斑马鱼简介
斑马鱼的胚胎发育和行为观察

观察
汇报人:XX
2024-01-11
• 斑马鱼基本概述 • 斑马鱼胚胎形态学观察 • 斑马鱼胚胎生理学观察 • 斑马鱼行为学观察方法与技术 • 斑马鱼行为学观察实例分析 • 总结与展望
01
斑马鱼基本概述
斑马鱼生物学特性
体型特征
食性
斑马鱼体型修长,侧扁,成鱼体长34厘米,呈纺锤形。体色为银蓝色或 银色,有数条黑色纵纹贯穿全身,形 似斑马线。
原肠胚期
原肠胚期是胚胎发育的重要阶段之一。在这个阶段,胚胎 内部细胞进一步分化形成中胚层,并开始形成消化管、神 经管等器官原基。
孵化期
孵化期是胚胎发育的最后阶段。在孵化前,胚胎内部器官 基本发育成形。随着孵化过程的进行,胚胎逐渐破膜而出 ,成为幼鱼。
02
斑马鱼胚胎形态学观察
受精卵形态与结构特点
受精卵呈圆球形,透 明度高,直径约 1mm。
受精卵表面有一层坚 韧的卵壳,保护胚胎 免受外界损伤。
卵黄囊较大,占据受 精卵的大部分体积, 为胚胎发育提供营养 。
卵裂期及囊胚期发育过程
卵裂期
受精卵经过连续多次快速分裂,形成多细胞胚胎。此阶段细胞数量增加,但胚 胎总体积基本不变。
囊胚期
细胞继续分裂并重新排列,形成囊胚。此时胚胎内部出现空腔,即囊胚腔,细 胞开始分化为内细胞团和外层细胞。
02
攻击性
在争夺领地、配偶或食物等资源时,斑马鱼可能会表现出攻击性。攻击
行为包括追逐、撕咬等,旨在将竞争对手赶出领地或获取所需资源。
03
行为影响因素
领域性和攻击性行为受到多种因素的影响,如个体大小、健康状况、环
境压力等。较大的个体通常更具攻击性,而环境压力可能导致斑马鱼的
红脸赤鳞斑马鱼的养殖技术

饲料
1元/kg
2元/kg
水电费
0.5元/月
1元/月
一般来说,红脸赤鳞斑马鱼养殖的利润率可以达到50%以上,养殖效益较为可观。
红脸赤鳞斑马鱼的养殖管理
定期检查
定期检查鱼缸水质、鱼体状况,及时发现问题,并采取相应措施。
环境控制
控制好水温、水质、光照等环境因素,为红脸赤鳞斑马鱼提供适宜的生长环境。
红脸赤鳞斑马鱼的养殖前景展望
市场需求不断增长
红脸赤鳞斑马鱼作为观赏鱼,市场需求不断增长,尤其是在观赏鱼爱好者和宠物市场。
科技助力养殖技术升级
随着科技发展,红脸赤鳞斑马鱼的养殖技术不断升级,提高了养殖效率和产品质量。
养殖规模不断扩大
红脸赤鳞斑马鱼养殖规模不断扩大,满足市场需求的同时,也为农民增收致富提供新的途径。
饵料选择
选择优质的鱼饲料,搭配活体饵料,保证营养均衡,避免过度喂食,防止污染水质。
病害预防
定期观察鱼类的状态,及时发现病害,隔离患病鱼,并采取相应的治疗措施,防止病害蔓延。
红脸赤鳞斑马鱼的养殖案例分析
成功案例
案例分析可以帮助我们更好地理解红脸赤鳞斑马鱼的养殖过程,以及可能遇到的问题和解决方案。通过学习成功案例,我们可以借鉴经验,提高养殖效率。
竞争风险
红脸赤鳞斑马鱼在高密度养殖情况下,容易发生争斗和互相攻击,导致鱼体受伤甚至死亡。
红脸赤鳞斑马鱼的养殖成本
红脸赤鳞斑马鱼的养殖成本主要包括鱼苗成本、饲料成本、水电成本、人工成本、设备成本、药物成本等。
鱼苗成本约为每条 0.5 元,饲料成本约为每公斤 10 元,水电成本约为每月 500 元,人工成本约为每月 2000 元,设备成本约为一次性投入 5000 元,药物成本约为每年 500 元。
斑马鱼

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1、用于细胞谱系分析 2、用于研究突变对胚胎的影响
3、用于饱和诱变,克隆和分析造成突变的原因
4、基因转移
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1、细胞谱系分析
含义:通过记录特定细胞在胚胎发育中的分裂历史,来揭 示其特定的细胞发育命运,观察发育潜能。 方法:直接观察法、遗传嵌合克隆分析法、颜料示踪分析 法
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2、突变
原理:斑马鱼单倍体和二倍体雌核发育 方法:①单倍体胚胎培育: 精子(经紫外照射)+卵子
②二倍体胚胎培育
精子(经紫外照射)+卵子
静水压休 克或热休 克e 9
作用及特点: 单倍体胚胎:胚胎可发育成基本体型 表现多种畸形 受精4天左右死亡 可用来甄别影响基本体型的突变 二倍体胚胎:可存活且可育 隐形突变通过一至三代繁育 可鉴定出来
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3、饱和诱变
原理:
化学诱导剂
成熟的精子 +卵子
三代繁育
发育异常胚胎 筛选
发育通道由一系列的分子事件控制,要想解 析完整的发育过程,需要掌握控制每一系列 事件的全部基因或几乎所有基因 所以,需要大量的动物个体才可进行筛选
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选择斑马鱼的优势: ①发育快、繁殖能力强 ②卵子体外受精、胚胎体外发育
斑马鱼的个“鱼”简历
• 斑马鱼(zebra fish)(拉丁名:Danio rerio)
中文学名: 斑马鱼 蓝条鱼、花条鱼、 蓝斑马鱼、印度 鱼、印度斑马鱼 Danio rerio 动物界 脊索动物门 Chordata 科: 纲: 辐鳍鱼纲 Actinoptery gii 鲤形目 Cyprinifor mes 鲤科 Cyprinidae (鱼丹)属 Danio 斑马鱼 D.
——在胚胎期产生的突变体也可呈现出 研究范围
模式动物斑马鱼

模式动物斑马鱼斑马鱼(Danio rerio)属于辐鳍亚纲(Actinopterygii)鲤科(Cyprinidae)短担尼鱼属(Danio)的一种硬骨鱼,原产于南亚,是一种常见的热带观赏鱼,因其体侧具有斑马一样暗蓝与银色相间的纹条而得名。
斑马鱼个体小,易于饲养,成体长4-5cm,雄鱼体修长,雌鱼体肥大。
可在有限空间里养殖相当大的群体,可满足样本需求量大的研究。
斑马鱼发育迅速,在28.5℃培养条件下受精后约40min完成第一次有丝分裂,之后大约每隔15min分裂一次,24h后主要器官原基形成,相当于28d的人类胚胎,幼鱼孵出后约3个月达到性成熟。
雌雄鱼通过调控光周期控制14:10(光照:黑暗)产卵时间,成熟鱼每周可产卵一次,一尾雌鱼每次可产卵100-300枚。
胚胎体外受精,体外发育,胚体透明,易于观察。
受精卵直径约1mm,易于进行显微注射和细胞移植等操作。
一、斑马鱼的品系经过30多年的研究应用和系统发展,已有约20个斑马鱼品系,斑马鱼基因数据库-ZFIN (http://zfin/org)里有相关的资料可供查询和下载。
目前研究中常用的斑马鱼野生型品系主要为AB 品系、Tuebingen(Tu)品系、WIK 品系,斑马鱼基因组计划所用品系是Tu。
AB 品系是实验室常用的斑马鱼品系,由单倍体细胞经早期加压法获得。
Tu品系斑马鱼具有胚胎致死突变基因,用于基因组测序前敲除该致死突变基因。
WIK品系较Tu品系具有更多的形态多样性。
此外,还保存有3000多个突变品系和100多个转基因品系。
这些品系资源对于利用斑马鱼开展各种科学研究起着很大的推动作用。
二、斑马鱼突变品系的筛选斑马鱼突变的方法主要有三种:已基亚硝脲(ENU)化学诱导、γ或χ射线照射和插入诱变。
ENU是一种DNA烃基化试剂,在生殖细胞减数分裂前诱导碱基对的替换,诱导产生的突变率为0.1%-0.2%,涉及单个基因的突变。
射线照射导致染色体大片段的缺失或染色体重排,产生突变率达1%。
七下科学斑马鱼

七下科学斑马鱼在七年级的生物课上,我们学习了各种各样的动物,其中有一种引起了我的特别关注,那就是斑马鱼。
斑马鱼是一种生活在热带和亚热带水域的小鱼,它们的身体呈现出黑白相间的斑纹,非常漂亮。
今天,让我们一起来了解一下这种迷人的斑马鱼吧。
让我们来了解一下斑马鱼的生活习性。
斑马鱼是群居鱼类,它们喜欢生活在有植被的水域中,这样可以提供给它们足够的藏身之处。
此外,斑马鱼是杂食性动物,主要以水生昆虫、浮游生物和植物为食,它们的食性非常广泛。
在自然环境中,斑马鱼通常会成群结队游动,保持着紧密的联系,以便及时发现危险并互相保护。
斑马鱼的繁殖也是一个非常有趣的话题。
它们是卵生动物,通常会在水草丛中产卵。
雄性斑马鱼会在卵的周围守护,保护卵不被捕食者侵袭。
而幼鱼孵化后会依靠卵黄囊提供营养,直到能够自行觅食为止。
斑马鱼的繁殖过程虽然简单,但却充满着生命的奇迹。
除了生活习性和繁殖方式,斑马鱼还有着一些引人注目的特点。
它们是一种常见的实验动物,在科学研究中有着重要的应用价值。
由于其生长周期短、繁殖力强、易于饲养等特点,斑马鱼成为了许多生物学家研究的对象。
通过对斑马鱼的研究,科学家们可以更好地了解生物的发育过程、遗传变异等重要问题,为人类健康和疾病治疗提供重要参考。
斑马鱼还是一种非常受欢迎的观赏鱼类。
它们的身体斑纹独特、色彩鲜艳,非常适合放在家中的鱼缸中观赏。
许多人喜欢养斑马鱼作为宠物,因为它们不仅美丽,而且性格温顺,容易饲养。
养斑马鱼不仅可以增添家居的生气,还可以让人们在繁忙的生活中放松心情,享受悠闲的时光。
总的来说,七下科学斑马鱼是一种非常有趣的生物。
它们的生活习性、繁殖方式、科学应用以及观赏价值都让人们对它们充满了好奇和喜爱。
希望通过今天的了解,大家对斑马鱼有了更深入的认识,也希望大家能够珍惜每一种生物,保护我们共同的家园。
让我们一起努力,让这个世界变得更加美好!。
斑马鱼服务手册模板

斑马鱼服务手册模板引言概述:斑马鱼是一种极具个性的迷你热带鱼,它们以其美丽的条纹而闻名于世。
在养殖斑马鱼之前,了解斑马鱼的基本需求和养护知识是至关重要的。
本文将介绍斑马鱼的基本信息,并提供一份斑马鱼服务手册模板,以方便养殖者对斑马鱼进行合理的养护和服务。
一、斑马鱼基本信息1.1 斑马鱼的起源和特点斑马鱼原产于东南亚地区,是热带鱼种类之一。
斑马鱼身体呈纺锤形,通常体长约3-6厘米。
斑马鱼最显著的特点是身体上的黑白相间的斑纹。
斑马鱼寿命较短,一般为1-3年。
1.2 斑马鱼的养殖环境要求温度:斑马鱼适应温度范围在24-28摄氏度之间。
水质:斑马鱼对水质要求较高,水质应保持清澈,pH值在6.5-7.5之间。
水量:每只斑马鱼需要大约2-3升的水体积。
水质检测:定期测试水质,保持适宜的水质参数。
1.3 斑马鱼的饲养要点饲料:斑马鱼是杂食性鱼类,可以吃鱼粮、活体浮游生物和冷冻食物等。
饲养时间表:每天喂食1-2次,每次不超过鱼儿能够在5分钟内食用完。
饲养区域:提供适当的游泳空间,并设置草丛和隐藏处,以提供保护和休息。
二、斑马鱼疾病的预防与治疗2.1 水质疾病防控定期检测、调整水质参数,保持适宜的pH、硬度和氨/亚硝酸盐浓度。
定期更换一部分水体,保持水质新鲜。
安装合适的过滤设备,如水底过滤器或外置过滤器。
2.2 常见疾病与防治方法鱼癣病:症状为皮肤出现灰白色粉尘状物质,可使用抗真菌药治疗。
鱼虱:症状为鱼体上有红点状标记,可使用虱子灭鱼药物来防治。
鱼鳃寄生虫:症状为鳃部出现红斑、肿胀和呼吸困难,可使用抗寄生虫药来治疗。
2.3 定期检查和隔离定期观察鱼儿的行为习惯和外貌,如有任何异常或疾病症状,应及时隔离治疗。
隔离病鱼,以免疾病传染给其他健康的鱼。
三、斑马鱼繁殖与孵化3.1 繁殖环境准备创建合适的繁殖环境,如水草丛、繁殖箱等。
适当调整水质参数,提供合适的水温和pH值。
提供足够的食物,增加饵料的蛋白质含量。
3.2 斑马鱼繁殖行为雄鱼展示颜色和游动动作以吸引雌鱼。
模式生物-斑马鱼
二、斑马鱼在医学中的应用
1、视网膜修复 斑马鱼因为它具有自我修复破损视网膜的独特能力。人类视网膜中
也拥有类似斑马鱼能够修复视网膜的细胞,并计划在5年内将研究结果 用于失明患者治疗,让他们重见光明,这可能有助于治疗因视网膜受损 引起的失明。
2、听觉修复 斑马鱼的毛细胞在受损后还可以再生。研究人员希望他们的工作
三、相关研究
科学家首绘斑马鱼大脑活动图 2013年2月,美国科学家首次绘出斑马鱼捕食时的大脑活动图,这
将改善科学家对于涉及捕食行为的大脑循环的理解。哈佛大学的分子 与细胞生物学家说道:“这是突破性进展,还没有人能够如此清晰的 用荧光显微法观察一条自由游动的斑马鱼幼鱼的神经活动。”
斑马鱼分辨气味完全靠左半鼻 2013年5月22日,日本一项新研究发现,斑马鱼发挥嗅觉作用的主要
一、斑马鱼在发育生物学中的应用
3、饱合诱变分析 用化学诱变剂处理成熟的雄性个体,然后用诱变了的精子与卵子受
精,产生的个体通过三代繁育来筛选发育异常的胚胎。因为发育过程是 由一系列的分子事件控制,要想解析完整的发育过程,必须要筛选到影 响一系列事件的全部基因或几乎全部基因,这就需要大量的动物个体进 行筛选。胚胎在子宫中发育,胚胎期受到影响的突变体无法呈现,因而 限制了其研究范围。斑马鱼卵子体外受精和胚胎体外发育的特征则解决 了这一难题。
小鼠属于胎盘动物,胚胎操作时不能离开母体;实验分析时就需 要大量推论。在小鼠胚胎发育期间对其进行物理性操作难度较大,要观 察胚胎必须将母体处死,胚胎也随之死亡。小鼠的胚胎从受精到出生需 要20d,早期胚胎间的发育往往是不同步的。
与小鼠相比的,斑马鱼作为实验对象就简单方便多了。斑马鱼的胚 胎发育非常迅速,从受精到孵出大约3d,而且,来之于同一母体的胚胎 是同步发育的,易于大量收集特定阶段的同期胚胎材料。
斑马鱼模式生物简介
斑马鱼模式生物简介斑马鱼(Danio rerio)是一种小型的鱼类,也是一种非常受欢迎的淡水观赏鱼,它是孔雀鱼科中的一员,是印度东北部和孟加拉国的淡水鱼类。
斑马鱼模式生物是国际上被广泛应用于基因工程和生物医学研究的模式生物之一,也可以作为重要的药物筛选平台和疾病模型使用。
那么,接下来就来逐一介绍斑马鱼的分类、形态特征、生活习性、模式生物优势及应用等方面的知识。
一、斑马鱼的分类斑马鱼属于脊索动物门、脊椎动物亚门、圆口纲、鲤形目、鲤科、孔雀鱼属的一种淡水鱼类,学名为Danio rerio。
斑马鱼还有各种不同的变种和突变体,例如白斑马鱼、红斑马鱼、紫斑马鱼、金斑马鱼等。
二、斑马鱼的形态特征1.外形特征斑马鱼身体呈纺锤形,通常长度为2.5-4厘米,雄性略大于雌性。
头部和尾部比身体稍大,呈楔形,头部较尖,口小,下颌略突出。
各种颜色和花纹的斑马鱼几乎可以说是身体通体条纹,由水平条纹串联俩个腹鳍之间的细密黑色点状线条逐渐变浓变宽而形成,其中背部、腹部及尾鳍的条纹分化明显。
因此,美国生物技术研究所把斑马鱼称为"斑马状鱼"(Zebra fish)。
2.内部结构斑马鱼的内部结构和人类相似,有头、躯干、尾等结构。
头部包括大脑、眼、鼻、口、耳等器官,身体包括骨架、肌肉、消化系统、心脏、循环系统、呼吸系统、泌尿系统等器官。
三、斑马鱼的生活习性1.水温适应性斑马鱼适应范围广,可在25摄氏度以下的水温生存,适应性强,而50摄氏度以上的水温则容易引起死亡。
通常在水温20度-28度之间生存。
2.繁殖生殖斑马鱼在2-3个月龄时性成熟,通常在水中产卵。
雌鱼体内产生卵子时,会有告诉性色素出现,这些色素可以帮助斑马鱼有效地控制自己和同伴的繁殖。
雄鱼会在巢穴内产生精子,和雌鱼配对后可以产生400-500颗卵。
在适当的条件下斑马鱼卵可以在69h后孵化。
3.食性习性斑马鱼性质温和,不挑食,食性杂,吃小型昆虫、蚯蚓、水虫以及水草、藻类等,在食物充足的情况下生长迅速,但在食物短缺时可以进入休眠状态。
斑马鱼的特点
斑马鱼的特点
斑马鱼是一种淡水鱼类,属于鲤形目鲤科短担尼鱼属。
以下是斑马鱼的特点:
1. 形态特征:
身体呈纺锤形,头部小而稍尖,吻短。
全身布满了多条深蓝色的纵纹,与银白色或金黄色的纵纹相间排列。
这些条纹从鳃盖后一直延伸到尾部,在水中游动时,它们看起来像一群奔驰的斑马,这也是斑马鱼名字的由来。
雄性的斑马鱼比雌性的颜色更深,且臀鳍更大。
平均体长可以达到25毫米,最大可以长到64毫米。
臀鳍宽大,与背鳍相对应,胸鳍较小。
下颚细长且突出,嘴朝上,并依靠鳃耙来分解食物。
2. 生活习性:
斑马鱼是杂食性动物,主要摄食浮游动物、浮游植物和昆虫幼虫等。
容易大规模饲养,3个月可达性成熟。
雌鱼每周可产卵一次,每次几百枚卵。
3. 科研价值:
由于斑马鱼养殖方便、繁殖周期短、产卵量大、胚胎体外受精、体外发育、胚体透明,它已成为生命科学研究的新宠。
全球范围内有超过1500个斑马鱼实验室。
利用斑马鱼,可以研究生命科学的基础问题,揭示胚胎和组织器官发育的分子机理;可以构建人类的各种疾病和肿瘤模型,建立药物筛选和治疗的研究平台;可以建立毒理学和水产育种学模型,研究和解决环境科学和农业科学的重大问题。
斑马鱼也是观赏鱼类,因其颜色漂亮、容易饲养且不易生病而受欢迎。
飞向太空的斑马鱼
飞向太空的斑马鱼作者:***来源:《青少年科技博览》2024年第07期随着神舟十八号载人飞船发射并与空间站对接成功,跟随乘组一同进入太空的斑马鱼也引发了大家的关注。
那么,斑马鱼究竟是一种什么样的鱼呢?它们又为何有幸成为我国首次“太空养鱼”的主角呢?斑马鱼究竟是什么鱼斑马鱼属于鲤形目鲤科的硬骨鱼类,是一种热带鱼。
斑马鱼的野生种群主要分布于印度东部、孟加拉国、尼泊尔等地的溪流之中。
斑马鱼的体侧有5~7条延伸至尾部的水平蓝色条纹,与斑马类似,故而得名。
斑马鱼成年个体体长在3~4厘米之间,寿命3~5年。
斑马鱼集群生活,群体内的个体通过相互撕咬和追逐确定社会等级,因此它们被认为是一种社会性鱼类。
通常情况下,一群斑马鱼中等级较高的,会在选择产卵场位置以及获取食物资源等方面拥有优先权利。
在野生环境下,斑马鱼一般都在白天外出活动,以小型甲壳动物、蠕虫、藻類为食。
到了晚上,它们会躲藏在相对安全的礁石下或水草丛等处。
斑马鱼的头小吻短,体形细长而略呈纺锤形。
它们的雌雄差异仅凭肉眼即可分辨,雄鱼的条纹是深蓝色间柠檬色,臀鳍棕黄色并有明显的条纹,而雌鱼全身是蓝色条纹间银灰色条纹,臀鳍为淡黄色。
自从20世纪50年代,斑马鱼作为实验动物被用于毒理学研究,并取得一系列成功开始,它们就陆续被应用到生命科学、健康科学和环境科学等领域的研究中,现在已经成为了仅次于大鼠和小鼠的第三大实验动物,也是一种常用的模式动物。
所谓模式动物是实验动物中的一种,指用于揭示某种具有普遍规律生命现象的生物物种,又被称为“活的试剂”。
目前,科学家使用的模式动物主要有啮齿类、非人灵长类、猪、兔、犬和斑马鱼这6大类。
作为脊椎动物的一员,斑马鱼还拥有其他脊椎动物少有的超强自愈再生能力。
研究发现,斑马鱼的尾鳍被切除后,切口处会被上皮细胞封闭,随后上皮细胞增厚,间质细胞也开始分化增殖,并逐渐形成胚基,仅用两周的时间就可以迅速再生出完整的尾鳍。
另外,斑马鱼的心脏、肝脏、皮肤、脊髓,以及视网膜等器官都可以再生。
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它是发育生物学家的得力助手,是医学研究的后起之秀,是环境监测的哨兵,是指示兵,是药物研发的新宠,它就是脊椎类模式动物明星斑马鱼(zebrafish,Danio rario)。
一、斑马鱼基本特点:
原产地:热带淡水鱼,原产于喜马拉雅山南麓的印度、巴基斯坦、孟加拉和尼泊尔等南亚国家。
成鱼体长3-100px,略呈纺锤形,头小而稍尖,吻较短,身躯玲珑而纤细,因其体侧具有像斑马一样纵向的暗蓝色与银色相间的条纹而得名。
http://www.mun.ca/biology/desmid/brian/BIOL3530/DEVO_03/ch03f09.jpg 斑马鱼是体外受精发育,胚体透明。
胚胎发育快,受精后3天左右孵化出膜,天左右开口进食,约3个月达到性成熟,寿命可达2年以上。
斑马鱼可常年产卵,繁殖周期3-4天,一对成年斑马鱼每次可产卵200-300枚,受精率通常在70%以上。
养殖温度一般在23-31℃,15℃左右仍可存活,最佳养殖温度在25-28摄氏度之间,pH值在6.8~7.8,硬度在2~6之间。
二、斑马鱼作为模式生物的起源和发展
1938年,美国布朗大学Roosen-Rung教授首次报道斑马鱼发育形态学研究成果。
1950年代,美国罗格斯大学K. Kenneth Hisaoka教授首次报道斑马鱼毒理学研究成果。
1972年,美国俄勒冈大学George Streisinge教授开始斑马鱼发育生物学研究和模式动物建立工作。
1989年,美国俄勒冈大学Monte Westerfield教授出版斑马鱼研究圣经The Zebrafish Book第一版。
1998年,首个斑马鱼模式生物数据库ZFIN成立()。
1998年,全球第一家斑马鱼药物研发
服务外包公司成立。
2004年,斑马鱼国际资源中心(ZIRC)在俄勒冈大学成立。
2007年,美国环境保护署(EPA)将斑马鱼技术列入其转化毒理学研究项目ToxCast TM。
2009年,斑马鱼药物毒理学评价技术首次通过FDA和EMA的GLP认证,这标志着斑马鱼模型的安全药理学和毒理学评价结果可以作为正式材料纳入临床试验申报资料。
2010年,中国首家斑马鱼技术服务公司杭州环特生物科技有限公司成立。
2011年,斑马鱼模型和技术研究被列入中国科技部“重大新药创制”专项十二五实施计划。
2012年,中国国家斑马鱼资源中心成立。
2013年,斑马鱼资料首次用于CFDA临床申报。
经济合作发展组织(OECD)已经颁布了项化学品鱼类(斑马鱼)毒性检测标准,而全球医药巨头辉瑞、罗氏、诺华、葛兰素史克、阿斯利康等都逐渐开始使用斑马鱼技术进行药物筛选研发。
三、斑马鱼作为模式生物的优势
1、拥有与人相似的组织器官和系统,基因和信号通路与人类高度保守:>85%;生理、发育和代谢与哺乳动物高度相似,美国国立卫生研究院(NIH)将斑马鱼列为继小鼠和大鼠之后的第三大脊椎模式生物。
2、斑马鱼是目前唯一适于高通量药物筛选的脊椎类动物。
3、个体小(目前唯一适于进行微孔板高通量药物筛选的脊椎类动物)、发育周期短(24小时器官便可形成)、实验周期短(筛选结果在一周内即可得出)、费用低(约为鼠类的1/10 - 1/100)、体外受精、透明(可直接观察药物对内部器官的作用)、单次产卵数较高(150-200枚)以及实验用药量小(为小鼠用药量的1/100~1/1000>)。
四、斑马鱼在基础研究领域的应用:发育生物学、基因功能研究、疾病发病机制研究等
1、斑马鱼可应用于发育生物学的细胞谱系分析、突变鉴别、饱和诱变分析、基因转移研究、基因连锁图的构建,其体外受精、胚体透明、细胞分裂快等特点使它比起大小鼠有独特优势。
2、基因功能研究:斑马鱼繁殖速度快,能提供足够量的胚胎用于基因筛选;其胚体透明的特点可以一目了然地观察到基因突变后的表型变化。
3、疾病发病机制研究:斑马鱼的器官发生、疾病生理、基因组与人类相似度较大,主要信号通路和基因具高度同源性,诸多斑马鱼疾病(如血癌、免疫性系统疾病、感染疾病等)模型已建立,利用斑马鱼的疾病模型来研究治愈人类相关疾病是近年全球热点的科研项目。
五、斑马鱼在药物研发中的应用
斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势,又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点,可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层,完善现有药物研发体系。
将斑马鱼模型鱼体外实验和哺乳动物实验相结合,可以从整体上缩短药物临床前早期研发的实验周期,降低实验成本,提高实验预测的准确性,进而提高药物研发效率,降低药物研发风险。
小动物筛选和药物开发过程。
利用斑马鱼等小动物模型进行的基于表现型的化合物筛选技术(②)提供了一种不同于传统药物筛选技术(①)的替代方法。
也有助于揭示新的疾病分子机理和药物作用靶点(③)(Giacomotto, J., et al., 2010).
斑马鱼模型融入临床前安全性评价体系.斑马鱼能够在体外实验和哺乳动物实验之间起到很好的桥梁作用,早期发现安全性不佳的候选化合物,降低后期研发失败风险和成本(Sukardi,et.al., 2011).
沙利度胺(thalidomide)因其致畸性而曾经臭名昭著,美国FDA因阻止沙利度胺进入美国市场而声望大涨。
梅里尔公司申请销售前坚称已研究沙利度胺对大鼠和孕妇毫无副作用。
应用斑马鱼评价沙利度胺毒性时,可明显看到沙利度胺的发育致畸性——胸鳍发育不全,如下图所示:
美国食品药品监督管理局(FDA)越来越多地应用斑马鱼对临床前药物进行安全性与毒理性评价,并在其官网介绍其研究成果:
六、斑马鱼在环境检测与化学品风险评估中的应用
ISO-15088-2008
Determination of the acute toxicity of waste water to zebrafish eggs
OECD 化学品鱼类(斑马鱼)毒性测试标准:
OECD 203(1992)Fish acute toxicity test
OECD 204(1984)Fish prolonged toxicity test: 14-day study
OECD 210(1992)Fish early life-stage toxicity test
OECD 212(1998)Fish short-term toxicity test on embryo and sac-fry stages OECD 215(2000)Fish juvenile growth test
OECD 229(2009)Fish short-term reproducti-on assay
OECD 230(2009)21-Day fish screening assay:A Short-Term Screening for
Oestrogenic and Androgenic Activity, and Aromatase Inhibition
OECD 305(1996)Bioconcentra-tion: Flowthrough fish test
OECD 236 (2013)(FET) Test
中国化学品、环境鱼类(斑马鱼)毒性测试标准:
GB/T 21806-2008 鱼类幼体生长试验
GB/T 21807-2008 鱼类胚胎和卵黄囊仔鱼阶段的短期毒性试验
GB/T 21808-2008 鱼类延长毒性14天试验
GB/T 21854-2008 鱼类早期生活阶段毒性试验
GB/T 21858-2008 生物富集半静态式鱼类试验
GB/T 21800-2008 生物富集流水式鱼类试验
GB/T 27861-2011 化学品鱼类急性毒性试验
GB/T 21281-2007 危险化学品鱼类急性毒性分级试验方法
GB/T 21814-2008 工业废水的试验方法鱼类急性毒性试验
GB/T 13267-1991 水质物质对淡水鱼(斑马鱼)急性毒性测定方法
转基因斑马鱼广泛应用于水质监测,其对污染物的作用反应快,可在短时间内调查水污染状况或用于特定污染物的检测。
将目标质粒注射到斑马鱼体内,斑马鱼经过筛选得到稳定的转基因品系,通过观察荧光蛋白可以用来快速检测不同的环境污染物:
银纳米粒子因其抗菌作用而广泛应用于洗涤剂和废物处理领域,为了研究银纳米粒子对环境和健康的影响,来自新加坡国立大学化学系的研究者用斑马鱼作用模式生物评价了银纳米粒子对斑马鱼的毒性,结果显示银纳米粒子可造成斑马鱼胚胎死亡、体轴异常、脊索扭曲、血流减慢、心包水肿、心律不齐等:
与常规物理和化学检测手段相比,应用斑马鱼进行环境监测和化学品研究能实现快速、高效、灵敏、成本低等优点。