离体蛙心灌流实验

实验五离体蛙心灌流实验

一实验目的

1、了解蟾蜍离体心脏的灌流的方法。

2、观察细胞外液钾离子、钙离子浓度变化对心脏活动的影响。

二实验原理

心脏离体后，如用人工灌流的方法，保持其新陈代谢的顺利进行，则心脏仍能有节律的自动收缩和舒张，并可维持较长的时间。离体心脏所需的条件应与动物内环境的理化性质基本相近，因此改变灌流液的理化因素，则可引起心脏活动的变化。

1、任氏液：正常对照

含有NaCl、CaCl2、KCl、NaH2PO4、 Na2HPO4

和蒸馏水，其电解质、晶体渗透压、pH值与蛙的组织液相近。

2、0.65%NaCl灌流：

3、2%CaCl2灌流

4、 1%KCl灌流

5、1:10000 E 灌流

6、1:10000 Ach灌流

7、心得安

β1受体阻断剂，抑制肾上腺素与β1受体结合，使E不能发挥作用。

8.、阿托品

M受体阻断剂，抑制Ach减慢心率，加速房室传导，增加心房收缩力。

三实验器材

微机生物信号处理系统， physiology系统，学校服务器系统，蟾蜍离体蛙心，任氏液，1%KCl，3%CaCl2，65%NaCl，1/10000 E，心得安+1/10000,1/10000 Ach，阿托品+1/10000 Ach。

四实验步骤

1、标本制备（观看视频）

2、仪器及标本的连接

3、具体软件操作：

1）离子试剂：任氏液→0.65%NaCl溶液→任氏液清洗→1%KCl溶液→任

溶液→任氏液清洗

氏液清洗→2%CaCl

2

2）药物试剂：肾上腺素（E）→任氏液清洗→心得安→任氏液清洗→Ach，任氏液清洗→阿托品→任氏液清洗。

五实验结果

图1 离体蛙心灌流

表1 离体蛙心灌流数据记录

六结果分析

此实验说明心脏具有自律性，兴奋性，传导性，收缩性，离体心脏静脉窦还能产生兴奋并传导到心房和心室，引起心脏有节律的兴奋和收缩。体内细胞所直接生存的环境较为稳定，内环境的稳态是细胞、器官维持正常生存和活动的必要条件，所以改变灌流的溶液，会引起心脏收缩的改变。