第二章 卫生样品的采集与处理
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第二章 样品采集与处理
随机取样：随机中有规律：查随机数表、抓阄法、
微机确定等。海关、收货方查看食品质量；卖方也
利用此法查库存的产品质量
六、 样品的处理方法：测定微生物指标时样品的处理 方法 液体直接 吸取25毫升到225毫升无菌水中配制为10-1
样品液。
粉状称取25克到225毫升无菌水中大于25rpm振荡。
固体称取25克，在灭菌的均质器内均质后到入225毫
样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、 采样人及采样年、月、日)。
5）、送检
3、无菌取样的要求 １）无菌样品的采集在收集过程中，本身应避免污染，然后放入消毒容 器中。 2）取样、检验前的准备工作 包装无菌取样的工具 其它准备 盒子或制冷皿、灭菌容器、取样工具、灭菌手套、灭菌全包装袋。
当采集无菌样品时，一条最重要的规则是：千万别污染样品。
４、固体样品
使用双套回转取样管，对大仓装的袋（或件）进行抽样， 将样品合并混匀，按四次法或用分样器分取平均小样。小 袋装样品按规定取样数量直接拣取小袋样品。
５、液体样品
一般可采用虹吸法，或者用简单的玻璃管按不同深度分 层取样。对于粘稠或含有固体悬浮或非均匀液体应充分搅 匀，然后再进行取样。
６、小包装、玻璃瓶装和盒装样品
按取样数量将内容物连同包装一起采样。取样时，玻璃 广口瓶应预先洗净、烘干，按取样的品种、生产日期、班 次、批号及类别写在标签上，封贴在广口瓶上。
五、常见的抽样方法 选择性取样：生产的全过程任意环节取样。实 验室留样分析原因，改进生产。
客观性取样一般按班次或批次取样， 因产品而定。跟踪产品质量监督。
二、样品种类
1、检样大小分类：样品种类可分为大样、中样、小样三种。大样系指一整批，中样 是从样品各部分取得的混合样品，小样系指做分析用，称为检样。检样一般以25g为 准，中样以200g为准。
第二章-样品的采集、保存和预处理
① 瞬间取样。为了解废水在每天不同时间内污染物含量的 动态变化，应每隔一定时间采集一次水样，立即分析 。
② 间隔式等量取样。通常在一昼夜内，每隔一定时间采集 等量的水样并混匀。这种采样方法适用于废水流量比较 恒定的情况。
2.1样品的采集和保存
2.1.2 样品采集方法简介
空气 在进行大气监测、作业场所空气中有害成分的监
测、室内空气和公共场所空气质量的监测，需要采集 空气样品。
由于空气污染物的种类及来源不同，它们的物理化 学性质及在空气中的存在状态也不同，有的以气态 （ NOX 、SO2 、CO、 O3 等）或蒸气状态（苯、甲 醛、丙烯醛等）逸散在空气中，有的以微滴或固体小 颗粒分散在空气中呈气溶胶状态（烟、雾、悬浮颗粒 物）。
2.1样品的测物质的浓度较低或所用分析 方法不能直接测定出其含量。
仪器：收集器、流量计和抽气动力
按收集器的不同分为四类:
（1）溶液吸收法
（2）固体吸附剂法
（3）滤纸滤膜阻留法 （4）冷阱收集:也叫低温浓缩
2.1样品的采集和保存
（1）溶液吸收法 适用范围：吸收气态、蒸气、气溶胶物质 吸收液：水、水溶液、有机溶剂
2.1样品的采集和保存
（4）冷阱吸收法 也称低温浓缩法，将一个U型管浸入液氮（-196℃）
中，通过便携常用泵将空气样品收集到冷阱中，选择 性地浓缩空气中的某些组分，然后在40℃-70℃解吸后 进行分析。
例如：空气中挥发性有机硫化物
2.1样品的采集和保存
水 （1）水样种类： ①天然水、生活饮用水（组成较稳定） ②生活污水和工业废水等（组成随时间等变化较大）。 （2）采样前调查： ①水源的水文、气候、地质、地貌特征； ②水体沿岸城市分布、工业分布、污染源分布、排污情
② 间隔式等量取样。通常在一昼夜内，每隔一定时间采集 等量的水样并混匀。这种采样方法适用于废水流量比较 恒定的情况。
2.1样品的采集和保存
2.1.2 样品采集方法简介
空气 在进行大气监测、作业场所空气中有害成分的监
测、室内空气和公共场所空气质量的监测，需要采集 空气样品。
由于空气污染物的种类及来源不同，它们的物理化 学性质及在空气中的存在状态也不同，有的以气态 （ NOX 、SO2 、CO、 O3 等）或蒸气状态（苯、甲 醛、丙烯醛等）逸散在空气中，有的以微滴或固体小 颗粒分散在空气中呈气溶胶状态（烟、雾、悬浮颗粒 物）。
2.1样品的测物质的浓度较低或所用分析 方法不能直接测定出其含量。
仪器：收集器、流量计和抽气动力
按收集器的不同分为四类:
（1）溶液吸收法
（2）固体吸附剂法
（3）滤纸滤膜阻留法 （4）冷阱收集:也叫低温浓缩
2.1样品的采集和保存
（1）溶液吸收法 适用范围：吸收气态、蒸气、气溶胶物质 吸收液：水、水溶液、有机溶剂
2.1样品的采集和保存
（4）冷阱吸收法 也称低温浓缩法，将一个U型管浸入液氮（-196℃）
中，通过便携常用泵将空气样品收集到冷阱中，选择 性地浓缩空气中的某些组分，然后在40℃-70℃解吸后 进行分析。
例如：空气中挥发性有机硫化物
2.1样品的采集和保存
水 （1）水样种类： ①天然水、生活饮用水（组成较稳定） ②生活污水和工业废水等（组成随时间等变化较大）。 （2）采样前调查： ①水源的水文、气候、地质、地貌特征； ②水体沿岸城市分布、工业分布、污染源分布、排污情
第二章样品预处理方法【共57张PPT】
❖ 注意测量pH值的准确性，误差不应超过0.1 固相萃取技术（SPE）的重要性
由于试剂未经纯化致使色谱分析中往往呈现额外的杂质峰。 ☞更严重的是干扰物在每批溶剂或试剂中有所不同，而影响不同实验室间、各分析人员间的实验结果。 0.
（3）温度 常用的溶剂有水、稀酸、稀碱、稀盐等，也可以采用不同比例的有机溶剂，如：乙醇、丙酮、氯仿、四氯化碳
使用方法
❖可先用6到10倍柱体积的去离子水或弱缓冲液平 微透析技术：实质上是一种膜分离技术，它利用膜透析原理，微量地对细胞液进行流动性连续采样的新型采样和色谱样品制备技术。
衡， 影响盐析的条件 盐的饱和浓度
动物体内—药物及代谢产物、糖类及有关化合物、脂类、维生素、核甘、核甘酸及其衍生物、磷酸酯类化合物、固醇类化合物、氨基酸、多肽、蛋
使用方法 ❖可先用6到10倍柱体积的甲醇或乙腈活化，再用 6到10倍柱体积的水或缓冲液平衡，不要让小柱 干了
❖样品溶解在强一些极性的溶剂中 ❖加入样品
❖用强极性溶剂洗脱不想要的组份
❖用极性弱些的溶剂洗脱第一组感兴趣的组份
❖用极性更弱的溶剂洗脱剩下的感兴趣的组份
确认回收率
各种SPE小柱（三）
❖ 离子交换
❖变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离 ❖ 典型的例子
氨基酸分析
加速溶剂萃取（ASE）
ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技术.
ASE 的原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压力来提高 萃取过程的效率.
ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、煮沸法和 其他萃取方法
三种不同型号的ASE
组感兴趣的组份 以1～5ml/min流速洗脱样品
❖用更强的缓冲液洗脱剩下的感兴趣的组份
确认回收率
由于试剂未经纯化致使色谱分析中往往呈现额外的杂质峰。 ☞更严重的是干扰物在每批溶剂或试剂中有所不同，而影响不同实验室间、各分析人员间的实验结果。 0.
（3）温度 常用的溶剂有水、稀酸、稀碱、稀盐等，也可以采用不同比例的有机溶剂，如：乙醇、丙酮、氯仿、四氯化碳
使用方法
❖可先用6到10倍柱体积的去离子水或弱缓冲液平 微透析技术：实质上是一种膜分离技术，它利用膜透析原理，微量地对细胞液进行流动性连续采样的新型采样和色谱样品制备技术。
衡， 影响盐析的条件 盐的饱和浓度
动物体内—药物及代谢产物、糖类及有关化合物、脂类、维生素、核甘、核甘酸及其衍生物、磷酸酯类化合物、固醇类化合物、氨基酸、多肽、蛋
使用方法 ❖可先用6到10倍柱体积的甲醇或乙腈活化，再用 6到10倍柱体积的水或缓冲液平衡，不要让小柱 干了
❖样品溶解在强一些极性的溶剂中 ❖加入样品
❖用强极性溶剂洗脱不想要的组份
❖用极性弱些的溶剂洗脱第一组感兴趣的组份
❖用极性更弱的溶剂洗脱剩下的感兴趣的组份
确认回收率
各种SPE小柱（三）
❖ 离子交换
❖变离子型化合物为非离子型，用反相方法分离 ❖ 典型的例子
氨基酸分析
加速溶剂萃取（ASE）
ASE 是用溶剂对固体、半固体的样品进行萃取的技术.
ASE 的原理是选择合适的溶剂、通过增加温度和压力来提高 萃取过程的效率.
ASE 可用来替代索氏提取、超声萃取、手工振摇、煮沸法和 其他萃取方法
三种不同型号的ASE
组感兴趣的组份 以1～5ml/min流速洗脱样品
❖用更强的缓冲液洗脱剩下的感兴趣的组份
确认回收率
教学课件第二章样品的采集与处理保存
9
§2 样品的预处理
一、预处理目的 测定前排除干扰组分 对样品进行浓缩
10
二、预处理原则 消除干扰因素 完整保留被测组分 使被测组分浓缩
11
三、预处理的方法
有机物破坏法 蒸馏法 溶剂提取法 色层分离法
化学分离法 浓缩法
12
有机物破坏法
1.干法灰化 原理：将样品至于电炉上加热，使其中的有机物脱
应一式三份,分别供检验、复验及备查使用。 每份样 品数量一般不少于0.5公斤。
5
三、采样的一般方法
1、随机抽样
2、代表性抽样
—可按不同生产日期
—可在流水线上按一定的时间间隔抽样
—按分析的目的取样
具体的取样方法因分析对象的不同而异，对于粮食、 油料类物品，由原始样品混合均匀，进而分取平 均样品或试样的过程，称为分样。分样常用的方 法有“四分法”和“自动机械式”。
18
１、常压蒸馏 适用对象：常压下受热不分解或沸点不
太高的物质。 装置： 注意： —爆沸现象 —温度计插放位置 —磨口装置涂油脂
19
２、减压蒸馏 适用对象：常压下受热易分解或沸点太高的物质。 装置：
20
3、水蒸汽蒸馏（动画演示）
水蒸气蒸馏装置.swf
21
习题
❖ 正确采样的原则有哪些？ ❖ 样品预处理的原则是什么？ ❖ 样品预处理的方法有哪些？ ❖ 干法灰化和湿法消化的原理分别是
教学目的与要求
了解样品的采集，制备和保存的方法; 掌握样品处理的方法
1
教学内容
§1 样品的采集 ❖ 样品的采集 ❖ 样品的分类 ❖ 采样的一般方法 ❖ 样品的制备 ❖ 样品的保存
§2 样品的预处理
❖ 样品的预处理目 的
❖ 样品的预处理原 则
§2 样品的预处理
一、预处理目的 测定前排除干扰组分 对样品进行浓缩
10
二、预处理原则 消除干扰因素 完整保留被测组分 使被测组分浓缩
11
三、预处理的方法
有机物破坏法 蒸馏法 溶剂提取法 色层分离法
化学分离法 浓缩法
12
有机物破坏法
1.干法灰化 原理：将样品至于电炉上加热，使其中的有机物脱
应一式三份,分别供检验、复验及备查使用。 每份样 品数量一般不少于0.5公斤。
5
三、采样的一般方法
1、随机抽样
2、代表性抽样
—可按不同生产日期
—可在流水线上按一定的时间间隔抽样
—按分析的目的取样
具体的取样方法因分析对象的不同而异，对于粮食、 油料类物品，由原始样品混合均匀，进而分取平 均样品或试样的过程，称为分样。分样常用的方 法有“四分法”和“自动机械式”。
18
１、常压蒸馏 适用对象：常压下受热不分解或沸点不
太高的物质。 装置： 注意： —爆沸现象 —温度计插放位置 —磨口装置涂油脂
19
２、减压蒸馏 适用对象：常压下受热易分解或沸点太高的物质。 装置：
20
3、水蒸汽蒸馏（动画演示）
水蒸气蒸馏装置.swf
21
习题
❖ 正确采样的原则有哪些？ ❖ 样品预处理的原则是什么？ ❖ 样品预处理的方法有哪些？ ❖ 干法灰化和湿法消化的原理分别是
教学目的与要求
了解样品的采集，制备和保存的方法; 掌握样品处理的方法
1
教学内容
§1 样品的采集 ❖ 样品的采集 ❖ 样品的分类 ❖ 采样的一般方法 ❖ 样品的制备 ❖ 样品的保存
§2 样品的预处理
❖ 样品的预处理目 的
❖ 样品的预处理原 则
采样、样品制备和预处理
平均，均匀地分出的一部分
复检样品：在对检验结果有争议或分歧时作
复检用 保留样品：需封存保留一段时间（通常一个
月），以备有争议时再作验证，但易变质 食品不作保留。
4.采样的一般方法
随机抽样
代表性取样
按照随机原则，从大批 初料中抽取部分样品。
所有初料的各个部分都 有被抽到的机会
用系统抽样法进行采样，根据 样品随空间（位置）、时间变 化的规律，采集能代表其相应 部分的组成和质量的样品。 （如分层取样、随生产过程流 动定时取样、按组批取样、定 期抽取货架商品等 ）
10）感官不合格产品不必进行理化检验，直接判为 不合格产品。
二、样品制备
（一）样品制备
按采样规程采取的样品往往数量过多，颗粒太大， 组成不均匀。
必须对样品进行粉碎、混匀、缩分——样品制备
1.样品制备的总原则
要防止易挥发性成分的逸散 、避免样品组成和 理化性质发生变化 ；
做微生物检验的样品，要按照无菌操作规程制 备
（8）超声波辅助萃取（Ultrasonic Assisted Extraction，UAE）
超声波发生器能发出高频振荡讯号，通过换 能器可以转换成高频机械振荡而传播到介质 中，超声波在介质中疏密相间地向前辐射， 使介质流动而产生数以万计的微小气泡，由 空化效应而形成超过1000个大气压的瞬间 高压，从而加速了溶剂萃取过程。
亚临界水与常温常压下的水在性质上有 较大差别，它类似于有机溶剂
水在250℃时介电常数为27，介于常温 常压下乙醇(ε=24)和甲醇(ε=33)之间
对中等极性和非极性有机物具有一定的 溶解能力
适用：处理各种固体和半固体样品中的 挥发性和半挥发性有机物
静态SBWE主要是通过控制加热的温度， 压力和时间等因素来到达最优萃取条件。
复检样品：在对检验结果有争议或分歧时作
复检用 保留样品：需封存保留一段时间（通常一个
月），以备有争议时再作验证，但易变质 食品不作保留。
4.采样的一般方法
随机抽样
代表性取样
按照随机原则，从大批 初料中抽取部分样品。
所有初料的各个部分都 有被抽到的机会
用系统抽样法进行采样，根据 样品随空间（位置）、时间变 化的规律，采集能代表其相应 部分的组成和质量的样品。 （如分层取样、随生产过程流 动定时取样、按组批取样、定 期抽取货架商品等 ）
10）感官不合格产品不必进行理化检验，直接判为 不合格产品。
二、样品制备
（一）样品制备
按采样规程采取的样品往往数量过多，颗粒太大， 组成不均匀。
必须对样品进行粉碎、混匀、缩分——样品制备
1.样品制备的总原则
要防止易挥发性成分的逸散 、避免样品组成和 理化性质发生变化 ；
做微生物检验的样品，要按照无菌操作规程制 备
（8）超声波辅助萃取（Ultrasonic Assisted Extraction，UAE）
超声波发生器能发出高频振荡讯号，通过换 能器可以转换成高频机械振荡而传播到介质 中，超声波在介质中疏密相间地向前辐射， 使介质流动而产生数以万计的微小气泡，由 空化效应而形成超过1000个大气压的瞬间 高压，从而加速了溶剂萃取过程。
亚临界水与常温常压下的水在性质上有 较大差别，它类似于有机溶剂
水在250℃时介电常数为27，介于常温 常压下乙醇(ε=24)和甲醇(ε=33)之间
对中等极性和非极性有机物具有一定的 溶解能力
适用：处理各种固体和半固体样品中的 挥发性和半挥发性有机物
静态SBWE主要是通过控制加热的温度， 压力和时间等因素来到达最优萃取条件。
卫生化学复习资料及参考答案【】总结
卫⽣化学复习资料及参考答案【】总结第⼀章绪论第⼆章样品的采集与处理⼀、选择题1、卫⽣化学的研究对象不包括：（D）A. 环境卫⽣学B. 营养与⾷品卫⽣学C. 劳动卫⽣学D. 分析化学2、下列分离⽅法哪⼀项不属于膜分离法范畴（B）A. 超滤B.顶空分析法C.透析法D.液膜法3、下列关于萃取操作描述不正确的是（C）A. 选择的溶剂对被测组分的分配⽐⼤B.被测组分在该溶剂中稳定C.萃取溶剂的分⼦量相差要⼤D.萃取时应少量多次⼆、填空题1、样品的保存⽅法有（密封保存法）、（冷藏保存法）、（化学保存法）2、样品溶液的制备⽅法有（溶解法）、（分解法）。
3、固相萃取法的步骤先后分别是：（活化）、（装样）、（清洗）、（洗脱）。
4、样品采集原则是（代表性）、（典型性）、（适时性）。
三、名词解释1、卫⽣化学：卫⽣化学是应⽤分析化学特别是仪器分析的基本理论和实验技术，研究预防医学领域与健康相关化学物质的质、量及变化规律的学科。
2、固相萃取法：利⽤样品中被分离组分和其它组分与萃取柱中固定相的作⽤⼒（吸附、分配、离⼦交换）不同进⾏分离的⽅法。
3、超临界流体萃取法：利⽤⼀种物质在超临界区约域形成的流体进⾏提取的⽅法，称“超临界流体萃取法”。
4、固相微萃取法：利⽤固相微量萃取器将被萃取的样品直接解吸⼊⽓相⾊谱仪或⾼效液相⾊谱仪中进⾏直接分析的⽅法。
5、膜分离法：依据选择性渗透原理，以外界能量或化学位差为动⼒，使组分从膜的⼀侧渗透⾄另⼀侧的⽅法。
五、计算题1. 1.15mg 0.165mg2. 43.3 99.96%第三章卫⽣分析数据的处理与分析⼯作的质量保证⼀.选择题1.卫⽣分析过程中不会产⽣误差的是（ D ）A.样品B.⼈员C.设备D.标准物质2.按有效数字规则，13.65+0.0092+1.627的结果是（ D ）Ａ.15.2862 Ｂ.15.286 Ｃ.15.28 Ｄ.15.293. 系统误差由（）因素决定（ C ）A.随机因素B.不确定因素C.稳定因素D.未知因素4.分析中反应系统误差和随机误差的综合指标是（Ａ）Ａ.准确度Ｂ.精密度Ｃ.灵敏度Ｄ.置信度5.⽤下列哪种⽅法可对可疑数据进⾏取舍（A ）A.Grubbs检验法B.F检验法C.标准偏差D.相对误差6.在没有纯标准品时采⽤下列哪种⽅法进⾏定量分析（ B ）A.内标法B.归⼀化法C.直接⽐较法D.标准曲线法7．下列哪个属于过失误差（A ）A.粗⼼⼤意 B.实验室温度变化 C.仪器故障 D.操作误差8．⽶尺的准确度可达到（）⽶（B ）A. 1/10 B. 1/100 C. 1/1000 D. 1/100009．标准曲线中的斜率，也称为（ D ）A.精密度 B.准确度 C.精确度 D.灵敏度10．直线回归⽅程中的相关系数r值，︱r︱值接近（），表⽰⼯作曲线的线性关系越好（ C ）A.>1 B.<1 C.=1 D.=0⼆．名词解释1.有效数字P282.误差P233.可疑数据P294.标准曲线P37三.问答题1.有效数字的修约规则是什么？P292.误差有哪些？随机误差、系统误差、过失误差3.如何在平均值质量控制图中评价分析⼯作的质量？P404. 精密度的表⽰⽅法有哪⼏种？（1）绝对偏差（2）平均偏差（3）相对平均偏差（4）标准偏差相对标准偏差是表⽰精密度的最好⽅法，可⽤于⽐较和评价不同浓度⽔平待测物质测量的精密度。
卫生化学：第二章 样品的采集与处理
通过计算可知，用少量的溶剂， 多次反复萃取，可节省萃取溶剂， 提高萃取效率，萃取液的浓度也 较高。
常用苯、己烷、石油醚等有机
溶剂，来提纯分离样品中的有机氯 农药、食品中的脂肪、大气飘尘中 的苯并（a）芘等。在操作时，应注 意通风排气，以免引起中毒和爆炸。
一种称为克雷格（Craig）的自 动萃取装置，可以自动进行多级萃 取操作。
常用的器械有颗粒状食物采样 器、固体脂肪采样器、搅拌器、 粉碎机、匀浆机等。
2．液体样品的采集 先用搅拌器将其搅匀，
再采集上、中、下三层处 的食品。
3．固体样品的采集 大颗粒的样品，须捣碎或
匀浆后再取其中的一部分。 充分混匀食物，再按“四分
法”进行缩分。 采集食物样品应将样品分
为检验、复验和备查三部分。
5. 光辐射消化法 将酸式湿法消化法改在石英容
器内进行，并辅助以紫外光照射， 加快消化的化学反应速度。
该法常用来进行血、头发、指 甲等生物样品的预处理。有机酸、 糖，特别是脂肪酸的消化，用该 法较为方便快捷。
6. 酶消化法 利用酶解作用，将生物
材料，特别是动物组织、 器官分解，让键合在蛋白 质上的物质释放出来。
(2) H2SO4消化法 硫酸的沸点高，且具有
强的氧化性，常用来消化食 品样品，进行蛋白质测定 （凯氏定氮法）。
但由于它会使一些组分 生成难溶物质（如PbSO4 等），影响测定结果。常将 它与HNO3混合使用，用来消 化血、尿、头发、指甲、脏 器等生物样品。
(3) HNO3＋HClO4或H2O2消化法 利用HClO4的高强氧化性，
应密封低温（通常在4℃以下）保 存，以防止被测组分分解、挥发性 组分损失以及微生物作用等。 3. 化学保存法
加入酸、碱或防腐剂。
常用苯、己烷、石油醚等有机
溶剂，来提纯分离样品中的有机氯 农药、食品中的脂肪、大气飘尘中 的苯并（a）芘等。在操作时，应注 意通风排气，以免引起中毒和爆炸。
一种称为克雷格（Craig）的自 动萃取装置，可以自动进行多级萃 取操作。
常用的器械有颗粒状食物采样 器、固体脂肪采样器、搅拌器、 粉碎机、匀浆机等。
2．液体样品的采集 先用搅拌器将其搅匀，
再采集上、中、下三层处 的食品。
3．固体样品的采集 大颗粒的样品，须捣碎或
匀浆后再取其中的一部分。 充分混匀食物，再按“四分
法”进行缩分。 采集食物样品应将样品分
为检验、复验和备查三部分。
5. 光辐射消化法 将酸式湿法消化法改在石英容
器内进行，并辅助以紫外光照射， 加快消化的化学反应速度。
该法常用来进行血、头发、指 甲等生物样品的预处理。有机酸、 糖，特别是脂肪酸的消化，用该 法较为方便快捷。
6. 酶消化法 利用酶解作用，将生物
材料，特别是动物组织、 器官分解，让键合在蛋白 质上的物质释放出来。
(2) H2SO4消化法 硫酸的沸点高，且具有
强的氧化性，常用来消化食 品样品，进行蛋白质测定 （凯氏定氮法）。
但由于它会使一些组分 生成难溶物质（如PbSO4 等），影响测定结果。常将 它与HNO3混合使用，用来消 化血、尿、头发、指甲、脏 器等生物样品。
(3) HNO3＋HClO4或H2O2消化法 利用HClO4的高强氧化性，
应密封低温（通常在4℃以下）保 存，以防止被测组分分解、挥发性 组分损失以及微生物作用等。 3. 化学保存法
加入酸、碱或防腐剂。
卫生化学样品分析的一般步骤
3）化学保存法：向样品加酸、碱或其他化学试剂作为调节 剂、抑制剂或防腐剂等。（控制pH、加防腐剂、稳定剂、 冷冻）
如血样加抗凝剂；尿样中加少量浓HNO3防腐。
注意：选择合适样品存放的器皿，避光，金属离子溶出。
不论何种方法保存，采样后都应及时尽快分析。间
隔越短结果越准确。
保存方法、保存时间整理需课通件 过实验确定。
b 要正确地确定总体，采样才具代表性。总体为被检 验的具相同属性的一批物质。不同属性的物料不能构 成一个总体。
例：调查西安市人口的高血压发病率，采样要不同年
龄，不同性别设定多个采整样理课点件
5
2.典型性：
针对检验目的，采集能充分说明此目的典型样品。
如：掺假食品、假烟、假酒等，应挑选可疑部分送检。
如：食物中毒，应采吃剩食品、餐具、呕吐物等检验。
4. 硝酸-硫酸- 因高氯酸高温下易爆炸，应注意：
用于消化难
高氯酸
① 通风橱常清洗；
消化的样品
（或H2O2） ② 补加时应将消化液冷却至50~60 C°，
切记不可高温下加入。
整理课件
22
第三章 样品分析的一般步骤
湿消化法注意事项：
① 消化必须在通风橱中进行，因消化过程 中产生大量的酸雾、氮和硫的氧化物，有很强 的刺激性、腐蚀性和毒性。
整理课件
24
方法
原理
溶剂萃取法 利用物质在两种互不相溶的 （液液萃取 溶剂中分配情况不同而进行
法） 分离
适用范围
从液体中分离 有机物，也可分 离金属离子
用超临界流体作萃取剂，从 超临界流体 复杂样品中分离提取待测组
萃取 分的提取分析技术。
利用色谱柱固定相保留被测 固相萃取法 组分，然后少量溶剂将其洗 （液固萃取 脱下来，达到分离、富集的
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总体：分析对象的全体 样品：从总体中抽出部分个体，代表全部待 分析物料的平均组成。
采样：按一定规则，从总体中抽取分析样品 的过程。
采样目的：获得能代表全部待分析总体平均 组成的样品。
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二、样品采集的原则
代表性、典型性和适时性
1.代表性 采集的样品必须能充分代表被分析总
体的性质 2.典型性
二、治疗效果：如果非典真的是衣原体造成的，那就 一点也不可怕了。因为只要正确使用抗菌素，衣原体感染 是可以控制的。当时那么多国内甚至国际一流的专家会不 考虑到这个？
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后来的发展证实了我的看法，相信国内很多医务人员 也经历过和我一样的疑惑。
那么，为什么在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵 体”呢？这其实是病原学研究时，最基本的需要分辨的， 即“宿主”还是“过客”这一最基本的问题。
根据检测目的，采集的样品必须能充 分说明此目的的典型样品
3.适时性 某些样品的采集要有严格的时间概念
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非典时期的支原体与衣原体之争
当广东开始非典流行时，国内权威机构报道非典是由 “衣原体”导致的时候，我的第一个反应是怀疑。但基于 以下理由觉得迷惑：
一、依据明显缺乏科学性：医学研究绝对不是这样的 ，仅仅从几个尸解病人的标本中发现衣原体“包涵体”（ 在细胞浆或细胞核内形成的具有一定形态的病变结构）就 仓促下结论是违背科学精神的。
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龙虾中毒引发的肌肉损伤和肌红蛋
白血症有如下可能原因：
1)龙虾被重金属污染，
2)龙虾被某种细菌污染，
3)龙虾中还有某种化学物质能抑制
线粒体的功能，具体原因等待卫生部的
调查。
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（四）生物材料
生物材料：人或动物的体液、排泄物、 分泌物和脏器等
1.血 包 括：全血、血浆和血清
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2.重要的萃取体系
用于萃取的有机溶剂称为萃取溶剂
根据组分的性质不同，萃取体系分： 简单分子萃取体系 螯合物萃取体系 离子缔合物萃取体系 溶剂化合物萃取体系
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3.萃取条件的选择 萃取溶剂的选择 溶液酸度的选择 其它试剂的选择
4.萃取操作
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（二）固相萃取法
Solid phase extraction，SPE
固相萃取： 液-固分离 分离载体： 一般为硅氧基甲烷，
颗粒直径40-80 μm 分离原理: 利用样品中被分离组 分与萃取柱中固定相的作用力（吸 附、分配和离子交换等）不同而进 行分离。
固相萃取柱
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固相萃取装置： 由柱管、筛板和固定相三部分组成
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例. 8-羟基喹啉-CHCl3对Al 3+ 的萃取
A l(H 2O )63++
N 3
O H
N Al+ H + 3+ H 2 6O
O3
亲水
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水合离子的正电 疏水 性被中和，亲水 的水分子被疏水 有机大分子取代
溶于CHCl3
8-羟基喹啉 萃取剂
CHCl3
溶剂
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(1)分配系数
有机溶剂从水相中萃取溶质A，若A在两相 中的存在形态相同，平衡时，在有机相的浓度
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三、常用的分离与富集方法
问题的提出
实际样品的复杂性
分析方法灵敏度的 局限性
干扰的消除
满足对灵敏 度的要求
控制实验条件
使用掩蔽剂 分离
选择灵敏度高 的方法
富集
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例：
海水中 U （IV） 的测定
C = 1 ~ 3 g / L
难以测定
富集为 C = 100 ~ 200 g / L 可以测定
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结束
此法。
溶液吸收法
固体吸收剂阻留法
滤纸滤膜阻留法
冷阱收集法
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3. 采样装置 基本组成
收集器 流量计 采样动力
（二）水
见书 p10
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（三）食品
检测项目
营养成分 功效成分 鲜度 添加剂 污染物
随机取样 取样方法 系统取样
指定代表性样品
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小龙虾致肌溶解
解:一次萃取
m 12(0 4 32 2 0 02)00.45 m 4g
E2 00.451 40 % 09.7% 20
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两次萃取
m 22(0 4 3 1 2 0 02)0 20.03m 9g 5 E % 2 0 0.03 1 90 % 5 0 9.8 9 %
20
上例结果说明，用同样数量的萃取液， 分多次萃取比一次萃取的效率高。
分离效果
干扰成分减少至不再干扰 待测组分有效回收
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分离效果的好坏用回收率衡量
回收率 %） （ 分原 离始 后含 测量 量 10% 0值
常量组分，含量 > 1%， 回收率 > 99 % 以上
微量组分，含量 < 0.01 %， 回收率 > 95 % 或更低
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常用分离方法
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四个步骤： 活化 装样 清洗 洗脱
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图 2-3 固相萃取过程
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固相萃取法一般程序为：
选适宜SPE管 润湿载体
加入样品溶液到载体 洗涤除去共存物 洗脱待分离物质
固相萃取柱
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（三）固相微萃取技术
始于1992年，加拿大的Janusz Pawliszyn
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（四）超临界流体萃取法 1.原理 超临界流体萃取: 气-固萃取
萃取剂: 超临界条件下的气体
特 点：粘度低，接近零的表面张力，比 很多液体容易渗透固体颗粒，易于除去。
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超临界萃取分离设备组成及流程：
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内容选择：
第一节 样品的采取和制备 第二节 样品的处理
coVocwVw
DVw
Vo
式中Vw/Vo称为相比。
萃取率由分配比和相比决定
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在实际分离工作中，萃取率E 最有意义。
最常采用--等体积溶剂进行萃取，即相比为1， 此时萃取率可写成:
E D 10% 0 D1
一次萃取：E > 90%以上，D>10 E > 90%以上，D>100
如果 D 值较小而要得到较高的萃
“宿主”是指病原体是造成疾病的病因；“过客”是指 病原体只是在疾病出现后，由于环境的改变，适合它在此 繁殖，即上面文章中所说的“继发感染”。
具体到上述的在非典的病人标本上会发现衣原体“包涵 体”的原因是这样：非典病人受到冠状病毒的侵犯后，肺 部环境发生了巨大的变化。原来衣原体无法生存的地方变 成衣原体生长的“沃土”，从而出现了继发衣原体感染。
为[A]o, 水相的浓度为[A]w之比，用KD表示。
萃取平衡 A (w)
A (o)
分配定律
KD
[HA]o [HA]w
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(2)分配比 如果溶质A在两相中存在多种型体，如离
解、缔合、络合、聚合等，则把溶质A在两相 中各种型体的浓度之和相比，称为分配比D。
D在 在有 水机 相相 中 A A 的 中 的 溶 总 溶 总 质 浓 质 浓 cc度 w o度
沉淀与共沉淀分离法
溶剂萃取分离法
固相萃取与微萃取法
色谱分超临界流体萃取法
挥发和蒸馏分离法
膜分离法
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（一）溶剂萃取分离法
在含有被分离物质的水 溶液中，加入萃取剂和与水 不相混溶的有机溶剂，振荡， 利用物质在两相中的分配不 同的性质，使一些组分进入 有机相中，使另一些组分仍 留在水相中，从而达到分离 的目的。
第二章
第一节 样品的采取
样品的采集与处理 和制备
第二节 样品的处理
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卫生样品分析的一般程序： 影响结果
样品的采集和保存
准确度
样品的预处理*
分析方法的选择及试样的测定
分析数据的处理
分析报告的撰写
卫生分析工作的第一步：样品的采集
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第一节 样品的采取和保存
一、几个基本概念
采样部位：手指血、耳垂血和静脉血
保存方法：置于聚四氟乙烯、聚乙烯或 硬质玻璃管中密塞，4℃下 保存，长期保存在-20℃。
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2.尿
24小时混合尿 取样方法 晨尿
某时间的一次尿
采样仪器：聚乙烯瓶或用硝酸溶液
浸泡过的玻璃瓶 3.毛发
取样方法：枕部距头皮2cm左右的发段
4.组织
取样：肝、肾、肺等脏器，冷冻保存
溶质在两相中存在形式完全相同时，D＝KD。 两相体积相等时，若D＞1，溶质进入有机相的量多。 在实际工作中，一般要求D至少大于10。
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（3）萃取率E
E溶质 A溶 在质 有 A的 机总 相量 中的 1总 0% 0量
萃取效率和分配比的关系是：
E% coVo 10% 0 D 10% 0
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1. 萃取分离的基本原理
亲水性 离子型化合物 极性
物质
相互转换
疏水性 共价键化合物 弱极性或非极性
萃取分离的实质
将待萃取组分由亲水性转化为疏水性，使其萃