线:代表 心室舒张的程度。
曲线的顶点水平: 代表心室收缩的程 度。
心肌的收缩活动是由钙离子触发的,由于心肌细胞的肌 浆网不发达,故心肌收缩的强弱与细胞外钙离子的浓度 成正比。任氏液中含有0.65%的NaCl,也含有Ca离子, 但全部换成0.65%NaCl,没有Ca离子,造成灌流液中缺 少钙离子,以致心肌细胞动作电位2期内流的钙离子减少, 胞浆内Ca离子浓度减少,所以心肌的收缩活动减弱。如 果长时间用0.65%的NaCl溶液灌注蛙心,心脏最终会停 止收缩,但心肌仍能产生动作电位,这种现象称为兴奋 -收缩脱耦联,是心肌细胞内缺少Ca离子的表现。
蛙心生理实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习离体蛙心灌流的方法。
2. 观察理化因素对蛙心活动的影响。
3. 探究心脏节律性活动的生理机制。
二、实验原理蛙心灌流实验是一种常用的生物学实验方法,通过将蛙心取出并置于人工灌流液中,使其在一定时间内保持节律性收缩。
实验中,通过改变灌流液的成分,可以观察不同理化因素对心脏活动的影响,从而了解心脏生理活动的调节机制。
蛙心无营养性血管,离体后采用人工灌流的方法,仍可保持其新陈代谢,心脏仍能有节律的自动收缩、舒张,并维持较长时间。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验器材:蛙心夹、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、任氏液、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、套管夹。
3. 生理信号采集系统、计算机。
四、实验方法与步骤1. 暴露蛙心:取一只青蛙,双毁髓后背位置于蛙板上,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管,在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
2. 插管:用斯氏蛙心插管法,将蛙心夹插入心脏,并通过蛙心夹上的管道与灌流系统连接。
3. 灌流:将蛙心置于任氏液中,开始灌流,调节灌流速度和压力,使心脏保持节律性收缩。
4. 观察与记录:观察心脏的收缩、舒张情况,记录心率和心搏曲线。
5. 改变灌流液成分:分别用0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸等灌流液替换任氏液,观察心脏活动的变化。
6. 分析与讨论:分析不同灌流液对心脏活动的影响,讨论心脏生理活动的调节机制。
五、实验结果与分析1. 在正常任氏液中,心脏保持节律性收缩,心率为60-100次/分钟。
离体蛙心实验实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 观察离体蛙心的生理特性,了解心脏在离体条件下的收缩和舒张规律。
2. 探讨神经递质、激素等对离体蛙心功能的影响。
3. 掌握离体蛙心灌流实验的操作方法。
二、实验原理离体蛙心灌流实验是研究心脏生理学的重要方法之一。
在实验过程中,通过灌流装置向蛙心提供氧气和营养物质,同时可以观察心脏的收缩和舒张情况。
实验中,可以通过改变灌流液成分、温度、pH值等条件,观察心脏功能的改变,从而了解心脏生理特性及影响因素。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:蟾蜍、蛙心套管、蛙心夹、蛙板、蛙类手术器械、二道仪、任氏液、氯化钙、肾上腺素、乙酰胆碱等。
2. 实验仪器:手术显微镜、蛙心灌流装置、注射器、秒表、滴管等。
四、实验方法与步骤1. 准备工作:将蟾蜍置于蛙板上,用手术剪剪开胸腔,暴露心脏。
用蛙心夹固定心脏,并连接灌流装置。
2. 灌流液准备:配制任氏液、氯化钙溶液、肾上腺素溶液、乙酰胆碱溶液等。
3. 实验分组:将实验分为对照组、氯化钙组、肾上腺素组、乙酰胆碱组。
4. 实验步骤:a. 对照组:灌流任氏液,观察心脏的收缩和舒张情况。
b. 氯化钙组:灌流氯化钙溶液,观察心脏功能的改变。
c. 肾上腺素组:灌流肾上腺素溶液,观察心脏功能的改变。
d. 乙酰胆碱组:灌流乙酰胆碱溶液,观察心脏功能的改变。
5. 记录数据:观察心脏的收缩和舒张频率、收缩幅度等,并记录数据。
五、实验结果与分析1. 对照组:心脏呈现规律的收缩和舒张,收缩幅度适中,频率约为60次/分钟。
2. 氯化钙组:心脏收缩幅度明显增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。
3. 肾上腺素组:心脏收缩幅度增大,频率加快,收缩时间延长,舒张时间缩短。
4. 乙酰胆碱组:心脏收缩幅度减小,频率减慢,收缩时间缩短,舒张时间延长。
六、实验结论1. 离体蛙心在灌流条件下可以维持一定时间的收缩和舒张功能。
2. 氯化钙和肾上腺素可以增强离体蛙心的收缩功能,使收缩幅度增大、频率加快。
蛙心倒灌实验报告

一、实验目的1. 学习蛙心倒灌实验的操作方法。
2. 观察不同灌流液对蛙心活动的影响,探究理化因素对心脏功能的作用。
3. 了解心脏自律性、兴奋性和传导性的生理机制。
二、实验原理蛙心倒灌实验是生理学实验中常用的方法之一,通过将蛙心置于人工灌流液中,模拟心脏在体内的血液流动情况,观察不同灌流液对心脏活动的影响。
实验中,通过改变灌流液的成分和浓度,可以模拟心脏在不同生理和病理状态下的功能变化。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:青蛙2. 实验仪器:蛙心夹、张力传感器、支架、双凹夹、刺激电极、滴管、培养皿、棉线、任氏液、0.65%NaCl溶液、2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液3. 实验试剂:NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、Na2HPO4、蒸馏水四、实验方法与步骤1. 将青蛙麻醉,背位固定于蛙板上。
2. 暴露心脏,用手术刀将心脏周围的大血管分离,并在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎。
3. 将蛙心夹固定在心脏的左心室,连接张力传感器。
4. 将心脏置于培养皿中,加入适量的任氏液。
5. 使用滴管向心脏的左心室注入0.65%NaCl溶液,观察心脏的收缩情况。
6. 分别加入2%CaCl2溶液、1%KCl溶液、1:10000肾上腺素溶液、1:10000乙酰胆碱溶液、3%乳酸溶液,观察心脏的收缩情况。
7. 记录不同灌流液对心脏收缩频率、幅度和节律的影响。
五、实验结果与分析1. 在0.65%NaCl溶液中,心脏保持正常的节律性收缩,收缩频率和幅度适中。
2. 将灌流液更换为0.65%NaCl溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微减小,说明细胞外液中缺乏Ca2+,导致心肌收缩力降低。
3. 向灌流液中加入2%CaCl2溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微加大,说明细胞外液浓度升高,Ca2+内流增加,心肌收缩力增强。
4. 向灌流液中加入1%KCl溶液后,心脏的收缩幅度和频率稍微加大,说明K+与Ca2+在细胞膜上有竞争性抑制,细胞外液中K+浓度升高,Ca2+内流减少,心肌的兴奋性降低。
蛙的生理实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 学习蛙的解剖结构,掌握青蛙坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解神经和肌肉的兴奋、兴奋性,刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
3. 掌握蛙心灌流实验方法,观察心脏活动的影响因素。
二、实验原理1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备:蛙的坐骨神经和腓肠肌在生理条件下具有兴奋性和传导性,通过制备坐骨神经-腓肠肌标本,可以观察神经和肌肉的兴奋、兴奋性,刺激与反应的规律和肌肉收缩的特征。
2. 蛙心灌流实验:离体心脏灌流实验是研究心脏生理功能的重要方法,通过改变灌流液的成分,可以观察其对心脏活动的影响,了解心脏的正常节律性活动。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:青蛙、任氏液、生理盐水、剪刀、手术剪、眼科镊、金属探针、玻璃分针、蛙板、蛙钉、细线、培养皿、滴管、电子刺激器、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、套管夹、65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰胆碱、3%乳酸。
2. 实验仪器:蛙类解剖台、显微镜、电生理实验系统、刺激器、数据采集系统、蛙心灌流装置。
四、实验方法与步骤1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备:(1)取青蛙一只,用生理盐水冲洗干净,左手握住蛙,使其背部向上。
(2)用眼科镊和剪刀在青蛙的坐骨神经和腓肠肌处剪开,分离出坐骨神经和腓肠肌。
(3)将坐骨神经和腓肠肌置于任氏液中,用玻璃分针轻轻拨动腓肠肌,观察肌肉收缩情况。
2. 蛙心灌流实验:(1)将青蛙的左心耳和左肺静脉用细线结扎,然后剪断,使心脏与体循环分离。
(2)将心脏置于蛙心灌流装置中,连接计算机采集系统和刺激器。
(3)将灌流液(任氏液)通过灌流装置注入心脏,观察心脏搏动情况。
(4)改变灌流液的成分,如加入肾上腺素、乙酰胆碱、乳酸等,观察心脏活动的影响。
五、实验结果与分析1. 蛙的坐骨神经-腓肠肌标本制备成功,腓肠肌在刺激下产生明显的收缩反应。
2. 蛙心灌流实验成功,心脏在灌流液的作用下保持节律性搏动。
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蛙类离体心脏灌流一、【目的要求】1、学习离体蛙心灌流法。
2、观察Na+,K+,Ca2+及肾上腺素(Adr),乙酰胆碱(ACh),乳酸对离体心脏活动的影响。
二、【原理】将离体蛙心(失去神经支配的蛙心)保持在适宜的环境中,在一定的时间内仍然能够保持节律性收缩,心脏正常的节律性活动需要一个适宜的理化环境,离体心脏也是如此,离体心脏脱离了机体的神经支配和全身体液因素的直接影响,可以通过改变灌流液的某些成分,观察其对心脏活动的作用。
心肌细胞的自律性、兴奋性、传导性及收缩性,都与钠、钾及钙等离子有关。
外源性给予去甲肾上腺素或乙酰胆碱可产生类似心交感神经或迷走神经兴奋时对心脏的作用。
三、【实验仪器】青蛙、常用手术器械、蛙板(或蜡盘)、蛙心夹、计算机采集系统、张力传感器、支架、双凹夹、双针形露丝刺激电极、滴管、培养皿(或小烧杯)、棉线、任氏液。
套管夹、0.65%NaCl、2%CaCl2、1%KCl、1:10000肾上腺素、1:10000乙酰肌碱、3%乳酸。
四、【方法与步骤】1、斯氏蛙心插管法(1)一只青蛙,双毁髓后背位置于蜡盘中,按前面的方法暴露心脏。
仔细识别心脏周围的大血管(见右图)。
在左主动脉下方穿一线,于动脉圆锥处结扎(动物个体小时,结扎位置可靠上些)。
再从左右两主动脉下方穿一线,并打一活结备用。
左手提起主动脉上的结扎线,右手用眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。
选择大小适宜的蛙心套管,然后将盛有少量(套管内2~3 cm高度)任氏液(内加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管,山开口处插入动脉圆锥(见右图)。
当套管尖端到达动脉圆锥基部时,应将套管稍稍后退,使尖端向动脉圆锥的背部后下方及心尖方向推进,经主动脉瓣插入心室腔内(于心室收缩时插入,但不可插得过深,以免心室壁堵住套管下口)。
此时可见套管中血液冲人套管,并使液面随心脏搏动而亡下移动,表明操作成功(否则需退回并重新插入)。
用滴管吸去套管中的血液,更换新鲜任氏液。
稳定住套管后,轻轻提起备用线,将左、右主动脉连同插入的套管用双结扎紧(不得漏液),再将结线固定在套管的小玻璃钩上,然后剪断结扎线上方的血管。
轻轻提起套管和心脏,看清静脉窦的位置,于静脉窦下方剪断有牵连的组织,仅保留静脉窦与心脏的联系,使心脏离体(切勿损伤静脉窦)。
用任氏液反复冲洗心室内余血,使套管内灌流液不再有残留血液。
保持套管内液面高度一致(1.5~2 cm),即可进行实验。
(2)将插好离体心脏的套管固定在支架上,用蛙心夹夹住少许心尖部肌肉(不可夹得过多,以免因夹破心室而漏液)。
再将蛙心夹上的系线绕过一个滑轮与张力传感器相连(如右图)。
注意:勿使灌流液滴到传感器上。
调节显示器上心脏收缩曲线的幅度适中。
2、实验观察(1)记录正常心搏曲线(2)改用0.65%NaCI溶液灌流,并作好加药标记,观察心搏变化。
待曲线氏插管装置出现明显变化时,立即吸去套管中的灌流液,同时做好冲洗标记,并用新鲜任氏液清洗2—3次,待心搏恢复正常。
注意:换液时切勿碰套管,以免影响描记曲线的基线,同时保持灌流液面一致(以下同)。
观察可得,NaCI溶液会阻遏心脏搏动。
(3) 迅速用新鲜任氏液清洗2~3次,待心搏恢复正常。
向套管内加入1~3滴2%CaCI:溶液,观察并记录心搏曲线的变化。
当出现明显变化时,立即更换任氏液,待心搏恢复正常(如果恢复迟缓,可多次冲洗)。
(4)同法向套管中加1—2滴1%KCl溶液,记录心搏曲线的变化。
当心搏曲线变化时,同法更换灌流液,待心搏恢复正常。
(5)同法记录套管中加入l~2滴的肾上腺素溶液(1:10 000)后心搏曲线的变化。
(6)同法记录套管中加入1—2滴乙酰胆碱溶液(1:10 000)后心搏曲线的变化。
(7)同法记录套管中加入l~2滴的3%乳酸后心搏曲线的变化。
五、【实验结果与原因分析】曲线的幅度————收缩的程度曲线的密度————心率曲线的基线————舒张的程度1、正常收缩曲线图2、滴加0.65%NaCl溶液图分析:滴加0.65%NaCl溶液后,心跳减弱,这是由于用0.65%NaCl溶液灌注蛙心时,由于灌注液中缺乏Ca2+(),以致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
3、滴加2%CaCl溶液分析:细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。
[Ca2+]增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2 0+] 0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。
Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。
[Ca2+]降低时,所引起的变化与高钙时相反。
因此加入CaCl2后,心率减少、振幅减少,基线上0移。
4、滴加1%KCl溶液分析:滴加1%KCl后的心搏曲线发现,曲线的频率逐渐减小,愈来愈疏,幅度逐渐下降,最后停止在基线处,即心脏停博于舒张状态。
因为当细胞K+浓度增高时,K+与Ca2+有竞争性拮抗作用,K+抑制细胞膜对Ca2+的转运,使进入细胞内Ca2+减少,心肌的兴奋—收缩偶联过程减弱,心肌收缩力降低。
所以心搏曲线振幅减小。
5、滴加1:10000肾上腺素溶液分析:滴加肾上腺素后,蛙心收缩增强,心脏舒张完全,描记的心搏曲线幅度明显增大。
其作用机理是,肾上腺素可与心肌细胞膜上的B受体结合,提高心肌细胞和肌浆网膜Ca2+通透性,导致肌浆中Ca2+浓度增高,使心肌收缩增强。
另外,肾上腺素还有降低肌钙蛋白与Ca2+亲和力,促使肌钙蛋白对Ca2+的释放速率增加,提高肌浆网膜摄取Ca2+的速度,刺激Na+与Ca2+交换,使复极期向细胞外排出Ca2+的作用加速,这样,将使心肌舒张速度增快,整个舒张过程明显增强。
6、滴加1:10000乙酰胆碱溶液分析:上图可示,蛙心收缩减弱,心率减慢,最后出现蛙心停止舒张阶段。
其机理为:乙酰胆碱与心肌细胞膜M受体结合,一方面提高心肌细胞膜K+通道的通透性,促使K+外流,将引起:1)窦房强细胞复极时K+外流增多,最大复极电位绝对值增大;Ik衰减过程减弱,自动除极速度减慢。
这两方面因素导致窦房自律性降低,心率减慢。
2)复极过程中K+外流增加,动作电位2、3期缩短,Ca2+进入细胞内减少,使心肌收缩减弱;另一方面乙酰胆碱可直接抑制Ca2+通道,减少Ca2+内流,进而使心肌收缩减弱。
7、滴加3%乳酸溶液分析:H+与Ca2+的竞争机制,导致心肌细胞动作电位2期内流Ca2+减少,细胞质Ca2+浓度减少,心肌的收缩活动也随之减弱。
六、【注意事项】1.制备蛙心标本时,勿伤及静脉窦。
2.上述各实验项目,一旦出现作用应立即用正常任氏液换洗,以免心肌受损,而且必须待心搏恢复正常后方能进行下一步实验。
3.尽量选用健壮、体大的雄性蟾蜍,手术过程中注意保护心脏,避免损伤。
4.实验中及时用任氏液冲洗心脏,待曲线恢复平稳后再进行下一步操作。
5.每次更换任氏液都必须保持灌流液液面高度恒定,以免因灌流量变化而影响结果。
6.严格控制每次药品加入量,先加一滴,效果不明显再加一滴。
7.吸滴瓶中的任氏液和吸蛙心套管内溶液的吸管应区分专用,不可混淆使用,以免影响实验结果。
七、【讨论】1. 离体蛙心制备好后,有时候馆内的液面上下移动很不明显,是何原因?如何处理?答:离体蛙心制备好后,蛙心插管内的液体应随蛙心室的收缩和舒张活动而上下移动。
其实质是:在心室收缩时,心室容积减少,室内压升高,将心室内的液体压入插管内,管内液面上升;在心室舒张的时候,心室容积增大,心室内压减少,将插管内液体吸入心室,管内液面下降。
但是有时候蛙心插管内液面波动不明显,其主要原因是:⑴插管内尖端出现血凝块。
⑵插管尖端不在心室腔内,而是在心房或者脉间结缔组织等地方。
⑶插管进入心室腔内过深,以致尖端抵住了心室壁。
⑷蛙心由于长期心肌失血,导致活力下降。
2. 实验过程中,为什么必须保持蛙心插管内液面高度的恒定?液面过高或过低会产生怎样的影响?答:在实验过程中,蛙心插管内液面高度发生变化,心脏收缩曲线会相应发生变化。
心肌缩短幅度和速度受到前负荷和后负荷的影响。
插管液面高度所产生的压力,在心室舒张期末期相当于心肌的前负荷,心室开始收缩的时候,此液体所产生的压力又成为心肌收缩时的后负荷。
故高度的改变,进而引起的前后负荷的改变将改变心肌收缩的幅度和频率。
当液面过高时。
心缩曲线幅度将降低。
因为过高的液面,将使心室前负荷超过了最适前负荷,将导致粗细肌丝过于疏远,而导致收缩的潜力减少,心肌收缩不再增加或下降。
而类似的,过高的后负荷,也使心肌收缩的幅度和速度大大下降。
而当液面过低时,心室收缩的幅度也会减少。
因为前负荷过小,将导致粗细肌丝过于接近,而导致收缩的潜力减少,实际上,此时由于前负荷的减少导致心室收缩的效力的减少比前负荷增加而导致的还有明显。
类似的,后负荷相应的减少也会导致心室收缩的减弱。
所以,在实验中保持最适的液面高度。
是取得较好实验结果的前提。
3.各种离子成分改变蛙心收缩的原理是什么?答:由于心肌细胞生物电活动和收缩过程与离子密切相关,因此,细胞外液中离子浓度升高或降低均会影响到心肌的电生理特性和收缩性。
(1)钾离子的影响K+与静息电位的形成有关。
细胞外液K+浓度[K+]0变化对心肌生理特性的影响较为复杂。
高钾:[K+]0轻度或中度增高时,膜内、外K+浓度差减小,静息电位绝对值减小,与阈电位差距缩短,因此,兴奋性增高。
[K+]0显著升高时,由于静息电位绝对值减小过多(膜内达-55mV左右),Na+通道失活,因而兴奋性降低甚至消失。
另外,还使0期去极化速度和幅度减小,传导性降低,导致兴奋传导减慢,甚至传导阻滞。
此外,[K+]0增高还可提高膜对K+的通透性,加速K+外流,动作电位平台期缩短,因此,不应期缩短。
此外由于平台期缩短,减少了Ca2+的内流,加上细胞外K+与Ca2+在膜上有竞争性抑制作用,导致心肌收缩功能减弱;(2)钙离子的影响细胞外Ca2+在细胞膜上对Na+内流有竞争性抑制作用,称为膜屏障作用。
[Ca2+] 0增高时,Na+内流受抑制,细胞0期除极速度与幅度减小,使兴奋性及传导性均降低。
[Ca2+] 0增高使Ca2+内流增多,因此慢反应细胞0期去极化加快加强,传导性增高,而快反应细胞平台期缩短,有效不应期缩短,复极加速。
Ca2+内流增多,使心肌收缩能力增强。
[Ca2+] 0降低时,所引起的变化与高钙时相反。
(3)钠离子的影响细胞外液中钠浓度差梯度的变化一般对心肌活动影响不明显。
只有当[Na+] 0明显增高时,膜内外钠的浓度差梯度增大,因此,快反应细胞Na+内流加快,0期去极速度和幅度均增加,导致传导性和自律性增高。
同时,Na+内流的增多促进细胞内Ca2+的外运使细胞内Ca2+浓度降低,因此,心肌收缩能力减弱。