捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白基因的克隆表达及功能分析

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捻转血矛线虫ZJ株15kD分泌排泄蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

捻转血矛线虫ZJ株15kD分泌排泄蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

捻转血矛线虫ZJ株15kD分泌排泄蛋白基因的克隆及在大肠杆菌中的表达杜爱芳;李孝军;侯玉慧【期刊名称】《农业生物技术学报》【年(卷),期】2005(13)5【摘要】捻转血矛线虫主要寄生于反刍动物尤其是绵羊的胃内,可引起宿主贫血,抵抗力下降甚至死亡,周期性服药和粪检是当今主要控制方法。

但耐药株的出现影响了这种策略的效果,因此人们正致力于疫苗的研究(Knox and Smith,2001)。

捻转血矛线虫ES抗原具有双重免疫学功能,一方面,ES抗原与宿主免疫系统直接接触,是最容易刺激机体产生免疫反应的抗原,因而是制备免疫原的理想材料(Bakker et a1.,2004)。

另一方面ES抗原是灵敏度特异性强的检测抗原,可测出自然感染1~2条以上捻转血矛线虫的抗体且不与其它虫的抗体发生反应。

【总页数】2页(P688-689)【作者】杜爱芳;李孝军;侯玉慧【作者单位】浙江大学动物预防医学研究所,杭州,310029;浙江大学动物预防医学研究所,杭州,310029;浙江大学动物预防医学研究所,杭州,310029【正文语种】中文【中图分类】S8【相关文献】1.两株大蒜病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 [J], 马筠;杨恭;徐绍华;魏军亚;邱并生2.番鸭呼肠孤病毒ZJ99株σC基因的序列分析及其在大肠杆菌中的表达 [J], 余旭平;何世成;朱军莉;金俊杰;郑新添3.捻转血矛线虫(H.contortus)ZJ株H11蛋白基因的克隆及序列分析 [J], 杜爱芳;李孝军;侯玉慧;王素华4.结核分支杆菌MPT83蛋白基因在大肠杆菌表达载体中的克隆、表达与鉴定 [J], 尤敏;邓小波;崔尚金5.捻转血矛线虫ZJ株24000分泌排泄(ES)蛋白基因的克隆和序列分析 [J], 杜爱芳;李孝军;王素华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

捻转血矛线虫免疫调节型DNA疫苗的构建及在山羊体内表达研究

捻转血矛线虫免疫调节型DNA疫苗的构建及在山羊体内表达研究

捻转血矛线虫免疫调节型DNA疫苗的构建及在山羊体内表达研究严若峰;赵光伟;徐立新;孙延鸣;李祥瑞【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2007(38)9【摘要】为构建免疫调节型DNA疫苗,将山羊IL-2基因分别与捻转血矛线虫H11-1、H11-2和H11-3基因串联构建融合表达载体pcDNA/IL-2-H11-1、pcDNA/IL-2-H11-2和pcDNA/IL-2-H11-3.为检测疫苗在山羊体内的表达情况,将纯化的疫苗质粒肌肉注射山羊后取注射部位肌肉组织,于首次免疫7 d后和二次免疫10 d后分别用RT-PCR和Western Blot等方法检测H11抗原的转录和翻译情况.结果发现H11基因和IL-2基因均能在注射部位肌肉获得转录和翻译.【总页数】5页(P954-958)【作者】严若峰;赵光伟;徐立新;孙延鸣;李祥瑞【作者单位】南京农业大学动物医学院,南京,210095;南京农业大学动物医学院,南京,210095;南京农业大学动物医学院,南京,210095;南京农业大学动物医学院,南京,210095;南京农业大学动物医学院,南京,210095【正文语种】中文【中图分类】S852.731【相关文献】1.捻转血矛线虫DNA疫苗的构建及山羊免疫保护性试验 [J], 严若峰;徐立新;孙延鸣;赵光伟;李祥瑞2.体内电穿孔对载体表达效率和人类免疫缺陷病毒1型DNA 疫苗免疫反应效果的研究 [J], 刘强;王文波;黄维金;邵荣光;王佑春3.杜氏利什曼原虫热休克蛋白70的DNA疫苗表达载体构建及体内应答研究 [J], 成军;斯崇文;王勤环4.可复制型抗肿瘤DNA疫苗PSCK-2PFcGB的构建及体内外表达 [J], 张亮;阎瑾琦;王越;肖毅;高昆;董金凯;王博;于继云5.捻转血矛线虫肌动蛋白基因的克隆与表达及其DNA疫苗的构建 [J], 严若峰;闫峰宾;王晶晶;徐立新;宋小凯;李祥瑞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

捻转血矛线虫过氧化物酶基因的克隆和5种蛋白的抗原特性分析的开题报告

捻转血矛线虫过氧化物酶基因的克隆和5种蛋白的抗原特性分析的开题报告

捻转血矛线虫过氧化物酶基因的克隆和5种蛋白的抗原特性分析的开题报告一、研究背景和意义血矛线虫病是由血矛线虫(Haemonchus contortus)引起的一种寄生虫病,是世界范围内绵羊、山羊和牛等重要畜牧业动物的主要寄生虫病之一,对畜牧业造成了重大经济负担。

目前,农业部已将其列为重点监测寄生虫。

传统的血吸虫病疫苗防治方法的局限性逐渐显现,因此发展新型的疫苗防治手段成为解决血矛线虫病防治现状的重要途径之一。

过氧化物酶(peroxidase)在多种生物体中存在,具有多种生物学功能。

已有研究表明,血矛线虫过氧化物酶可以作为疫苗候选抗原,并在动物体内有一定的免疫保护作用。

因此,深入探究血矛线虫过氧化物酶的分子特性及其抗原性有助于寻找更有效的防治血矛线虫病新途径。

二、研究内容1. 捻转血矛线虫过氧化物酶基因的克隆:通过PCR方法,获取血矛线虫的总RNA,进一步从RNA中克隆目标基因,并进行测序及生物信息学分析,确定其基因组序列。

2. 血矛线虫过氧化物酶基因的表达及纯化:将基因克隆至表达载体中,在大肠杆菌中进行表达,并进行线性梯度盐析纯化方法进行纯化。

3. 抗原特性分析:通过Western blot和ELISA等方法,检测不同浓度的纯化过的过氧化物酶及其多种蛋白与雌性马和绵羊血清之间的反应,分析其抗原特性。

4. 蛋白生物活性测定:通过荧光素一二磷酸比色法测定过氧化物酶的活性,评估其生物学功能。

三、研究方法1. PCR方法:利用yPCR技术,通过一对特异性引物对血矛过氧化物酶基因进行PCR扩增,针对扩增产物进行生物信息学分析。

2. 表达载体的构建和转化:将扩增后的基因片段插入至表达载体中,转化至大肠杆菌中进行表达。

3. 大肠杆菌菌液的处理:利用超声破碎法及尿素淋洗法等方法进行大肠杆菌菌液的处理。

4. 过氧化物酶的纯化:利用线性梯度盐析纯化方法进行过氧化物酶的纯化。

5. Western blot分析:根据蛋白电泳原理,利用Western blot进行血清样品的检测分析。

捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析

捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析

捻转血矛线虫脂肪酶基因表达与生物学特性分析周丽娜;胡孟娟;孙伟;李祥瑞;徐立新;宋小凯;严若峰【期刊名称】《畜牧兽医学报》【年(卷),期】2018(049)003【摘要】To study the biological character of Lipase from Haemonchus contortus,the lipase gene of H.contortus preserved in our laboratory was cloned by PCR,and then expressed in procaryotic expression system.The expression vector was constructed to obtain the fusion protein.The antigenicity of the protein was analyzed by Western blot.The Lipase activity of the fusion protein was detected by esterase reaction.The location of the protein was tested by the indirect immunofluorescence.The transcription of lipase in different stages of H.contortus was detected by real-time quantification PCR.The results showed that the gene fragment encoding Lipase (without signal peptide region) sized as 864 bp.The recombinant protein weighted as 50 kD was fusion expressed.The fusion protein had highest lipase enzyme activity under 37 ℃ and pH7.Hc-Lipase was localized at outer and inter membrane as well as the intestinal tracts of adult worms.The expression of Hc-Lipase was higher in the male than other stages.It is indicated that Lipase from H.contortus could play important roles in worm development and modulation of the host immunity.Therefore,it is expected that Hc-Lipase could be a new target in prevention and therapy of Haemonchosis.%选取捻转血矛线虫脂肪酶(Lipase)进行基因克隆、表达并对其生物学特性进行探究.PCR克隆捻转血矛线虫lipase基因,构建表达载体,获得融合蛋白质,采用Western blot检测该蛋白质的抗原特性;酯类酶解反应检测该融合蛋白质脂肪酶活性;实时定量PCR检测该基因在捻转血矛线虫不同发育阶段的转录情况;间接免疫荧光试验检验该抗原蛋白质在虫体组织的定位情况.结果表明,去除lipase基因信号肽序列后,基因片段长864 bp,融合蛋白质大小50 ku;该融合蛋白质在37℃左右、pH为7的条件下酶活力最高;雄性成虫lipase转录量相对虫体其他阶段最高;该抗原蛋白质主要表达于虫体表皮和肠腔.Lipase具有较好的抗原性,可能与捻转血矛线虫发育和宿主免疫调节有关,深入研究捻转血矛线虫Lipase的特性对寻找新的免疫保护性抗原和药物靶标具有意义.【总页数】8页(P580-587)【作者】周丽娜;胡孟娟;孙伟;李祥瑞;徐立新;宋小凯;严若峰【作者单位】南京农业大学动物医学院,南京210095;南京农业大学动物医学院,南京210095;南京农业大学动物医学院,南京210095;南京农业大学动物医学院,南京210095;南京农业大学动物医学院,南京210095;南京农业大学动物医学院,南京210095;南京农业大学动物医学院,南京210095【正文语种】中文【中图分类】S852.731【相关文献】1.捻转血矛线虫保护性抗原H11 cDNA克隆及特性分析 [J], 严若峰;李祥瑞2.泛酸干预脂肪甘油三酯脂肪酶和长链脂酰辅酶 A合成酶1基因表达对鹅生长和脂类代谢的反向调控 [J], 孔敏;王宝维;葛文华;张名爱;马传兴;张肖3.鹅脂肪甘油三酯脂肪酶和长链脂酰辅酶 A合成酶1基因表达差异及其对脂肪沉积和血清脂类代谢的调控 [J], 王宝维;孔敏;葛文华;张名爱;马传兴;张肖4.牦牛肉品质相关的去饱和脂肪酶1基因表达\r差异分析 [J], 谢凤莲;孙万成;罗毅皓5.捻转血矛线虫新基因Hcher-1的克隆与特性分析 [J], 张志凯;徐立新;宋小凯;李祥瑞;严若峰因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

多重PCR检测捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗性等位基因

多重PCR检测捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗性等位基因

多重PCR检测捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗性等位基因薄新文;李祥瑞【期刊名称】《中国农业科学》【年(卷),期】2005(038)004【摘要】利用GenBank发表的捻转血矛线虫β微管蛋白基因组DNA序列设计2对引物,建立检测捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗性的多重PCR方法,利用该方法检测我国不同地区捻转血矛线虫对苯并咪唑类药物的抗性,并用生物学检测验证.结果表明,建立的多重PCR方法在抗性检测上具有很强的特异性,澳大利亚抗性虫株只有F1和F3条带,上海敏感虫株只有F2和F3片段;序列分析证实抗性虫株编码β微管蛋白第200位氨基酸的密码子为TAC,敏感虫株为TTC.并且该法具有很高的灵敏性,检测基因组DNA的最低量为50 ng.生物学检测,澳大利亚抗性虫株丙硫苯咪唑LD50达0.54 μg·ml-1,上海敏感虫株的LD50为0.0023 μg·ml-1,与多重PCR结果相符,说明多重PCR可以用于捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗性的检测.利用该技术检测源于新疆石河子、伊宁,安徽五河,江苏南京、徐州等地的虫株发现,这些地理株均表现为敏感型,丙硫苯咪唑LD50在0.0023~0.0032 μg·ml-1之间,提示我国捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗性尚不严重.【总页数】5页(P826-830)【作者】薄新文;李祥瑞【作者单位】南京农业大学动物医学院,南京,210095;南京农业大学动物医学院,南京,210095【正文语种】中文【中图分类】S852.731【相关文献】1.等位基因特异多重PCR快速检测结核分枝杆菌异烟肼耐药性研究 [J], 焦伟伟;孙琳;李兆娜;顾艺;孙桂芝;申阿东2.等位基因特异性多重PCR快速检测结核分枝杆菌喹诺酮耐药性的初步研究 [J], 夏强;赵丽丽;刘志广;刘劼;万康林3.应用等位基因特异性PCR和多重差别检测肺癌患者CYP1A1和GSTM1 … [J], 陈森清;许林4.特异性等位基因PCR扩增技术检测家蝇击倒抗性相关钠通道的基因突变 [J], 李春晓;张晓龙;曹晓梅;董言德;赵彤言5.绵羊捻转血矛线虫苯并咪唑类药物抗药性等位基因的PCR-RFLP分析 [J], 蔡葵蒸;柏家林因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

捻转血矛线虫耐药相关基因P450原核表达及其生物信息学分析

捻转血矛线虫耐药相关基因P450原核表达及其生物信息学分析

中国预防兽医学报Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine第42卷第11期2020年11月V ol.42No.11Nov.2020doi :10.3969/j.issn.1008-0589.202002039捻转血矛线虫耐药相关基因P450原核表达及其生物信息学分析王文龙,苏倩,赵学亮,孙柯,翟帅,王腾宇,呼和巴特尔*(内蒙古农业大学兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,内蒙古呼和浩特010018)摘要:为表达捻转血矛线虫P450蛋白并分析其生物信息学特性,本研究利用RT-PCR 扩增捻转血矛线虫P450基因,构建重组质粒pET-P450,经双酶切鉴定,将其转化大肠杆菌后,采用SDS-PAGE 检测P450蛋白的表达;利用生物信息学软件对P450蛋白的理化性质、结构特点进行分析。

结果显示,正确构建了重组质粒pET-P450且P450蛋白以包涵体的形式表达。

生物信息学分析结果显示,P450蛋白分子式为C 1154H 1812N 314O 330S 15,为不稳定蛋白、无跨膜区、无信号肽,是一种含较多抗原表位的亲水性蛋白,有7个B 细胞抗原表位和11个T 细胞抗原表位,有望用作捻转血矛线虫耐药性的诊断抗原。

本研究获得了P450重组蛋白,为捻转血矛线虫耐药性快速检测方法和新药开发奠定物质基础。

关键词:捻转血矛线虫;P450基因;原核表达;生物信息学分析中图分类号:S884.6文献标识码:A文章编号:1008-0589(2020)11-1181-04Bioinformation analysis and prokaryotic expression ofHaemonchus contortus of P450gene related to drug resistanceWANG Wen-long,SU Qian,ZHAO Xue-liang,SUN Ke,ZHAI Shuai,WANG Teng-yu,HUHE Bateer *(Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease,Ministry of Agriculture and Rural Affairs,College ofVeterinary Medicine,Inner Mongolia Agricultural University,Hohhot 010018,China)Abstract :To analyze the bioinformatics characteristics of the P450gene of Haemonchus contortus and obtain the P450recombinant protein,RT-PCR technology was used to amplify the P450gene of Haemonchus contortus.A pET-P450recombinant expression vector was constructed and identified by double enzyme digestion,and later transformed into E.coli and induced for protein expression.The results showed that the recombinant plasmid pET-P450was correctly constructed and P450protein is expressed as inclusion body.The physicochemical properties and structural characteristics of P450protein were analyzed by bioinformatics software.Bioinformatics analysis results showed that the molecular formula of P450protein is C 1154H 1812N 314O 330S 15.The P450protein is an unstable protein with no transmembrane region and no signal peptide region.P450protein is a kind of hydrophilic protein with 7B-cell epitopes and 11T-cell epitopes,thus it is expected to be used as a diagnostic antigen for resistance to Haemonchus contortus .The recombinant P450protein was successfully purified in this study,providing a theoretical basis for the rapid detection of resistance to Haemonchus contortus and the development of new drugs.Key words :Haemonchus contortus ;P450gene;prokaryotic expression;rescue收稿日期:2020-02-26基金项目:内蒙古自治区科技计划项目(201702074);国家自然科学基金项目(31760731)作者简介:王文龙(1976-),男,内蒙古赤峰人,副教授,主要从事寄生虫学和分子生物学研究.*通信作者:E-mail :***************Corresponding author中国预防兽医学报2020年捻转血矛线虫(Haemonchus contortus)属于毛圆科血矛属,其主要以吸食宿主血液为生,会导致宿主出现贫血、消瘦、皱胃粘膜损伤等症状[1],严重者可致宿主,特别是幼龄宿主死亡。

黄嘌呤氧化还原酶的结构、功能和作用

黄嘌呤氧化还原酶的结构、功能和作用

黄嘌呤氧化还原酶的结构、功能和作用李丽书;陈献华;邵叶波;刘璇;徐平【期刊名称】《细胞生物学杂志》【年(卷),期】2004(26)4【摘要】黄嘌呤氧化还原酶(XOR)参与人体内的嘌呤代谢,并且是这一代谢过程的限速酶。

其终产物是活性氧(包括OH·、H2O2和O2-)和尿酸。

这两种产物参与体内多种生理活动。

从XOR基因的结构、XOR蛋白的分子结构和基本功能、控制XOR活性的多个环节以及XOR的两种催化产物活性氧和尿酸在生理和病理情况下的功能及机制进行了总结,以期对XOR的发现、研究历史及现状和有待解决的问题有一个系统的了解。

【总页数】4页(P381-384)【关键词】黄嘌呤氧化还原酶;尿酸;生理;嘌呤代谢;活性氧【作者】李丽书;陈献华;邵叶波;刘璇;徐平【作者单位】复旦大学生命科学学院基因生理学实验室脑研究中心;复旦大学上海医学院【正文语种】中文【中图分类】Q554【相关文献】1.黄嘌呤氧化还原酶钼中心与配体的相互作用 [J], 王传铭;张旭东;王栋;谢昆2.1,3-丙二醇氧化还原酶结构与功能关系的探讨 [J], 林锦霞;张光亚;方柏山3.精索静脉曲张病人血中一氧化氮合成酶及黄嘌呤氧化酶的活性:氧化氮及过氧化氮对精子功能不良所起的作用 [J],4.捻转血矛线虫NADH:泛醌氧化还原酶结构域包含蛋白基因的克隆表达及功能分析 [J], 吴玲燕;王玉俭;温玉玲;严若峰;徐立新;宋小凯;李祥瑞5.含有WW结构域的氧化还原酶的基因在骨肉瘤组织中表达的临床意义及其对骨肉瘤的调控作用 [J], 许峰;王帝;李哲;元耀博;李隆卿;张卫红;闻嘉;谢祎;李家平;李甲振;张岩;卢新昌;张翼;刘永奎因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

捻转血矛线虫BLAODA蛋白单克隆抗体的制备及在诊断中的初步应用

捻转血矛线虫BLAODA蛋白单克隆抗体的制备及在诊断中的初步应用

捻转血矛线虫BLAODA蛋白单克隆抗体的制备及在诊断中的初步应用卡力比夏提·艾木拉江;文兆海;陆明敏;徐立新;宋小凯;李祥瑞;严若峰【期刊名称】《中国兽医科学》【年(卷),期】2022(52)6【摘要】为了研究捻转血矛线虫排泄分泌蛋白生物素脂酰结合和2-氧酸脱氢酶酰基转移酶(BLAODA)在捻转血矛线虫病诊断中的应用,以重组捻转血矛线虫BLAODA为免疫原,通过杂交瘤细胞技术,筛出4株稳定分泌抗BLAODA单克隆抗体细胞株,分别命名为1B2、1G4、2E3和5B4。

将这4株杂交瘤细胞分别接种小鼠腹腔,制备腹水,用层析柱纯化抗体并建立双抗体夹心ELISA方法。

结果显示:筛选出的1B2、1G4、2E3和5B4细胞株产生的抗体效价高、特异性强,其抗体亚型均为Ig G1型,轻链均为kappa型,纯化的小鼠腹水的效价均可达1∶2^(22);基于抗捻转血矛线虫BLAODA的单抗1B2、5B4建立了双抗体夹心ELISA检测方法,其敏感性为90.6%,特异性为90.6%。

本研究获得了捻转血矛线虫抗BLAODA单克隆抗体并建立了双抗体夹心ELISA方法,为捻转血矛线虫诊断试剂盒的开发奠定了基础。

【总页数】8页(P753-760)【作者】卡力比夏提·艾木拉江;文兆海;陆明敏;徐立新;宋小凯;李祥瑞;严若峰【作者单位】新疆医科大学中亚高发病成因与防治国家重点实验室;南京农业大学动物医学院【正文语种】中文【中图分类】S852.731【相关文献】1.猪圆环病毒3型Cap蛋白单克隆抗体的制备及其在免疫组化试验中的初步应用2.抗肺炎衣原体蛋白酶样活性因子单克隆抗体在冠状动脉硬化患者肺炎衣原体感染诊断中的初步应用3.桥斑蛋白DPⅠ/Ⅱ单克隆抗体在肿瘤诊断中的初步应用4.大口黑鲈免疫球蛋白单克隆抗体的制备及初步应用5.血清Ⅰ型鸭甲型肝炎病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备与初步应用因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

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收 稿 日 期 :2016-11-02
基金项目:国家重点基础发展研究计划(973计划 江 )(2015CB150300); 苏高校优势学科资助项目(PAPD)
作者简介:吴玲燕 女 (1992-), ,江苏南京人,硕士研究生,主要从事寄生虫分子与免疫方面研究,E-mail:2014107055@
Abstract:ThegeneofNADH:ubiquinoneoxidoreductasedomaincontainingprotein (NDUDC)of Haemonchuscontortuswasselectedtoclone,express,andthefunctionsofthisproteinwerestudiedinthispaper.ThegeneofNDUDC wasclonedbyRT-PCR,thenexpressionvectorwasconstructedtoobtaintherecombinantprotein.Theantigenicityoftheproteinwasanalyzedby Westernblot.Peripheralblood mononuclearcells (PBMCs)wereseparatedfrom goatandculturedin vitro withtherecombinantNDUDCtocheckthebindingoftheproteintoPBMCsbyindirectimmunofluorescenceassay.Differentconcentrations (0,10,20,40μg·mL-1)oftherecombinant proteinwereusedtostimulatePBMCs,andtheeffectsofcellproliferation,cellmigrationand NOsecretionweretested.TheresultsshowedthattherecombinantproteinNDUDCcouldstimulatecellproliferationeffectively,alsosignificantlyenhancecellmigrationandincreasethesecretionofNO.TheseresultsindicatethatNDUDCproteinhasstrongantigenicity,andcanstimulate cellstoexertimmunefunction. Keywords:Haemonchuscontortus;goat;NADH:ubiquinoneoxidoreductasedomaincontaining protein;peripheralblood mononuclearcells
(Haemonchus),
牛、羊等反刍动物一种常见的胃肠道寄生性线虫,主
要寄 生 于 皱 胃,偶 见 于 小 肠,以 吸 食 宿 主 血 液 为
Байду номын сангаас
生 可, [1] 引起宿主皱胃黏膜的出血、损伤、发炎,影响
宿主物质代谢,进而导致患畜贫血、腹泻、消瘦,严重
者甚至可致患畜死亡 给, [2] 我国畜牧业的发展带来
(南京农业大学动物医学院,南京 210095)
摘 要:选取捻转血矛线虫 泛 NADH: 醌氧化还原酶结构域包含蛋白 基 (NDUDC) 因进行克隆表达,并对其功能进
行研究。采用 RT-PCR方法对 NDUDC 基因进行克隆,构建表达载体得到重组蛋白质,Westernblot分析蛋白质
的抗原特性;采血分离山羊外周血单个核细胞 与 (PBMCs) 重组蛋白质共培养,利用间接免疫荧光试验检验重组蛋
巨大经济损失。
排泄分 泌 抗 原 (excretoryandsecretoryprod-
是 ucts,ESPs) 虫体的代谢分泌产物 包, [3] 括多种蛋
WU Ling-yan,WANG Yu-jian,WEN Yu-ling,YAN Ruo-feng, XU Li-xin,SONG Xiao-kai,LIXiang-rui*
(CollegeofVeterinary Medicine,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,China)
关键词:捻转血矛线虫;山羊 泛 ;NADH: 醌氧化还原酶结构域包含蛋白;外周血单个核细胞
中图分类号:S852.731
文献标志码:A
文 章 编 号 :0366-6964(2017)04-0722-09
Cloning,ExpressionandFunctionAnalysisofNADH:Ubiquinone OxidoreductaseDomainContainingProteininHaemonchuscontortus
畜牧兽医学报 2017,48(4):722-730
ActaVeterinariaetZootechnicaSinica
doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2017.04.016
捻转包血含矛蛋线白虫基N因AD的H克:泛隆醌表氧达化及还功原能酶分结析构域
吴玲燕,王玉俭,温玉玲,严若峰,徐立新,宋小凯,李祥瑞*
白 质 与 细 胞 的 结 合 情 况 ;以 不 同 质 量 浓 度 (0、10、20、40μg·mL-1)重 组 蛋 白 质 刺 激 细 胞 ,测 定 其 对 细 胞 增 殖 、细 胞
迁移和 NO分泌的影响。结果表明,重组蛋白质能够有效刺激细胞增殖,显著提高细胞迁移能力以及增加 NO 的
分泌。可见 NDUDC蛋白具有较强的抗原性,可刺激细胞发挥免疫功能。
通信作者 李祥瑞 教授 *

(1958-), ,E-mail:lixiangrui@
4期 吴玲燕等:捻转血矛线虫 泛 NADH: 醌氧化还原酶结构域包含蛋白基因的克隆表达及功能分析 723
捻转血矛线虫 隶属毛 (Haemonchuscontortus)
圆科 血矛属 是 (Trichostrongylidae)
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