液相色谱仪操作步骤

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液相色谱仪操作流程

液相色谱仪操作流程

液相色谱仪操作流程液相色谱仪(Liquid Chromatography, LC)是一种常见的分析仪器,被广泛应用于化学、生物化学、制药、环境监测等领域。

正确的操作流程对于获得准确的分析结果至关重要。

本文将介绍液相色谱仪的基本操作流程。

1. 仪器设置在开始操作液相色谱仪之前,首先需要进行仪器设置。

操作人员需要将色谱柱与色谱仪连接好,并确保连接处密封良好,以避免泄漏。

接下来,调整色谱柱的工作温度和流速,根据实验需求选择合适的检测波长和检测器类型。

确保仪器处于正常工作状态后,即可进行样品的准备与进样操作。

2. 样品准备液相色谱仪需要对待分析物进行溶解、过滤等预处理步骤。

首先,称取适量的待分析样品,然后加入适量的溶剂,将待分析物充分溶解。

溶解后,使用0.22μm的微孔滤膜过滤液体,以去除悬浮物和微粒。

确保样品无杂质后,即可进行进样操作。

3. 进样操作将经过处理的样品注射进液相色谱仪中,可以通过手动进样或自动进样方式进行。

手动进样需要使用微量注射器,将适量的样品吸入注射器,然后注射到进样口;自动进样则通过液相色谱仪的自动进样器完成。

确保样品进样完全后,即可开始进行分析。

4. 色谱条件设定根据待分析物的性质和分析目的,需要设定好液相色谱的参数。

这些参数包括:流动相的组成和流速、柱温、梯度程序等。

调整这些参数可以影响分析结果的分离效果和分析时间。

合理设定色谱条件可以提高分析的准确性和灵敏度。

5. 数据采集与解析启动液相色谱仪,开始采集数据。

液相色谱仪会根据设定的方法进行数据采集,并将采集到的数据保存在计算机中。

数据采集完成后,可以使用相应的色谱软件对数据进行解析和处理,包括峰面积计算、定量分析、峰识别等。

6. 仪器维护与保养操作结束后,需要对液相色谱仪进行适当的维护与保养工作。

包括清洗进样口和色谱柱,检查各部件的密封性能,并及时更换损坏的零部件。

定期进行系统的校准和液相色谱针对性保养,确保仪器的正常工作状态和精确性。

液相色谱仪基本操作步骤

液相色谱仪基本操作步骤

液相色谱仪
基本操作步骤
一、启动开机顺序:
稳压器→插座电源→检测器→高压泵→动态混合器→流动相→计算机→色谱工作站。

二、开机注意事项:
1.待检测器和高压泵都自检完了,再启动流动相。

2.启动流动相之前,要先排气泡。

通过拧松排气螺钉打开排气毛细管,选择需排气的流动
相,按冲洗键(purge),用手指弹动输送流动相的毛细管,使气泡从排气毛细管中排出。

气泡排完后,按冲洗键停止冲洗。

3.设置样品检测条件:流动相比例,冲洗流速,检测波长等。

4.按启动键(start stop)启动流动相。

三、制样:
在仪器自检和流动相稳定的空档,进行制样,一般稀释2500倍或5000倍即可。

四、取样、进样:
待流动相压力和检测器信号都稳定了,即可进样。

用100μl针管进样器吸取样品50μl-70μl,气泡朝上(吸样时动作要缓慢,尽可能地少产生气泡),用干净滤纸擦拭针头上的水,将针头插入进样孔(插到底),将进样阀瓣至左边,按检测器上的红键回零,再将样品推入进样孔(注意:勿将气泡推入),将进样阀瓣至右边,即完成进样。

程序将自动进行谱图采集。

五、处理报告
谱图采集结束后,对谱图进行处理并保存文件,打印文件。

六、关机
将流动相设置成100%乙腈,清洗色谱柱1.5h。

按启动键关闭流动相。

关闭动态混合器电源、高压泵电源、检测器电源。

液相色谱操作规程

液相色谱操作规程

液相色谱操作规程液相色谱操作规程液相色谱(HPLC)是一种常用的分离和分析技术,广泛应用于制药、化学、食品、环境等领域。

为了确保实验结果的准确性和实验室安全,以下是液相色谱操作的一般规程,供参考。

1. 实验前准备- 检查液相色谱仪的状态,确保仪器正常运行。

检查流动相、样品、色谱柱等试剂和设备的有效性和存放条件。

- 清洗和准备色谱柱。

按照柱内包装说明进行操作,如需更换柱,要将原柱溶液彻底洗净,并严格按照规程存储。

2. 样品准备- 准备样品溶液,注意选用适合的溶剂,并控制样品的浓度在色谱柱适用范围内。

- 对于固体样品,要将其溶解在适当的溶剂中,使用滤膜过滤以除去杂质。

3. 仪器启动和操作- 打开液相色谱仪,确保仪器连接正常并处于待机状态。

- 打开软件,设置操作参数,如流速、检测波长、温度等,并校准仪器。

- 检查进样器和检测器的运行情况,确保它们的正常工作。

- 启动柱温箱并设置温度。

4. 进样和分离- 使用适当的方式进样,如自动进样器或手动进样器,并确保进样量适当。

- 设置适当的流速和柱温,开始分离实验。

- 注意记录实时的色谱图和数据。

5. 后处理和结果解释- 完成分离后,关闭液相色谱仪。

- 分析数据,包括峰面积、保留时间和峰高等,与标准曲线或其他样品对照进行比较。

- 解释和记录实验结果。

6. 清洗和保养- 分离结束后,进行色谱柱的清洗和保养。

根据柱的材质和要求,选择适当的清洗方法和溶剂,彻底清洗柱内的杂质,避免污染或损坏柱。

- 清洗完毕后,根据柱的要求存储或封存,以确保柱的使用寿命。

7. 实验室安全- 在实验过程中,注意个人防护措施,戴上实验手套、护目镜等。

尽量避免将试剂接触皮肤和眼睛,如不慎溅到眼睛或皮肤上应立即用大量清水冲洗。

- 坚持实验室清洁和卫生,在实验后及时清理实验台面、器材和废弃物,保持良好的工作环境。

液相色谱是一项繁琐的实验技术,需要严格遵守操作规程和实验室安全要求。

以上规程仅供参考,具体操作还需根据实验目的、仪器型号和试剂要求进行调整。

高效液相色谱仪的操作步骤 液相色谱解决方案

高效液相色谱仪的操作步骤 液相色谱解决方案

高效液相色谱仪的操作步骤液相色谱解决方案高效液相色谱仪操作步骤:1).过滤流动相,依据需要选择不同的滤膜.2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10—20分钟。

3).打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。

4).进入hplc掌控界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。

5).有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。

冲洗泵,直接在泵的出水口,用针头抽取。

冲洗进样阀,需要在manual菜单下,先点击purge,再点击start,冲洗时速度不要超过10 ml/min。

6).调整流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000、点击injure,选用合适的流速,点击on,走基线,察看基线的情况。

7).设计走样方法。

点击file,选取se—lect users and methods,可以选取现有的各种走样方法。

若需建立一个新的方法,点击new method。

选取需要的配件,包括进样阀,泵,检测器等,依据需要而不同。

选完后,点击protocol。

一个完整的走样方法需要包括:a.进样前的稳流,一般2—5分钟;b.基线归零;c.进样阀的loading—inject转换;d.走样时间,随不同的样品而不同。

8).进样和进样后操作。

选定走样方法,点击start。

进样,全部的样品均需过滤。

方法走完后,点击postrun,可记录数据和做标记等。

全部样品走完后,再用上面的方法走一段基线,洗掉剩余物。

9).关机时,先关计算机,再关液相色谱。

10).填写登记本,由负责人签字。

注意事项:11).流动相均需色谱纯度,水用20m的去离子水。

脱气后的流动相要当心振动尽量不引起气泡。

12).柱子是特别脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。

13).全部过柱子的液体均需严格的过滤。

14).压力不能太大,可以不要超过2000 psi。

液相色谱流动相说明流动相相当于液相的血液,可以想象对液相的紧要程度。

液相色谱操作规程

液相色谱操作规程

液相色谱操作规程
液相色谱仪操作规程
1仪器组成
1.1仪器组成:自动进样器,泵,柱温箱,检测器。

1.2 计算机
2操作步骤
2.1将滤头和流动相进行超声,以除去气泡。

超声10min后,去除,安装滤头,放入流动相中,A泵进有机相,B泵进水相。

2.2打开计算机,自动进样器,泵,柱温箱和检测器的四个开关。

2.3打开液相软件(Breeze)。

2.4建立测样方法,设定流动相流速及比例,选择检测波长。

2.5按照提示,进行抽气,洗泵。

洗泵完毕后按照测试方法修改流动相比例,升高流速。

当流速达到所需要求的时候,选择所需要的方法进行平衡。

2.6当平衡至小数点后6位时进行测样。

3关机
3.1当测样结束是,需要用100%的甲醇运行半小时,以保护色谱柱。

3.2降流速,当流速降为0以后,关闭四个开关,关闭软件和计算机。

将滤头拔出,浸泡在甲醇中。

4注意事项
4.1进样时需要先将待测样品过0.25um的膜。

4.2抽气时应尽量抽尽气体,当洗泵完成,提升流速的时候要注意将阀掰回原来的位置。

4.3注意平衡压力,防止压力过高一起自动停止运行。

4.4测样时出现问题要及时告知仪器负责人。

4.5做好仪器使用记录。

液相色谱仪操作步骤

液相色谱仪操作步骤

液相色谱仪操作步骤1.准备工作-检查和清洁仪器以确保其正常运行。

-检查并校准流量计,以确保它们读数准确。

-检查并准备所需的溶剂和样品。

2.设置仪器参数-打开仪器并设置所需的温度和流速。

-设置检测器以选择适当的检测方式(如紫外线检测器、荧光检测器等)。

-根据样品的性质选择适当的波长或选择合适的检测器。

3.校准系统-使用标准品或混合物进行系统校准。

根据需要选择适当的标准品。

-执行系统检漏以确保系统没有泄漏。

-进行系统的质量控制,以确保仪器的准确性和稳定性。

4.准备样品-准备样品溶液并确保其在操作过程中稳定。

-使用过滤器过滤样品以去除悬浮物和杂质。

-根据需要进行样品的预处理,如稀释、洗涤等。

5.填装柱和样品进样-选择合适的柱,并根据需要填充柱。

-连接柱与仪器,并确保其紧固和密封。

-使用进样针将样品引入柱中,并控制进样量。

6.运行色谱仪-开始运行仪器并监控色谱图的生成。

-根据需要调整流速、温度和其他参数。

-定期检查流速计和检测器的读数,并记录结果。

7.数据分析和结果评估-分析和解释色谱图以确定化合物的保留时间和峰形。

-根据峰的面积计算化合物的浓度或相对含量。

-使用标准曲线将峰面积转换为浓度或含量。

8.清洗和维护-在使用完毕后,及时清洗仪器以防止残留物的积累。

-维护仪器,包括更换柱和消耗品,以确保其长期正常运行。

以上是液相色谱仪的操作步骤。

通过正确操作仪器和遵循标准程序,可以获得准确和可靠的分析结果。

请注意,实际操作步骤可能因仪器型号和分析需求的不同而有所不同。

因此,在操作前请仔细阅读和了解所使用液相色谱仪的操作手册和相关文献。

岛津液相色谱仪lc-16操作规程

岛津液相色谱仪lc-16操作规程

岛津液相色谱仪lc-16操作规程一、仪器简介岛津液相色谱仪LC-16是一种用于分离和分析化合物的仪器,通过液相色谱技术实现。

它广泛应用于生物化学、药物分析、环境监测等领域。

本规程将详细介绍LC-16的操作方法,以保证准确、安全地使用该仪器。

二、仪器安全操作1.操作人员需在使用前仔细阅读并理解仪器的操作手册,确保熟悉仪器的功能和操作步骤。

2.操作人员在进行仪器操作前,需佩戴实验室防护装备,包括实验服、手套和护目镜。

3.确保工作台面干净整洁,防止溅洒试剂或样品造成污染。

4.对于高压部分,操作人员应特别注意不要用力过大,以免造成意外伤害。

三、仪器操作步骤1.打开仪器电源,待仪器初始化完成后,检查仪器工作状态是否正常。

如有异常情况,应停止操作,并联系维修人员进行处理。

2.将待测样品装入进样器中,并按照仪器说明书进行进样操作。

3.设置色谱条件,包括流动相、柱温、检测波长等参数,根据待测物质特性进行调整。

4.启动仪器进行分析,监测色谱曲线的变化,根据需要调整相关参数以获取满意的分离效果。

5.分析结束后,关闭仪器电源并对仪器及周围环境进行清洁和消毒处理。

四、操作注意事项1.严格按照实验操作规程进行操作,不得随意更改或省略操作步骤。

2.避免操作过程中产生静电,防止对仪器产生影响。

3.在使用仪器过程中,如发现任何异常情况,应及时停止操作,并及时向主管或维修人员报告。

4.在操作过程中,注意保持清洁,避免污染样品或试剂。

操作结束后,及时对仪器进行清洁和消毒处理。

五、仪器维护1.定期对仪器进行维护保养,如更换耗材或维修部件。

2.在使用过程中,注意保持仪器的清洁,并定期清洁主要部件,避免因污染而影响仪器的分析能力。

3.对于仪器性能出现异常情况,应及时联系专业维修人员进行处理,切不可私自拆卸或更改仪器部件。

液相色谱仪操作及原理

液相色谱仪操作及原理

液相色谱仪操作及原理液相色谱仪(Liquid Chromatography,LC)是一种常用的分析技术,用于分离和测定混合物中的化合物。

它的操作原理基于样品在流经填充物时与填充物相互作用,并以不同的速度移动。

以下是液相色谱仪的操作步骤及其原理:操作步骤:1. 准备样品:将待测样品准备成溶液,并以适当的方法预处理,如稀释、萃取等。

2. 准备填充物:选择合适的填充物,并将其装填进色谱柱中。

填充物的选择根据分离物质的性质和需求。

3. 装载样品:将样品溶液使用注射器加载到色谱柱中,通常通过自动进样器进行。

4. 运行液相色谱仪:启动液相色谱仪,使流动相从色谱柱中流经。

流动相可以是不同溶剂或缓冲溶液的混合物。

流动相的选择也取决于待测物质的性质。

5. 检测和记录数据:样品分离过程中,通过检测器(如紫外可见光灯、荧光检测器、质量分析仪等)检测分离出的各组分,记录并分析检测结果。

操作原理:液相色谱仪的操作原理基于样品与填充物的相互作用以及溶剂的选择。

填充物通常是一种多孔性材料,具有大量的表面积,可与样品中的分离物质发生化学或物理相互作用。

在运行液相色谱仪时,样品中的化合物在与填充物相互作用的同时,也与流动相相互作用。

由于不同分离物质与填充物和流动相之间的相互作用不同,它们在色谱柱中的停留时间也不同。

较强的相互作用会导致较长的停留时间,而较弱的相互作用会导致较短的停留时间。

通过控制流动相的组成和流动速度,可以使待测物质在色谱柱中以不同的速率移动,从而实现样品中各成分的分离。

检测器可以检测到每个组分的浓度,进而得到分离出的组分的浓度和峰面积等信息。

根据这些信息,可以定量分析样品中各组分的含量或确定未知化合物的结构。

需要注意的是,在实际操作中,操作条件和仪器设置可能会因分析需要而有所不同。

因此,在使用液相色谱仪进行操作时,应根据具体实验要求和仪器特性进行适当调整和操作。

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液相色谱仪操作步骤
1.系统组成:
溶剂输送泵,手动进样阀,检测器,色谱数据工作站和电脑等组成,另外还包括打印机,不间断电源等辅助设备。

2.准备:
2.1.准备所需流动相,用合适的0.45um滤膜过滤,超声脱气20min。

2.2.根据待测样品的需要更换合适的色谱柱(注意方向)和定量环。

2.3.配制样品和标准溶液,用合适的0.45um滤膜过滤。

2.4.检查仪器各部件的电源线、数据线、地线、和输液管道是否连接正
常。

3. 开机:
3.1.接通电源,依次打开检测器、输液泵,待检测器自检结束,显示测
量状态时,打开电脑、打印机、电脑显示器等。

3.2.更换流动相并排气泡
3.3.将管路的不锈钢过滤头放入装有准备好的流动相的储液瓶中
3.4.逆时针转动泵的排空阀(1/2圈左右),拧松排空阀
3.5.按输送泵的【purge】键,绿灯指示灯亮,这时泵以5.0ml/min的流
速冲洗,一般冲洗2分钟左右,以管路中没有气泡为止,再按【stop】
键,重新设定流速值。

4. 参数设定:
4.1.流速设定:在输送泵显示初始屏幕时,按【flow】键,用数字键输
入所需的流速(一般是1.0ml/min),按【Enter】键确认。

4.2.波长设定:在检测器显示初始屏幕时,按【λ】键,用数字键输入
所需的波长值,按【Enter】键确认。

4.3. 参数设定完后按【run】键运行。

4.4.色谱工作站操作:打开“在线工作站”---“通道1”---“OK”---“数据采
集”---零点校正---查看基线,基线稳定后,关闭查看基线可以进样。

进样后采集---待样品出峰完毕---停止采集---预览---查看结果---打
印。

(在离线查看:打开“离线工作站”-“打开”—双机打开样品-选定谱图
编号-“确定”-“NO” “预览”-查看结果-打印。


5.进样:
5.1.进样前按检测器【A/Z】键调零,查看基线是不是在0mv,如果偏
差较多,按软件中的【零点校正】即可。

5.2.用样品清洗注射器,并排除气泡,抽取适量,将手动进样阀杆拨到
【Load】位置,将样品溶液注入进样阀,将进样阀杆拨到【lnject】
位置,完成进样,在线工作站自动采集数据。

6.分析结束后,系统冲洗:
若分析样品时,流动相系统中含有缓冲盐类物质,需要先用10%甲醇水溶液,1.0ml/min冲洗40分钟后,在更换纯甲醇试剂,1.0ml/min
冲洗40分钟后,按【stop】键停泵,然后关机。

若流动相系统中无
缓冲盐类物质,则可直接用纯甲醇试剂冲洗系统,1.0ml/min冲洗40
分钟后,按【stop】键停泵,然后关机。

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