标准曲线的绘制吸光度标准曲线绘制
吸光度标准曲线绘制

吸光度标准曲线绘制吸光度标准曲线是在分光光度计测定光密度时的一种标准曲线。
吸光度标准曲线的绘制对于准确测定样品的浓度具有非常重要的意义。
下面将介绍吸光度标准曲线的绘制方法及相关注意事项。
首先,准备工作。
在进行吸光度标准曲线绘制之前,需要准备好一系列不同浓度的标准溶液。
这些标准溶液需要覆盖到待测样品的浓度范围,并且需要保证它们的稳定性和准确性。
另外,还需要准备好分光光度计和相关的实验器材。
其次,进行实验操作。
首先,使用分光光度计进行零点校准,确保仪器的准确性。
然后,依次取一系列标准溶液进行测定,记录下各个浓度对应的吸光度数值。
在进行测定时,要注意保持实验条件的一致性,如光程、温度等。
测定完所有的标准溶液后,可以得到一组吸光度与浓度的数据。
接下来,绘制吸光度标准曲线。
将浓度作为自变量,吸光度作为因变量,以浓度为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制出吸光度随浓度变化的曲线图。
在绘制曲线时,要注意选择合适的比例,使得曲线能够清晰地显示出吸光度随浓度变化的趋势。
另外,还可以利用拟合曲线的方法,得到吸光度与浓度之间的函数关系,从而方便后续对待测样品浓度的计算。
最后,分析吸光度标准曲线。
通过分析标准曲线,可以得到吸光度与浓度之间的定量关系。
在测定待测样品时,可以根据其吸光度值,通过标准曲线反推出其浓度。
此外,还可以通过标准曲线来评估分光光度计的灵敏度和线性范围,以及分析样品的稀释倍数等。
在进行吸光度标准曲线绘制的过程中,需要注意一些细节问题。
比如,在实验操作中要保证操作规范,避免因实验误差导致的数据不准确;在绘制曲线时要选择合适的比例,使得曲线能够清晰地表达出吸光度与浓度之间的关系;在分析曲线时要注意准确地反推出待测样品的浓度,避免因误差而导致测定结果的偏差。
总之,吸光度标准曲线的绘制对于分光光度计的准确测定具有非常重要的意义。
通过合理的实验操作和数据处理,可以得到一条准确可靠的标准曲线,为后续的样品测定提供有力的支持。
吸光度标准曲线的绘制

吸光度标准曲线的绘制吸光度标准曲线是在光谱分析中常用的一种曲线,它可以帮助我们确定样品中物质的浓度。
在进行光谱分析时,我们通常会先制备一系列不同浓度的标准溶液,然后测定它们的吸光度,最后利用吸光度与浓度之间的关系绘制吸光度标准曲线。
下面,我将详细介绍吸光度标准曲线的绘制方法。
首先,我们需要准备一系列不同浓度的标准溶液。
这些标准溶液的浓度应该覆盖我们待测样品的浓度范围,并且要保证浓度之间有一定的间隔,以便绘制出一条较为平滑的标准曲线。
在制备标准溶液时,我们需要准确称取一定量的溶质,并将其溶解到已知体积的容器中,然后用溶剂稀释至刚好达到目标浓度。
在这个过程中,我们需要注意溶质的溶解度和稀释的准确性,以确保标准溶液的浓度准确无误。
接下来,我们需要使用分光光度计或其他光谱仪器测定这些标准溶液的吸光度。
在测定吸光度之前,我们要先对仪器进行基准校准,确保它能够准确地测量光的吸收。
然后,我们将标准溶液依次放入仪器中进行测量,记录下每种浓度标准溶液的吸光度值。
在记录吸光度值时,我们要注意避免气泡和杂质的干扰,以确保测量结果的准确性。
当我们完成了各个标准溶液的吸光度测量后,就可以开始绘制吸光度标准曲线了。
通常情况下,我们会将标准溶液的浓度作为自变量,吸光度作为因变量,绘制出一条浓度与吸光度之间的曲线。
在绘制曲线时,我们要选择合适的比例尺和坐标轴范围,以确保曲线能够清晰地展现出吸光度随浓度变化的趋势。
同时,我们还可以利用拟合曲线的方法,对实验数据进行拟合,以获得更加精确的吸光度标准曲线。
绘制好吸光度标准曲线后,我们就可以利用它来测定待测样品的浓度了。
通过测量待测样品的吸光度,并将其代入标准曲线中,我们就可以得到样品的浓度值。
这样,我们就可以利用吸光度标准曲线来快速、准确地确定样品中物质的浓度,为后续的实验和分析工作提供了重要的参考依据。
总之,吸光度标准曲线的绘制是光谱分析中的重要步骤,它可以帮助我们确定样品中物质的浓度,为化学分析提供了重要的数据支持。
吸光度标准曲线的绘制excel

吸光度标准曲线的绘制excel
(不含标题)
Excel是一款制图软件,可以用来绘制吸光度标准曲线。
吸光度
标准曲线是在分析化学品时非常重要的一种工具,它可以帮助化学工
程师以视觉方式鉴定化合物的浓度。
在Excel中,要绘制吸光度标准
曲线,可以使用制图功能。
首先,使用Excel的插入功能来插入一个
折线图,在窗口中输入X轴和Y轴的数据即可。
折线图的X轴表示吸
光度,Y轴表示浓度。
接下来,在Excel中插入一些标准曲线数据。
绘制吸光度标准曲
线要使用有关物质的浓度数据和相应的吸光度数据。
输入浓度数据后,计算数据点相应的吸光度值,将计算的吸光度值和浓度数据输入Excel 的X轴和Y轴中。
最后,可以通过对折线图的设置来绘制出完整的吸光度标准曲线。
可以修改坐标轴的标签以及标题,改变折线的粗细,添加X轴和Y轴
的刻度值,并且可以根据需要改变折线的颜色,让吸光度标准曲线更
加清晰美观。
综上所述,使用Excel进行吸光度标准曲线的绘制是一种简单易
行的方法。
通过Excel的功能,可以让结果更加清晰美观,可以大大
的提高化学工程师的工作效率。
标准曲线的绘制吸光度标准曲线绘制

标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本:广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间:2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人:何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1.数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后,得到的ALT活力单位值均大于40,即均为非正常值,综上,认为待测血清中ALT 含量超于正常值。
3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系,符合理论规律,但其他的数据误差较大。
另外,比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。
4.经分析,总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时,丙酮酸标准溶液的剂量都很小,容易造成误差。
加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差,保温的时间,以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差,容易造成较大。
吸光度标准曲线绘制

吸光度标准曲线绘制在化学分析中,吸光度标准曲线是一种常见的实验方法,用于确定待测溶液中物质的浓度。
通过绘制吸光度与浓度之间的关系曲线,可以对待测溶液的浓度进行快速准确的测定。
本文将介绍吸光度标准曲线的绘制方法,希望能够对化学分析实验有所帮助。
首先,准备一系列不同浓度的标准溶液。
这些标准溶液的浓度应该覆盖待测溶液可能的浓度范围,并且应该是已知准确浓度的。
然后,使用分光光度计或比色皿等设备,测量每种标准溶液的吸光度值。
在测量吸光度时,要确保设备已经校准,并且避免空气泡或杂质对测量结果的影响。
接下来,根据测得的吸光度值和相应的浓度值,绘制吸光度与浓度的标准曲线。
通常情况下,吸光度与浓度之间呈线性关系,因此可以使用线性回归分析或其他拟合方法,得到吸光度与浓度的数学关系式。
在绘制标准曲线时,要选择合适的比例尺,确保吸光度和浓度的变化能够清晰地显示在曲线上。
完成标准曲线的绘制后,就可以用待测溶液的吸光度值,通过标准曲线得到其对应的浓度。
这样就可以快速准确地确定待测溶液中物质的浓度,为化学分析实验提供了重要的数据支持。
除了上述基本的吸光度标准曲线绘制方法外,还需要注意以下几点:1. 实验条件的控制。
在测量吸光度时,要注意控制温度、光线等实验条件的稳定性,避免这些因素对测量结果的影响。
2. 标准曲线的验证。
在绘制标准曲线后,可以使用其他方法对标准溶液的浓度进行验证,以确认标准曲线的准确性和可靠性。
3. 数据处理的准确性。
在实验数据处理过程中,要注意数据的准确性和可靠性,避免误差的积累影响最终的测定结果。
总之,吸光度标准曲线的绘制是化学分析实验中非常重要的一步,它为测定待测溶液中物质的浓度提供了可靠的方法。
通过掌握吸光度标准曲线的绘制方法,并注意实验细节和数据处理的准确性,可以提高化学分析实验的准确性和可靠性,为科研工作和实验教学提供有力支持。
希望本文内容能够对吸光度标准曲线的绘制有所帮助,谢谢阅读!。
吸光度标准曲线绘制

吸光度标准曲线绘制吸光度标准曲线是在光谱分析中非常重要的一项工作,它可以帮助我们准确地测定样品中物质的浓度。
在进行吸光度标准曲线绘制之前,我们需要准备一些必要的实验器材和试剂,确保实验的准确性和可靠性。
首先,我们需要准备一台紫外可见分光光度计,这是用来测量吸光度的仪器,能够测定不同波长下样品的吸光度值。
其次,我们需要一些标准溶液,这些溶液的浓度是已知的,可以用来构建吸光度标准曲线。
最后,我们还需要一些玻璃仪器,如移液器、比色皿等,用来进行实验操作。
在进行实验之前,我们需要根据实验要求选择合适的波长进行测量。
一般来说,我们会选择样品在紫外可见光谱下吸光度变化最为显著的波长进行测量。
接下来,我们需要按照一定的比例将标准溶液稀释,以便得到一系列不同浓度的溶液。
然后,我们分别用紫外可见分光光度计测量这些溶液的吸光度值,并记录下实验数据。
在获得一系列不同浓度溶液的吸光度数据之后,我们需要利用这些数据绘制吸光度标准曲线。
通常情况下,吸光度与溶液浓度之间呈现一定的线性关系,因此我们可以利用线性回归分析的方法来拟合吸光度标准曲线。
通过拟合得到的标准曲线,我们就可以根据待测样品的吸光度值,反推出其浓度。
在绘制吸光度标准曲线的过程中,我们需要注意一些实验技巧。
首先,我们需要保证实验操作的精准度,尽量减小误差的产生。
其次,我们需要进行多次重复实验,以确保实验数据的准确性和可靠性。
最后,在进行数据处理和曲线拟合时,我们需要选择合适的数学方法和软件工具,以确保得到的标准曲线能够准确地反映吸光度与浓度之间的关系。
总之,吸光度标准曲线的绘制是一项重要的实验工作,它可以帮助我们准确地测定样品中物质的浓度。
在进行实验时,我们需要注意实验操作的精准度和数据的准确性,以确保得到可靠的标准曲线。
希望本文对吸光度标准曲线的绘制有所帮助,谢谢阅读!。
吸光度505nm标准曲线的绘制

吸光度505nm标准曲线的绘制吸光度(Absorbance)是一种用于测量溶液中物质浓度的常用方法。
在化学、生物学和医学等领域中,吸光度的测量对于定量分析和质量控制非常重要。
而绘制吸光度505nm标准曲线则是一种常见的实验方法,用于确定物质浓度与吸光度之间的关系。
绘制吸光度505nm标准曲线的过程需要准备一系列已知浓度的标准溶液,并测量它们在505nm波长下的吸光度。
首先,我们需要准备一定浓度的标准溶液,可以通过稀释已知浓度的溶液来得到。
例如,我们可以准备一系列浓度为0.1、0.2、0.3、0.4和0.5 mg/mL的标准溶液。
接下来,我们需要使用分光光度计来测量这些标准溶液在505nm波长下的吸光度。
分光光度计是一种常见的实验仪器,可以测量溶液对特定波长光线的吸收程度。
在测量吸光度之前,我们需要将分光光度计调节到505nm波长,并进行零点校准,以确保测量结果的准确性。
在测量吸光度之前,我们需要将每个标准溶液倒入分光光度计的比色皿中,并将比色皿放入光路中。
然后,我们可以通过操作分光光度计上的按钮或旋钮来测量吸光度。
每次测量完一个标准溶液后,我们需要将比色皿清洗干净,并用纯溶剂或去离子水进行漂洗,以避免不同溶液之间的交叉污染。
完成各个标准溶液的吸光度测量后,我们可以将测得的吸光度数据绘制成505nm标准曲线。
在绘制曲线时,我们将吸光度作为纵坐标,浓度作为横坐标。
通过将吸光度与浓度之间的关系绘制成曲线,我们可以得到一个直观的图像,以便后续测量未知样品的吸光度,并根据标准曲线确定其浓度。
绘制标准曲线时,我们可以使用电子表格软件(如Excel)来进行数据处理和绘图。
首先,我们将吸光度和浓度的数据输入到电子表格中,并进行数据的排序和整理。
然后,我们可以使用散点图或折线图来绘制标准曲线。
在绘制曲线时,我们可以选择添加趋势线或拟合曲线,以更好地描述吸光度与浓度之间的关系。
绘制完标准曲线后,我们可以使用该曲线来测量未知样品的浓度。
吸光度标准曲线绘制

吸光度标准曲线绘制吸光度标准曲线是在光度计测定吸光度时使用的一种标准曲线,它是通过一系列标准溶液的吸光度测定值和相应的溶液浓度值所绘制出的曲线。
吸光度标准曲线的绘制对于溶液中物质的浓度测定具有重要意义,因此掌握其绘制方法对于化学分析实验至关重要。
首先,准备一系列标准溶液,其浓度应当覆盖待测样品可能出现的浓度范围。
然后,使用光度计分别测定这些标准溶液的吸光度值,并记录下相应的浓度值。
在进行吸光度测定时,要注意选择合适的波长,并保持光度计的灵敏度在合适范围内。
测定吸光度时,要确保各个标准溶液的吸光度值在光度计的线性范围内,以保证吸光度标准曲线的准确性。
接下来,将所得的吸光度测定值和相应的浓度值绘制成散点图。
在绘制图表时,要选择适当的比例尺,使得吸光度标准曲线能够清晰地展现出吸光度随浓度变化的趋势。
通常情况下,吸光度标准曲线呈线性关系,因此可以通过线性回归分析得到吸光度标准曲线的方程。
在进行线性回归分析时,要注意排除异常值的影响,以提高吸光度标准曲线的拟合度。
绘制好吸光度标准曲线后,就可以利用该曲线对待测样品的浓度进行测定了。
首先,测定待测样品的吸光度值,然后利用吸光度标准曲线的方程,反推出待测样品的浓度值。
需要注意的是,在进行浓度测定时,要选择合适的稀释倍数,以确保测定结果的准确性。
总之,吸光度标准曲线的绘制是化学分析实验中的重要步骤,它能够帮助我们准确测定溶液中物质的浓度。
在进行吸光度标准曲线的绘制时,要注意选择合适的标准溶液、合理设置光度计参数、绘制清晰的散点图、进行准确的线性回归分析,以及合理选择稀释倍数。
只有这样,才能绘制出准确可靠的吸光度标准曲线,为溶液浓度的测定提供可靠的参考。
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标准曲线的绘制-吸光度标准曲线绘制生物化学实验报告ALT与其吸光度的标准曲线绘制采集样本:广西医科大学口腔医学2016级13班四个组中7组生物化学实验数据采集时间:2016年11月15日2016~2016上学期第十一周周一下午采集人:何洁梅一、几组ALT与其吸光度的标准曲线数据记录ALT活力单位A520吴修团1组A520黎丁菱1组A520杨璇璇1组A520谢晓兰2组A520莫雪玲2组A520李文良3组A520文全海4组00000000二、各采集样本汇总图样本1测定得待测血清ALT活力单位为50U/L样本2测定得待测血清ALT活力单位为97U/L样本3测定得待测血清ALT活力单位为135U/L样本4测定得待测血清ALT活力单位为70U/L样本5测定得待测血清ALT活力单位为148U/L样本6测定得待测血清ALT活力单位为45U/L样本7测定得待测血清ALT活力单位为98U/L四、采集数据处理结果分析1.数据总结样本编号测定的ALT活力单位是否大于40U/L正常/非正常150是非正常297是非正常3135是非正常470是非正常5148是非正常645是非正常798是非正常平均值92均为“是”均为“非正常”2.针对数据处理结果的分析采集的7组数据经标准曲线测量后,得到的ALT活力单位值均大于40,即均为非正常值,综上,认为待测血清中ALT 含量超于正常值。
3.针对源数据的分析采集的7组数据中样本4、5、6的数据经画图后可基本分布呈过原点的线性关系,符合理论规律,但其他的数据误差较大。
另外,比较符合理想标准曲线的4、5、6样本的三个ALT活力单位值也存在较大的出入。
4.经分析,总结可能的误差来源如下配置丙酮酸标准溶液、底物溶液、磷酸缓冲液的混合溶液时,丙酮酸标准溶液的剂量都很小,容易造成误差。
加入2,4—二硝基苯肼的时间可能有误差,保温的时间,以及加入NaOH 以停止反应的时间都有可能有偏差,容易造成较大。
如何用EXCEL绘制标准曲线Excel是Microsoft offices系统的重要组成,它是界于WORD字处理软件与ACCESS数据库软件之间的电子表格工具,功能十分强大,特别适合于日常工作使用。
使用得好,完全比目前所有的检验科办公系统优秀。
现就先介绍一下如何使用Excel绘制标准曲线。
首先,将数据整理好输入Excel,并选取完成的数据区,并点击图表向导,如下图所示。
点击图表向导后会运行图表向导如下图,先在图表类型中选“XY散点图”,并选了图表类型的“散点图”。
点击“下一步”,出现如下图界面。
如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选“列”。
如果发现图不理想,就要仔细察看是否数据区选择有问题,如果有误,可以点击“系列”来更改,如下图。
如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标,结果如下图:出现上图后,如图在表上选取正确的数据区域。
然后点击“下一步”出现图表选项界面,如下图,上应调整选项,以满足自己想要的效果。
点击“下一步”,现在一张带标准值的完整散点图就已经完成,如下图。
完成了散点图,现在需要根据数据进行回归分析,计算回归方程,绘制出标准曲线。
其实这很简单,先点击图上的标准值点,然后按右键,点击“添加趋势线”。
如下图。
由于本例是线性关系,在类型中选“线性”如下图点击“确定”,标准曲线就回归并画好了。
标准曲线是画好了,可是我们怎么知道回归后的方程是什么样呢?这了简单,点击趋势线然后按右键,选趋势线格式,如下图:在显示公式和显示R平方值前点一下,勾上。
再点确定。
好了,现在公式和相关系数都出来了。
如图:呵R的平方达,线性相当好。
可是有时候有的项目是成指数增加的,散点图如下图,从上图看并不值关,除了最大的一个点外其余的几乎都成了直线。
这不难理解,对于10000000而言,10与10000都差不了多少。
因此我们平时常使用半对数坐标纸画图。
对于Excel也可以,先点中Y坐标轴,再按右键,选“坐标轴格式”如下图将左下方的对数刻度选中,确定。
完整的一个半对数标准曲线就做好了。
用Excel绘制标准曲线用Excel绘制标准曲线将数据整理好输入Excel,并选取完成的数据区,并点击图表向导,如下图:点击图表向导后会运行图表向导如下图,先在图表类型中选“XY散点图”,并选了图表类型的“散点图”。
点击“下一步”,出现如下图界面。
如是输入是如本例横向列表的就不用更改,如果是纵向列表就改选“列”:如果发现图不理想,就要仔细察看是否数据区选择有问题,如果有误,可以点击“系列”来更改,如下图:如果是X值错了就点击它文本框右边的小图标,结果如下图:在表上选取正确的数据区域,点击“下一步”,出现图表选项界面如下图,调整选项,以满足自己想要的效果:点击“下一步”,一张带标准值的完整散点图完成,如下图:现在要根据数据进行回归分析,计算回归方程,绘制出标准曲线:先点击图上的标准值点,然后按右键,点击“添加趋势线”。
如下图:本例是线性关系,在类型中选“线性”,如下图:点击“确定”,标准曲线回归画好:回归后的方程是什么样呢?点击趋势线然后按右键,选趋势线格式,如下图:在显示公式和显示R平方值前点一下,勾上。
再点确定,公式和相关系数都出来了。
如图:由此标准曲线可得出浓度:切换到“选项”标签页,选择“显示公式”,确定。
在图表中出现一个公式,即浓度对吸光度的关系。
在单元格中输入该公式,即可根据该公式计算出样品的浓度。
有时候有的项目是成指数增加,散点图如下图:从上图看并不相关,除了最大的一个点外其余的几乎都成了直线。
这不难理解,因为对于10000000而言,10与10000都差不了多少。
因此我们平时常使用半对数坐标纸画图。
对于Excel,先点中Y坐标轴,再按右键,选“坐标轴格式”如下图:将左下方的对数刻度选中,确定。
完整的一个半对数标准曲线就做好了:利用Excel制作标准曲线,如果认真调整参数可以得到不同的效果。
绘图时最好用XY散点图。
生成图表后,选择生成的曲线,之后在曲线上点击右键,选择“添加趋势线”,在“类型”中,选择最接近的曲线形式。
比如你的曲线接近线性,则选择“线性”,若接近乘幂的形式,则选择“乘幂”,如果比较难判断,则选择“多项式”,并调整其阶数。
荧光定量PCR之绝对定量分析——标准曲线的绘制荧光定量PCR之绝对定量分析——标准曲线的绘制1. 绝对定量定义绝对定量是用已知浓度的标准品绘制标准曲线来推算未知样品的量。
将标准品稀释至不同浓度,作为模板进行PCR反应。
以标准品拷贝数的对数值为横坐标,以测得的CT 值为纵坐标,绘制标准曲线,对未知样品进行定量时,根据未知样品的CT值,即可在标准曲线中得到样品的拷贝数。
* Log(起始浓度)与循环数呈线性关系,通过已知起始拷贝数的标准品可作出标准曲线,即得到该扩增反应存在的线性关系* 由样品CT值,就可以计算出样品中所含的模板量2. 绝对定量标准品标准品的一些标准* 必须用与扩增目的基因相同的引物进行扩增,并且扩增效率相同* 标准品必须是经过准确定量的* 标准品必须是标准化的* 在每组实验时,必须用相同的阈值设定来确定CT值标准品可以是含有目的基因的线性化的质粒DNA,也可以是比扩增片段长的纯化后的PCR产物,当然也可以是基因组DNA,甚至cDNA,但前提是所有的作为标准品的核酸都必须保证稳定。
3. 标准品的制备一般一条标准曲线取四到五个点,浓度范围要能覆盖样品的浓度区间,以保证定量的准确性。
一般一个点重复三至五次,对于常期稳定使用的标准品可以适当减少重复的次数。
倍比梯度稀释方法:1v原液+9v稀释缓冲液,得标准品ii1v标准品ii+9v稀释缓冲液,得标准品iii1v标准品iii+9v稀释缓冲液,得标准品iv1v标准品iv+9v稀释缓冲液,得标准品v依次倍比稀释拷贝数的计算:详见核酸拷贝数的计算4. 实例标准品的制作:将标准品依次进行10倍稀释,ASP-3700 测得其拷贝数×108copy /ul标准曲线的绘制设置对照:浓度为×107、×106、×105、×104、×103、×102、×101的标准样品各一个,设空白对照PCR反应:以不同浓度标准品作为模板标准品的扩增曲线标准品的溶解曲线标准品的标准曲线图扩增效率计算:E=10-1/斜率=10-1/-=,E%=()×100%=104%若未知样本的CT值为,将CT值代入线性方程:即=,所以X=()/(-)=Quantityunknow==50118 copies核酸拷贝数的计算一、分步推理如何计算核酸拷贝数1A260吸光度值=dsDNA 50ug/ml=ssDNA 33ug/ml=ssRNA 40ug/ml核酸浓度=(OD260)×(dilution factor)×=ng/ulMW代表克/摩尔,单位dolton:1dolton即表示1g/mol1摩尔=摩尔分子(拷贝数)平均分子量(MW):dsDNA=(碱基数)×(660道尔顿/碱基)ssDNA = (碱基数)×(330道尔顿/碱基)ssRNA=(碱基数)×(340道尔顿/碱基)得到拷贝数计算公式:(拷贝数/摩尔)×(浓度)/(MW g/mol)= copies/ml.即()×(g/ml)/(DNA length×660)=copies/ml.或(×1023)×(ng/ul×10-9)/(DNA length×660)=copies/ul.例:3000碱基质粒,浓度100 ng/ul MW=3000bp×660dalton/bp=×106daltons,即1mol=×106g(100ng×10-9)g/×106=摩尔数copy数=摩尔数××1023=3×1010copies/ul.二、这是一个小小的计算器,使你计算更加方便快捷,免去算数之苦……什么是拷贝数?/html/如何计算拷贝数?计算方法:(×1023拷贝数/摩尔) ×(浓度g/ml) / (MW g/mol) = copies/ml 蛋白质水解度测定及其标准曲线绘制研究2102年3月广东轻工职业技术学院学报JOURNALOFGUANGDONGNDUSITRYTECHNICALCOLLEGEVO.11lNo.1Ma.r22O1蛋白质水解度测定及其标准曲线绘制研究蒋婧密8239摘要:应用茚三酮显色法对蛋白质水解度的测定及其标准曲线生成进行了分析。
进而,于一元线性回归分别在Ecl和Maa基xeltb平台上对标准曲线的生成进行了研究,l并给出了相应的标准曲线生成源代码,为蛋白质水解度的控制及工业分析中各标准曲线的绘制提供了必要的手段和方法。